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水/有机溶剂两相体系微生物催化不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 被引量:7
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作者 何军邀 孙志浩 +1 位作者 郑璞 韩丽 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期310-315,共6页
研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程。有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁... 研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程。有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁酯两相体系能明显改善反应效率。通过系统考察一些因素如相体积比、振摇速度、反应温度和pH等对反应速度、摩尔转化率和产物光学纯度的影响发现,这些因素对还原反应的初速度和摩尔转化率有较明显的影响,而对产物的光学纯度影响不明显。优化后的条件为:水与有机溶剂的相体积比1:1,振摇速度180r·min-1,温度30℃,pH7.0。在该优化反应条件下,水/有机溶剂两相体系中出芽短梗霉SW0202细胞催化COBE生成(S)-CHBE不对称还原反应的最大摩尔转化率和产物的光学纯度分别达到了94.8%和97.9%e.e.,在用Na2CO3溶液控制水相pH7.0条件下,有机相中的产物浓度积累达58.2g·L-1。 展开更多
关键词 出芽短梗霉SW0202 不对称还原 4-乙酰乙酸乙酯 (S)-4--3-羟基丁酸乙酯
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外消旋体4-氯-3-羟基丁酸乙酯的化学合成 被引量:2
2
作者 唐功 《化学与生物工程》 CAS 2010年第12期18-19,30,共3页
采用化学方法,从4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)出发,合成得到4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE),收率为82.5%、纯度达96.779%,并对合成产物的结构进行了表征。
关键词 4--3-羟基丁酸乙酯 化学合成
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光学活性R-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的制备 被引量:3
3
作者 李立新 李军 谢明贵 《四川大学学报(工程科学版)》 EI CAS CSCD 2003年第4期106-108,共3页
R-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯是制成血管紧张素转化酶抑制剂类药物的重要中间体,以廉价易得的DL-苹果酸为手性源,经过酐活化、付-克反应、拆分、常压催化氢解和酯化等成功地制得了R-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯,为了工业化生产制备该类药物提供... R-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯是制成血管紧张素转化酶抑制剂类药物的重要中间体,以廉价易得的DL-苹果酸为手性源,经过酐活化、付-克反应、拆分、常压催化氢解和酯化等成功地制得了R-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯,为了工业化生产制备该类药物提供了一些可行的方法和途径。 展开更多
关键词 光学活性 拆分 包结拆分 不对称合成 r-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯
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生物催化制备光学活性4-氯-3-羟基丁酸酯研究进展 被引量:7
4
作者 孙志浩 何军邀 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期623-628,共6页
综述了生物催化制备光学活性4-氯-3-羟基丁酸酯(CHBE)的研究进展,介绍了生物催化外消旋体拆分和不对称还原方法制备光学活性CHBE的研究现状,重点阐述了反应介质选择、辅助底物和添加剂的选择、细胞热处理等一些控制不对称还原4-氯-3-氧... 综述了生物催化制备光学活性4-氯-3-羟基丁酸酯(CHBE)的研究进展,介绍了生物催化外消旋体拆分和不对称还原方法制备光学活性CHBE的研究现状,重点阐述了反应介质选择、辅助底物和添加剂的选择、细胞热处理等一些控制不对称还原4-氯-3-氧代丁酸酯(COBE)立体选择性的方法。对生物催化制备光学活性CHBE的工业化前景进行了展望。 展开更多
关键词 生物催化 光学活性 4--3-羟基丁酸 外消旋体拆分 不对称还原
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稳定烯醇结构3-氯-2-羟基-4-羰基-4-对甲苯基-2-丁烯酸乙酯的合成
5
作者 徐泽刚 王伦 +4 位作者 李秉擘 宁斌科 王月梅 卫天琪 杨翠凤 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期299-302,共4页
以甲苯为起始原料,通过傅克-酰基化、Aldol反应合成了具有稳定烯醇结构的3-氯-2-羟基-4-羰基-4-对甲苯基-2-丁烯酸乙酯,反应过程生成了中间体3,3-二氯-2-羟基-4-羰基-4-对甲苯基丁酸乙酯,采用红外、核磁共振谱、HRMS产品进行了测定和结... 以甲苯为起始原料,通过傅克-酰基化、Aldol反应合成了具有稳定烯醇结构的3-氯-2-羟基-4-羰基-4-对甲苯基-2-丁烯酸乙酯,反应过程生成了中间体3,3-二氯-2-羟基-4-羰基-4-对甲苯基丁酸乙酯,采用红外、核磁共振谱、HRMS产品进行了测定和结构表征。对反应机理进行了初步探讨。 展开更多
关键词 烯醇 3--2-羟基-4-羰基-4-对甲苯基-2-丁烯酸乙酯 乙醛酸乙酯 反应机理
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新显色剂5-氯-4-羟基-3-甲氧基苯基卟啉的合成及其与Fe(Ⅲ)的显色反应研究 被引量:10
6
作者 王玉枝 李庆宏 +3 位作者 熊劲芳 文凌飞 邓志军 周伟 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期39-41,共3页
合成了 5 -氯 - 4-羟基 - 3-甲氧基苯基卟啉 ( MTCHPMOP) ,并对其与 Fe( )的显色反应进行了初步研究。在 p H6.6的弱酸性介质中 ,在 Triton X- 1 0 0存在下 ,试剂与 Fe( )形成橙黄色配合物 ,其表观摩尔吸光系数ε4 46 =6.6× 1 0 ... 合成了 5 -氯 - 4-羟基 - 3-甲氧基苯基卟啉 ( MTCHPMOP) ,并对其与 Fe( )的显色反应进行了初步研究。在 p H6.6的弱酸性介质中 ,在 Triton X- 1 0 0存在下 ,试剂与 Fe( )形成橙黄色配合物 ,其表观摩尔吸光系数ε4 46 =6.6× 1 0 5L· mol- 1·cm- 1,Fe( )浓度在 0 .0 1~ 7.5 μg/2 5 m L范围内符合比耳定律。方法应用于天然水中痕量 Fe( )的测定 。 展开更多
关键词 显色剂 5--4-羟基-3-甲氧基苯基卟啉 合成 Fe(Ⅲ) 显色反应 分光光度法 铁(Ⅲ) 测定
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新显色剂meso-四(3-氯-4-羟基-5-甲氧基苯基)卟啉与Pd(Ⅱ)的显色反应 被引量:4
7
作者 王玉枝 沈广宇 +1 位作者 张亚学 陈同森 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期263-265,共3页
研究了meso 四 (3 氯 4 羟基 5 甲氧基苯基 )卟啉 [T(3Cl 4H 5MOP)P]与Pd(Ⅱ )的显色反应。在阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠 (SDS)与乳化剂OP存在下 ,在pH 2 .0的Britton Robinsin广泛缓冲介质中 ,Pd(Ⅱ )与T(3Cl 4H 5MOP)P形成 1... 研究了meso 四 (3 氯 4 羟基 5 甲氧基苯基 )卟啉 [T(3Cl 4H 5MOP)P]与Pd(Ⅱ )的显色反应。在阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠 (SDS)与乳化剂OP存在下 ,在pH 2 .0的Britton Robinsin广泛缓冲介质中 ,Pd(Ⅱ )与T(3Cl 4H 5MOP)P形成 1∶1的稳定配合物 ,其最大吸收峰位于 4 2 2nm处 ,表观摩尔吸光系数ε4 2 2 =4 .78× 10 5L·mol- 1·cm- 1,钯量在 0~ 8.0 μg/ 2 5ml范围内符合比耳定律。应用此法测定催化剂中的痕量Pd(Ⅱ ) ,结果满意。 展开更多
关键词 显色反应 meso-四(3--4羟基-5-甲氧基苯基)卟啉 催化剂 痕量分析 分光光度法
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2-(4′-羟基苯氧基)-3-氯-5-三氟甲基吡啶的合成 被引量:4
8
作者 廖泽栋 刘智凌 +1 位作者 徐满才 廖文文 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期944-946,960,共4页
以对苯二酚与2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶单醚化合成精吡氟氯禾灵的重要中间体2-(4′-羟基苯氧基)-3-氯-5-三氟甲基吡啶。探讨并得到了反应的最佳工艺条件:K2CO3为缚酸剂,二甲基亚砜和甲苯为溶剂,n(2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶)∶n(对苯二酚)... 以对苯二酚与2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶单醚化合成精吡氟氯禾灵的重要中间体2-(4′-羟基苯氧基)-3-氯-5-三氟甲基吡啶。探讨并得到了反应的最佳工艺条件:K2CO3为缚酸剂,二甲基亚砜和甲苯为溶剂,n(2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶)∶n(对苯二酚)∶n(K2CO3)=1∶2∶1.08,不需要脱水。在回流条件下加入2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶并反应5 h。在此条件下,2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶的转化率100%,产品的选择性大于98%。 展开更多
关键词 2-(4-羟基苯氧基)-3-.5-三氟甲基吡啶 2 3--5-三氟甲基吡啶 对苯二酚
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3-(2-氯吡啶-3-基)-2-[4-(2,6-二氟苯基)噻唑-2-基]-3-羟基丙烯腈衍生物的合成及生物活性 被引量:1
9
作者 杨鹏 沈德隆 +4 位作者 谭成侠 翁建全 陆棋 魏优昌 孔小林 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期183-185,190,共4页
鉴于噻唑丙烯腈和吡啶两类化合物的优点,本文以丙二腈、2,6-二氟苯乙酮、2-氯吡啶酸为起始原料,经五步反应,设计合成了3个新的3-(2-氯吡啶-3-基)-2-[[4-(2,6-二氟苯基)噻唑-2-基]-3-取代丙烯腈类化合物;并利用1HNMR、IR、MS,元素分析对... 鉴于噻唑丙烯腈和吡啶两类化合物的优点,本文以丙二腈、2,6-二氟苯乙酮、2-氯吡啶酸为起始原料,经五步反应,设计合成了3个新的3-(2-氯吡啶-3-基)-2-[[4-(2,6-二氟苯基)噻唑-2-基]-3-取代丙烯腈类化合物;并利用1HNMR、IR、MS,元素分析对其结构进行了表征.初步生物活性测试结果表明:3个化合物在测试浓度下均具有一定杀菌杀虫活性. 展开更多
关键词 3-(2吡啶-3-基)-2-[4(2 6-二氟苯基)噻唑2基]-3-羟基丙烯腈 合成 生物活性
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3-氯甲基-4-羟基苯乙酮合成工艺研究 被引量:1
10
作者 毛先桐 文三林 龚大春 《湖北化工》 2001年第6期17-18,共2页
利用盐酸作催化剂 ,由对羟基苯乙酮和甲醛经缩合生成 3 氯甲基 4 羟基苯乙酮 ,研究了该中间体合成的配料比、反应温度和反应时间对反应收率的影响。结果表明 :对羟基苯乙酮、甲醛、盐酸配料摩尔比为 1∶2∶5 ,反应温度为 30~ 35℃ ,... 利用盐酸作催化剂 ,由对羟基苯乙酮和甲醛经缩合生成 3 氯甲基 4 羟基苯乙酮 ,研究了该中间体合成的配料比、反应温度和反应时间对反应收率的影响。结果表明 :对羟基苯乙酮、甲醛、盐酸配料摩尔比为 1∶2∶5 ,反应温度为 30~ 35℃ ,反应时间为 3 .0h ,反应收率为 80 % 。 展开更多
关键词 3-甲基-4-羟基苯乙酮 合成 工艺 研究 中间体 制药
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4-羟基苯甲醛及其溴代物在氯仿中溶解度测定和关联 被引量:6
11
作者 魏东炜 姜浩锡 +1 位作者 井欣 袁继堂 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1192-1195,共4页
Solubilities of 4-hydroxybenzaldehyde, 3-bromo-4-hydroxybenzaldehyde, 3,5 -dibromo-4-hydroxybenzaldehyde in chloroform were measured at temperatures ranging from 283.15 K to 323.15 K.The measurements of temperature an... Solubilities of 4-hydroxybenzaldehyde, 3-bromo-4-hydroxybenzaldehyde, 3,5 -dibromo-4-hydroxybenzaldehyde in chloroform were measured at temperatures ranging from 283.15 K to 323.15 K.The measurements of temperature and enthalpy of fusion of pure solutes were used for caculation of solubility by ideal solution model,which was higher than the experimental values.The very low solubility in chloroform was due to self association of solute molecules.A λh formula was used to fit the data and had shown good correlation results. 展开更多
关键词 溶解度 4-羟基苯甲醛 3--4-羟基苯甲醛 3.5-二溴-4-羟基苯甲醛 仿 缔合 关联
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DMAP催化的17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮硅醚化反应研究
12
作者 吴庆安 吴红卫 柏挺 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期850-854,共5页
以4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂,氯甲基二甲基氯硅烷(CDCS)为硅醚化试剂,Et3N为缚酸剂,5℃反应2 h,对17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮(I)的17α-OH进行硅醚化保护,生成17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮-17-氯甲基二甲基硅醚(II)... 以4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂,氯甲基二甲基氯硅烷(CDCS)为硅醚化试剂,Et3N为缚酸剂,5℃反应2 h,对17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮(I)的17α-OH进行硅醚化保护,生成17β-氰基-17α-羟基雄甾-4-烯-3-酮-17-氯甲基二甲基硅醚(II)。研究水分、p H、DMAP用量及投料顺序对化合物(I)硅醚化反应的影响。在最佳反应条件下,化合物收率98.70%,纯度99.07%。 展开更多
关键词 17β-氰基-17α-羟基雄甾-4--3--17-甲基二甲基硅醚 17β-氰基-17α-羟基雄甾-4--3- 硅醚化 4-二甲氨基吡啶
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3-硝基-4-羟基苯甲酸的制备研究 被引量:1
13
作者 全保学 蒋文伟 杨琴 《应用化工》 CAS CSCD 2014年第2期332-334,共3页
以3-硝基-4-氯苯甲酸为原料,经水解反应得到产品,最佳水解条件为:氢氧化钠/3-硝基-4-氯苯甲酸摩尔比为4.5,碱液质量分数为15%,水解温度为95℃,反应时间为10 h。在最佳水解条件基础上,考察了碱液的循环利用,提高了氢氧化钠的利用率。总... 以3-硝基-4-氯苯甲酸为原料,经水解反应得到产品,最佳水解条件为:氢氧化钠/3-硝基-4-氯苯甲酸摩尔比为4.5,碱液质量分数为15%,水解温度为95℃,反应时间为10 h。在最佳水解条件基础上,考察了碱液的循环利用,提高了氢氧化钠的利用率。总收率大于91%,纯度大于99%(HPLC),经FTIR、1H NMR、13C NMR和MS分析,证实产品为3-硝基-4-羟基苯甲酸。 展开更多
关键词 3-硝基-4-羟基苯甲酸 3-硝基4-苯甲酸 水解 循环
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新试剂T(3Cl-4H-5MOP)P胶束分光光度法测定微量银 被引量:4
14
作者 沈广宇 王玉枝 +1 位作者 陈同森 吴燕 《湖南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 1998年第S1期31-35,共5页
研究了Ag-meso-四(3-氯-4-羟基-5-甲氧基苯基)卟啉(简称T(3Cl-4H-5MOP)P)-Tween-80-TDS胶束显色反应的最佳形成条件,在pH11.60的Na2B4O710H2O-NaOH缓冲溶液... 研究了Ag-meso-四(3-氯-4-羟基-5-甲氧基苯基)卟啉(简称T(3Cl-4H-5MOP)P)-Tween-80-TDS胶束显色反应的最佳形成条件,在pH11.60的Na2B4O710H2O-NaOH缓冲溶液中和Tween-80-TDS混合表面活性剂存在下,Ag(Ⅰ)与T(3Cl-4H-5MOP)P形成1∶1的胶束配合物,其最大吸收波长和表观摩尔吸光系数分别是432nm和2.25×105L·mol-1·cm-1.银量在0~7.25μg/25mL范围内符合比尔定律.方法应用到照片和定影液废水中微量银的测定,结果满意. 展开更多
关键词 meso-四(3--4-羟基-5-甲氧基苯基)卟啉 胶束分光光度法 照片 废水
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氯化消毒副产物2-氯-5-酮-3-烯-己二酰氯的质谱分析 被引量:1
15
作者 余子锐 邹惠仙 陆隽鹤 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期5-8,共4页
3_氯_4_(二氯甲基)_5_羟基_2(H)_呋喃酮(MX)是饮用水氯化消毒过程中产生的一种具有强致突变性的消毒副产物 (DBPs) ,在对MX的前驱物模拟氯化过程中 ,发现在MX峰的附近有一峰 ,有时干扰MX的测定 ;作者对该未知峰的质谱图进行了解析,初步... 3_氯_4_(二氯甲基)_5_羟基_2(H)_呋喃酮(MX)是饮用水氯化消毒过程中产生的一种具有强致突变性的消毒副产物 (DBPs) ,在对MX的前驱物模拟氯化过程中 ,发现在MX峰的附近有一峰 ,有时干扰MX的测定 ;作者对该未知峰的质谱图进行了解析,初步推断其结构可能为2_氯_5_酮_3_烯_己二酰氯 (2_chloro_5_oxo_3_hexenediacylchloride,COHC)。 展开更多
关键词 化消毒副产物 质谱分析 2--5--3--己二酰 3--4-(二甲基)-5-羟基-2(H)-呋喃酮 饮用水
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Pseudomonas putida ZWL73经龙胆酸途径分解代谢3-羟基苯甲酸 被引量:2
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作者 肖长生 刘虹 +1 位作者 王淑君 周宁一 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期245-250,共6页
一株4-氯硝基苯(4-CNB)的完全降解菌Pseudomonas putidaZWL73能利用3-羟基苯甲酸(3-HBA)为惟一碳源和能源生长,而且ZWL73在对3-HBA降解的过程中,有中间产物龙胆酸生成;酶学分析的分光光度法证实,ZWL73通过GSH依赖型的龙胆酸途径代谢3-H... 一株4-氯硝基苯(4-CNB)的完全降解菌Pseudomonas putidaZWL73能利用3-羟基苯甲酸(3-HBA)为惟一碳源和能源生长,而且ZWL73在对3-HBA降解的过程中,有中间产物龙胆酸生成;酶学分析的分光光度法证实,ZWL73通过GSH依赖型的龙胆酸途径代谢3-HBA,并且该途径需经3-HBA或龙胆酸诱导. 展开更多
关键词 PSEUDOMONAS PUTIDA ZWL73 3-羟基苯甲酸 龙胆酸途径 4-硝基苯
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2-羟基-4-甲基苯磺酸的合成工艺 被引量:1
17
作者 张梦辉 韩科展 +1 位作者 周志旭 赵春深 《化学研究与应用》 CSCD 北大核心 2017年第7期1065-1068,共4页
2-羟基-4-甲基苯磺酸是合成内皮素拮抗剂UK-350,926的重要中间体。本文以4-氯-3-甲基苯酚为起始原料,经磺化和氢解两步反应得到目标化合物,并对其单晶结构进行了研究,其结构经1H NMR、13C NMR和X-ray单晶衍射确证。经优化后的工艺原料... 2-羟基-4-甲基苯磺酸是合成内皮素拮抗剂UK-350,926的重要中间体。本文以4-氯-3-甲基苯酚为起始原料,经磺化和氢解两步反应得到目标化合物,并对其单晶结构进行了研究,其结构经1H NMR、13C NMR和X-ray单晶衍射确证。经优化后的工艺原料易得、操作简单、反应时间短且收率较高,适合工业化生产,反应总收率80.1%。 展开更多
关键词 2-羟基-4-甲基苯磺酸 4--3-甲基苯酚 合成 单晶
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乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE 被引量:2
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作者 金永琴 徐娴 +1 位作者 毛政 何冰芳 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1120-1124,共5页
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(al... R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(alr),构建重组大肠杆菌E.coliBL21/pET-alr,并与葡萄糖脱氢酶的基因工程菌(BL21/pET-gdh)进行偶联转化COBE。合理调整双菌双酶比例,当BL21/pET-alr和BL21/pET-gdh的湿菌重比为6∶1时,CHBE的产量达到最高,无需添加辅酶,转化22h摩尔转化率达到95.88%,产物R-CHBE的对映体过量值ee为96%,较好地实现了双酶偶联制备R-CHBE。 展开更多
关键词 NADPH再生 葡萄糖脱氢酶 乙醛还原酶 r-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
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E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-cr羰基还原酶分离纯化及酶学性质研究 被引量:4
19
作者 王亚军 吴配配 +1 位作者 罗希 郑裕国 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期607-615,共9页
利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-... 利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯(CHOHB)、4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)合成阿托伐他汀关键手性合成子6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯、(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,对丙酮酸乙酯、丁二酮也表现出较高的还原能力。该羰基还原酶的最适作用条件为:30℃,p H7.5;且活性不依赖于金属离子。它催化CHOHB还原反应的最大反应速度vmax 54.3μmol·mg-1·min-1,KmCHOHB值4.4 mmol·L-1;作用于COBE时,最大反应速度vmax 36.5μmol·mg-1·min-1,KmCOBE值1.2×10-1 mmol·L-1。E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr羰基还原酶在他汀手性侧链制造上具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 r-羰基还原酶 分离纯化 6-氰基-(3R 5R)-羟基己酸叔丁酯 (S)-4--3-羟基丁酸乙酯
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羰基还原酶工程菌构建及其应用于还原制备S-CHBE 被引量:3
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作者 张志斌 吴小芳 +4 位作者 杨慧林 颜日明 曾庆桂 汪涯 朱笃 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期24-29,共6页
S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列... S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列构建了基因工程菌BL21(DE3)/pET28a-S1',提高了羰基还原酶表达效率,经诱导条件优化后羰基还原酶活力达11.49 U/mg蛋白;将BL21(DE3)/pET28a-S1'与E.coli BL21(DE3)/pET28a-gdh进行偶联,在单一水相中未添加辅酶条件下转化10 h,产物的摩尔转化率和对映体过量值(e.e.)分别达92.1%和100%。 展开更多
关键词 生物催化 羰基还原酶 密码子优化 诱导表达 S-4--3-羟基丁酸乙酯
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