自拟肠宁方联合美沙拉嗪调控PERK/NF-κB通路治疗溃疡性结肠炎 被引量：1

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作者 胡选亚 杨丛家 +2 位作者 徐录梅 艾世鹏 张福生 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期255-260,共6页

目的探讨自拟肠宁方复合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎(UC)的效果,并分析其对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子κB(NF-κB)通路的影响。方法选取2021年1月~2024年1月南阳市第一人民医院收治的100例UC患者,按随机数字表法分为对照组、联合... 目的探讨自拟肠宁方复合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎(UC)的效果,并分析其对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子κB(NF-κB)通路的影响。方法选取2021年1月~2024年1月南阳市第一人民医院收治的100例UC患者,按随机数字表法分为对照组、联合组,每组各50例。对照组予以美沙拉嗪,联合组予以自拟肠宁方联合美沙拉嗪。治疗2个月后比较两组治疗前后临床症状、疾病活动度(Mayo指数评分)、肠镜病理情况(Baron评分)、黏膜愈合情况(Geboes指数)及外周血单核细胞中PERK/NF-κB通路相关蛋白水平[磷酸化PERK(p-PERK)、磷酸化真核细胞起始因子2α(p-eIF2α)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)]、PERK/NF-κB通路下游细胞因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)]水平及不良反应。结果联合组总有效率为96.00%,高于对照组的76.00%,临床症状评分低于对照组(均P<0.05);联合组治疗后Mayo指数评分、Baron评分、Geboes指数分别为(2.32±0.28)分、(0.51±0.11)分、(0.41±0.10)分,低于对照组的(3.45±0.50)分、(1.17±0.28)分、(1.00±0.22)分(均P<0.05);联合组治疗后外周血单核细胞中p-PERK、p-eIF2α、p-NF-κB水平分别为1.07±0.14、0.88±0.14、0.95±0.18,低于对照组的1.85±0.20、1.29±0.23、1.14±0.23(均P<0.05);联合组治疗后血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平分别为(4.02±1.26)pg/mL、(6.15±1.64)pg/mL、(8.52±2.04)pg/mL、(25.34±5.28)pg/mL,低于对照组的(6.00±1.54)pg/mL、(8.79±2.33)pg/mL、(11.23±3.19)pg/mL、(41.78±9.34)pg/mL(均P<0.05);联合组不良反应发生率为4.00%,与对照组(8.00%)比较无明显差异(P>0.05)。结论自拟肠宁方联合美沙拉嗪治疗UC的疗效确切且具有一定安全性,可改善临床症状,控制病情进展,缓解炎性反应,可能与抑制PERK/NF-κB通路活化有关。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 肠宁方 美沙拉嗪 蛋白激酶R样内质网激酶 核因子ΚB 疗效

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基于PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路探讨中医药干预糖尿病肾病的作用机制 被引量：1

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作者 王茂泓 郑航 +1 位作者 李雪 张珍珍 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第8期3079-3088,共10页

糖尿病肾病发病机制复杂,最终可进展为终末期肾病,给患者带来沉重负担,目前的治疗手段疗效有限。蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)-真核翻译起始因子2α激酶(eukaryotic initiation ... 糖尿病肾病发病机制复杂,最终可进展为终末期肾病,给患者带来沉重负担,目前的治疗手段疗效有限。蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)-真核翻译起始因子2α激酶(eukaryotic initiation factor-2α, eIF2α)-转录激活因子4(activating transcription factor 4,ATF4)-C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein, CHOP)信号通路作为内质网应激的关键通路,其下游调控的细胞凋亡和自噬等病理过程与糖尿病肾病的进展关系密切。中医药通过益气养阴、健脾益肾、利水消肿、清热解毒、活血祛瘀等治法调控PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路,起到保护肾小球滤过屏障、减少毛细血管基底膜增厚、增加尿蛋白质重吸收、延缓肾间质纤维化的作用。阐释PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路在糖尿病肾病中的作用机制,归纳中医治法干预该通路的理论基础,总结中药有效成分干预该通路的作用机制的研究进展,旨在为中医药防治糖尿病肾病提供新的思路和方法。 展开更多

关键词 中医药 糖尿病肾病 内质网应激 蛋白激酶R样内质网激酶-C/EBP同源蛋白(PERK-CHOP)信号通路

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蛋白激酶D3在LPS诱发的大黄鱼头肾炎性反应及内质网应激中的作用

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作者 李嘉龙 郝婷婷 +2 位作者 赵增琦 麦康森 艾庆辉 《水生生物学报》 北大核心 2025年第11期157-165,共9页

为了探究蛋白激酶D(PKD)在大黄鱼(Larimichthys crocea)炎性反应和内质网应激中是否发挥调控作用,研究使用50 ng/μL的脂多糖(LPS)孵育大黄鱼头肾巨噬细胞或10 mg/kg体重腹腔注射,构建大黄鱼在体和离体炎症模型,并检测PKD家族不同亚型... 为了探究蛋白激酶D(PKD)在大黄鱼(Larimichthys crocea)炎性反应和内质网应激中是否发挥调控作用,研究使用50 ng/μL的脂多糖(LPS)孵育大黄鱼头肾巨噬细胞或10 mg/kg体重腹腔注射,构建大黄鱼在体和离体炎症模型,并检测PKD家族不同亚型的表达情况。随后设置对照组(CON)、LPS处理组(LPS)和LPS+PKD3抑制剂处理组(LPS+CRT),分别在离体与在体条件下使用PKD3特异性抑制剂CRT0066101进行干预,并检测促炎相关基因(tnfα、il1β、il8和il6)和内质网应激相关基因(grp78、xbp1、xbp1s、atf4、atf6和chop)的表达情况。结果显示,在体和离体实验中PKD3的表达均显著增加,离体PKD3抑制剂预孵育显著降低了LPS刺激导致的大黄鱼头肾巨噬细胞中促炎基因和内质网应激相关基因的表达增加。在体实验也表明,注射PKD3抑制剂能显著降低LPS诱发的头肾组织中促炎基因和内质网应激相关基因的表达增加。以上研究结果表明,PKD3在LPS诱导的大黄鱼的炎性反应和内质网应激过程中发挥重要作用。研究首次揭示了PKD3在大黄鱼炎性反应与内质网应激中的关键调控功能,为深入理解鱼类固有免疫反应提供了新的分子基础,也为水产养殖中炎症疾病的干预提供了潜在的靶向策略。 展开更多

关键词 蛋白激酶D3 炎性反应 内质网应激 大黄鱼

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牡荆素-4″-O-葡萄糖苷对对乙酰氨基酚诱导急性肝损伤有改善作用

4

作者 董凡 赖尚磊 +1 位作者 邱剑楠 窦晓兵 《浙江大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期307-317,共11页

目的:研究牡荆素-4″-O-葡萄糖苷(VOG)对对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤的改善作用及潜在机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、VOG小剂量组(VOG 30 mg/kg)和VOG大剂量组(VOG 60 mg/kg)。除空白对照组外,每组腹... 目的:研究牡荆素-4″-O-葡萄糖苷(VOG)对对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤的改善作用及潜在机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、VOG小剂量组(VOG 30 mg/kg)和VOG大剂量组(VOG 60 mg/kg)。除空白对照组外,每组腹腔注射对乙酰氨基酚500 mg/kg建立急性肝损伤模型,VOG组在对乙酰氨基酚处理前两小时通过灌胃给予VOG。通过测定小鼠血浆中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平和苏木精-伊红染色评价肝损伤情况;测定小鼠肝组织中丙二醛含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以评价肝氧化应激反应;定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测小鼠肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Il-1β和Il-6的基因表达水平;蛋白质印迹法检测小鼠肝组织c-Jun氨基端激酶(JNK)、p38的蛋白磷酸化水平和肌醇需求酶1α(IRE-1α)、X盒结合蛋白1s(XBP1s)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。在AML-12细胞上用衣霉素构建内质网应激模型,细胞计数试剂盒-8法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤程度,并用qRT-PCR法检测细胞中Ire-1α、Xbp1s、Grp78的基因表达水平。结果:动物实验结果显示,与模型对照组比较,VOG组显著改善小鼠血浆中ALT、AST含量和肝组织中丙二醛含量、SOD和CAT活性,降低肝组织中Tnf-α、Il-1β和Il-6基因表达,改善小鼠肝组织中JNK、p38的蛋白磷酸化水平和IRE-1α、XBP1s、GRP78蛋白表达。细胞实验结果显示,VOG预处理可提高细胞存活率、降低LDH释放量,降低细胞中Ire-1α、Xbp1s和Grp78的mRNA表达。结论:VOG可抑制炎症和氧化应激,通过抑制内质网应激和调控MAPK信号通路改善对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤。 展开更多

关键词 牡荆素-4″-O-葡萄糖苷 对乙酰氨基酚 急性肝损伤 内质网应激 丝裂原活化蛋白激酶信号通路 氧化应激 炎症 小鼠

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四逆汤对脓毒症心肌病大鼠心肌内质网应激-自噬的影响

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作者 张茜 李若冰 +6 位作者 刘厚颖 代卓青 江四华 陈堆明 秦娟 骆衡 宋国林 《世界中医药》 北大核心 2025年第15期2642-2648,共7页

目的:探讨四逆汤通过内质网应激(ERS)-自噬途径治疗脓毒症心肌病的作用机制。方法:采用盲肠结扎穿刺法(CLP)建立脓毒症心肌病SD大鼠模型,将160只雌性SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型对照组(CLP模型)、四逆汤组(CLP模型+四逆汤)... 目的:探讨四逆汤通过内质网应激(ERS)-自噬途径治疗脓毒症心肌病的作用机制。方法:采用盲肠结扎穿刺法(CLP)建立脓毒症心肌病SD大鼠模型,将160只雌性SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型对照组(CLP模型)、四逆汤组(CLP模型+四逆汤)、诱导组(CLP+四逆汤+衣霉素)、阻断组(CLP+四逆汤+4-苯基丁酸),每组32只。成功造模干预后,给予腹主动脉取血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌损伤标志物N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)水平;取心脏组织进行苏木精-伊红(HE)染色及蛋白质印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、转录激活因子4(ATF4)、微管相关蛋白1轻链3A/B(LC3A/B)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果:经四逆汤治疗的四逆汤组心肌组织水肿坏死显著减轻,血清NT-proBNP、cTnI、FABP3水平较模型对照组明显降低(P<0.05);18 h时,四逆汤组和阻断组ERS标志蛋白GRP78、PERK、p-PERK、ATF4表达显著降低(P<0.05),炎症介质TNF-α、NF-κB p65的表达较模型对照组和诱导组减弱(P<0.05);自噬标志蛋白LC3A/B在18 h和24 h时表达明显升高,其中18 h差异有统计学意义(P<0.05)。结论:四逆汤能够有效抑制ERS介导的PERK/ATF4信号通路过度激活,调控自噬活性,发挥对脓毒症心肌病大鼠的心肌保护作用。 展开更多

关键词 四逆汤 脓毒症心肌病 心肌保护 蛋白激酶R样内质网激酶 转录激活因子4 内质网应激 微管相关蛋白1轻链3A/B 自噬

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姜黄素通过抑制内质网应激和JNK通路过度活化减轻小鼠肺缺血再灌注损伤 被引量：28

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作者 赵珊 马迎春 +5 位作者 刘亚坤 周俊辉 郝卯林 陈海娥 孙勤 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期308-313,共6页

目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)是否通过抑制内质网应激和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路过度活化来减轻小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤。方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位I/R损伤模型。实验随机分为6组(每组10只),包括假手术组(sham组)、I/R组... 目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)是否通过抑制内质网应激和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路过度活化来减轻小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤。方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位I/R损伤模型。实验随机分为6组(每组10只),包括假手术组(sham组)、I/R组、DMSO组(I/R+DMSO组)和Cur组(I/R+Cur低、中、高剂量组)。实验结束后处死小鼠,留取左肺,检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜、电镜观察肺组织形态结构变化,并进行肺组织损伤评估(IQA);RT-PCR检测JNK和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA表达;West-ern blotting检测磷酸化JNK(p-JNK)和GRP78的蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI)。结果:与sham组相比,I/R组和DMSO组W/D、TLW、IQA及AI均明显升高(P<0.01),JNK、GRP78 mRNA和p-JNK、GRP78蛋白表达量上升(P<0.01),光镜、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化。I/R组与DMSO组相比,上述各指标无显著差异(P>0.05)。与I/R组和DMSO组相比,I/R+Cur低、中、高剂量组各组GRP78mRNA和蛋白表达量无明显变化(P>0.05),W/D、TLW、IQA及AI下降(P<0.05或P<0.01)且肺组织损伤减轻,JNK mRNA和p-JNK蛋白质表达量亦下降,以I/R+Cur高剂量组下降最为明显(P<0.01)。结论:缺血/再灌注引发肺组织细胞发生过度的内质网应激,损伤肺组织。Cur能减轻肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与抑制JNK信号通路的过度活化有关。 展开更多

关键词 内质网应激 c—Jun氨基末端激酶 再灌注损伤 细胞凋亡 姜黄素

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槲皮素对毒胡萝卜素诱导的巨噬细胞内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制 被引量：11

7

作者 岳雯 姚树桐 +3 位作者 鲍颖 王家富 杨娜娜 商战平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期518-523,共6页

目的:研究槲皮素(quercetin,Que)对毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)诱导的巨噬细胞RAW264.7内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制。方法:1μmol/L TG作用RAW264.7细胞24 h诱导内质网应激,不同浓度Que(80、120或160μmol/L)与TG共同作用后,MT... 目的:研究槲皮素(quercetin,Que)对毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)诱导的巨噬细胞RAW264.7内质网应激凋亡途径的抑制作用及机制。方法:1μmol/L TG作用RAW264.7细胞24 h诱导内质网应激,不同浓度Que(80、120或160μmol/L)与TG共同作用后,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡率及[Ca^(2+)]_i,激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化,Western blotting法检测糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达;Western blotting法检测Que(160μmol/L)和(或)磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,P13K)抑制剂LY294002(15 nmol/L)与TG共同作用时GRP78和CHOP的表达。结果:Que能够抑制TG诱导的RAW264.7细胞内质网应激损伤,与TG组相比,细胞存活率升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),[Ca^(2+)]_i,降低(P<0.05),GRP78及CHOP表达减少(P<0.05);LY294002单独作用可抑制TG诱导的GRP78及CHOP表达上调(P<0.05),但与Que联合应用与二者单独使用时抑制作用无显著差异。结论:Que可以抑制TG诱导的RAW264.7细胞内质网应激凋亡途径,该作用可能与其抑制P13K信号通路从而降低CHOP蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 槲皮素 内质网应激 巨噬细胞 细胞凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶

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内质网应激PERK凋亡通路研究进展 被引量：15

8

作者 宋洋 袁宜勤 郁洁 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第5期1009-1011,共3页

蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R—like ER kinase,PERK)是位于内质网膜上的一种I型跨膜蛋白,属于elF2a上游激酶家族中的一种。PERK信号通路的激活发生在内质网应激早期,通过抑制蛋白质的合成对细胞起保护作用、促进细胞的生存... 蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R—like ER kinase,PERK)是位于内质网膜上的一种I型跨膜蛋白,属于elF2a上游激酶家族中的一种。PERK信号通路的激活发生在内质网应激早期,通过抑制蛋白质的合成对细胞起保护作用、促进细胞的生存。随着内质网应激时间的延长,PERK通过诱导CHOP的表达而促进细胞凋亡。PERK特异性的磷酸酶去磷酸化抑制PERK,调控的信号途径在中枢神经系统、缺血一再灌注损伤及代谢异常等病理过程中发挥着重要的作用。 展开更多

关键词 蛋白激酶R样内质网激酶 内质网应激 中枢神经

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人参皂苷Rg1对心肌细胞的影响及其信号传导机制 被引量：5

9

作者 刘燃 宋蕊 +6 位作者 袁丽 凌露 杨萍 郭家智 张戈 陆地 孙林 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2015年第11期1096-1100,共5页

目的:从细胞和分子层面探讨人参皂苷Rg1(G-Rg1)对心肌细胞的影响及其信号传导机制。方法:体外培养大鼠H9c2心肌细胞,按实验要求随机分13组,每组5个平行孔,分别为空白对照组,单纯缺血缺氧2 h、6 h、12 h、24 h、48 h组,G-Rg1 5μmol/L、1... 目的:从细胞和分子层面探讨人参皂苷Rg1(G-Rg1)对心肌细胞的影响及其信号传导机制。方法:体外培养大鼠H9c2心肌细胞,按实验要求随机分13组,每组5个平行孔,分别为空白对照组,单纯缺血缺氧2 h、6 h、12 h、24 h、48 h组,G-Rg1 5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L组,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的特异性抑制剂(YC-1)组,YC-1+G-Rg1组,蛋白激酶B(Akt)蛋白的磷酸化特异性抑制剂(Wortmannin)组,Wortmannin+G-Rg1组。检测G-Rg1、缺血缺氧以及YC-1对心肌细胞活力及心肌细胞损伤的影响。同时用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌细胞内HIF-1α、葡萄糖载体蛋白-1(GLUT-1)和血红素氧合酶-1(HO-1)的信使核糖核酸mR NA表达水平变化。用蛋白质免疫印迹法检测HIF-1α、GLUT-1和HO-1、活化转录因子-6(ATF-6)、抑制CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Akt等细胞信号通路蛋白表达水平变化。结果:缺血缺氧时间与心肌细胞活力呈负相关(r=-0.8580,P<0.05),与乳酸脱氢酶溢出率呈正相关(r=0.9201,P<0.05)。G-Rg1 10μmol/L组较单纯缺血缺氧24 h组细胞活力明显回升(87.8%、62.6%,P<0.05),细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)含量明显减少(25.0%、74.8%,P<0.05),且上调了HIF-1α、GLUT-1、HO-1的mR NA表达水平(P<0.05)。蛋白质免疫印迹法分析显示:YC-1+G-Rg1组较G-Rg1组,心肌细胞活力下降(68.0%,87.8%,P<0.05),细胞培养上清LDH含量增加(56.4%,25.0%,P<0.05),同时YC-1拮抗了G-Rg1对HIF-1α、GLUT-1、HO-1、ATF-6和CHOP的蛋白表达水平的调控(P<0.05);Wortmannin可拮抗G-Rg1对HIF-1α和CHOP的蛋白表达水平的调控(P<0.05),及对Akt两个磷酸化位点的激活作用(P<0.05)。结论:心肌细胞损伤程度与缺血缺氧时间有关;G-Rg1对心肌细胞具有保护作用,其机制激活HIF-1α及其下游因子的表达并抑制了内质网应激效应,可能与G-Rg1激活Akt有关。 展开更多

关键词 人参皂苷RG1 磷脂酰肌醇3激酶 缺氧诱导因子-1Α 内质网应激 凋亡

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黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶途径抑制高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞自噬的研究 被引量：13

10

作者 余静 赵海岚 +2 位作者 程凯尧 沈平宇 金黄林 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第4期361-368,共8页

目的:探讨黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)途径影响高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)自噬水平。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞,实验分为正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),黄芪皂苷... 目的:探讨黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)途径影响高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)自噬水平。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞,实验分为正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),黄芪皂苷组(30 mmol/L葡萄糖+2.5、5、10μg/mL黄芪皂苷)。噻唑蓝比色(MTT)法检测ARPE-19细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测自噬相关蛋白及PERK途径关键因子表达水平。添加PERK特异性抑制剂GSK2606414,Western blot检测对细胞自噬水平的影响。结果:与正常对照组比较,高糖组ARPE-19细胞活性降低,凋亡率升高,自噬相关蛋白LC3表达水平明显升高,另一自噬相关蛋白p62蛋白表达水平明显降低。PERK途径关键因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Perk和增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与高糖组比较,黄芪皂苷组ARPE-19细胞活性升高,凋亡率降低,LC3蛋白表达水平明显下调,p62蛋白表达水平明显上调,GRP78、Perk和CHOP蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。PERK特异性抑制剂GSK2606414能够进一步抑制黄芪皂苷组ARPE-19细胞LC3蛋白表达水平,上调p62蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪皂苷能够抑制高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞自噬水平,其作用机制可能与抑制蛋白激酶R样内质网激酶途径有关。 展开更多

关键词 黄芪皂苷 蛋白激酶R样内质网激酶途径 人视网膜色素上皮细胞 细胞自噬 糖尿病视网膜病变

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PERK介导的内质网应激参与血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的机制 被引量：6

11

作者 吕振嵘 王晓礽 +2 位作者 李玉珍 王琛 刘秀华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1153-1159,共7页

目的:研究蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)介导的内质网应激(ERS)反应在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法:在AngⅡ诱导原代培养的乳大鼠心肌细胞肥大模型上,采用[3H]-亮氨酸掺入、心肌细胞表面积测定等评估心肌细胞肥大... 目的:研究蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)介导的内质网应激(ERS)反应在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法:在AngⅡ诱导原代培养的乳大鼠心肌细胞肥大模型上,采用[3H]-亮氨酸掺入、心肌细胞表面积测定等评估心肌细胞肥大程度;以实时定量PCR、RT-PCR和Western blotting检测ERS标志性分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙网蛋白(CRT)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)和C/EBP同源蛋白(CHOP)mRNA和蛋白表达变化。结果:与正常对照组比较,AngⅡ组CRTmRNA和蛋白表达分别高146.4%和125.3%(P<0.05),GRP78 mRNA和蛋白的表达分别高84.0%和77.6%(P<0.05),PERK mRNA和蛋白表达分别高165.4%和132.1%(P<0.05),eIF2αmRNA和蛋白表达分别高110.9%和46.5%(P<0.05),CHOP mRNA和蛋白表达分别高117.7%和63.3%(P<0.05)。结论:PERK介导的内质网应激反应参与了AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。 展开更多

关键词 心肌肥大 内质网应激 蛋白激酶R样内质网激酶

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内质网应激相关因子PERK和ATF6在结肠癌中的表达及意义 被引量：7

12

作者 高磊 冯丹丹 +6 位作者 戴发亮 董仕桢 吴玉丹 轩青霞 陈攀 金建军 高强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第9期1280-1284,共5页

目的探讨内质网应激相关因子蛋白激酶R样内质网调节激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)在结直肠癌组织中的表达情况,分析PERK和ATF6在结肠癌发生发展中的作用。方法选择手术切除结肠癌组织及距离病变组织5 cm以上正常组织,采用实时荧光定... 目的探讨内质网应激相关因子蛋白激酶R样内质网调节激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)在结直肠癌组织中的表达情况,分析PERK和ATF6在结肠癌发生发展中的作用。方法选择手术切除结肠癌组织及距离病变组织5 cm以上正常组织,采用实时荧光定量PCR技术(RTPCR)检测PERK和ATF6的mRNA表达情况,免疫组织化学法(IHC)、Western blot法检测PERK和ATF6蛋白的表达情况,并结合临床病理特征,分析其与结肠癌发生、发展之间的关系。结果肿瘤组织ATF6和PERK mRNA表达均较正常组织下调(P<0.05)。IHC和Western blot结果显示PERK和ATF6在结肠癌中的表达均显著低于正常组织(P<0.05)。PERK和ATF6主要定位于上皮细胞中。结论PERK和ATF6在结肠癌中的表达水平下降说明缺乏适当的内质网应激反应可能在肿瘤的发生机制中起作用。 展开更多

关键词 蛋白激酶R样内质网调节激酶 活化转录因子6 结肠癌 内质网应激 未折叠蛋白反应

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高血压大鼠全脑缺血再灌注后海马区c-Jun氨基末端激酶激活与GRP78表达的关系 被引量：6

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作者 李建民 赵雅宁 +3 位作者 刘乐 常学优 陈长香 李淑杏 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第5期473-477,共5页

目的全脑缺血再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,CI/R)后c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminal kinase,JNK)活化与内质网应激的内在关系尚不明确。文中探讨高血压大鼠CI/R后海马区JNK激活与糖调节蛋白78(glucose-regulated proteins 7... 目的全脑缺血再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,CI/R)后c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminal kinase,JNK)活化与内质网应激的内在关系尚不明确。文中探讨高血压大鼠CI/R后海马区JNK激活与糖调节蛋白78(glucose-regulated proteins 78,GRP78)表达的关系。方法 90只雄性自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)分为假手术组、CI/R组、JNK特异性抑制剂SP600125干预组(以下简称SP600125干预组)。改良的Pulsineli 4血管阻断(4-VO)法制作CI/R。分别在术后6、24、48 h取脑组织,应用甲苯胺蓝染色观察海马区神经细胞形态变化;免疫组化法和免疫印迹法检测海马区GRP78和磷酸化JNK表达。结果与假手术组比较,CI/R组各时间点存活神经元密度降低,GRP78表达和磷酸化JNK表达增高。与CI/R组比较,SP600125干预组中各时间点存活神经元密度增加,GRP78表达增高,磷酸化JNK表达减少,相关性分析显示CI/R组中GRP78和磷酸化JNK蛋白表达相关(r=-0.862,P<0.01);SP600125干预组中GRP78和磷酸化JNK蛋白表达相关(r=-0.898,P<0.01)。结论高血压大鼠CI/R后海马区JNK激活与GRP78表达有关;抑制JNK信号通路可上调高血压全脑缺血大鼠海马区GRP78表达,对神经有保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 内质网 糖调节蛋白78 激活化蛋白激酶

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内质网应激在吸烟COPD模型小鼠膈肌细胞凋亡中的作用及机制研究 被引量：5

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作者 任慧敏 韩树池 +2 位作者 薛乾隆 王慧 王佳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期22-26,33,共6页

目的:研究内质网应激(ERS)在吸烟慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠膈肌细胞凋亡中的作用及机制。方法:野生型雄性C57BL/6小鼠分为对照组、COPD模型组、激动剂组、拮抗剂组,Perk基因敲除小鼠分为PERK-KO组、PERKKO+模型组,采用被动吸烟法... 目的:研究内质网应激(ERS)在吸烟慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠膈肌细胞凋亡中的作用及机制。方法:野生型雄性C57BL/6小鼠分为对照组、COPD模型组、激动剂组、拮抗剂组,Perk基因敲除小鼠分为PERK-KO组、PERKKO+模型组,采用被动吸烟法复制COPD模型,给予ERS激动剂毒胡萝卜素或拮抗剂4-苯基丁酸干预,检测0.3 s用力呼气容积与用力肺活量比(FEV_(0.3)/FVC)、最高峰值流速(PEF)、血清及支气管肺泡灌流液(BALF)中IL-1β及IL-6含量、肺组织病理改变、膈肌中细胞凋亡率及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、肌醇酶1α(IRE1α)、活化转录因子6(ATF6)、p-eIF2α、ATF4、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Caspase-12表达水平。结果:与对照组相比,模型组FEV_(0.3)/FVC、PEF降低,肺组织出现病理改变,膈肌中细胞凋亡率及PERK、p-eIF2α、CHOP、Caspase-12表达水平提高(P<0.05);与模型组相比,激动剂组膈肌中细胞凋亡率及PERK、peIF2α、CHOP、Caspase-12表达水平提高(P<0.05),拮抗剂组膈肌中细胞凋亡率及PERK、p-eIF2α、CHOP、Caspase-12表达水平降低(P<0.05);敲除PERK后,与模型组相比,PERK-KO+模型组膈肌中细胞凋亡率及eIF2α、CHOP、Caspase-12表达水平降低。结论:吸烟COPD模型小鼠膈肌细胞凋亡过度激活,ERS的PERK通路激活与膈肌细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 内质网应激 膈肌细胞凋亡 蛋白激酶R样内质网激酶

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胰岛素抵抗大鼠肝脏组织PERK和p-PERK的表达及意义 被引量：2

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作者 林志楠 罗红飞 +4 位作者 都健 裴丽娜 刘佳 郭宁宁 张克莹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期529-531,538,共4页

目的探讨胰岛素抵抗大鼠肝脏组织PKR样内质网调节激酶(PERK)及磷酸化PERK(p-PERK)的表达及意义。方法 SPF级雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常饮食组(NC组)和高脂饮食组(HF组),每组15只。喂养10周后,以高血浆胰岛素-正常血糖钳夹技术评... 目的探讨胰岛素抵抗大鼠肝脏组织PKR样内质网调节激酶(PERK)及磷酸化PERK(p-PERK)的表达及意义。方法 SPF级雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常饮食组(NC组)和高脂饮食组(HF组),每组15只。喂养10周后,以高血浆胰岛素-正常血糖钳夹技术评估胰岛素抵抗大鼠模型。应用Westernblot方法检测肝脏组织中PERK和p-PERK蛋白的表达。结果与NC组相比,HF组60～120min的平均葡萄糖输注率(GIR60～120)明显低于NC组(0.90±0.15mg·kg-1·min-1vs4.97±0.68mg·kg-1·min-1,P<0.01)。与NC组相比,HF组大鼠肝脏p-PERK表达明显升高(192.89±25.16vs63.04±15.61,P<0.05),p-PERK/PERK也明显升高(0.99±0.12vs0.33±0.08,P<0.05)。结论胰岛素抵抗大鼠肝脏组织中p-PERK蛋白及p-PERK/PERK升高,提示内质网应激可能参与胰岛素抵抗的发生。 展开更多

关键词 胰岛素抵抗 内质网应激 大鼠 肝脏组织 磷酸化PKR样内质网调节激酶

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JNK信号途径通过内质网应激反应介导心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌组织的凋亡 被引量：3

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作者 陈鹏 杨成明 +3 位作者 曾春雨 王旭开 熊秀勤 何多芬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期2455-2458,共4页

目的探讨在心肌梗死后心力衰竭诱导的内质网应激反应中c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路介导心肌细胞凋亡可能的作用及机制。方法结扎小鼠左冠状动脉主干建立心肌梗死后心力衰竭(心衰)模型,32只小鼠采用随机数字法分4... 目的探讨在心肌梗死后心力衰竭诱导的内质网应激反应中c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路介导心肌细胞凋亡可能的作用及机制。方法结扎小鼠左冠状动脉主干建立心肌梗死后心力衰竭(心衰)模型,32只小鼠采用随机数字法分4组:假手术组、心肌梗死后2、4、6周组,采用超声心动图观察心室扩张及心功能变化情况,Western blot检测内质网分子伴侣GRP78蛋白以及JNK蛋白及其磷酸化水平的表达。采用TUNEL法观察心肌细胞的凋亡情况。结果与假手术组相比较,心肌梗死后心力衰竭的小鼠左心室扩大,心功能下降。小鼠心肌组织GRP78表达明显增高(P<0.05),JNK蛋白表达没有明显变化,但其活化形式磷酸化JNK表达增高(P<0.05)。TUNEL染色显示心肌梗死后心力衰竭的小鼠心肌组织凋亡明显增多(P<0.05)。结论心肌梗死后心力衰竭诱导内质网应激反应,并激活JNK信号途径促进了心肌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 心力衰竭 C-JUN氨基末端激酶 内质网 应激 细胞凋亡

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降糖舒心方对糖尿病心肌内质网应激c-JNK凋亡旁路的影响 被引量：11

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作者 符显昭 冯雪萍 +5 位作者 黄文华 李春燕 李星婵 丘海先 王清礼 班富度 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第10期2423-2427,I0026-I0029,共9页

目的：探讨降糖舒心方（JTSX）抑制SD糖尿病大鼠心肌细胞内质网应激c-JNK凋亡旁路,减轻糖尿病心肌重构的分子机制。方法：采用高脂饲养＋链脲佐菌素制备2型糖尿病大鼠模型,成模后随机分为模型组、西药组、JTSX低剂量组（JTSX1组）和JTS... 目的：探讨降糖舒心方（JTSX）抑制SD糖尿病大鼠心肌细胞内质网应激c-JNK凋亡旁路,减轻糖尿病心肌重构的分子机制。方法：采用高脂饲养＋链脲佐菌素制备2型糖尿病大鼠模型,成模后随机分为模型组、西药组、JTSX低剂量组（JTSX1组）和JTSX高剂量组（JTSX2组）,另设正常组作对照。相应药物干预8周后,检测空腹血糖（FBG）、血脂、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）变化。用透射电镜观察心肌组织超微结构; TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平;用RT-PCR和免疫组化分别检测c-JUN氨酸端激酶（c-JNK）和糖调节蛋白78（GRP78）的mRNA转录及其功能蛋白的表达水平。结果：与模型组相比,各给药组均能明显降低FBG（P 〈0. 05）,升高SOD、GSH-Px（P 〈0. 05）;均可降低TG、LDL-C（P 〈0. 05）,升高HDL-C（P 〈0. 05）;均可下调c-JNK、GRP78mRNA转录及其蛋白表达（P 〈0. 05）,降低心肌细胞凋亡指数（AI）（P 〈0. 05）,并改善心肌组织超微结构;与西药组相比,JTSX2疗效更显著（P 〈0. 05）。结论：JTSX能改善糖尿病代谢紊乱,提高抗氧化应激能力,抑制内质网应激细胞凋亡通路,从而改善心肌重构,疗效具有剂量依赖性。 展开更多

关键词 糖尿病 内质网应激 细胞凋亡 C-JUN氨基端激酶 糖调节蛋白78 心肌重构 降糖舒心方

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糖原合酶激酶-3β与内质网应激相互作用参与高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤 被引量：3

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作者 徐文明 林建聪 +2 位作者 陈美姬 张常然 李延兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期612-619,共8页

目的糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)与内质网应激(ERS)相互作用是否参与高糖引起的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤。方法应用40 mmol/L葡萄糖作用HUVECs 24 h构建高糖血管内皮细胞损伤模型。应用Western blot法检测GSK-3β、糖调节蛋白78(GRP... 目的糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)与内质网应激(ERS)相互作用是否参与高糖引起的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤。方法应用40 mmol/L葡萄糖作用HUVECs 24 h构建高糖血管内皮细胞损伤模型。应用Western blot法检测GSK-3β、糖调节蛋白78(GRP78)、CHOP和cleaved caspase-3蛋白的表达水平;CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定细胞凋亡;DCFH-DA染色荧光显微镜照相法测定胞内活性氧(ROS)水平;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位(MMP)。结果应用40 mmol/L葡萄糖处理HUVECs 3~24 h,磷酸化(p)-GSK-3β表达减少,与Con组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);用高糖处理HUVECs 1~24 h,对促进GRP78和CHOP蛋白表达呈显著的时间依赖性,与Con组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);氯化锂(Li Cl,GSK-3β抑制剂)能减轻高糖引起的ERS,使GRP78和CHOP蛋白表达减少,与高糖组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);4-苯基丁酸(4-PBA,ERS抑制剂)减弱高糖对GSK-3β的激活作用,使p-GSK-3β表达增多,与高糖组比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。高糖处理HUVECs 24 h能引起细胞存活率降低、凋亡细胞、cleaved caspase-3表达和ROS生成增多及MMP丢失等损伤;在高糖作用前,应用Li Cl或4-PBA预处理60 min均减轻高糖引起的上述损伤,与高糖组分别比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论在高糖损伤的HUVECs,存在GSK-3β与ERS的相互作用并参与高糖对HUVECs的损伤。 展开更多

关键词 糖原合酶激酶-3Β 内质网应激 相互作用 人脐静脉内皮细胞 高糖

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MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡 被引量：6

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作者 陶天琪 王晓礽 +3 位作者 徐菲菲 刘蜜 李玉珍 刘秀华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期193-202,共10页

目的:研究肌原纤维形成调节因子1(MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)途径减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡。方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞... 目的:研究肌原纤维形成调节因子1(MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)途径减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡。方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞的凋亡率;以Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化PERK、Nrf2、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Bcl-2和Bax的蛋白水平,研究过表达或敲低对于H/R致心肌细胞凋亡的影响及其与PERK/Nrf2途径活化的关系。结果:H/R引起心肌细胞凋亡;过表达MR-1减轻H/R引起的细胞凋亡(P<0.01),下调CHOP表达(P<0.05),引起Bcl-2/Bax值升高(P<0.01),并抑制H/R诱导的PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01)。敲低MR-1加重H/R引起的细胞凋亡(P<0.01)、CHOP表达上调(P<0.05)和Bcl-2/Bax值下降(P<0.01),并加重H/R诱导的PERK磷酸化(P<0.05)、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01)。结论:MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 缺氧 复氧 心肌细胞 肌原纤维形成调节因子1 蛋白激酶R样内质激酶 核因子E2 相关因子2

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腺苷酸蛋白激酶活化在红景天苷抑制同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞内质网应激中的作用 被引量：2

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作者 俞天虹 朱琳 +3 位作者 赵蓉 王彦军 孙建辉 贾方 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第10期2558-2562,共5页

目的:探讨腺苷酸蛋白激酶(AMPK)活化在红景天苷(Sal)抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVECs)内质网应激中的作用。方法:将AMPK基因的siRNA载体(AMPK-si-RNA)转染HUVECs后,用红景天苷或AMPK的选择性激动剂5-氨-4-甲酰胺咪唑... 目的:探讨腺苷酸蛋白激酶(AMPK)活化在红景天苷(Sal)抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVECs)内质网应激中的作用。方法:将AMPK基因的siRNA载体(AMPK-si-RNA)转染HUVECs后,用红景天苷或AMPK的选择性激动剂5-氨-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)预孵育2 h,再加入Hcy处理24 h,实时荧光定量PCR(Realtime-PCR)检测免疫球蛋白结合蛋白(Bi P)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的mRNA表达水平,Western Blot检测Bi P、CHOP、AMPK的蛋白表达变化,双链RNA依赖的PKR内质网激酶(PERK)、翻译起始因子(e IF2α)和AMPK的磷酸化水平。结果:与空白对照组相比,单用Hcy处理组的Bi P和CHOP基因表达和蛋白表达都显著升高(P<0.01),PERK和e IF2α的磷酸化水平升高(P<0.01),与单用Hcy处理组相比,红景天苷和AICAR预处理组均能抑制Hcy导致的Bi P和CHOP的基因和蛋白表达(P<0.05),降低PERK和e IF2α的磷酸化水平(P<0.05),而AMPK-si-RNA转染细胞后,红景天苷抑制Bi P和CHOP基因和蛋白表达的能力下降,抑制PERK和e IF2α的磷酸化水平的能力也相应降低。结论:红景天苷抑制Hcy诱导的内质网应激是由AMPK活化介导的,从而发挥内皮保护的效应。 展开更多

关键词 腺苷酸蛋白激酶 红景天苷 同型半胱氨酸 内质网应激

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