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鸡不同生精细胞中Piwil1基因启动子区DNA甲基化差异研究
被引量:
3
1
作者
陈静
翟飞
+9 位作者
夏明秀
陈蓉
徐琪
常国斌
李建超
马腾
王洪志
徐璐
刘璐
陈国宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1404-1409,共6页
旨在通过检测不同类型生精细胞中Piwil1基因的转录水平和启动子区甲基化状态,为深入探讨该基因在鸡精子发生过程中的转录调控机制奠定基础。通过荧光定量PCR技术检测Piwil1基因在不同生精细胞的mRNA表达水平,同时采用Bisulfite sequenci...
旨在通过检测不同类型生精细胞中Piwil1基因的转录水平和启动子区甲基化状态,为深入探讨该基因在鸡精子发生过程中的转录调控机制奠定基础。通过荧光定量PCR技术检测Piwil1基因在不同生精细胞的mRNA表达水平,同时采用Bisulfite sequencing PCR法对启动子区进行甲基化修饰、转化和克隆测序,分析甲基化状态。结果发现,鸡Piwil1基因在精子中几乎不表达,在精原细胞的表达量显著高于PGCs、SSCs和四倍体(P<0.01)。鸡Piwil1基因启动子区-233^+298bp存在1个CpG岛,该岛有56个CpG位点。第1~10个CpG位点(-233^-129bp区域),精子细胞、四倍体细胞、PGCs、SSCs中处于未甲基化状态,而精原细胞中甲基化比例高达0.600;第39~55个CpG位点(+105^+252bp区域),不同细胞中的甲基化水平差异显著,精原细胞中仅为0.212。PGCs、SSCs中DNA高甲基化在一定程度上抑制了Piwil1基因的表达。研究表明:在+105^+252bp非编码区域甲基化可能对Piwil1基因转录调控有一定影响,但还存在其他转录调控机制。
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关键词
鸡
piwil1基因
甲基化
精子发生
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职称材料
鸡Piwil1基因启动子区转录调控元件的初步分析
被引量:
1
2
作者
夏明秀
常国斌
+8 位作者
陈蓉
翟飞
戴爱琴
马腾
王洪志
徐璐
陈静
刘璐
陈国宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1349-1354,共6页
旨在确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,预测转录因子结合位点,并探讨转录因子对家禽Piwil1基因核心启动子活性的影响。通过将Piwil1基因启动子系列缺失片段插入到pGL3-basic载体,构建重组体质粒,将重组体分别转染COS-7和GC-1细胞系,...
旨在确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,预测转录因子结合位点,并探讨转录因子对家禽Piwil1基因核心启动子活性的影响。通过将Piwil1基因启动子系列缺失片段插入到pGL3-basic载体,构建重组体质粒,将重组体分别转染COS-7和GC-1细胞系,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,并对调控区进行转录因子结合位点预测;对预测的转录因子NF-Y结合位点进行定点突变,构建重组体质粒,并通过双荧光素酶报告基因检测系统分析其对启动子活性的影响。狼山鸡Piwil1基因的-1 377^-268bp区域在COS-7和GC-1细胞中都有不同程度的启动活性,-221^+1bp启动子活性几乎完全丧失,在-268^-221bp区域有转录因子NF-Y结合位点,定点突变后启动子活性显著下降,认为转录因子NF-Y对启动子活性可能起着重要的调控作用。转录因子NF-Y为Piwil1基因核心启动子区的重要调控元件,为进一步研究Piwil1基因的转录调控机制奠定了理论基础。
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关键词
piwil1基因
核心启动子
定点突变
双荧光素酶活性检测系统
NF-Y
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职称材料
题名
鸡不同生精细胞中Piwil1基因启动子区DNA甲基化差异研究
被引量:
3
1
作者
陈静
翟飞
夏明秀
陈蓉
徐琪
常国斌
李建超
马腾
王洪志
徐璐
刘璐
陈国宏
机构
扬州大学动物科学与技术学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1404-1409,共6页
基金
国家自然科学基金(31372297
31172199)
江苏省农业科技支撑计划(BE2013392)
文摘
旨在通过检测不同类型生精细胞中Piwil1基因的转录水平和启动子区甲基化状态,为深入探讨该基因在鸡精子发生过程中的转录调控机制奠定基础。通过荧光定量PCR技术检测Piwil1基因在不同生精细胞的mRNA表达水平,同时采用Bisulfite sequencing PCR法对启动子区进行甲基化修饰、转化和克隆测序,分析甲基化状态。结果发现,鸡Piwil1基因在精子中几乎不表达,在精原细胞的表达量显著高于PGCs、SSCs和四倍体(P<0.01)。鸡Piwil1基因启动子区-233^+298bp存在1个CpG岛,该岛有56个CpG位点。第1~10个CpG位点(-233^-129bp区域),精子细胞、四倍体细胞、PGCs、SSCs中处于未甲基化状态,而精原细胞中甲基化比例高达0.600;第39~55个CpG位点(+105^+252bp区域),不同细胞中的甲基化水平差异显著,精原细胞中仅为0.212。PGCs、SSCs中DNA高甲基化在一定程度上抑制了Piwil1基因的表达。研究表明:在+105^+252bp非编码区域甲基化可能对Piwil1基因转录调控有一定影响,但还存在其他转录调控机制。
关键词
鸡
piwil1基因
甲基化
精子发生
Keywords
chicken
piwil
1
gene
methylation
spermatogenesis
分类号
S831 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
鸡Piwil1基因启动子区转录调控元件的初步分析
被引量:
1
2
作者
夏明秀
常国斌
陈蓉
翟飞
戴爱琴
马腾
王洪志
徐璐
陈静
刘璐
陈国宏
机构
扬州大学动物科学与技术学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1349-1354,共6页
基金
国家自然科学基金(31172199)
国家科技支撑计划(2011BAD28B03)
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA100305)
文摘
旨在确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,预测转录因子结合位点,并探讨转录因子对家禽Piwil1基因核心启动子活性的影响。通过将Piwil1基因启动子系列缺失片段插入到pGL3-basic载体,构建重组体质粒,将重组体分别转染COS-7和GC-1细胞系,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,并对调控区进行转录因子结合位点预测;对预测的转录因子NF-Y结合位点进行定点突变,构建重组体质粒,并通过双荧光素酶报告基因检测系统分析其对启动子活性的影响。狼山鸡Piwil1基因的-1 377^-268bp区域在COS-7和GC-1细胞中都有不同程度的启动活性,-221^+1bp启动子活性几乎完全丧失,在-268^-221bp区域有转录因子NF-Y结合位点,定点突变后启动子活性显著下降,认为转录因子NF-Y对启动子活性可能起着重要的调控作用。转录因子NF-Y为Piwil1基因核心启动子区的重要调控元件,为进一步研究Piwil1基因的转录调控机制奠定了理论基础。
关键词
piwil1基因
核心启动子
定点突变
双荧光素酶活性检测系统
NF-Y
Keywords
piwil
1
gene
core promoter
point mutation
Dual-Glo
Luciferase Assay System
NF-Y
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡不同生精细胞中Piwil1基因启动子区DNA甲基化差异研究
陈静
翟飞
夏明秀
陈蓉
徐琪
常国斌
李建超
马腾
王洪志
徐璐
刘璐
陈国宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鸡Piwil1基因启动子区转录调控元件的初步分析
夏明秀
常国斌
陈蓉
翟飞
戴爱琴
马腾
王洪志
徐璐
陈静
刘璐
陈国宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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