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加工番茄遗传转化再生体系的建立 被引量:17
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作者 张录霞 郝青南 +3 位作者 马超 段小瑜 牛建新 马兵钢 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期236-241,共6页
加工番茄种子出芽后7-8 d,子叶剪成约0.2-0.4 cm,0.3-0.5 cm的小块,以MS+B5为基本培养基,附加IAA0.2 mg/L分别与0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/L的6-BA/ZT/TDZ组合;6-BA2.0 mg/L分别与0.0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L的IAA/IBA/NAA组合。经诱... 加工番茄种子出芽后7-8 d,子叶剪成约0.2-0.4 cm,0.3-0.5 cm的小块,以MS+B5为基本培养基,附加IAA0.2 mg/L分别与0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/L的6-BA/ZT/TDZ组合;6-BA2.0 mg/L分别与0.0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L的IAA/IBA/NAA组合。经诱芽比较,在不同浓度6-BA/ZT/TDZ与0.2mg/LIAA组合中,出芽率最高的培养基为MS+ZT1.0 mg/L+IAA0.2 mg/L和MS+TDZ2.0 mg/L+IAA0.2 mg/L。在不同浓度的IAA/IBA/NAA与6-BA2.0 mg/L组合中,IAA明显优于NAA和IBA,筛选出MS+2.0 mg/L6-BA+1.0 mg/LIAA为最佳生芽培养基。以1/2MS添加NAA//BA0.0,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L进行生根比较,再生芽在MS+0.5 mg/L IBA生根培养基上生根最好,并发育成完整的小植株。 展开更多
关键词 加工番茄 遗传转化 再生体系 子叶
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建立青菜(Brassica chinensis)农杆菌介导法基因转化体系 被引量:25
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作者 蔡小宁 佘建明 +3 位作者 朱祯 朱卫民 袁希汉 苏小俊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1997年第2期110-114,共5页
以青菜地方品种矮脚黄、苏州青的子叶、子叶柄、真叶为外植体,在改良MS培养基上离体培养获得再生植株。在不定芽诱导培养基中添加2~20mg/LAgNO3可显著提高子叶不定芽诱导频率;添加0.1mg/LNAA和1~2mg/... 以青菜地方品种矮脚黄、苏州青的子叶、子叶柄、真叶为外植体,在改良MS培养基上离体培养获得再生植株。在不定芽诱导培养基中添加2~20mg/LAgNO3可显著提高子叶不定芽诱导频率;添加0.1mg/LNAA和1~2mg/LCPPU既可提高不定芽诱导频率,又可获得较多数量的不定芽。用含CpTI基因和NPTII基因的农杆菌感染子叶,获得了具有卡那霉素抗性的再生植株。培养基中添加羧苄青霉素促进子叶再生不定芽,头孢霉素和卡那霉素则抑制子叶再生。卡那霉素敏感性测定结果表明,当培养基中含卡那霉素10mg/L时。 展开更多
关键词 青菜 子叶 农杆菌介导法 基因转化体系 再生植株
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加工番茄子叶和下胚轴离体植株再生的研究 被引量:14
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作者 张丽华 程智慧 +3 位作者 李海燕 王宝云 陈丽萍 刘绍 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第7期106-110,共5页
以加工番茄BO 2和BO 4无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,以M S为基本培养基,研究了不同浓度的ZT,6-BA与不同浓度的IAA组合对外植体芽诱导的影响。结果表明,在不同浓度的ZT和IAA组合中,对2个番茄品种的子叶和下胚轴外植体芽诱导均以M S+1.0 ... 以加工番茄BO 2和BO 4无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,以M S为基本培养基,研究了不同浓度的ZT,6-BA与不同浓度的IAA组合对外植体芽诱导的影响。结果表明,在不同浓度的ZT和IAA组合中,对2个番茄品种的子叶和下胚轴外植体芽诱导均以M S+1.0 m g/L ZT+0.05 m g/L IAA培养基为最好,BO 2品种子叶和下胚轴的出芽率分别为32.7%和24.5%,BO 4品种的分别为37.3%和28.2%;在不同浓度的6-BA和IAA组合中,诱导BO 2外植体出芽率最高的培养基是M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率分别为27.3%和14.5%;诱导BO 4品种子叶和下胚轴出芽率最高的培养基分别为M S+1.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/LIAA和M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率均为28.2%;在M S+0.1 m g/L IAA培养基上,加工番茄BO 2再生芽1周左右就能长出根,形成完整的小植株。 展开更多
关键词 加工番茄 子叶 下胚轴 植株再生
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红番3号加工番茄遗传转化再生体系的建立 被引量:7
4
作者 乔亚红 郑银英 +4 位作者 李诗林 田桂英 张丽丽 林涛 向本春 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1636-1643,共8页
本研究以加工番茄红番3号子叶为外植体,对加工番茄再生体系无菌苗的苗龄、培养基激素的配比和培养基基质选择方面进行优化。结果表明:8~10 d的子叶为最佳的外植体。以MS为基本培养基,附加不同浓度IAA(0.05、0.10、0.15、0.20mg·L... 本研究以加工番茄红番3号子叶为外植体,对加工番茄再生体系无菌苗的苗龄、培养基激素的配比和培养基基质选择方面进行优化。结果表明:8~10 d的子叶为最佳的外植体。以MS为基本培养基,附加不同浓度IAA(0.05、0.10、0.15、0.20mg·L-1)分别与不同浓度6-BA(1.0、1.5、2.0、2.5mg·L-1)/ZT(0.1、0.5、1.5、2.0mg·L-1)的组合。经诱芽比较,在不同浓度6-BA/ZT与不同浓度IAA组合中,诱导出愈伤组织和不定芽分化最高的培养基为MS+ZT 0.5mg·L-1+IAA 0.1mg·L-1+植物凝胶2g·L-1。以1/2MS添加不同浓度IAA(0.05、0.10、0.15、0.20mg·L-1)进行生根比较,再生芽在1/2MS+IAA 0.1mg·L-1生根培养基上生根最好。 展开更多
关键词 加工番茄 子叶 遗传转化 再生体系
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加工番茄离体再生体系的建立 被引量:21
5
作者 陈丽萍 张丽华 程智慧 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期162-167,共6页
以加工番茄B04子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素(ZT、6-BA和KT)和生长素(IAAI、BA和NAA)组合及附加物AgNO3对外植体不定芽诱导的影响。结果表明,细胞分裂素ZT的不定芽诱导效果明显优于6-BA和KT,KT诱导效果... 以加工番茄B04子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素(ZT、6-BA和KT)和生长素(IAAI、BA和NAA)组合及附加物AgNO3对外植体不定芽诱导的影响。结果表明,细胞分裂素ZT的不定芽诱导效果明显优于6-BA和KT,KT诱导效果最差;生长素IAA的不定芽诱导效果优于IBA和NAA;在不同的激素组合中,不定芽诱导率最高的培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA。再生芽在MS+0.1mg/L IAA生根培养基上能正常生根,并发育成完整的小植株。 展开更多
关键词 加工番茄 再生体系 子叶 下胚轴
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抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化 被引量:3
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作者 乔亚红 田桂英 +3 位作者 郑银英 崔百明 李诗林 向本春 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第1期102-110,共9页
【目的】利用农杆菌介导法将抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12转入红番3号加工番茄,获得抗CMV和ToMV的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增,选取新疆加工番茄CMV分离物NS0-4 1a复制酶第1 051-1 35... 【目的】利用农杆菌介导法将抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12转入红番3号加工番茄,获得抗CMV和ToMV的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增,选取新疆加工番茄CMV分离物NS0-4 1a复制酶第1 051-1 350bp序列和ToMV分离物SCS-2 130/180ku复制酶第1 920-2 200bp序列,作为干扰片段CR12和To12。通过T克隆载体将CR12和To12连接成拼接片段TC12,构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC12。通过农杆菌介导法,用其转化红番3号加工番茄,经过筛选、PCR检测得到转基因植株。【结果】成功构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,并用其转化番茄植株,从转化的1 500个愈伤组织中获得33株再生植株,利用PCR对再生植株进行检测,显示从33株再生植株中获得了19株转基因植株,转化率为1.26%。【结论】构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,用其转化红番3号加工番茄,获得了转基因植株。 展开更多
关键词 CMV TOMV RNAI载体 加工番茄 遗传转化
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番茄micro-TOM活体再生体系的建立 被引量:2
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作者 曹慧颖 王玉莹 +4 位作者 孙建坤 刘玲莉 张立军 阮燕晔 夏润玺 《中国蔬菜》 北大核心 2014年第12期27-29,共3页
番茄micro-TOM是生物学研究的模式植物,它的离体再生体系对遗传转化及发育生物学研究至关重要。但是microTOM组培再生体系费时费力,容易污染。本试验通过对活体植株进行去头去腋芽诱导,建立了高效快捷、不依赖外源激素的番茄micro-TOM... 番茄micro-TOM是生物学研究的模式植物,它的离体再生体系对遗传转化及发育生物学研究至关重要。但是microTOM组培再生体系费时费力,容易污染。本试验通过对活体植株进行去头去腋芽诱导,建立了高效快捷、不依赖外源激素的番茄micro-TOM活体再生体系,为简化番茄遗传转化奠定了基础,也为植物再生机理研究提供了良好的实验材料。 展开更多
关键词 植物再生 组织培养 再生机理 遗传转化 番茄micro-TOM
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茄子遗传转化植株再生体系的优化 被引量:5
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作者 张明华 陈钰辉 +2 位作者 刘富中 张映 连勇 《长江蔬菜》 2014年第14期15-20,共6页
以4个茄子品种的下胚轴和子叶为外植体,通过不同外源激素种类和浓度组合筛选,对茄子遗传转化过程中外植体脱分化诱导、植株再生及生根培养基进行优化,探索建立较为通用完善的茄子遗传转化植株再生体系。结果表明,茄子下胚轴的再生能力... 以4个茄子品种的下胚轴和子叶为外植体,通过不同外源激素种类和浓度组合筛选,对茄子遗传转化过程中外植体脱分化诱导、植株再生及生根培养基进行优化,探索建立较为通用完善的茄子遗传转化植株再生体系。结果表明,茄子下胚轴的再生能力要显著高于子叶,不同茄子品种间的分化能力差异明显;最佳愈伤诱导培养基为MS+ZT 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L,最佳植株再生分化培养基为MS+ZT 0.5 mg/L,最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L。 展开更多
关键词 茄子 下胚轴 子叶 植株再生 遗传转化
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加工番茄离体再生体系研究 被引量:2
9
作者 孙秀霞 于超 +1 位作者 赖黎丽 薛琳 《黑龙江农业科学》 2016年第11期11-15,共5页
为建立一套优化的适于加工番茄遗传转化的高效离体再生体系,以加工番茄石红303的子叶、下胚轴、叶片作为外植体,研究了不同激素及浓度、不同外植体材料对愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明:激素的种类和浓度对加工番茄外... 为建立一套优化的适于加工番茄遗传转化的高效离体再生体系,以加工番茄石红303的子叶、下胚轴、叶片作为外植体,研究了不同激素及浓度、不同外植体材料对愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响。结果表明:激素的种类和浓度对加工番茄外植体出愈率的影响没有差异,但是诱导形成的愈伤组织形态和不定芽存在差异。选取子叶作为外植体,培养基组成为MS+6-BA3.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1最有利于愈伤组织和不定芽的形成;不定芽在生根培养基1/2MS+0.1mg·L-1 IAA上生根效果最佳,并能发育成完整的小植株。 展开更多
关键词 加工番茄 再生体系 子叶 愈伤组织 不定芽分化
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黄瓜再生体系和遗传转化的建立 被引量:4
10
作者 叶永亮 杜波 《黑龙江农业科学》 2009年第5期5-7,共3页
以黄瓜(Cucumis sativus L.)哈研3号为试验材料,采用组织培养技术系统探讨以子叶或子叶节为外植体时不定芽的诱导效率,最终确定以子叶节作为再生体系及遗传转化体系的试验材料;并系统探讨了不同PGRs浓度对不定芽诱导、不定芽伸长及生根... 以黄瓜(Cucumis sativus L.)哈研3号为试验材料,采用组织培养技术系统探讨以子叶或子叶节为外植体时不定芽的诱导效率,最终确定以子叶节作为再生体系及遗传转化体系的试验材料;并系统探讨了不同PGRs浓度对不定芽诱导、不定芽伸长及生根阶段的影响;建立了哈研3号黄瓜的高频再生体系;并在子叶节根端膨大阶段进行了抗生素(Km)浓度的摸索,建立了较为适宜的遗传转化体系,为转基因工作打下坚实的基础。 展开更多
关键词 黄瓜 子叶节 不定芽 再生体系 遗传转化体系 PGRs
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液泡转化酶反义基因对番茄的遗传转化
11
作者 梁静娜 程智慧 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1316-1319,共4页
以中蔬4号番茄的子叶为试材,通过农杆菌介导法遗传转化,将液泡转化酶反义基因导入再生植株,经PCR和Southern斑点杂交检测证明,5株转化植株基因组中整合有目的基因.遗传转化最佳条件为:在附加1.5mg/L6-BA和0.1mg/LIAA的MS培养基上再生培... 以中蔬4号番茄的子叶为试材,通过农杆菌介导法遗传转化,将液泡转化酶反义基因导入再生植株,经PCR和Southern斑点杂交检测证明,5株转化植株基因组中整合有目的基因.遗传转化最佳条件为:在附加1.5mg/L6-BA和0.1mg/LIAA的MS培养基上再生培养,外植体预培养2d,菌液浓度OD600=0.5,侵染时间5min,共培养2d.遗传转化后,对整合有目的基因的再生番茄叶片液泡转化酶活性测定,表明液泡转化酶活性明显受到抑制.获得的转基因植株为进一步研究液泡转化酶基因的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 番茄 不定芽再生 遗传转化 转化酶 反义基因
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抗番茄花叶病毒RNAi载体转化加工番茄 被引量:2
12
作者 苏建辉 向本春 +4 位作者 郑银英 赵峰玉 王子华 王海燕 杨艳芹 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1416-1418,共3页
加工番茄是普通番茄中的一种栽培类型,主要特点是矮化,果实比普通栽培番茄略小,果皮比普通栽培番茄厚,耐贮藏运输,目前已逐渐成为新疆的特色产业和出口创汇的支柱产业。ToMV(番茄花叶病毒)是影响新疆加工番茄产量的重要病害,发病时可... 加工番茄是普通番茄中的一种栽培类型,主要特点是矮化,果实比普通栽培番茄略小,果皮比普通栽培番茄厚,耐贮藏运输,目前已逐渐成为新疆的特色产业和出口创汇的支柱产业。ToMV(番茄花叶病毒)是影响新疆加工番茄产量的重要病害,发病时可造成番茄严重减产。药剂、疫苗等均起不到有效的防治作用。抗病毒育种是最经济、有效的防治方法。 展开更多
关键词 加工番茄 农杆菌 遗传转化:子叶
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大豆子叶节再生及农杆菌介导转化研究 被引量:3
13
作者 杨荣仲 谭裕模 +2 位作者 李松 张木清 陈如凯 《西南农业学报》 CSCD 2003年第4期33-38,共6页
用大豆早熟一号无菌苗不同外植体进行再生研究发现都能获得再生植株,但再生能力差异较大,以子叶节和顶芽的再生能力较强且以子叶节作为遗传转化的受体较好,宜用带少量子叶的子叶节作外植体,AS浓度160μmol/L、40min浸染时间、共培养2d... 用大豆早熟一号无菌苗不同外植体进行再生研究发现都能获得再生植株,但再生能力差异较大,以子叶节和顶芽的再生能力较强且以子叶节作为遗传转化的受体较好,宜用带少量子叶的子叶节作外植体,AS浓度160μmol/L、40min浸染时间、共培养2d进行农杆菌介导转化和Kan浓度120mg/L筛选获得的转化抗性苗率较高。 展开更多
关键词 大豆 子叶节再生 农杆菌介导转化 无菌苗 外植体 再生植株 顶芽 AS浓度
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易感线虫番茄品种Rutgers遗传转化体系的建立 被引量:2
14
作者 吴文涛 董莹 +3 位作者 邓人可 薛美静 张靖 王扬 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期92-97,共6页
【目的】旨在建立Rutgers番茹品种的遗传转化体系。【方法】以易感线虫番茹品种Rutgers为实验材料,采用农杆菌介导法,对无菌苗的苗龄、筛选培养基中Hyg的浓度大小、不定芽诱导培养基的激素配比和生根培养基4个方面进行优化,从而建立Rut... 【目的】旨在建立Rutgers番茹品种的遗传转化体系。【方法】以易感线虫番茹品种Rutgers为实验材料,采用农杆菌介导法,对无菌苗的苗龄、筛选培养基中Hyg的浓度大小、不定芽诱导培养基的激素配比和生根培养基4个方面进行优化,从而建立Rutgem品种的遗传转化体系。【结果】选择9~11 d的无菌苗的叶片分化愈伤组织的效果最好,筛选培养基中Hyg的浓度为10 mg/L时可以有效的筛选转基因的抗性芽,愈伤组织诱导不定芽培养基中最佳激素配比为6-BA2mg/L+IAA0.1 mg/Lo以1/2MS添加不同浹度IBA(0.05、0.1、0.15、0.20 mg/L)进行生根比较,再生芽在1/2 MS+IBA 0.1 mg/L生根培养基上生根最好。【结论】首次建立了Rutgers番茹品种的遗传转化体系,为番茄的抗根结线虫转基因育种打下基础。 展开更多
关键词 Rutgers番茹 农杆菌介导法 遗传转化 再生体系
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油菜子叶和下胚轴再生体系及其遗传转化的研究进展 被引量:9
15
作者 黄先群 《西南农业学报》 CSCD 2006年第1期152-158,共7页
对油菜子叶和下胚轴快繁体系及其遗传转化的研究进展进行了概述,并从基因型、激素及添加物、外植体状态、预培养和共培养、抗生素筛选等方面讨论了影响子叶和下胚轴快繁体系及其转化的因素。
关键词 油菜 子叶 下胚轴 再生体系 生物技术 遗传转化
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