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克氏原螯虾prx6基因抗鲶爱德华氏菌侵染的分子机制研究
1
作者
秦仕宇
金博阳
+4 位作者
李倩倩
张明达
文静
沈秀丽
杜志强
《福建农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第11期1228-1235,共8页
【目的】以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)为研究对象,探索过氧化物还原酶6(Peroxiredoxin 6,Prx6)基因(prx 6)在抗细菌先天免疫应答过程中的作用机制,为克氏原螯虾养殖过程病害问题的防治提供新思路。【方法】为了确定prx 6基因是否...
【目的】以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)为研究对象,探索过氧化物还原酶6(Peroxiredoxin 6,Prx6)基因(prx 6)在抗细菌先天免疫应答过程中的作用机制,为克氏原螯虾养殖过程病害问题的防治提供新思路。【方法】为了确定prx 6基因是否参与到克氏原螯虾抗细菌先天免疫过程,检测鲶爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)免疫刺激后的克氏原螯虾血细胞、肝胰腺、鳃以及肠组织中prx 6的相对表达量。采用体外转录法制备Prx6双链RNA(double-strands RNA,dsRNA),使用无菌注射器注射至克氏原螯虾血窦处,通过qRT-PCR检测其干扰效果。随后,通过RNAi试验分析鲶爱德华氏菌免疫刺激后克氏原螯虾的存活率,并通过qRT-PCR检测克氏原螯虾内源抗菌肽(antimicrobial peptides,Amps)基因的变化情况。【结果】通过qRT-PCR试验,发现经鲶爱德华氏菌刺激后克氏原螯虾各组织中prx 6基因的表达量上调,表明其可能参与了克氏原螯虾抗鲶爱德华氏菌的先天免疫调节。为深入研究prx 6基因的免疫调节作用机制,体外制备了Prx 6双链RNA,并注射dsRNA后检测克氏原螯虾肝胰腺中prx 6的相对表达量,结果显示其表达水平被显著抑制。在RNAi试验中,注射病原菌之后,与dsGFP对照组相比,克氏原螯虾的存活率显著下降,证明prx 6在宿主抵抗病原菌感染过程中发挥了重要作用。进一步检测病原菌感染后克氏原螯虾抗菌肽基因的变化情况,结果显示,与dsGFP对照组相比较,克氏原螯虾内源的抗菌肽基因ALF4、ALF 1、crustin 1、crustin 2、lys和lectin 2表达量被明显抑制。推测prx 6基因可能通过调节抗菌肽基因的表达水平,影响了克氏原螯虾对病原菌的抵抗能力,进而导致存活率下降。【结论】prx 6在克氏原螯虾对鲶爱德华氏菌的先天免疫中起重要作用,可能通过调控抗菌肽的表达参与克氏原螯虾抵抗鲶爱德华氏菌的免疫应答过程。
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关键词
克氏原螯虾
RNA干扰
先天免疫
prx
6
基因
抗菌肽
基因
鲶爱德华氏菌
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职称材料
花绒寄甲Prx6基因的确定和表达分析
被引量：
1
2
作者
郭瑞坚
郝春凤
+3 位作者
张正青
张伟
王化鹏
李孟楼
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2016年第8期148-154,161,共8页
【目的】获得花绒寄甲过氧化物还原酶6基因(Prx6),分析其在花绒寄甲发育和衰老过程中相对表达量的变化,以进一步揭示花绒寄甲衰老的分子机制。【方法】基于花绒寄甲成虫转录组数据库获得Prx6基因,并对其进行生物信息学分析。利用实时荧...
【目的】获得花绒寄甲过氧化物还原酶6基因(Prx6),分析其在花绒寄甲发育和衰老过程中相对表达量的变化,以进一步揭示花绒寄甲衰老的分子机制。【方法】基于花绒寄甲成虫转录组数据库获得Prx6基因,并对其进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,分析Prx6在花绒寄甲发育和衰老阶段的表达量。【结果】从花绒寄甲成虫转录组数据库中获取了2个Prx6基因,分别命名为Prx6-1和Prx6-2,其开放阅读框长度依次为654和672bp,分别编码218和224个氨基酸。多序列比对和系统发育分析表明,这2个基因均属于1-Cys家族,并且与鞘翅目的赤拟谷盗Prx6-1和Prx6-2的同源性最高,分别为71%和82%。发育阶段的定量结果表明,Prx6-1在2龄幼虫、蛹和初孵成虫体内的表达量较高,在6龄幼虫体内的表达量最低;Prx6-2在2龄和4龄幼虫体内表达量较高,在6龄幼虫体内表达量最低。在成虫衰老过程中,2个Prx6基因表达量整体上呈现出随羽化后时间的延长而增加的趋势。【结论】花绒寄甲Prx6基因影响其发育,特别是在2龄和6龄幼虫期。在花绒寄甲衰老过程中,2个Prx6基因的表达量随其羽化后时间的延长而升高。
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关键词
花绒寄甲
prx6基因
实时荧光定量PCR
幼虫发育阶段
成虫
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职称材料
题名
克氏原螯虾prx6基因抗鲶爱德华氏菌侵染的分子机制研究
1
作者
秦仕宇
金博阳
李倩倩
张明达
文静
沈秀丽
杜志强
机构
内蒙古科技大学生命科学与技术学院
内蒙古科技大学图书馆
出处
《福建农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第11期1228-1235,共8页
基金
内蒙古自治区自然科学基金项目(2024MS03051)
国家自然科学基金项目(32060834)
内蒙古科技大学2022年基本科研业务费专项资金(028)。
文摘
【目的】以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)为研究对象,探索过氧化物还原酶6(Peroxiredoxin 6,Prx6)基因(prx 6)在抗细菌先天免疫应答过程中的作用机制,为克氏原螯虾养殖过程病害问题的防治提供新思路。【方法】为了确定prx 6基因是否参与到克氏原螯虾抗细菌先天免疫过程,检测鲶爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)免疫刺激后的克氏原螯虾血细胞、肝胰腺、鳃以及肠组织中prx 6的相对表达量。采用体外转录法制备Prx6双链RNA(double-strands RNA,dsRNA),使用无菌注射器注射至克氏原螯虾血窦处,通过qRT-PCR检测其干扰效果。随后,通过RNAi试验分析鲶爱德华氏菌免疫刺激后克氏原螯虾的存活率,并通过qRT-PCR检测克氏原螯虾内源抗菌肽(antimicrobial peptides,Amps)基因的变化情况。【结果】通过qRT-PCR试验,发现经鲶爱德华氏菌刺激后克氏原螯虾各组织中prx 6基因的表达量上调,表明其可能参与了克氏原螯虾抗鲶爱德华氏菌的先天免疫调节。为深入研究prx 6基因的免疫调节作用机制,体外制备了Prx 6双链RNA,并注射dsRNA后检测克氏原螯虾肝胰腺中prx 6的相对表达量,结果显示其表达水平被显著抑制。在RNAi试验中,注射病原菌之后,与dsGFP对照组相比,克氏原螯虾的存活率显著下降,证明prx 6在宿主抵抗病原菌感染过程中发挥了重要作用。进一步检测病原菌感染后克氏原螯虾抗菌肽基因的变化情况,结果显示,与dsGFP对照组相比较,克氏原螯虾内源的抗菌肽基因ALF4、ALF 1、crustin 1、crustin 2、lys和lectin 2表达量被明显抑制。推测prx 6基因可能通过调节抗菌肽基因的表达水平,影响了克氏原螯虾对病原菌的抵抗能力,进而导致存活率下降。【结论】prx 6在克氏原螯虾对鲶爱德华氏菌的先天免疫中起重要作用,可能通过调控抗菌肽的表达参与克氏原螯虾抵抗鲶爱德华氏菌的免疫应答过程。
关键词
克氏原螯虾
RNA干扰
先天免疫
prx
6
基因
抗菌肽
基因
鲶爱德华氏菌
Keywords
Procambarus clarkii
RNAi
innate immunity
prx
6
Amps
E.ictaluri
分类号
S945.4 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
花绒寄甲Prx6基因的确定和表达分析
被引量：
1
2
作者
郭瑞坚
郝春凤
张正青
张伟
王化鹏
李孟楼
机构
西北农林科技大学林学院
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2016年第8期148-154,161,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31170608)
文摘
【目的】获得花绒寄甲过氧化物还原酶6基因(Prx6),分析其在花绒寄甲发育和衰老过程中相对表达量的变化,以进一步揭示花绒寄甲衰老的分子机制。【方法】基于花绒寄甲成虫转录组数据库获得Prx6基因,并对其进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,分析Prx6在花绒寄甲发育和衰老阶段的表达量。【结果】从花绒寄甲成虫转录组数据库中获取了2个Prx6基因,分别命名为Prx6-1和Prx6-2,其开放阅读框长度依次为654和672bp,分别编码218和224个氨基酸。多序列比对和系统发育分析表明,这2个基因均属于1-Cys家族,并且与鞘翅目的赤拟谷盗Prx6-1和Prx6-2的同源性最高,分别为71%和82%。发育阶段的定量结果表明,Prx6-1在2龄幼虫、蛹和初孵成虫体内的表达量较高,在6龄幼虫体内的表达量最低;Prx6-2在2龄和4龄幼虫体内表达量较高,在6龄幼虫体内表达量最低。在成虫衰老过程中,2个Prx6基因表达量整体上呈现出随羽化后时间的延长而增加的趋势。【结论】花绒寄甲Prx6基因影响其发育,特别是在2龄和6龄幼虫期。在花绒寄甲衰老过程中,2个Prx6基因的表达量随其羽化后时间的延长而升高。
关键词
花绒寄甲
prx6基因
实时荧光定量PCR
幼虫发育阶段
成虫
Keywords
Dastarcus helophoroides
prx
6
real-time qPCR
development
aging
分类号
Q74 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
克氏原螯虾prx6基因抗鲶爱德华氏菌侵染的分子机制研究
秦仕宇
金博阳
李倩倩
张明达
文静
沈秀丽
杜志强
《福建农业学报》
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
花绒寄甲Prx6基因的确定和表达分析
郭瑞坚
郝春凤
张正青
张伟
王化鹏
李孟楼
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
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职称材料
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