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前列腺癌患者外周血淋巴细胞中perforin和granzyme-B mRNA的表达及意义 被引量：1
1
作者 何景良 李鎏勋 +4 位作者 危文素 魏竞超 龙智 张一川 何乐业 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期387-391,共5页
目的:探讨前列腺癌(prostate cancer,PCa)患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)中perforin和granzyme-B的表达水平及意义。方法:运用荧光定量RT-PCR检测60例PCa患者PBL中perforin和granzyme-B的m RNA的表达水平,同期检... 目的:探讨前列腺癌(prostate cancer,PCa)患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)中perforin和granzyme-B的表达水平及意义。方法:运用荧光定量RT-PCR检测60例PCa患者PBL中perforin和granzyme-B的m RNA的表达水平,同期检测40例良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)患者及20例健康者作为对照。结果:PCa组PBL中perforin和granzyme-B m RNA的表达水平较BPH组及健康对照组均明显下降(P<0.05);高病理分级组表达水平均低于低病理分级组(P<0.05);高临床分期组表达水平低于低临床分期组(P<0.05)。结论:PCa患者PBL中perforin和granzyme-B m RNA表达水平较对照组下降,且与病理分级和临床分期负相关,提示PCa的发生发展与患者免疫状态下降有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 淋巴细胞 perforin GRANZYME-B
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外周血淋巴细胞亚群及细胞内颗粒酶B和穿孔素在儿童脓毒症中的变化
2
作者 魏晓星 赵明奇 +2 位作者 郭巧芝 杨镒宇 陈飞燕 《中国循证儿科杂志》 北大核心 2025年第5期385-390,共6页
背景儿童脓毒症的发病机制与机体免疫功能紊乱密切相关,但目前关于脓毒症患儿外周血淋巴细胞亚群及细胞内颗粒酶B、穿孔素的变化及其与病情严重程度、预后的关联尚未完全明确。目的探讨脓毒症患儿外周血淋巴细胞亚群及细胞内的颗粒酶B... 背景儿童脓毒症的发病机制与机体免疫功能紊乱密切相关,但目前关于脓毒症患儿外周血淋巴细胞亚群及细胞内颗粒酶B、穿孔素的变化及其与病情严重程度、预后的关联尚未完全明确。目的探讨脓毒症患儿外周血淋巴细胞亚群及细胞内的颗粒酶B、穿孔素的变化及其临床意义。设计病例对照研究。方法以2022年7月1日至2023年12月31日在广州医科大学附属妇女儿童医疗中心PICU住院的脓毒症患儿为病例组,并根据其转入PICU时的儿童顺序器官衰竭评估(pSOFA)评分分为≤4分亚组和>4分亚组;以健康儿童为对照组。通过流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群绝对计数,以及T淋巴细胞和NK细胞中表达穿孔素和颗粒酶B的细胞计数百分比。主要结局指标T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞绝对计数;表达颗粒酶B、穿孔素的T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、NK细胞百分比。结果病例组纳入51例患儿,男32例,女19例,年龄2~74个月;对照组20例儿童,男11例,女9例,年龄6~70个月;两组年龄(Z=1.119,P=0.263)、性别构成(χ^(2)=0.361,P=0.548)差异均无统计学意义。病例组中,pSOFA评分≤4分25例,其中1例死亡(放弃治疗);pSOFA评分>4分26例,其中4例(15.4%)因病情恶化死亡。对照组以及病例组pSOFA≤4分亚组和pSOFA>4分亚组比较,T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞和NK细胞绝对计数差异均有统计学意义,均为对照组检测值最高、pSOFA>4分亚组检测值最低;表达颗粒酶B的T淋巴细胞、NK细胞和CD8^(+)T淋巴细胞百分比以及表达穿孔素的T淋巴细胞、NK细胞和CD8^(+)T淋巴细胞百分比,在3组间差异均有统计学意义,均在pSOFA≤4分亚组最高,在pSOFA>4分亚组最低。pSOFA>4分亚组存活患儿转出PICU前24 h内,T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、NK细胞绝对计数,以及表达颗粒酶B和穿孔素的T淋巴细胞、NK细胞和CD8^(+)T淋巴细胞百分比,均高于转入PICU 24 h内的检测值,差异有统计学意义。结论监测外周血T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、NK细胞绝对计数以及表达颗粒酶B、穿孔素的T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、NK细胞百分比的动态变化趋势,可为评估PICU脓毒症患儿的病情严重程度及预后提供参考。 展开更多
关键词 淋巴细胞亚群 CD8^(+)T淋巴细胞 NK细胞 颗粒酶B 穿孔素 儿童脓毒症
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类风湿关节炎患者外周血CD4^(+)CD28^(-)T细胞亚群免疫功能相关分子的表达分析
3
作者 林倩 张诚 +3 位作者 张杰 黄会娜 李霞 王冠 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期2087-2091,共5页
目的:探讨CD4^(+)CD28^(-)T细胞的活化途径及其在类风湿关节炎(RA)中的具体作用。方法:分离RA患者及健康人外周血单个核细胞(PBMCs),流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例、活化水平以及穿孔素和TNF-α的表达情况,并分析CD4^(+)CD28^... 目的:探讨CD4^(+)CD28^(-)T细胞的活化途径及其在类风湿关节炎(RA)中的具体作用。方法:分离RA患者及健康人外周血单个核细胞(PBMCs),流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例、活化水平以及穿孔素和TNF-α的表达情况,并分析CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例与年龄、C反应蛋白、抗-环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)和血沉(ESR)的相关性。流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞Toll样受体(TLR)2表达。采用抗-CD3抗体和TLR2激动剂单独或联合刺激纯化的RA患者CD4+T细胞,流式细胞术检测CD4^(+)CD28^(-)T细胞活化水平和细胞因子分泌情况。结果:RA患者CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例高于健康人(P<0.05),且与RF和ESR呈正相关(r=0.5541,P<0.01;r=0.3634,P<0.01)。与CD4+CD28+T细胞相比,RA患者的CD4^(+)CD28^(-)T细胞CD25表达下调(P<0.01),CD40L及TLR2表达上调(P<0.01;P<0.0001),且分泌更多的穿孔素和TNF-α(P<0.001;P<0.001)。TLR2激动剂刺激后RA患者CD4^(+)CD28^(-)T细胞CD40L和CD25表达及穿孔素、TNF-α的分泌均无显著变化。结论:RA患者体内CD4^(+)CD28^(-)T细胞比例增加,其分泌大量穿孔素和TNF-α,可能参与RA的炎症状态和关节损伤,但TLR2不能替代CD28激活CD4^(+)CD28^(-)T细胞。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 CD4^(+)CD28^(-)T细胞 TOLL样受体2 TNF-α 穿孔素
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穿孔素和颗粒酶B在儿童传染性单核细胞增多症肝损伤中的表达及意义 被引量：17
4
作者 姜涛 李黎平 +3 位作者 易思思 欧阳文献 谭艳芳 李双杰 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期1956-1959,共4页
目的观察传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD8+T淋巴细胞和NK细胞中穿孔素及颗粒酶B的变化,探索其在肝损伤中的临床意义。方法选择2016年1月-2017年6月在湖南省儿童医院住院且符合IM诊断标准的患儿60例,以30例健... 目的观察传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD8+T淋巴细胞和NK细胞中穿孔素及颗粒酶B的变化,探索其在肝损伤中的临床意义。方法选择2016年1月-2017年6月在湖南省儿童医院住院且符合IM诊断标准的患儿60例,以30例健康儿童志愿者为对照组;通过细胞表面标记和细胞内细胞因子染色技术,采用流式细胞术分析PBMC中CD8+T淋巴细胞和NK细胞及其穿孔素及颗粒酶B的表达。计量资料2组间比较采用t检验,3组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Dunnett-t法。结果在60例IM患儿中,肝损伤发生率50%(30/60),其中ALT<200 U/L者60%(18/30),200 U/L≤ALT<400 U/L者33.3%(10/30),ALT≥400 U/L者6.67%(2/30),所有患儿经治疗1个月后复查肝功能均恢复正常。与正常组相比,IM非肝损伤和肝损伤组CD8+T淋巴细胞中穿孔素和颗粒酶B的表达均明显升高(P值均<0.05)。与IM非肝损伤组相比,肝损伤组中CD8+T淋巴细胞表达水平及NK细胞中穿孔素和颗粒酶B的表达均明显升高(P值均<0.05)。结论 IM患儿肝损伤发生率高,主要为轻中度转氨酶升高,能自限性恢复正常,NK细胞中穿孔素和颗粒酶B及CD8+T淋巴细胞高表达是造成IM肝损伤的原因。 展开更多
关键词 疱疹病毒4型 人 传染性单核细胞增多症 穿孔素 颗粒酶类 儿童
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人外周血NK细胞亚群、表型和生物学特征 被引量：34
5
作者 吴长有 刘杰 +1 位作者 杨滨燕 Mario Roedere 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期483-486,共4页
目的:探讨人外周血NK细胞的异质性和生物学特征。方法:利用多种标记抗体进行细胞表面和细胞内细胞毒效应分子染色,再利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析NK细胞亚群的多样性和生物学特征。结果:NK细胞可分为CD56+、CD56+CD16+和CD16+三... 目的:探讨人外周血NK细胞的异质性和生物学特征。方法:利用多种标记抗体进行细胞表面和细胞内细胞毒效应分子染色,再利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析NK细胞亚群的多样性和生物学特征。结果:NK细胞可分为CD56+、CD56+CD16+和CD16+三个亚群。所有CD56+NK细胞均表达CD95,但表达水平的高(CD95bright)和低(CD95dim)不同。在CD95bright和CD8+细胞亚群中有43.5%的细胞同时表达颗粒酶B和穿孔素。而CD56+CD16+和CD16+细胞表达CD95均为CD95bright,同时表达颗粒酶B(83.6%)和穿孔素(89.8%)。结论:NK细胞乃异质性群体,随着CD56表达减少和CD16表达增加,其生物效应功能逐渐成熟。 展开更多
关键词 NK细胞 CD56 CD16 穿孔素 颗粒酶B
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穿孔素在大鼠肝移植急性排斥的早期表达及意义 被引量：9
6
作者 张绍庚 吴孟超 +2 位作者 谈景旺 杨甲梅 钱其军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期31-33,共3页
探索激活的细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )的穿孔素途径 ,大鼠肝移植急性排斥的早期表达及诊断价值。在建立大鼠肝移植急性排斥模型的基础上 ,应用免疫组化和逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测移植肝穿孔素的表达 ,并以同基因肝移植为对照。... 探索激活的细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )的穿孔素途径 ,大鼠肝移植急性排斥的早期表达及诊断价值。在建立大鼠肝移植急性排斥模型的基础上 ,应用免疫组化和逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测移植肝穿孔素的表达 ,并以同基因肝移植为对照。急性排斥移植肝存在穿孔素的蛋白表达 ,术后 3天即急性排斥早期均表达穿孔素 4天后表达明显增强 ,并贯穿整个排斥反应全过程 ;而同基因对照组术后 7天内均不表达穿孔素。CTL 的穿孔素途径参与介导了大鼠肝移植急性排斥反应 。 展开更多
关键词 穿孔素 肝移植 移植物排斥 大鼠
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人外周血γδT细胞CD107a的表达变化与细胞毒活性的关系 被引量：9
7
作者 周忠海 陈复兴 +4 位作者 吕小婷 张娟 孙蕾清 张磊 黄菲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期301-305,共5页
目的：探讨人外周血γδT细胞体外诱导过程中CD107a的表达变化及其与γδT细胞细胞毒活性的关系。方法：分离健康人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,加入含有IL-2和异戊烯焦磷酸（isopentenyl pyro-phosp... 目的：探讨人外周血γδT细胞体外诱导过程中CD107a的表达变化及其与γδT细胞细胞毒活性的关系。方法：分离健康人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,加入含有IL-2和异戊烯焦磷酸（isopentenyl pyro-phosphate,IPP）的培养基,体外诱导γδT细胞。分别在第7、10、14天以流式细胞仪对培养的γδT细胞进行鉴定,并同时检测其CD107a、穿孔素和颗粒酶B的表达。CCK-8试剂盒检测γδT细胞对胰腺癌细胞SW-1990的杀伤效应。采用SPSS13.0软件进行spearman相关分析。结果：在培养的第7、10、14天,γδTCR阳性细胞分别为（60.31±3.84）%、（66.45±4.25）%、（70.99±4.66）%。CD107a、穿孔素和颗粒酶B的表达在γδT细胞培养第710天达到峰值后呈下降趋势,第7天与第0天相比差异有统计学意义[（80.66±4.42）%、（70.11±3.34）%、（94.26±4.25）%vs（69.02±5.04）%、（62.31±4.66）%、（53.62±3.69）%,P〈0.05]。培养第7天、第10天的γδT细胞对SW-1990细胞杀伤率显著高于第14天的γδT细胞[（58.86±5.12）%、（61.53±4.69）%vs（40.31±4.83）%,P〈0.05]。γδT细胞CD107a表达与穿孔素、颗粒酶B、其对SW-1990细胞杀伤效应显著相关（r=0.853,r=0.785,r=0.839,均P〈0.01）。结论：人外周血γδT细胞CD107a的表达与其抗肿瘤能力正相关,可能是γδT细胞细胞毒活性的一个标志。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 CD107a 胰腺肿瘤 细胞毒作用 穿孔素 颗粒酶B
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颗粒外排与Fas/Fas配体途径在人γδT细胞的肿瘤细胞毒活性中的作用 被引量：7
8
作者 胡建国 侯彦强 +1 位作者 陈勇 李柏青 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第4期260-263,共4页
目的 :探讨结核杆菌抗原 (Mtb Ag)特异性活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞的细胞毒活性机制。 方法 :用Mtb Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增并用磁珠阳性分选法获得高纯度γδT细胞 ;用RT PCR法检测γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和FasLmRN... 目的 :探讨结核杆菌抗原 (Mtb Ag)特异性活化的γδT细胞杀伤肿瘤细胞的细胞毒活性机制。 方法 :用Mtb Ag刺激正常人PBMC以诱导γδT细胞扩增并用磁珠阳性分选法获得高纯度γδT细胞 ;用RT PCR法检测γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和FasLmRNA的表达 ;用流式细胞仪检测γδT细胞表面Fas配体 (FasL)分子以及几种肿瘤细胞表面Fas分子的表达 ;用MTT法测定γδT细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性 ,观察穿孔素 /颗粒酶途径的阻断剂concanamycinA (CMA)和Fas/FasL途径的抑制剂brefeldinA(BFA)对γδT细胞细胞毒活性的影响。结果 :经Mtb Ag激活和扩增的γδT细胞高表达穿孔素、颗粒酶B和FasLmRNA ;Mtb Ag活化的γδT细胞中 2 2 .4%表达FasL分子 ;CMA能明显抑制γδT细胞对肿瘤细胞 (尤其对Fas低表达的K5 6 2和PG)的杀伤 ,BFA能强烈抑制γδT细胞杀伤Fas高表达的Raji和A375。 结论 :Mtb Ag活化的γδT细胞杀伤Fas低表达的靶细胞时主要通过颗粒外排途径 ,杀伤Fas高表达的靶细胞时 ,颗粒外排和FasL均起作用。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 细胞毒活性 穿孔毒 颗粒酶B Fas/FasL配体 结核杆菌抗原 肿瘤细胞
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穿孔素与颗粒酶B在鼻NK/T细胞淋巴瘤诊断中的意义 被引量：9
9
作者 石群立 周晓军 +5 位作者 孟奎 陈琴 盛春宁 李军 陈鑫 刘镭 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期580-584,共5页
目的　检测鼻NK/T细胞淋巴瘤中的穿孔素、颗粒酶B表达分布情况 ,为临床治疗和预后判断提供依据。方法　运用免疫组化S P法检测 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况 ;同时与组织芯片中其他类型淋巴瘤进行比较研究 ,1... 目的　检测鼻NK/T细胞淋巴瘤中的穿孔素、颗粒酶B表达分布情况 ,为临床治疗和预后判断提供依据。方法　运用免疫组化S P法检测 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况 ;同时与组织芯片中其他类型淋巴瘤进行比较研究 ,10例淋巴组织反应性增生作为对照。结果　 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中均见穿孔素和颗粒酶B过度表达。以 6 0例淋巴瘤制成组织芯片的 4 2例B细胞淋巴瘤中见 11例少许穿孔素和 14例少许颗粒酶B阳性表达细胞散在分布于瘤细胞间 ,10例外周T细胞淋巴瘤中 8例少许表达穿孔素和 9例少许表达颗粒酶B。 2例间变性大细胞淋巴瘤见少许穿孔素和颗粒酶B阳性表达细胞。 2例霍奇金淋巴瘤阴性。NK/T细胞淋巴瘤的穿孔素和颗粒酶B表达程度与T、B淋巴瘤比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标记物 ,可作为NK/T细胞淋巴瘤的诊断性标记物 ;其在外周T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤中的表达 ,反映了机体存在抗肿瘤的免疫反应机制。 展开更多
关键词 穿孔素 颗粒酶B NK细胞淋巴瘤 T细胞淋巴瘤 鼻肿瘤 免疫反应
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淫羊藿甙逆转转化生长因子β_2对LAK、CD_3AK细胞的免疫抑制作用 被引量：20
10
作者 李晓燕 张玲 +3 位作者 王芸 毛海婷 刘炬 温培娥 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期266-268,270,共4页
探讨淫羊藿甙逆转转化生长因子 β2 (TransformingGrowthFactorβ2 ,TGFβ2 )对LAK、CD3AK细胞的免疫抑制作用及其机制。方法 :采用MTT法 ,RT PCR和流式细胞术。结果 :淫羊藿甙能逆转受TGFβ2 抑制的LAK和CD3AK细胞的杀伤活性 ,并能部... 探讨淫羊藿甙逆转转化生长因子 β2 (TransformingGrowthFactorβ2 ,TGFβ2 )对LAK、CD3AK细胞的免疫抑制作用及其机制。方法 :采用MTT法 ,RT PCR和流式细胞术。结果 :淫羊藿甙能逆转受TGFβ2 抑制的LAK和CD3AK细胞的杀伤活性 ,并能部分恢复受TGFβ2 抑制的LAK细胞表面IL 2Rα表达和CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平 ,以及CD3AK细胞的增殖活性。结论 :淫羊藿甙通过恢复LAK细胞IL 2Rα表达 ,提高CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平及促进CD3AK增殖 ,逆转TGFβ2 对LAK、CD3AK的免疫抑制作用。 展开更多
关键词 淫羊藿甙 转化生长因子Β LAK细胞 CD3AK细胞
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EV71手足口病患儿CD8^+T、NK细胞穿孔素和颗粒酶B的变化 被引量：8
11
作者 姜涛 欧阳文献 +1 位作者 谭艳芳 李双杰 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期1079-1082,共4页
目的探讨肠道病毒7l型(EV71)手足口病患儿CD8^+T、NK细胞穿孔素(PRF)和颗粒酶B(Grz B)的变化。方法选取某儿童医院2017年5—7月普通型、重型手足口病患儿(普通型组、重型组),健康儿童志愿者(正常对照组)各30例,采用流式细胞术测定外周血... 目的探讨肠道病毒7l型(EV71)手足口病患儿CD8^+T、NK细胞穿孔素(PRF)和颗粒酶B(Grz B)的变化。方法选取某儿童医院2017年5—7月普通型、重型手足口病患儿(普通型组、重型组),健康儿童志愿者(正常对照组)各30例,采用流式细胞术测定外周血CD8^+T、NK细胞PRF和Grz B的表达水平,比较各组差异。结果与正常对照组相比,普通型组和重型组EV71手足口病患儿急性期两种细胞中PRF和Grz B的表达水平均升高,差异有统计学意义(均P <0. 05)。普通型组和重型组EV71手足口病恢复期患儿CD8^+T细胞PRF、Grz B的表达水平较急性期明显下降,但仍高于正常对照组(均P <0. 05)。NK细胞PRF、Grz B的表达水平:普通型组和重型组急性期比较,差异均无统计学意义(均P> 0. 05);普通型组EV71手足口病恢复期患儿较急性期虽稍升高,但差异仍无统计学意义(均P> 0. 05);重型组EV71手足口病恢复期患儿较急性期明显升高(均P <0. 05)。结论 CD8^+T、NK细胞PRF和Crz B在EV71手足口病发病中起着一定作用。 展开更多
关键词 EV71 手足口病 穿孔素 颗粒酶B
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年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响 被引量：5
12
作者 李芳秋 方蓉 +1 位作者 章金春 孟奎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期562-564,共3页
目的　通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法　利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb... 目的　通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法　利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb) ,采用单标记免疫组化染色法 ,检测外周血单个核细胞 (PBMC)中PFP的表达。采用双标记免疫组化染色法 ,检测上述细胞表面标志CD3或CD5 6的表达和细胞内PFP的表达。结果　儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率 (% ) ,分别为 (2 6 .4± 2 .7) % ,(2 1.6± 3.2 ) %和 (13.4± 2 .0 ) % ,老年组明显下降 ,与其他两组相比较P <0 .0 0 1。 3个年龄组CD3+ T细胞表达PFP的阳性率 (% ) ,分别为 (30 .1± 4 .8) %、(2 1.4± 7.3) %和 (18.8± 4 .2 ) % ,随年龄的增长而显著下降。3个年龄组CD5 6 +NK细胞PFP的表达差别不显著。结论　健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减 ,CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著。 展开更多
关键词 年龄 穿孔素 细胞毒性T淋巴细胞 自然杀伤细胞 双标记免疫组化染色法
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乳腺癌HIFU后腋窝淋巴结內淋巴细胞杀伤活性的变化 被引量：6
13
作者 朱学强 伍峰 +3 位作者 伍悦蕾 周强 张军 王智彪 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第14期824-826,共3页
目的:探讨高强度聚焦超声(HIFU)治疗乳腺癌原发灶后同侧腋窝淋巴结中淋巴细胞的Fas配体(FasL)、颗粒酶B(GzB)、穿孔素(Pf)等细胞毒性分子表达的变化。方法:用SP免疫组化方法检测HIFU组23例和对照组25例患者腋窝淋巴结中淋巴细胞的FasL、... 目的:探讨高强度聚焦超声(HIFU)治疗乳腺癌原发灶后同侧腋窝淋巴结中淋巴细胞的Fas配体(FasL)、颗粒酶B(GzB)、穿孔素(Pf)等细胞毒性分子表达的变化。方法:用SP免疫组化方法检测HIFU组23例和对照组25例患者腋窝淋巴结中淋巴细胞的FasL、GzB和Pf的表达。结果:HIFU组腋窝癌转移阴性和阳性淋巴结内Fasl、GzB、Pf阳性细胞数明显高于对照组(P<0.01)。结论:HIFU治疗乳腺癌原发灶后肿瘤引流淋巴结(TDLN)内具有杀伤活性的淋巴细胞增多,细胞免疫增强。 展开更多
关键词 高强度聚焦超声 乳腺癌 肿瘤引流淋巴结 Fas配体颗粒酶B 穿孔素
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银合欢涠洲DHP－降解细菌脱毒及饲喂乳牛效果的研究 被引量：6
14
作者 汪儆 雷祖玉 +4 位作者 冯学勤 杨家晃 吴柱月 宋光谟 黄增发 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期206-212,共7页
将１８头乳用后备母牛分为３组，其中Ⅲ组为对照组，喂象草，Ⅰ、Ⅱ组喂银合欢并分别以灌胃接种和接触感染方式使试牛获得涸洲ＤＨｐ－降解细菌，观察银合欢的脱毒和饲养效果。结果指出，接种后Ⅰ、Ⅱ组试牛尿中３－羟基－４（１氢）吡... 将１８头乳用后备母牛分为３组，其中Ⅲ组为对照组，喂象草，Ⅰ、Ⅱ组喂银合欢并分别以灌胃接种和接触感染方式使试牛获得涸洲ＤＨｐ－降解细菌，观察银合欢的脱毒和饲养效果。结果指出，接种后Ⅰ、Ⅱ组试牛尿中３－羟基－４（１氢）吡啶酮（ＤＨＰ）浓度明显降低，其中Ⅰ组各试牛最后均为零，Ⅰ、Ⅱ组试牛瘤胃液抽出后在３７℃体外培养一周，可使培养基中ＤＨＰ全部降解，由此说明涸洲ＤＨｐ～降解细菌可在试牛瘤胃中充分繁殖生长并发挥脱毒作用。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组试牛的平均日增重分别为０．８２千克、０．７１千克和０．３３千克，饲料报酬分别为５．７３、１．７０和１３．８１，１、Ⅱ组试牛平均日增重和饲料报酬均极显著高于ｍ组（Ｐ＜０．０１），而Ⅰ、Ⅱ组之间无显著差异（Ｐ＞０．０５），故经涠洲ＤＨＰ－降解细菌脱毒后，银合欢是一种优良的蛋白质饲料。 展开更多
关键词 DHP-降解细菌 乳牛 银合欢 脱毒
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穿孔素介导的细胞凋亡机制在抗流感病毒感染免疫防御中作用的研究 被引量：7
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作者 刘北星 吕昌龙 木村吉延 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期480-483,486,共5页
目的:穿孔素介导的细胞凋亡机制在流感病毒初次感染中作用的研究。方法:用流感病毒A/PR/8/34经鼻感染穿孔素基因敲除鼠和同源对照C57BL/6小鼠,采用PFU方法测定肺内流感病毒增殖状况;免疫组织化学染色方法观察小鼠病毒感染后感染细胞的... 目的:穿孔素介导的细胞凋亡机制在流感病毒初次感染中作用的研究。方法:用流感病毒A/PR/8/34经鼻感染穿孔素基因敲除鼠和同源对照C57BL/6小鼠,采用PFU方法测定肺内流感病毒增殖状况;免疫组织化学染色方法观察小鼠病毒感染后感染细胞的凋亡情况;利用乳酸脱氢酶释放法检测感染鼠脾淋巴细胞NK活性及CTL杀伤活性。结果:穿孔素基因缺乏导致流感病毒在小鼠肺内大量增殖;小鼠清除感染病毒所需时间延长;病毒感染细胞发生凋亡的时间亦因穿孔素的缺乏而延迟;感染小鼠脾淋巴细胞NK活性及CTL杀伤活性均显著降低。结论:穿孔素依赖的细胞介导的细胞毒效应在控制流感病毒初次感染,快速清除感染病毒方面起重要作用。 展开更多
关键词 穿孔素 流感病毒 细胞毒活性 细胞凋亡
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HLH-2004方案诊断治疗小儿噬血细胞综合征结果分析 被引量：7
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作者 朱音 高怡瑾 +1 位作者 朱晓华 陈笑韵 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期718-722,共5页
目的了解我国小儿噬血细胞综合征(HLH)的发病情况和治疗效果,并开展HLH的穿孔素(perforin)基因研究。方法研究对象为符合国际组织细胞协会HLH-2004诊断标准的18例患儿,分析患儿起病时及治疗后的临床资料。用流式细胞仪和基因测序法检测... 目的了解我国小儿噬血细胞综合征(HLH)的发病情况和治疗效果,并开展HLH的穿孔素(perforin)基因研究。方法研究对象为符合国际组织细胞协会HLH-2004诊断标准的18例患儿,分析患儿起病时及治疗后的临床资料。用流式细胞仪和基因测序法检测患儿的穿孔素基因。结果流式细胞仪检测发现1例患儿的穿孔素在CD8+T细胞和NK细胞中的表达几乎完全缺如,而且基因测序发现该患儿的穿孔素基因存在错义突变(G47C),确诊为原发性HLH。14例接受HLH-2004治疗,随访时间2周～39个月,临床缓解4例,复发4例,持续活动4例,失访2例。共死亡7例。结论HLH-2004是诊断和治疗小儿HLH的有效方案,提高生存率需积极开展造血干细胞移植。为鉴别原发性和继发性HLH应进行相关基因检测。 展开更多
关键词 噬血细胞综合征 儿童 基因诊断 穿孔素
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蝎毒多肽提取物调控肝脏移植瘤中自然杀伤细胞浸润的机制研究 被引量：4
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作者 韩琛 王朝霞 +4 位作者 贾青 王兆朋 张月英 张钰 王恒孝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期390-395,400,共7页
目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对H22细胞小鼠肝脏原位移植瘤模型中肿瘤浸润自然杀伤细胞(Natural killer cell,NK cell)的浸润分布及活性的影响。方法:C57BL/6小鼠肝脏接种H22肝癌细胞株悬液构建原位移植瘤模型,设立正常对照组、荷瘤... 目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对H22细胞小鼠肝脏原位移植瘤模型中肿瘤浸润自然杀伤细胞(Natural killer cell,NK cell)的浸润分布及活性的影响。方法:C57BL/6小鼠肝脏接种H22肝癌细胞株悬液构建原位移植瘤模型,设立正常对照组、荷瘤对照组、PESV小剂量组和PESV大剂量组,分别给予生理盐水及PESV灌胃干预14 d,观察比较各组小鼠给药后的肿瘤体积、肿瘤质量及生存期变化,通过HE染色比较各组肿瘤组织形态学变化,流式细胞术和免疫组化检测肝脏及癌组织中浸润NK1.1^+细胞的比例及分布特点,real-time PCR法检测癌组织中穿孔素、颗粒酶B的表达。结果:PESV大、小剂量组肝脏移植瘤的生长受到抑制,肿瘤体积和瘤质量均低于荷瘤对照组,肿瘤抑制率分别为30.77%和15.38%,生存期观察显示PESV大剂量组能显著延长荷瘤小鼠生存时间,生命延长率为34.06%,P<0.05;荷瘤对照组肿瘤细胞排列紧密,异型性显著,呈浸润性生长,PESV大、小剂量组出现明显坏死区,细胞异型性减轻;PESV大剂量组小鼠肝脏NK细胞占肝脏总淋巴细胞的比例是(5.91±0.49)%,显著高于荷瘤对照组(3.69±0.50)%(P<0.05),且大量浸润分布在肿瘤组织及癌旁组织中;PESV大剂量组瘤组织中穿孔素和颗粒酶的mRNA表达量分别是荷瘤对照组的3.62倍和5.82倍(P<0.05)。结论:PESV可通过提高H22细胞肝脏原位移植瘤中浸润NK细胞的比例,促进NK细胞向肿瘤组织迁移,诱导穿孔素和颗粒酶B的产生,有助于NK细胞杀伤活性的恢复,从而增强对肿瘤细胞的清除,抑制肿瘤的浸润生长。 展开更多
关键词 蝎毒 肝肿瘤 自然杀伤细胞 穿孔素 颗粒酶B
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急性髓系白血病患者NK细胞表达及功能变化研究 被引量：4
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作者 刘露 陈肖 +4 位作者 金慧敏 赵四书 朱毅 钱思轩 吴雨洁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期49-55,共7页
目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者自然杀伤(NK)细胞的抗原表达特征和功能标记物的表达特点。方法:采用多参数流式细胞术检测56例初诊AML患者临床样本以及24例健康对照样本中的NK细胞表面标记物以及其功能指标,包括激活性受体NKG2D、NK... 目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者自然杀伤(NK)细胞的抗原表达特征和功能标记物的表达特点。方法:采用多参数流式细胞术检测56例初诊AML患者临床样本以及24例健康对照样本中的NK细胞表面标记物以及其功能指标,包括激活性受体NKG2D、NKP46、DNAM-1和杀伤标记颗粒酶B、穿孔素。结果:56例AML患者参照WHO造血和淋巴组织肿瘤分类标准大致分为AML未分化型(M_(1))、AML部分分化型(M_(2))和急性粒/单核细胞白血病(M_(4)/M_(5))3类,但3类患者的NK细胞并无差异,因而不再细分。NK细胞分为CD3^(-)CD56^(hi)CD16^(-)(简称CD56^(hi)NK)和CD3^(-)CD56^(dim)CD16^(+)(简称CD56^(dim)NK)两个细胞群来分析。AML患者CD56^(hi)NK细胞群与CD56^(dim)NK细胞群相比,除NKP46外,CD56^(hi)NK细胞的NKG2D等受体阳性百分比均明显降低(P<0.001)。与健康对照相比,AML患者CD56^(hi)NK细胞比例明显增高,而NK细胞数量、比例和CD56^(dim)NK细胞比例明显降低(P<0.05);CD56^(hi)NK细胞胞内穿孔素分子比例明显增高(P<0.05);CD56^(hi)NK细胞表面DNAM-1分子,CD56^(dim)NK细胞表面NKG2D、DNAM-1分子以及胞内穿孔素分子表达明显减低(P<0.05)。AML患者其余功能指标表达与健康对照对应指标相比差异均无统计学意义(P>0.05)。另外,AML患者CD56^(hi)NK细胞比例与CD34^(+)表达呈正相关关系(r=0.303)。结论:与CD56^(dim)NK相比,AML患者的CD56^(hi)NK比例及功能标记物表达量都较低;与健康对照相比,AML患者的NK细胞数量及表达比例降低且功能标记物表达异常,提示其功能受损。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 自然杀伤细胞 激活性受体 颗粒酶 穿孔素
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细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞抑制性差减杂交文库构建及巨噬细胞表达蛋白cDNA的克隆与差异表达 被引量：4
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作者 任洪林 徐丹丹 +4 位作者 乔琨 蔡灵 黄伟滨 张鼐 王克坚 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1043-1050,共8页
以雌性杂色鲍为对象,以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌,利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSHcDNA文库。随机挑取生长菌落110个克隆子,进行菌液PCR鉴定,... 以雌性杂色鲍为对象,以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌,利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSHcDNA文库。随机挑取生长菌落110个克隆子,进行菌液PCR鉴定,计算文库重组率为98.18%,文库容量为1.37×106pfu。将重组子测序,经BLAST一致性搜索比对分析,有一重组片段含有穿孔素(Perforin)保守结构域,为巨噬细胞表达蛋白(MEP)类穿孔素部分cDNA序列,片段大小为1551bp,连续编码517个氨基酸残基,申请GenBank登录号为EU272049。经半定量PCR和荧光定量PCR差异显示分析,发现在细菌感染状态下MEP基因在血淋巴细胞中存在明显的上调表达现象。 展开更多
关键词 杂色鲍 血淋巴细胞 细菌 抑制性差减杂交 巨噬细胞表达蛋白 类穿孔素 差异表达分析
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组织芯片检测淋巴瘤中活化的细胞毒性细胞 被引量：3
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作者 陈琴 石群立 +5 位作者 孟奎 周晓军 吴波 马恒辉 李军 刘镭 《医学研究生学报》 CAS 2006年第1期26-30,i0010,共6页
目的:运用组织芯片及常规病理切片检测活化的细胞毒性细胞在各型淋巴瘤中的表达分布情况,为临床治疗和判断预后提供依据。方法:运用免疫组化方法检测60份淋巴瘤标本制成的组织芯片中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况,同时选择10份鼻自... 目的:运用组织芯片及常规病理切片检测活化的细胞毒性细胞在各型淋巴瘤中的表达分布情况,为临床治疗和判断预后提供依据。方法:运用免疫组化方法检测60份淋巴瘤标本制成的组织芯片中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况,同时选择10份鼻自然杀伤细胞(NK)/T细胞淋巴瘤常规标本与组织芯片进行比较研究,10份淋巴组织反应性增生标本作为对照。结果:在60份淋巴瘤组织芯片中,发生在淋巴结内者48份,淋巴结外者12份。B细胞淋巴瘤42份,T细胞淋巴瘤16份(外周T细胞淋巴瘤10份、NK/T细胞淋巴瘤2份、T淋巴母细胞瘤2份及间变性大细胞淋巴瘤2份),2份霍奇金淋巴瘤。42份B细胞淋巴瘤的瘤细胞均不表达穿孔素和颗粒酶B。10份外周T细胞淋巴瘤中8份表达穿孔素,9份表达颗粒酶B,阳性表达细胞均为非肿瘤细胞。芯片中的2份和常规10份鼻NK/T细胞淋巴瘤中均见穿孔素和颗粒酶B过度表达。T、B细胞淋巴瘤与NK/T细胞淋巴瘤比较有显著性差异(P<0.01)。结论:穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标志物,可作为NK/T细胞淋巴瘤的诊断性标志物;其在T细胞淋巴瘤中的表达反映了机体的抗肿瘤免疫反应机制。组织芯片技术具有高信息量、简捷、高效、实验误差小、重复性好等优点,可作为研究淋巴瘤的有用工具。 展开更多
关键词 淋巴瘤 组织芯片 免疫组化 穿孔素 颗粒酶B
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