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彭波半细毛羊冷冻保存睾丸组织支持细胞分离、纯化及鉴定 被引量：1
1
作者 刘海霞 王健 +4 位作者 平措班旦 朱爱文 德庆卓嘎 王军 格桑加措 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期249-257,共9页
[目的]睾丸支持细胞(Sertoli cells, SCs)位于生精小管内上皮,为不同分化阶段雄性生殖细胞发育提供物理构架和能量物质支持,对精子发生过程产生至关重要的作用。试验旨在研究新鲜绵羊睾丸组织样品获取不便的情况下,从冷冻保存的彭波半... [目的]睾丸支持细胞(Sertoli cells, SCs)位于生精小管内上皮,为不同分化阶段雄性生殖细胞发育提供物理构架和能量物质支持,对精子发生过程产生至关重要的作用。试验旨在研究新鲜绵羊睾丸组织样品获取不便的情况下,从冷冻保存的彭波半细毛羊睾丸组织分离支持细胞的技术方法。[方法]将冷冻保存液预处理后冻存的彭波半细毛羊睾丸组织进行复苏,采用苏木精-伊红(HE)染色检测复苏后睾丸组织形态,利用组合酶消化法、差速贴壁法进行睾丸组织支持细胞分离纯化培养,观察细胞生长规律,绘制生长曲线,采用RT-PCR和免疫荧光染色(IF)技术进行睾丸支持细胞特异性基因鉴定。[结果]冻存复苏睾丸组织曲细精索及睾丸间质保存完好。组合酶消化后能获得满足试验需要的生精上皮细胞混悬液,分离培养2~4 h后支持细胞贴壁,形态呈梭形或不规则多边形,培养3~4 d后汇合,其中培养1~2 d生长速度缓慢,培养3~6 d进入对数期,增殖速度加快,培养7~8 d后增殖速度下降。RT-PCR检测显示,GNDF、WT1、ABP、SOX9基因均在彭波半细毛羊睾丸支持细胞中特异性表达;免疫荧光染色显示,特异性抗体GATA4、Vimentin免疫阳性。[结论]经冻存液预处理的冷冻保存睾丸组织复苏后,可分离出满足试验条件的原代支持细胞,应用于科学试验研究。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 冷冻保存 睾丸支持细胞 分离鉴定 细胞培养
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玉米赤霉烯酮致彭波半细毛羊睾丸支持细胞增殖凋亡、氧化应激及NAC保护机制
2
作者 朱爱文 王健 +6 位作者 朱戈辉 刘海霞 平措班旦 王军 德庆卓嘎 闫伟 韩大勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2752-2764,共13页
旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞... 旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞进行体外染毒试验,试验组ZEA染毒剂量分别为25、50、100、200μmol·L^(-1),对照组(NC组)仅添加0.1%DMSO,每组3个重复,筛选ZEA试验浓度。采用组合酶消化法、差速贴壁法和免疫荧光染色(IF)法进行彭波半细毛羊睾丸组织支持细胞分离、纯化培养及特异性抗体GATA4和Vimentin鉴定。CCK-8法、EdU法检测睾丸组织支持细胞活率及增殖能力。qRT-PCR和Western blot技术从转录和翻译水平检测细胞增殖(pcna)、凋亡(bax、caspase3、caspase 9)和氧化应激(cat、gsh-px、sod 1)等相关基因和蛋白的表达变化规律以及NAC的保护作用。结果发现,组合酶消化法和差速贴壁法能够获得满足ZEA染毒试验的SCs,随ZEA染毒浓度升高,SCs细胞活性和细胞增殖数量逐渐下降,200μmol·L^(-1)ZEA处理组SCs活性和细胞增殖数量极显著低于NC组(P<0.01);细胞增殖基因pcna的mRNA相对表达量和蛋白表达量均极显著低于NC组(P<0.01);促凋亡相关基因bax、caspase3、caspase 9的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P<0.01),CASPASE3蛋白表达量极显著高于NC组(P<0.01),BAX、CASPASE9蛋白表达量显著高于NC组(P<0.05);抗凋亡基因bcl-2的mRNA相对表达量和蛋白表达量显著低于NC组(P<0.05);氧化应激相关基因gsh-px和sod 1的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P<0.01),cat的mRNA相对表达量显著高于NC组(P<0.05),CAT、SOD1蛋白表达量极显著于NC组(P<0.01)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,与NC组对比,试验组cleaved-CASPASE-9、cleaved-CASPASE-3蛋白表达量极显著下降(P<0.01),BAX蛋白表达量显著下降(P<0.05),BCL-2蛋白表达量显著上升(P<0.05)。综上表明,ZEA暴露能够对彭波半细毛羊产生生殖毒性,抑制睾丸SCs增殖,促进SCs凋亡,导致SCs发生氧化损伤,而NAC对ZEA诱导的彭波半细毛羊睾丸SCs氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 玉米赤霉烯酮 睾丸 支持细胞 增殖凋亡 氧化应激 N-乙酰半胱氨酸
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HSPA2和SPATA6在彭波半细毛羊睾丸组织中的细胞定位及表达差异分析 被引量：2
3
作者 朱爱文 刘海霞 +5 位作者 德庆卓嘎 韩大勇 格桑加措 闫伟 平措班旦 朱戈辉 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期967-974,共8页
热休克蛋白A2(HSPA2)是热休克蛋白HSP70家族重要成员,能够促进睾丸支持细胞增殖;精子发生相关基因6(SPATA6)能够调控肌球蛋白合成的微丝运输系统,影响精子细胞骨架形成。在雄性哺乳动物生殖过程中,两者均起重要作用。为研究HSPA2和SPATA... 热休克蛋白A2(HSPA2)是热休克蛋白HSP70家族重要成员,能够促进睾丸支持细胞增殖;精子发生相关基因6(SPATA6)能够调控肌球蛋白合成的微丝运输系统,影响精子细胞骨架形成。在雄性哺乳动物生殖过程中,两者均起重要作用。为研究HSPA2和SPATA6在雄性彭波半细毛羊生殖过程中的表达规律和细胞定位,以不同年龄阶段(3月龄、12月龄和3岁龄)彭波半细毛羊睾丸组织为研究对象,运用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色法(IHC)从转录和翻译水平检测了HSPA2和SPATA6在不同年龄阶段彭波半细毛羊睾丸组织的表达水平和分布模式,分析预测HSPA2和SPATA6在彭波半细毛羊睾丸发育和精子发生过程中的调控作用。结果表明:12月龄和3岁龄彭波半细毛羊睾丸组织中HSPA2 mRNA的相对表达量以及蛋白表达量极显著高于3月龄(P<0.01);12月龄SPATA6 mRNA的相对表达量以及蛋白表达量极显著高于3月龄(P<0.01),显著高于3岁龄(P<0.05)。不同年龄阶段彭波半细毛羊睾丸组织的支持细胞和间质细胞中HSPA2和SPATA6蛋白均有分布。初步推断,HSPA2和SPATA6的表达水平变化在调控彭波半细毛羊精子发生过程和促进精子成熟中具有重要作用。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 热休克蛋白A2 精子发生相关基因6 睾丸 表达定位 免疫组化 蛋白质免疫印迹
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彭波半细毛羊屠宰性能与肉质特性研究 被引量：1
4
作者 巴桑吉巴 拉旺欧珠 +1 位作者 索朗 次旦卓嘎 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第3期88-93,共6页
为更好地开发利用彭波半细毛羊遗传资源,从西藏自治区林周县种羊场选取相同饲养管理条件下的8月龄彭波半细毛公羊和母羊各8只,测定了屠宰性能和肉质特性。结果表明,8月龄彭波半细毛母羊的背膘厚度、背最长肌干物质含量、脂肪含量、必需... 为更好地开发利用彭波半细毛羊遗传资源,从西藏自治区林周县种羊场选取相同饲养管理条件下的8月龄彭波半细毛公羊和母羊各8只,测定了屠宰性能和肉质特性。结果表明,8月龄彭波半细毛母羊的背膘厚度、背最长肌干物质含量、脂肪含量、必需氨基酸含量、必需氨基酸/氨基酸总量(EAA/TAA)、必需氨基酸/非必需氨基酸(EAA/NEAA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)和n-6 PUFA含量均显著高于公羊(P<0.05);公羊背最长肌的亮度(L^(*))、剪切力、水分含量、鲜味氨基酸、非必需氨基酸/氨基酸总量(NEAA/TAA)、二十碳二烯酸含量和花生四烯酸含量均显著高于母羊(P<0.05)。且公、母羊肉的EAA/TAA均超过40%,EAA/NEAA均在67%左右。综上说明,8月龄彭波半细毛羊羊肉属于优质蛋白质,母羊肉的嫩度和营养价值优于公羊肉,公羊肉的色泽更鲜亮、口感更鲜美。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 屠宰性能 肉质特性
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产双羔彭波半细毛羊发情期卵巢基因表达差异研究 被引量：4
5
作者 张立 普布次仁 +4 位作者 胡亚东 扎西 洛桑催成 次仁曲珍 德庆卓嘎 《四川动物》 北大核心 2020年第2期156-166,共11页
彭波半细毛羊是西藏自治区第一个国家级家畜新品种,对其产羔性状的研究有助于推动藏绵羊繁殖力研究工作。为研究产双羔彭波半细毛羊发情期内卵巢基因的特异调控模式,采用转录组测序对其差异表达基因进行了筛选和分析。结果发现,双羔组... 彭波半细毛羊是西藏自治区第一个国家级家畜新品种,对其产羔性状的研究有助于推动藏绵羊繁殖力研究工作。为研究产双羔彭波半细毛羊发情期内卵巢基因的特异调控模式,采用转录组测序对其差异表达基因进行了筛选和分析。结果发现,双羔组相对于单羔组有1 021个基因表达上调,1 468个基因表达下调。GO和KEGG分析发现,上调基因主要与细胞膜结构相关,下调基因主要与物质代谢等相关。其中,上调基因显著富集于与细胞膜相关的细胞粘附、细胞运动、物质运输、信号转导等生命活动。研究结果表明,双羔组卵巢内细胞的物质运输和信号转导频率加快,以促进卵泡的分化和发育;同时,双羔组卵巢内细胞的粘附及运动功能增强,有利于卵母细胞的发育和成熟卵子的排出。此外,卵巢中细胞粘附因子、TGF-beta信号通路和溶质运载蛋白家族基因的上调表达可作为彭波半细毛羊产双羔性状的潜在信号进行更深入的研究。研究结果不仅有利于对彭波半细毛羊产双羔性状的研究和利用,更有利于人们对藏绵羊繁育力的深入研究。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 产羔数性状 卵巢发育 转录组测序 差异表达基因
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拉萨河谷冬春季放牧与舍饲彭波半细毛羊牧草、血液及被毛矿物质含量 被引量：10
6
作者 张晓庆 金艳梅 +1 位作者 武俊喜 田发益 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期124-129,共6页
为分析拉萨河谷冬春季放牧与舍饲彭波半细毛羊采食牧草、血液及被毛中主要矿物质元素的含量,试验选用1.5岁左右彭波半细毛羊母羊60只,随机分为放牧组(GZ)和舍饲组(IF)进行试验。结果表明:试验所用牧草矿物质元素,除钼外其他元素含量均... 为分析拉萨河谷冬春季放牧与舍饲彭波半细毛羊采食牧草、血液及被毛中主要矿物质元素的含量,试验选用1.5岁左右彭波半细毛羊母羊60只,随机分为放牧组(GZ)和舍饲组(IF)进行试验。结果表明:试验所用牧草矿物质元素,除钼外其他元素含量均为绿麦草>冬季天然牧草。冬季天然牧草磷、镁、硫、铜、锰、锌和硒及绿麦草镁含量低于正常范围。(2)舍饲组血清钙(P=0.026)、硫(P=0.030)、铜(P=0.011)和钼(P=0.014)含量高于放牧组,镁(P=0.090)、铁(P=0.071)、锌(P=0.083)和碘(P=0.066)含量有增高的趋势;其被毛钙(P=0.003)、磷(P=0.006)、镁(P<0.001)、铁(P=0.022)、锰(P<0.001)和碘(P=0.012)含量均高于后者,铜含量有增高的趋势(P=0.068)。在血液和被毛中,放牧组血清铜、锰及被毛铜、锰和硒含量及舍饲组血锰及被毛锰、硒含量均低于推荐值。以上结果表明,拉萨河谷冬春季放牧彭波半细毛羊钙、铁、钼和碘充足,但磷、镁、硫、铜、锰、锌和硒缺乏或不足;舍饲(以谷物为主的精补料+绿麦草干草)能有效解决磷、镁、硫、铜、锌和硒的缺乏问题,但锰仍需补充。 展开更多
关键词 西藏 彭波半细毛羊 矿物质元素 硒 锰 缺乏
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彭波半细毛羊羊毛品质分析研究 被引量：5
7
作者 央金 扎西 +3 位作者 德庆卓嘎 普布次仁 洛桑崔成 王宝闯 《草食家畜》 2009年第3期29-32,共4页
彭波半细毛羊是西藏和平解放后用引进的苏联美利奴和新疆细毛羊杂交改良当地彭波羊的基础上,引入了茨盖、边区莱斯特等半细毛羊品种进行多品种复合杂交育成的半细毛羊新品种。以毛用为主,具有良好的产毛性能。彭波半细毛羊一级成年公、... 彭波半细毛羊是西藏和平解放后用引进的苏联美利奴和新疆细毛羊杂交改良当地彭波羊的基础上,引入了茨盖、边区莱斯特等半细毛羊品种进行多品种复合杂交育成的半细毛羊新品种。以毛用为主,具有良好的产毛性能。彭波半细毛羊一级成年公、母羊毛长分别为10.56cm、10.8cm,剪毛量分别5.0kg、2.5kg,剪毛后体重分别71.2kg、29.1kg,毛长比当地河谷羊分别增加3.35cm、3.06cm;剪毛后体重分别增加41.92kg,10.38kg,羊毛综合品质达到半细毛羊的优良品质特征,净毛率达到60%以上,纯白率达到86.47%,主体支数为48～58支,均呈正态分布,羊毛干态单纤维强力超过了优质羊毛的干态单纤维强度,指标为0.9-1.6Cn/dtex,化学组成除碳、氮元素外,其他均高于林肯羊,氨基酸总量达到80%,羊毛异质率下降到5%以下。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 羊毛品质 分析
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周岁彭波半细毛羊羊毛品质分析 被引量：2
8
作者 格桑加措 平措班旦 拉旺欧珠 《中国草食动物科学》 CAS 2023年第6期80-82,共3页
为了解彭波半细毛羊的羊毛品质,随机选择1周岁的彭波半细毛羊公羊7只,母羊21只,采集其肩部、体侧和股部羊毛,统计分析平均纤维直径、洗净率、毛丛自然长度、卷曲度、伸直率和油汗比例等指标。结果表明,周岁公羊的肩部羊毛纤维直径显著... 为了解彭波半细毛羊的羊毛品质,随机选择1周岁的彭波半细毛羊公羊7只,母羊21只,采集其肩部、体侧和股部羊毛,统计分析平均纤维直径、洗净率、毛丛自然长度、卷曲度、伸直率和油汗比例等指标。结果表明,周岁公羊的肩部羊毛纤维直径显著低于母羊(P<0.05),公羊各部位羊毛毛丛自然长度极显著低于母羊(P<0.01),公羊肩部羊毛卷曲度极显著高于母羊(P<0.01),公羊各部位羊毛的油汗比例极显著低于母羊(P<0.01)。综上,彭波半细毛羊的羊毛品质较好,但其色度和公羊的毛丛自然长度仍有改善的空间。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 羊毛 品质
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放牧与舍饲对彭波半细毛羊瘤胃细菌群落的生物学信息影响 被引量：13
9
作者 田发益 武俊喜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2252-2263,共12页
旨在通过不同蛋白质、非纤维性碳水化合物(NFC)和纤维素含量对瘤胃微环境细菌群落结构的影响研究,阐明瘤胃优势菌群结构的消长情况,清晰地了解瘤胃微生物对养分的依赖程度,以期为西藏传统放牧补饲及规模化养殖营养配比奠定理论基础。本... 旨在通过不同蛋白质、非纤维性碳水化合物(NFC)和纤维素含量对瘤胃微环境细菌群落结构的影响研究,阐明瘤胃优势菌群结构的消长情况,清晰地了解瘤胃微生物对养分的依赖程度,以期为西藏传统放牧补饲及规模化养殖营养配比奠定理论基础。本研究选用年龄2岁左右,体重相近((23.77±2.34)kg)的健康彭波半细毛母羊20只,放牧组及舍饲组各10只(每组各2个重复,每个重复5只)。采用凯氏定氮法、范氏(van soest)法和差值法分别测定放牧组可饲用牧草混合样、舍饲组饲草的粗蛋白、纤维素、NFC含量。饲养半年后,抽取瘤胃液,提取总DNA,构建重组标准质粒对瘤胃细菌进行绝对荧光定量(qRT-PCR)研究。结果:1)在门水平上,发现优势菌群集中在拟杆菌门,其在放牧组的丰度((49.52±6.07)%)比舍饲组((55.52±12.18)%)低6.00%,但差异不显著(P>0.05);放牧组厚壁菌门的丰度((43.28±4.59)%)比舍饲组((36.68±9.78)%)高6.60%,两组差异显著(P<0.05);放牧组螺旋体门的丰度((1.99±1.75)%)比舍饲组((0.76±0.59)%)高1.23%,两组差异显著(P<0.05)。2)通过PLS-DA和LEfSe分析发现,两组间均差异显著的主要细菌有:纤维素或其代谢产物主要依赖菌(放牧组)为假丁酸弧菌属(Pseudobutyrivibrio)、月形单胞菌属(Selenomonas)、粪球菌属(Coprococcus)、梭菌属(Clostridium)、厌氧弧菌属(Anaerovibrio)、毛螺旋菌科下一属(Shuttleworthia)、类普雷沃氏菌科下一属(CF231)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)、类普雷沃氏菌科下一属(YRC22)、毛螺菌属(Lachnospira)、毛螺菌科下一属(Moryella);高蛋白和NFC或其代谢产物主要依赖菌(舍饲组)为脱硫叶菌属(Desulfobulbus)、奇异菌属(Atopobium)、韦荣球菌科下一属(p-75-a5)、普氏菌属(Prevotella)、布劳特氏菌属(Blautia)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)和链球菌属(Streptococcus)。结果说明,合理蛋白质能量水平的饲料,不仅利于蛋白、淀粉依赖菌的增殖,也有利于主要纤维降解菌(瘤胃球菌属(Ruminococcus))和协同纤维降解菌(普氏菌属(Prevotella))的增殖。同时,舍饲组中纤维素分解菌(厚壁菌门(Firmicutes)和螺旋体门(Spirochaetes))的整体丰度值出现显著下降。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 TMR 丰度 瘤胃细菌 OTUs 放牧组和舍饲组
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彭波半细毛羊羊肉风味物质的鉴定与分析 被引量：3
10
作者 洛桑催成 次仁曲珍 +1 位作者 平措班旦 格桑加措 《中国草食动物科学》 CAS 2023年第6期29-34,共6页
为探究彭波半细毛羊羊肉的挥发性风味物质,选择体重相近、健康状况良好的8月龄公母羊各10只,屠宰后采集胴体左侧部位的背最长肌,采用顶空气相色谱-离子迁移谱(HS-GC-IMS)联用技术对肉品挥发性风味物质进行鉴定。结果表明,彭波半细毛羊... 为探究彭波半细毛羊羊肉的挥发性风味物质,选择体重相近、健康状况良好的8月龄公母羊各10只,屠宰后采集胴体左侧部位的背最长肌,采用顶空气相色谱-离子迁移谱(HS-GC-IMS)联用技术对肉品挥发性风味物质进行鉴定。结果表明,彭波半细毛羊公、母羊肉品中均鉴定出40种挥发性物质,其中35种物质被定性,包括醛类5种、酮类6种、醇类5种、酯类4种、烃类6种、杂环类9种;有5种未被定性出明确化合物。离子迁移差异图谱和指纹图谱结果显示,母羊与公羊肉样中挥发性风味物质差异较大,其中母羊B2、B4和B5号样品中15种物质(如2-庚酮、1-戊醇等)的含量高于公羊。对公、母羊肉品中挥发性风味物质含量的分析结果表明,母羊肉品中的(E)-2-辛烯醛、3-壬烯-2-酮和2-甲基吡嗪含量显著高于公羊(P<0.05);公羊肉品中糠醇单聚体含量显著高于母羊(P<0.05);其余已定性的物质含量在公、母羊肉品间无显著差异(P>0.05)。综上说明,彭波半细毛羊母羊肉品中有含量较高的香味物质。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 挥发性风味物质 气相色谱-离子迁移谱
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