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大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达
被引量：
3
1
作者
易亮衡
秦永伟
+3 位作者
陈金铃
朱丹丹
何兴新
段义农
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期25-28,共4页
目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中...
目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。
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关键词
大鼠源肺孢子菌
p55
基因
真核表达
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题名
大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达
被引量：
3
1
作者
易亮衡
秦永伟
陈金铃
朱丹丹
何兴新
段义农
机构
南通大学医学院寄生虫学教研室
湖北省黄石市疾病预防控制中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期25-28,共4页
基金
南通大学自然科学基金资助项目(No.08Z044)
文摘
目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。
关键词
大鼠源肺孢子菌
p55
基因
真核表达
Keywords
pneumocystis of rats p55 gene fragment eukaryotic expression
分类号
R382.9 [医药卫生—医学寄生虫学]
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作者
出处
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被引量
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1
大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达
易亮衡
秦永伟
陈金铃
朱丹丹
何兴新
段义农
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
3
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