2011年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测 被引量：98

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作者 施晓群 孙景勇 +29 位作者 倪语星 汪复 朱德妹 胡付品 蒋晓飞 徐英春 张小江 胡云建 艾效曼 杨青 孙自镛 陈中举 贾蓓 黄文祥 卓超 苏丹虹 魏莲花 吴玲 张朝霞 季萍 王传清 王爱敏 张泓 孔菁 徐元宏 沈继录 单斌 杜艳 俞云松 林洁 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期218-221,共4页

目的了解2011年中国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国15所医院临床分离的6012株铜绿假单胞菌按照统一方案,采用统一材料、方法(K-B法或自动化仪器)和判断标准(CLSI 2011年版),... 目的了解2011年中国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国15所医院临床分离的6012株铜绿假单胞菌按照统一方案,采用统一材料、方法(K-B法或自动化仪器)和判断标准(CLSI 2011年版),进行铜绿假单胞菌的耐药性监测,并用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 2011年15所医院从临床标本中共分离6 012株铜绿假单胞菌,其中92.9%分离自住院患者,73.7%的菌株分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为14.3%。耐药性最高的医院分离株对大多数抗菌药物的耐药率均高于30%,而耐药性最低的成人医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率均低于20%,2所儿童医院分离菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于17%;分离自门诊的菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于25%,而分离自ICU的菌株除了对阿米卡星的耐药率为16.1%外,对其他各种抗菌药物的耐药率均高于23%。各医院泛耐药铜绿假单胞菌的检出率平均为1.8%。结论我国不同地区、不同医院临床分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率仍处于较高水平,但近年耐药性增长趋势稳定。各地区、各医院、各科室患者的分离株对抗菌药物的耐药性相差较大,医疗机构应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物。 展开更多

关键词 抗菌药物 铜绿假单胞菌 细菌耐药性

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多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因及qacEΔ1基因检测研究 被引量：10

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作者 蒋伟 常东 黄志红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期9-11,共3页

目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pa)的耐药机制,为临床使用氨基糖苷类药物治疗Pa感染和消毒灭菌工作提供参考。方法采用琼脂稀释法从临床分离的Pa中筛选出35株多重耐药菌株,用PCR方法检测这些菌株中氨基糖苷类修饰酶编码基因及qacEΔ1基... 目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pa)的耐药机制,为临床使用氨基糖苷类药物治疗Pa感染和消毒灭菌工作提供参考。方法采用琼脂稀释法从临床分离的Pa中筛选出35株多重耐药菌株,用PCR方法检测这些菌株中氨基糖苷类修饰酶编码基因及qacEΔ1基因存在状况。结果35株Pa中aac(3)Ⅱ、aa(6′)Ⅱ、ant(3″)Ⅰ和ant(2″)Ⅰ等5种氨基糖苷类修饰酶基因检出率分别为48.6%、40.0%、54.3%、45.7%和60.0%,绝大多数菌株携带2种或2种以上的氨基糖苷类修饰酶基因,而qacEΔ1基因检出率也达到94.3%。结论铜绿假单胞菌产生氨基糖苷修饰酶与该菌的多重耐药有密切关系,临床治疗Pa感染应参考药敏试验结果,慎选氨基糖苷类药物;同时在消毒灭菌工作中,不宜继续使用季铵盐类、双胍类等作为常用消毒剂。 展开更多

关键词 假单胞菌 铜绿 抗药性 多药 耐药 氨基糖苷类修饰酶基因 基因 qacEΔl

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采用Red重组系统敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因 被引量：8

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作者 余华 熊浚智 +4 位作者 何晓梅 盛哈蕾 蔡文强 谢玮 张克斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期129-132,137,共5页

目的敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,获得无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株。方法采用PCR从pKD46质粒上扩增λ噬菌体的Red重组酶基因,并将其克隆到大肠杆菌和铜绿假单胞菌穿梭质粒pUCP多克隆位点上,电击转化铜绿假单胞菌PAO1感受态... 目的敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,获得无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株。方法采用PCR从pKD46质粒上扩增λ噬菌体的Red重组酶基因,并将其克隆到大肠杆菌和铜绿假单胞菌穿梭质粒pUCP多克隆位点上,电击转化铜绿假单胞菌PAO1感受态细胞,构建PAO1/pUCP-Red基因敲除体系。常规基因操作构建两端与弹性蛋白酶基因上、下游同源,中间为庆大霉素抗性基因的线性打靶片段;并将其电击转化pUCP-Red/PAO1感受态;采用庆大霉素和羧苄青霉素抗性平板初步筛选阳性重组菌;通过PCR、RT-PCR及弹性蛋白酶活性检测方法,鉴定菌株弹性蛋白酶基因的敲除情况。结果本研究通过构建Red重组系统,获得了无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株。结论本研究成功敲除了铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,所获无弹性蛋白酶活性的菌株将为系统深入研究弹性蛋白酶在铜绿假单胞菌致病性中的详细作用机理提供材料和基础。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 弹性蛋白酶 基因敲除 RED重组系统

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酸性氧化电位水对铜绿假单胞菌的杀菌机制研究 被引量：9

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作者 赵凯丽 李武平 +2 位作者 张晓娜 王刚 庄玉晨 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期41-45,共5页

目的探讨酸性氧化电位水(EOW)对铜绿假单胞菌的杀菌机制。方法以铜绿假单胞菌作为研究对象,从蛋白质渗漏,核酸和细胞膜钙离子通透性等方面对EOW的杀菌机制进行研究,同时以2%戊二醛作为阳性对照组,以生理盐水(NS)作为阴性对照组。结果以... 目的探讨酸性氧化电位水(EOW)对铜绿假单胞菌的杀菌机制。方法以铜绿假单胞菌作为研究对象,从蛋白质渗漏,核酸和细胞膜钙离子通透性等方面对EOW的杀菌机制进行研究,同时以2%戊二醛作为阳性对照组,以生理盐水(NS)作为阴性对照组。结果以EOW、2%戊二醛对铜绿假单胞菌作用30 s杀灭率>99.99%,作用60 s杀灭率可达100.00%。EOW、NS、2%戊二醛作用铜绿假单胞菌60 s后,经BCA法检测蛋白渗漏,分别为(96.00±7.42)、(94.15±7.49)、(216.97±10.35)μg/mL,总体比较,差异有统计学意义(F=613.20,P<0.01),2%戊二醛组高于EOW组、NS组;蛋白渗漏量不随作用时间增加而改变(均P>0.05)。随机多态性扩增DNA电泳图谱显示,EOW组与NS组均在500~1 000 kb间显示亮度较高的密集条带,2%戊二醛组无扩增条带。EOW及2%戊二醛作用后钙离子荧光强度均低于NS组。结论 EOW可能的杀菌机制是使铜绿假单胞菌细胞膜通透性受到一定程度的损伤,致使Ca2+泄漏,但未能造成蛋白质泄漏,对其核酸损伤作用不明显,DNA可能并非EOW杀菌靶点。 展开更多

关键词 酸性氧化电位水 戊二醛 铜绿假单胞菌 杀菌机制 蛋白质泄漏 核酸 细胞膜通透性

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医院感染铜绿假单胞菌对抗菌药物多重耐药基因的研究 被引量：7

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作者 王继东 王晓岚 +4 位作者 周丽珍 宫玲玲 唐丽凤 郁敏 糜祖煌 《中国感染控制杂志》 CAS 2007年第2期77-82,共6页

目的了解某院铜绿假单胞菌(PA)医院感染菌株的多重耐药情况和有关机制。方法采用微量肉汤法对分离自临床标本的37株PA进行药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)法对多重耐药的PA进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、耐消毒剂和磺胺... 目的了解某院铜绿假单胞菌(PA)医院感染菌株的多重耐药情况和有关机制。方法采用微量肉汤法对分离自临床标本的37株PA进行药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)法对多重耐药的PA进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、耐消毒剂和磺胺基因检测,并对耐药基因进行测序。结果β-内酰胺酶基因TEM、CARB、VIM的阳性率分别为24.32%(9/37)、43.24%(16/37)、5.41%(2/37),而SHV、CTX-M、OXA-10group、PER、GES、VEB、DHA、IMP均阴性,oprD2缺失率为86.49%(32/37);氨基糖苷类修饰酶基因aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ和ant(2″)-Ⅰ阳性率分别为8.11%(3/37)、43.24%(16/37)、18.92%(7/37)、40.54%(15/37);耐消毒剂和磺胺基因qacE△1-sul1阳性达51.35%(19/37)。结论医院感染PA存在多种耐药基因,严重影响临床的抗感染疗效,应采取有效措施控制耐药菌株的出现。 展开更多

关键词 医院感染 铜绿假单胞菌 多重耐药 基因 抗药性 微生物

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43株临床铜绿假单胞菌exoS、exoU基因的携带及其耐药性 被引量：9

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作者 董晨晓 宋诗铎 +1 位作者 王悦 门昆 《中国感染控制杂志》 CAS 2010年第2期93-96,共4页

目的研究43株临床分离的铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统毒素基因exoS、exoU携带情况以及细菌的耐药性。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测毒素基因的分布,K-B纸片扩散法检测细菌的耐药性。结果 43株临床铜绿假单胞菌中,37株(86.05%)exoS基因阳... 目的研究43株临床分离的铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统毒素基因exoS、exoU携带情况以及细菌的耐药性。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测毒素基因的分布,K-B纸片扩散法检测细菌的耐药性。结果 43株临床铜绿假单胞菌中,37株(86.05%)exoS基因阳性,6株(13.95%)exoU基因阳性,无同时携带2种基因菌株。携带exoU的临床株对9种抗菌药物的耐药率均高于携带eroS菌株,其中对头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率差异有显著性(P<0.05)。结论携带毒素基因exoU的铜绿假单胞菌临床株所占比例较低,但耐药率高。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 Ⅲ型分泌系统 毒素基因 exoS exoU 抗药性 微生物

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重组毒素LHRH-PE40与A549细胞表面LHRH受体结合的特异性及其细胞毒性 被引量：6

7

作者 邓欣 冯昱 +7 位作者 王姿 朱丽娜 周洪伟 陈航 刘莹 朱平 张国利 李亘松 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期698-699,共2页

关键词 LHRH-PE40 促性腺激素释放激素受体(LHRHR) A549细胞

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铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株的构建 被引量：1

8

作者 张加勤 饶慧华 +4 位作者 徐巧丽 黄朝阳 房丽丽 马晓波 宋秀宇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期627-630,共4页

目的构建铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。方法分别以质粒pUCGM和铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板PCR扩增庆大霉素抗性基因(GM)和铜绿假单胞菌clpP基因及其3′、5′侧翼序列,将clpP基因及其3′、5′侧翼序列克隆至pMD19T载体,EcoRV切除clpP基... 目的构建铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。方法分别以质粒pUCGM和铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板PCR扩增庆大霉素抗性基因(GM)和铜绿假单胞菌clpP基因及其3′、5′侧翼序列,将clpP基因及其3′、5′侧翼序列克隆至pMD19T载体,EcoRV切除clpP基因37bp^453bp片段后,引入庆大霉素抗性基因,构建重组质粒pCKR2;EcoRⅠ/HindⅢ双酶切重组质粒pCKR2,回收FclpP-GM-clpPR片段,与自杀质粒pEX18Tc连接,得到clpP基因缺陷的同源重组载体pCKR3;将pCKR3质粒转化大肠埃希菌SM10,与铜绿假单胞菌PAO1双亲杂交,庆大霉素筛选得到铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。结果经酶切鉴定同源重组载体pCKR3构建正确;PCR和DNA测序鉴定铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株构建成功。结论本研究成功敲除了铜绿假单胞菌clpP基因,为进一步研究clpP基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 clpP基因 双亲杂交 同源重组

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某县级医院铜绿假单胞菌的分布及耐药性变迁 被引量：3

9

作者 戢运超 饶荣 《中国感染控制杂志》 CAS 2014年第4期246-248,共3页

目的：了解近年某县级医院铜绿假单胞菌的分布及耐药特点，为临床合理用药提供依据，并有助于医院感染预防与控制。方法对该院2010-2012年临床各类标本分离的铜绿假单胞菌的资料进行统计分析。结果3年共分离铜绿假单胞菌369株，主要检... 目的：了解近年某县级医院铜绿假单胞菌的分布及耐药特点，为临床合理用药提供依据，并有助于医院感染预防与控制。方法对该院2010-2012年临床各类标本分离的铜绿假单胞菌的资料进行统计分析。结果3年共分离铜绿假单胞菌369株，主要检出自痰液及咽拭子（234株，63．41％）、尿液（41株，11．11％）和伤口拭子（28株，7．59％）标本；在病区，主要分布于重症监护室（146株，39．56％）、呼吸内科（51株，13．82％）和神经外科（37株，10．03％）。铜绿假单胞菌对多粘菌素B无耐药；对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的耐药率较低（6．81％～22．73％）；各年度相比，除多粘菌素B外，对其他抗菌药物的耐药率均有不同程度上升，部分抗菌药物具统计学意义（P＜0．05）。结论该院铜绿假单胞菌主要分离自呼吸道标本，以收治危重症患者的科室分布较多；对多种抗菌药物具有较高的耐药性，且有上升趋势，临床应加强监控。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 抗菌药物 抗药性 微生物 耐药 医院感染 合理用药

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貉源绿脓杆菌分离鉴定 被引量：5

10

作者 王建军 莫玲 +3 位作者 郭广君 韩强 姚春阳 王玉茂 《中国动物保健》 2021年第12期116-117,120,共3页

为确诊引起山东省潍坊市某貉子养殖场的主要细菌性疾病,对该养殖户送检的病死貉子进行剖检,根据病貉的临床症状、病理剖检变化及其对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16SrDNAPCR鉴定、药物敏感试验,初步确诊为绿脓杆菌... 为确诊引起山东省潍坊市某貉子养殖场的主要细菌性疾病,对该养殖户送检的病死貉子进行剖检,根据病貉的临床症状、病理剖检变化及其对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16SrDNAPCR鉴定、药物敏感试验,初步确诊为绿脓杆菌感染。药物敏感试验结果表明,分离菌株对恩诺沙星、硫酸粘杆菌素、氟苯尼考中敏,对头孢噻呋、庆大霉素、替米考星、多西环素、林可霉素、阿莫西林耐药。 展开更多

关键词 貉 绿脓杆菌 药敏试验 PCR鉴定

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巯乙磺酸钠联合环丙沙星对铜绿假单胞菌生物膜的作用

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作者 陈盛 余加林 +2 位作者 罗则佳 何念海 孙凤军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期623-627,604,共5页

目的:探讨巯乙磺酸钠(mesna)对成熟铜绿假单胞菌生物膜(BF)的影响及其联合环丙沙星(CIP)对铜绿假单胞菌BF的作用。方法:微量稀释法检测mesna和CIP对铜绿假单胞菌PAO1的最低抑菌浓度(MIC);建立铜绿假单胞菌BF体外模型后分为对照组、低浓... 目的:探讨巯乙磺酸钠(mesna)对成熟铜绿假单胞菌生物膜(BF)的影响及其联合环丙沙星(CIP)对铜绿假单胞菌BF的作用。方法:微量稀释法检测mesna和CIP对铜绿假单胞菌PAO1的最低抑菌浓度(MIC);建立铜绿假单胞菌BF体外模型后分为对照组、低浓度mesna组及高浓度mesna组,用激光共聚焦显微镜(CLSM)采集并结合BF图像结构分析软件(ISA)定量分析mesna对铜绿假单胞菌BF作用后的结构参数;铜绿假单胞菌BF再次分为mesna组、CIP组及CIP联合mesna组,用CLSM采集BF图像并结合Amira 5.2三维重建软件定性分析mesna单独及联合CIP对成熟铜绿假单胞菌BF的作用;以棋盘设计,将不同浓度的mesna(0、0.5、1.0、2.0、4.0g.L-1)和不同浓度的CIP(浓度依次为(0、1/2、1、2、4和8MIC)两两组合,平板计数法检测mesna单独及与CIP联用后BF内活菌数。结果:mesna对PAO1的MIC为10g.L-1,CIP对PAO1的MIC为0.125mg.L-1;CLSM图像经ISA软件定量分析显示,与对照组比较,mesna能使BF厚度、平均扩散距离和结构熵均减少(P<0.01),区域孔率增加(P<0.01),高浓度组较低浓度组效应更明显(P<0.01);CLSM图像经三维重建后可见,单用mesna(2g.L-1),BF内细菌密集层叠,厚度较厚,可见大量活菌,未见明显死菌;单用CIP(2MIC),BF内仍可见大量活菌,死菌数少;mesna(2g.L-1)联合CIP(2 MIC)组可见BF细菌稀疏、厚度薄,活菌数少,BF内可见大量死菌;单用2g.L-1 mesna能使BF中的活菌数减少(P<0.05),单用2MICCIP可使BF中活菌数降低(P<0.05),1g.L-1 mesna与1 MIC的CIP联合应用可使BF上的活菌数明显减少(P<0.05)。结论:mesna能破坏铜绿假单胞菌BF形态结构,mesna与CIP存在协同作用,可增强其杀菌能力。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 生物膜 巯乙磺酸钠 环丙沙星

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铜绿假单胞菌YY24的异养硝化-好氧反硝化功能基因的研究 被引量：8

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作者 刘兴 李连星 +5 位作者 薄香兰 陈继楚 周胜杰 王军 王立红 陈成勋 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期475-483,共9页

为研究铜绿假单胞菌YY24硝化、反硝化功能基因及催化过程,分别对关键酶基因(amoA、napA、narG、nirK、nirS、cnorB、qnorB、nosZ、nifH)进行PCR扩增、鉴定及测序,通过琼脂糖凝胶电泳确定目的基因片段。研究结果表明,amoA基因为铜绿假单... 为研究铜绿假单胞菌YY24硝化、反硝化功能基因及催化过程,分别对关键酶基因(amoA、napA、narG、nirK、nirS、cnorB、qnorB、nosZ、nifH)进行PCR扩增、鉴定及测序,通过琼脂糖凝胶电泳确定目的基因片段。研究结果表明,amoA基因为铜绿假单胞菌YY24硝化关键酶氨单加氧酶的编码基因;铜绿假单胞菌YY24存在膜结合硝酸盐还原酶;亚硝酸还原酶的类型为细胞色素cd1型亚硝酸盐还原酶nirS;铜绿假单胞菌YY24存在一氧化氮还原酶norB,能够将NO催化转化为N2O,其基因类型为qnorB;铜绿假单胞菌YY24中存在nosZ基因。 展开更多

关键词 硝化 反硝化 功能基因 铜绿假单胞菌

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产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性和基因检测 被引量：2

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作者 谭萍 祝玲玲 +3 位作者 张松 朱平安 邹汉良 赖秀花 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第2期114-116,121,共4页

目的研究某地区临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶株主要基因型及其耐药性。方法以聚合酶链反应(PCR)法检测该市3所医院2002年8月—2007年6月分离的100株耐亚胺培南和(或)头孢他啶铜绿假单胞菌中产金属β-内酰胺酶基因,并用二倍... 目的研究某地区临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶株主要基因型及其耐药性。方法以聚合酶链反应(PCR)法检测该市3所医院2002年8月—2007年6月分离的100株耐亚胺培南和(或)头孢他啶铜绿假单胞菌中产金属β-内酰胺酶基因,并用二倍琼脂稀释法检测10种抗菌药物对产金属酶株的体外最低抑菌浓度(MIC)。结果共检出9株金属酶阳性菌株,其中3株IMP-1扩增阳性;6株VIM扩增阳性,经基因测序确认为VIM-2型。产酶株对头孢哌酮、头孢吡肟、亚胺培南、复方磺胺甲口恶唑全部耐药,部分对阿米卡星、环丙沙星较为敏感。结论该地区铜绿假单胞菌流行株金属酶基因型主要为VIM-2型和IMP-1型;其耐药性强,临床应根据药敏结果选择药物联合使用,以达到最佳抗菌效果。 展开更多

关键词 金属Β-内酰胺酶 铜绿假单胞菌 基因型 抗药性 微生物 聚合酶链反应

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一例雏鸡铜绿假单胞菌的分离鉴定及其16SrRNA基因序列分析 被引量：3

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作者 卢受昇 孔令辰 +1 位作者 罗晶璐 孙彦伟 《广东畜牧兽医科技》 2011年第6期32-35,共4页

为对死亡雏鸡进行病因诊断,通过大体剖检、细菌分离、生化鉴定,证实为铜绿假单胞菌感染。测定了该分离株的16S rRNA基因序列,并与GenBank中收录的序列比较,结果发现所分离的铜绿假单胞菌及参考株的16S rDNA基因序列极其保守,相似性达99%... 为对死亡雏鸡进行病因诊断,通过大体剖检、细菌分离、生化鉴定,证实为铜绿假单胞菌感染。测定了该分离株的16S rRNA基因序列,并与GenBank中收录的序列比较,结果发现所分离的铜绿假单胞菌及参考株的16S rDNA基因序列极其保守,相似性达99%～100%;与大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌的相似性差异约为9%;与鸭疫里默氏杆菌的相似性差异则更大,超过18%,提示16S rRNA序列测定可作为该菌鉴定的一种可靠方法。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 分离鉴定 1 6S RRNA 序列分析

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