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氰氟草酯、杀虫安亚致死剂量对金鱼Carrasius auratus和麦穗鱼Pseudorasbora parva肝脏酯酶及谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响(英文) 被引量:2
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作者 朱国念 吴慧明 +1 位作者 Jilisa K.Mwalilino 李少南 《农药学学报》 CAS CSCD 2002年第3期35-42,共8页
研究了 10 %千金乳油 (有效成分 :氰氟草酯 )和 78%杀虫安可溶性粉剂对金鱼和麦穗鱼肝脏酯酶及谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)活性的亚致死剂量效应。发现杀虫安 (0 .2 34mg· L-1)对两种鱼的 GST活性均具诱导作用 ,而氰氟草酯 (1,2 mg&... 研究了 10 %千金乳油 (有效成分 :氰氟草酯 )和 78%杀虫安可溶性粉剂对金鱼和麦穗鱼肝脏酯酶及谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)活性的亚致死剂量效应。发现杀虫安 (0 .2 34mg· L-1)对两种鱼的 GST活性均具诱导作用 ,而氰氟草酯 (1,2 mg· L-1)仅诱导了麦穗鱼的 GST活性 ;当杀虫安与氰氟草酯混合处理时 ,对麦穗鱼 GST活性的诱导效应最为明显。在一定的浓度范围内 ,氰氟草酯 (1,2 mg· L-1)和杀虫安 (0 .117,0 .2 34mg· L-1)均可诱导金鱼肝脏酯酶活性 ;对麦穗鱼肝脏酯酶而言 ,杀虫安为诱导作用 ,氰氟草酯则抑制其活性。研究结果表明 :两种酶的活性直接或间接地受供试药剂的影响 。 展开更多
关键词 金鱼 Carrasiusauratus 麦穗鱼 Pseudorasboraparva 活性 氰氟草酯 杀虫安 肝脏酯 -S-转移 致死剂量效应 农药 环境毒理
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亚硝基谷胱甘肽对大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶的激活及机制
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作者 史强 楼宜嘉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期438-442,共5页
目的 探索一氧化氮供体亚硝基谷胱甘肽(GSNO)能否在体外通过S 亚硝酰化机制激活大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶 (mGST)。方法 微粒体粗提物与GSNO体外共孵育 ,测定mGST催化动力学改变 ,结合N 乙基马来酰亚胺 (NEM )再激活实验和二巯基苏... 目的 探索一氧化氮供体亚硝基谷胱甘肽(GSNO)能否在体外通过S 亚硝酰化机制激活大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶 (mGST)。方法 微粒体粗提物与GSNO体外共孵育 ,测定mGST催化动力学改变 ,结合N 乙基马来酰亚胺 (NEM )再激活实验和二巯基苏醇 (DTT)逆转实验 ,以及酶蛋白游离巯基和酶S 亚硝酰化蛋白的改变 ,研究酶的激活机制。结果 GSNO在 0 .12 5~ 2mmol·L- 1浓度范围内呈浓度和时间 (3~ 15min)依赖性地激活mGST ,NEM对酶的再激活效应消失 ,DTT可以逆转上述激活作用 ,同时酶蛋白游离巯基浓度依赖性减少 ,而S 亚硝酰化蛋白浓度依赖性增多。结论 GSNO体外可激活大鼠肝mGST ,激活机制可能与mGST第 4 9位半胱氨酸 (Cys4 9)的巯基被亚硝酰化形成S 亚硝基硫醇结构有关。 展开更多
关键词 微粒体 转移 激活 硝基
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低浓度阿特拉津对鲫鱼谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)活性的影响 被引量:15
3
作者 陈家长 孟顺龙 +2 位作者 瞿建宏 胡庚东 冷春梅 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期68-72,共5页
研究不同作用时间和不同暴露浓度下阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:阿特拉津对鲫鱼各个组织器官GSTs活性产生较强的影响。长期暴露下(24 d),阿特拉津对鲫鱼肝脏和肌肉GSTs活性基本表现为诱... 研究不同作用时间和不同暴露浓度下阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:阿特拉津对鲫鱼各个组织器官GSTs活性产生较强的影响。长期暴露下(24 d),阿特拉津对鲫鱼肝脏和肌肉GSTs活性基本表现为诱导作用,最大诱导率为110.81%和32.54%,且分别在0.15.0和1.010.0 mg.L-1质量浓度范围内存在剂量-效应关系;对鲫鱼肾脏GSTs活性具有抑制作用,最大抑制率为14.42%,且在所设质量浓度(010 mg.L-1)范围内均表现出剂量-效应关系。在10.0 mg.L-1质量浓度暴露下第6—14天内,阿特拉津与鲫鱼肝脏及肌肉GSTs活性间存在时间-效应关系;其他情况下,任何组织器官在试验期间均未表现出时间-效应关系。 展开更多
关键词 急性 阿特拉津 鲫鱼 -S转移
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蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽S_转移酶的部分纯化 被引量:3
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作者 汤方 张常忠 +2 位作者 梁沛 史雪岩 高希武 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-178,共7页
通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通... 通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通过PEI沉淀去核酸后,再用硫酸铵沉淀,中肠和脂肪体GST活性分布在70%~75%和60%~65%沉淀段,比活力分别为1081.49和596.41 nmol/(min·mg),纯化倍数分别为2.53和2.2.在6种PEG中,PEG10000和PEG20000的纯化效果较好.在中肠和脂肪体中PEG10000沉淀的GST活性峰分别在40%~45%和30%~40%,GST比活力分别为795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.4和3.97.PEG20000沉淀中肠和脂肪体GST的活性峰分别在25%~40%和25%~45%,比活力分别是767.57和945.96 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.81和3.05.用GSH-Sepharose 4B纯化中肠GST,GST比活力达到5 888.44nmol/(min·mg),纯化倍数达到107.38. 展开更多
关键词 棉铃虫 S-转移 硫酸铵沉淀 聚乙烯胺沉淀 聚乙二醇沉淀 GSH—Sephamse 4B亲和柱
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大鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶简易制备法对活性影响 被引量:5
5
作者 郑英 张捷 楼宜嘉 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第6期429-432,共4页
目的 :研究大鼠肝微粒体简易制备法对微粒体谷胱甘肽巯基转移酶 (m GST)活性的影响。方法 :用聚乙二醇 6 0 0 0 (PEG 6 0 0 0 )法和钙沉淀法制备大鼠肝微粒体 ,并与巯基烷化剂 N-乙基顺丁烯二酰亚胺 (NEM)共孵育 ,分别测定不同制备法所... 目的 :研究大鼠肝微粒体简易制备法对微粒体谷胱甘肽巯基转移酶 (m GST)活性的影响。方法 :用聚乙二醇 6 0 0 0 (PEG 6 0 0 0 )法和钙沉淀法制备大鼠肝微粒体 ,并与巯基烷化剂 N-乙基顺丁烯二酰亚胺 (NEM)共孵育 ,分别测定不同制备法所获 m GST活性。结果 :PEG 6 0 0 0法和钙沉淀法制备的肝微粒体 ,其 m GST活性分别为0 .15 ,0 .0 8μmol· min- 1 · ml- 1 ;NEM可使其活性分别显著增加至 1.797和 2 .375倍 (P<0 .0 0 1) ;洗涤纯化后 ,分别增加至 NEM活化前的 2 .35 0和 4 .12 7倍 (P<0 .0 0 1) ;其中 NEM与微粒体共孵育最适浓度为 5~ 10 mmol/ L ,最佳激活时间为 1~ 2 min。结论 :经 PEG 6 0 0 0法和钙沉淀法高速离心制备的微粒体 ,分离制备时间短 ,方法简单易行 ;钙沉淀法制备的 m 展开更多
关键词 肝微粒体 转移 代谢 聚乙二醇6000法 钙沉淀法 N-乙基顺丁烯二酰
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环磷酰胺激活小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ的机制研究 被引量:2
6
作者 郑英 邹晓华 +3 位作者 付再林 方慧 陈素红 吕圭源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1387-1390,共4页
目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化... 目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)对酶再激活效应,用SDS-PAGE和负染凝胶法评价CP对mGST-Ⅰ蛋白表达的影响。结果 CP引起小鼠微粒体中mGST-Ⅰ活性增加;NEM在mGST-Ⅰ半胱氨酸-49-巯基(cys-49-SH)上的活化效应减弱,而CP引起的mGST-Ⅰ激活效应不被二硫键还原剂DTT逆转。激活的mGST-Ⅰ电泳图谱未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论大剂量CP致mGST-Ⅰ激活效应机制主要是酶分子cys-49-SH上单个巯基的修饰作用。 展开更多
关键词 环磷酰胺 微粒体 S-转移 二巯基丁二醇 N-乙基马来酰 氨酸-49-巯基 机制
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活性氮对肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1修饰激活的研究进展 被引量:2
7
作者 史强 楼宜嘉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期297-300,共4页
活性氮导致肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1(MGST1)修饰激活是近年来研究热点之一,由于其半胱氨酸(Cys49)可感受亲电子剂等而被修饰,担任"感受器"角色,行使对机体的保护作用。以过氧亚硝酸盐和S-亚硝基谷胱甘肽为代表的活性氮,可引... 活性氮导致肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1(MGST1)修饰激活是近年来研究热点之一,由于其半胱氨酸(Cys49)可感受亲电子剂等而被修饰,担任"感受器"角色,行使对机体的保护作用。以过氧亚硝酸盐和S-亚硝基谷胱甘肽为代表的活性氮,可引起MGST1的酪氨酸(Tyr92)和Cys49发生若干种修饰,包括硝基化、S-亚硝酰化、谷胱甘肽化、巯基氧化等,均可介导酶激活,其中Tyr92的硝基化修饰可望揭示MGST1的"第二个感受器",与机体对硝基化应激的保护机制相关。 展开更多
关键词 微粒体 转移 过氧硝酸盐 S-硝基
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基于全基因组和转录组的绿豆谷胱甘肽转移酶基因及其对镉胁迫的响应 被引量:3
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作者 张创娟 程斌 +2 位作者 杨乐 冷艳 李师翁 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期703-717,共15页
以绿豆为材料,运用生物信息学、转录组学和酶学等分析方法,对绿豆GST家族基因结构及其表达蛋白的特征进行分析,并检测镉(Cd)胁迫下GST基因表达谱和酶活性变化。结果表明,绿豆基因组中包含有93个GST基因,分为Tau、Phi、Lambda、Theta、Z... 以绿豆为材料,运用生物信息学、转录组学和酶学等分析方法,对绿豆GST家族基因结构及其表达蛋白的特征进行分析,并检测镉(Cd)胁迫下GST基因表达谱和酶活性变化。结果表明,绿豆基因组中包含有93个GST基因,分为Tau、Phi、Lambda、Theta、Zeta、DHAR、EF1Bg、GHRs、mPGES2和TCHQD等10类,以Phi和Tau类基因数最多;不同类基因结构存在较大差异,Tau类和TCHQD类含有2个外显子,Phi类和GHRs类分别含3和5个外显子,其余基因外显子数目在6~10个。其中只有40个基因在绿豆中表达,31个基因在根、茎、叶中都有表达,6个基因选择性表达。Cd胁迫上调大多数基因的表达量,根、茎、叶中被显著上调的GST基因分别为10、8和4个,平均上调倍数为2.17、2.25和3.26;Cd胁迫显著升高根和茎中GST酶活分别达2.14和1.27倍,与基因表达量的变化一致。表明绿豆根中GST基因及其酶活在Cd胁迫响应中起最主要作用。研究结果为植物GST基因的进一步研究和在植物抗逆中生物技术应用提供了科学资料。 展开更多
关键词 绿豆 转移 基因家族 镉胁迫
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亚致死浓度下印楠素和苦皮藤素对亚洲玉米螺解毒酶活性的影响
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作者 王晓曦 王宇 +1 位作者 王克勤 刘兴龙 《昆虫学报》 北大核心 2025年第9期1261-1269,共9页
【目的】本研究旨在明确植物源杀虫剂印楝素和苦皮藤素对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis幼虫的亚致死效应及对其体内解毒酶活性的影响,探究亚洲玉米螟对这两种药剂的解毒机理。【方法】采用浸虫法测定印楝素和苦皮藤素对亚洲玉米螟3龄幼... 【目的】本研究旨在明确植物源杀虫剂印楝素和苦皮藤素对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis幼虫的亚致死效应及对其体内解毒酶活性的影响,探究亚洲玉米螟对这两种药剂的解毒机理。【方法】采用浸虫法测定印楝素和苦皮藤素对亚洲玉米螟3龄幼虫72 h内的毒力,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定不同亚致死浓度(LC_(10),LC_(20)和LC_(40))的印楝素和苦皮藤素处理亚洲玉米螟3龄幼虫6,12,24,48和72 h后体内谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)、羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)和细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)3种解毒酶的活性。【结果】72 h内印楝素对亚洲玉米螟3龄幼虫的LC_(10),LC_(20)和LC_(40)值分别为0.352,0.614和1.290 mg/L,苦皮藤素对亚洲玉米螟3龄幼虫的LC_(10),LC_(20)和LC_(40)值分别为0.032,0.086和0.321 mg/L。LC_(10),LC_(20)和LC_(40)浓度印楝素处理对亚洲玉米螟3龄幼虫GST活性先抑制后诱导再抑制,其中LC_(10)浓度印楝素处理12 h对GST活性具有诱导作用;LC_(10),LC_(20)和LC_(40)浓度印楝素处理亚洲玉米螟3龄幼虫对CarE和CYP450活性主要为抑制作用。LC_(10),LC_(20)和LC_(40)浓度苦皮藤素处理对亚洲玉米螟3龄幼虫GST和CarE活性主要为抑制作用,对CYP450活性呈先抑制后诱导的趋势;而LC_(10)浓度苦皮藤素处理72 h对CYP450活性具有诱导作用。【结论】印楝素和苦皮藤素可以影响亚洲玉米螟的解毒代谢,对GST,CarE和CYP450活性的抑制作用是其具有杀虫活性的原因之一。亚洲玉米螟GST可能对低浓度(LC_(10))印楝素有一定代谢作用,CYP450可能对低浓度(LC_(10))苦皮藤素有一定代谢作用。 展开更多
关键词 洲玉米螟 印楝素 苦皮藤素 致死浓度 S-转移 羧酸酯 细胞色素P450
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辛硫磷亚致死剂量对桑粉虱解毒酶活性的影响 被引量:4
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作者 柴建萍 倪婧 +4 位作者 江秀均 罗雁婕 谢道燕 达爱斯 黄平 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1115-1119,共5页
【目的】研究辛硫磷对桑粉虱成虫的毒力及其亚致死剂量作用下桑粉虱成虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性变化,为桑粉虱抗药性研究及杀虫剂合理使用提供依据。【方法】采用闪烁管药膜法测定辛硫磷对桑... 【目的】研究辛硫磷对桑粉虱成虫的毒力及其亚致死剂量作用下桑粉虱成虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性变化,为桑粉虱抗药性研究及杀虫剂合理使用提供依据。【方法】采用闪烁管药膜法测定辛硫磷对桑粉虱亚致死剂量LC10、LC30、LC50,玻璃均浆器冰浴提取经过处理的桑粉虱酶液,用BIO-RAD全波长微孔板酶标读数仪测定GST、CarE、AchE。【结果】辛硫磷对桑粉虱成虫亚致死剂量LC10、LC30、LC50分别为0.0090、0.0899、0.4427μg/mL,随着辛硫磷亚致死剂量浓度增大,桑粉虱成虫GST活性显著增大、CarE及AchE活性显著下降。【结论】GST在桑粉虱对辛硫磷的解毒代谢中发挥作用。 展开更多
关键词 桑粉虱 致死剂量 S-转移 羧酸酯 乙酰胆碱酯
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溴氰菊酯和辛硫磷亚致死剂量对甜菜夜蛾酶活性的影响 被引量:5
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作者 张元建 王真 +1 位作者 竹傲 朱福兴 《天津农业科学》 CAS 2009年第5期37-40,共4页
研究了溴氰菊酯和辛硫磷亚致死剂量处理后,甜菜夜蛾羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性变化规律,结果表明:经辛硫磷亚致死剂量5.20mg/kg和溴氰菊酯亚致死剂量0.73mg/kg处理后,甜菜夜蛾体内CarE和GST均被... 研究了溴氰菊酯和辛硫磷亚致死剂量处理后,甜菜夜蛾羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性变化规律,结果表明:经辛硫磷亚致死剂量5.20mg/kg和溴氰菊酯亚致死剂量0.73mg/kg处理后,甜菜夜蛾体内CarE和GST均被不同程度的抑制,辛硫磷处理后24h时与对照相比AChE活性下降了24.87%,而溴氰菊酯对AChE活性没有明显抑制作用。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 致死剂量 羧酸酯 S-转移 乙酰胆碱酯
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氧化乐果和甲萘威亚致死剂量对黄褐天幕毛虫2种解毒酶活性的影响 被引量:4
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作者 付莉 胡春祥 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期126-128,132,共4页
室内条件下采用叶片药膜法分别测定氧化乐果和甲萘威对黄褐天幕毛虫(Malacosoma neustria testacea)3龄幼虫的毒力;采用分光光度法测定2种药剂亚致死剂量对黄褐天幕毛虫的羧酸酯酶(CarE),谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响。结果... 室内条件下采用叶片药膜法分别测定氧化乐果和甲萘威对黄褐天幕毛虫(Malacosoma neustria testacea)3龄幼虫的毒力;采用分光光度法测定2种药剂亚致死剂量对黄褐天幕毛虫的羧酸酯酶(CarE),谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:氧化乐果对黄褐天幕毛虫的24、48 h的LC20分别为33.975、8.298 mg·L-1,甲萘威24、48 h的LC20分别为23.314、1.863 mg·L-1。经氧化乐果和甲萘威亚致死剂量处理后,幼虫体内的CarE在6-48 h内均被不同程度抑制,其中处理12 h活性降到最低,分别为对照的0.51、0.36倍;氧化乐果亚致死剂量对幼虫体内的GSTs表现为抑制-激活-抑制作用,在处理后24 h对该酶的激活作用最强,为同期对照的1.37倍。亚致死剂量甲萘威处理6-12 h内幼虫体内GSTs被激活,随后逐渐被抑制。 展开更多
关键词 黄褐天幕毛虫 致死剂量 羧酸酯 S-转移
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蓝莓花青素相关VcGSTF19基因的克隆及功能研究
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作者 张永艳 郭思健 +4 位作者 李晶 郝思怡 李瑞得 刘嘉鹏 程春振 《生物技术通报》 北大核心 2025年第9期139-146,共8页
【目的】Phi亚家族谷胱甘肽转移酶(GSTF)在多种植物花青素积累和转运中发挥关键作用。为研究蓝莓GSTF的功能,对蓝莓花青素相关GSTF19基因进行克隆和功能研究。【方法】利用反转录PCR克隆获得蓝莓花青素相关GSTF19的编码序列并构建过表... 【目的】Phi亚家族谷胱甘肽转移酶(GSTF)在多种植物花青素积累和转运中发挥关键作用。为研究蓝莓GSTF的功能,对蓝莓花青素相关GSTF19基因进行克隆和功能研究。【方法】利用反转录PCR克隆获得蓝莓花青素相关GSTF19的编码序列并构建过表达载体,基于蓝莓果实瞬时转化和拟南芥tt19突变体互补实验研究其功能。【结果】VcGSTF19的瞬时过表达可以显著促进蓝莓果皮中花青素的积累。过表达VcGSTF19的蓝莓果皮花青素含量达到空载对照的6.61倍。其瞬时过表达显著提高了蓝莓果皮中VcCHS、VcCHI、VcF3H、VcDFR、VcANS和VcUFGT等花青素合成结构基因的表达水平。此外,VcGSTF19异源转化拟南芥tt19突变体恢复了突变体花青素积累,转基因莲座叶中花青素含量约为突变体的6.21倍。【结论】蓝莓VcGSTF19基因在花青素积累和转运中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 花青素 蓝莓 phi亚家族谷胱甘肽转移酶 基因克隆 功能研究
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高羊茅FaGST1基因克隆、亚细胞定位及表达分析 被引量:3
14
作者 陈锡 赵德刚 +3 位作者 陈莹 吴佳海 袁暘暘 王小利 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1614-1624,共11页
【目的】克隆高羊茅谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因FaGST1,并进行亚细胞定位及表达分析,为深入研究该基因的抗逆分子调控提供理论依据。【方法】采用RT-PCR和RACE从高羊茅黔草1号中克隆FaGST1基因,对其进行生物信息学分析,构建植物融合表... 【目的】克隆高羊茅谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因FaGST1,并进行亚细胞定位及表达分析,为深入研究该基因的抗逆分子调控提供理论依据。【方法】采用RT-PCR和RACE从高羊茅黔草1号中克隆FaGST1基因,对其进行生物信息学分析,构建植物融合表达载体pCAMBIA1300-FaGST1-GFP,通过农杆菌介导转入烟草叶片表皮细胞,观察FaGST1基因亚细胞定位情况,并利用实时荧光定量PCR检测高盐、高温、干旱及低氮胁迫处理下高羊茅叶片中该基因的表达情况。【结果】克隆获得FaGST1基因cDNA全长序列为1003 bp,开放阅读框(ORF)为681 bp,编码227个氨基酸残基,其编码蛋白的分子量约25.60 kD,理论等电点(pI)为5.58,亲水指数平均值-0.342,不稳定系数32.96,为稳定的亲水蛋白,定位于细胞核。FaGST1蛋白二级结构中,α-螺旋占50.44%,β-转角占5.75%,无规则卷曲占30.54%,延伸链占13.27%。FaGST1蛋白的保守结构区域为含有G位点的N末端结构域和含有H位点的C末端结构域。FaGST1蛋白与黑麦草GST蛋白(AMY26594.1)的氨基酸序列相似性最高,为93%,其次是海滨雀稗GST蛋白(AMN87043.1),为91%,与玉米(ACG39365.1)和小米(KQK86785.1)GST蛋白氨基酸序列相似性均在80%以上,与系统发育进化树分析结果基本相符,即FaGST1蛋白与黑麦草、海滨雀稗、玉米和小米等禾本科植物GST蛋白亲缘关系较近。高羊茅FaGST1基因在干旱、高温、高盐胁迫和低氮胁迫处理下均出现抑制表达。【结论】FaGST1基因负向调控高羊茅逆境胁迫响应。 展开更多
关键词 高羊茅 -S-转移(GST) 基因克隆 细胞定位 生物信息学分析 非生物胁迫 表达分析
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花生GSTs家族基因的全基因组分析 被引量:1
15
作者 王通 迟晓元 +4 位作者 王冕 潘丽娟 陈明娜 陈娜 焦坤 《花生学报》 北大核心 2019年第4期25-34,共10页
谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transferase,GST)是一类重要的多功能超家族酶,普遍存在于植物体中,作为配体或结合蛋白,在调控植物的生长发育、解除外界毒素作用过程起到重要作用。为全面了解花生GSTs基因家族的结构特性,本论文通过生... 谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transferase,GST)是一类重要的多功能超家族酶,普遍存在于植物体中,作为配体或结合蛋白,在调控植物的生长发育、解除外界毒素作用过程起到重要作用。为全面了解花生GSTs基因家族的结构特性,本论文通过生物信息分析技术对花生GST基因家族进行全基因组鉴定和表达特性分析,结果表明,在花生全基因组中一共有163个GSTs基因,其中A组基因中含有76个,B组基因中含有87个。基因结构和发育进化树将花生GST基因分为6类:Tau、Theta、Lamda、EF1Bγ、Phi和DHAR,花生GST家族基因结构进化相对保守,但各基因的内含子数量及长度有较大差异,其中EK5R9的外显子数最多,达19个;而K7JNV的内含子最长,约18 kb。MEME分析发现,花生GST家族基因中存在9个保守域,各基因中的保守结构域为6~8个不等。染色体定位显示,花生GSTs家族基因在花生A、B染色体组上呈不均匀分布,在A02、A03、A07、A09、B02、B03、B05、B08和B09号染色体上存在1~2个基因簇。表达分析发现,只有80个花生GST基因具有组织表达差异,其中6个的组织表达有极显著差异。本研究为GSTs基因的功能研究及花生抗逆性提高提供了理论依据。 展开更多
关键词 花生 转移 基因家族 全基因组分析
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割手密GST基因家族的分析及其对阿特拉津的响应
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作者 林焕泰 薛耀威 +1 位作者 高三基 王锦达 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第5期582-590,共9页
从全基因组的角度分析了割手密谷胱苷肽⁃S⁃转移酶(GST)基因家族成员的特征,共鉴定出129个GST。通过对割手密GST蛋白的系统发育分析,发现这些GST可以划分为4个亚家族,且每个亚家族内的蛋白排列紧凑,说明同亚族内部基因进化关系均比较亲... 从全基因组的角度分析了割手密谷胱苷肽⁃S⁃转移酶(GST)基因家族成员的特征,共鉴定出129个GST。通过对割手密GST蛋白的系统发育分析,发现这些GST可以划分为4个亚家族,且每个亚家族内的蛋白排列紧凑,说明同亚族内部基因进化关系均比较亲近。此外,对在阿特拉津处理下GST基因家族中10个F亚族基因的表达水平进行检测,结果表明,根中的SpGSTF1、SpGSTF9、SpGSTF14、SpGSTF16、SpGSTF18、SpGSTF31在阿特拉津胁迫下表达显著上调,推测这6个基因可能在响应阿特拉津胁迫的过程中起重要作用。研究结果有助于揭示割手密GST家族的进化和功能演替,并对进一步了解割手密GST对阿特拉津的解毒响应机制提供理论参考,同时也为培养抗除草剂甘蔗品种提供基因资源。 展开更多
关键词 割手密 ⁃S⁃转移 基因家族分析 阿特拉津
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急性淋巴细胞白血病患儿GSTP1及MTHFR基因多态性对大剂量甲氨蝶呤不良反应的影响 被引量:17
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作者 李菲 尹郸丹 +3 位作者 周小兰 马建梅 郭红梅 孟黎 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期723-728,共6页
目的:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的GSTP1及MTHFR基因多态性对大剂量甲氨蝶呤(HDM TX)不良反应的影响。方法:对2014年1月-2016年1月98例ALL患儿采用PCR方法测定C677T A303G及MTHFR C677T的多态性,观察患儿HD-M TX化疗期间的不良反... 目的:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的GSTP1及MTHFR基因多态性对大剂量甲氨蝶呤(HDM TX)不良反应的影响。方法:对2014年1月-2016年1月98例ALL患儿采用PCR方法测定C677T A303G及MTHFR C677T的多态性,观察患儿HD-M TX化疗期间的不良反应发生情况,分析C677T及MTHFR对不良反应发生的影响。结果:98例患儿中61例(62.24%)存在有至少1个基因位点的变异;C677TA303G基因多态性表现:A基因频率84.69%,G基因频率15.31%;MTHFR C677T基因多态性表现:C基因频率66.33%,T基因频率33.67%。98例患儿中,7例(7.14%)发生骨髓抑制,23例(23.47%)发生肝损害,15例(15.31%)发生肾损害,48例(48.98%)发生胃肠道反应,46例(46.94%)发生黏膜损害。对患儿的年龄、性别、危险程度及MTX的剂量进行校正后分析显示,基因多态性与骨髓抑制、胃肠道及黏膜损害的发生无显著相关性(P>0.05)。然而,变异基因数量与肝功能及肾功能损害的发生具有显著相关性(P<0.05)。结论:MTHFR及C677T基因联合变异时患儿的M TX不良反应发生风险明显增加,对此应引起临床上的重视。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病(ALL) 甲基四氢叶酸还原(MTHFR) 转移P1(GSTP1) 基因多态性 大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)
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牵牛子杀螨活性物质鉴定及其作用机制初探 被引量:5
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作者 杜娟 赵磊 +2 位作者 师光禄 王有年 仝宝生 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期199-203,共5页
朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)具有个体小、繁殖快、代数多、适应性强、为害重等特点,是世界公认的最难防治的有害生物群落(Hazan et al.,1974;何林等,2004),可危害百余种农作物和果树,并对其产量和品质造成严重的影响(Ho et... 朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)具有个体小、繁殖快、代数多、适应性强、为害重等特点,是世界公认的最难防治的有害生物群落(Hazan et al.,1974;何林等,2004),可危害百余种农作物和果树,并对其产量和品质造成严重的影响(Ho et al.,1997)。长期以来,大量重复使用非专一性化学杀螨剂,使许多螨类已产生抗药性(唐除痴等,1998),并且对杀螨剂出现了交互抗性(王旭等,1997)。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 油酸甲酯 -S-转移 乙酰胆碱酯 单胺氧化 CA2+-ATP Na+ K+-ATP
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苯并(a)芘对罗非鱼肝脏CYP1A1和GST活性的影响 被引量:2
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作者 陈家长 裘丽萍 +4 位作者 瞿建宏 孟顺龙 范立民 贾旭淑 宋超 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期268-272,共5页
以罗非鱼为试验动物,研究不同浓度(0.1、1、10和50μg·L-1)苯并(a)芘(BaP)暴露下,罗非鱼肝脏细胞色素P450亚酶1A1(CYP1A1)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性的变化。结果表明,0.1、1和10μg·L-13个浓度组罗非鱼肝脏CYP1A1活性与... 以罗非鱼为试验动物,研究不同浓度(0.1、1、10和50μg·L-1)苯并(a)芘(BaP)暴露下,罗非鱼肝脏细胞色素P450亚酶1A1(CYP1A1)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性的变化。结果表明,0.1、1和10μg·L-13个浓度组罗非鱼肝脏CYP1A1活性与空白和丙酮溶剂对照组相比没有显著差异(P>0.05),50μg·L-1浓度组CYP1A1活性在6和168 h时受到显著诱导(P<0.05);0.1和1μg·L-1浓度组肝脏GST活性与空白和丙酮溶剂对照组相比无显著差异(P>0.05),10和50μg·L-1浓度组GST活性在336 h时与空白和丙酮溶剂对照组相比差异显著(P<0.05)。研究CYP1A1活性与GST活性之间的关系发现,两者的变化趋势相近,尤其是1和50μg·L-12个浓度组,表明这两者之间可能存在一定的对应关系。 展开更多
关键词 细胞色素P4501A1(CYP1A1) -S-转移(GST) 罗非鱼 苯并(a)芘(BaP)
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