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角膜上皮细胞Pax-6基因表达分析(英文) 被引量:3
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作者 潘志强 张文华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2001年第2期97-100,共4页
目的 检测体外培养角膜上皮细胞Pax-6基因的达,探讨维持角膜缘干细胞特性的基因因素。 方法 地高辛标记cDNA探针进行DNA印迹杂交和蛋白质免疫印迹,检测培养的角膜上皮细胞中Pax-6基因表达状况。 结果 EcoR Ⅰ... 目的 检测体外培养角膜上皮细胞Pax-6基因的达,探讨维持角膜缘干细胞特性的基因因素。 方法 地高辛标记cDNA探针进行DNA印迹杂交和蛋白质免疫印迹,检测培养的角膜上皮细胞中Pax-6基因表达状况。 结果 EcoR Ⅰ酶切角膜缘上皮细胞中9.1kbp的DNA片断与探针序列相同,其中原位和原代培养细胞、传第1代明显测出,角膜中央上皮细胞的原位和原代细胞中也能测出。Western Blot发现抗血清11认识相对分子质量为81×103和55×103两种角膜上皮细胞蛋白,抗血清13认识60×103的角膜上皮细胞蛋白,原位和原代、传第1代角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均能够测出,角膜缘传第3代细胞和角膜基质细胞不表达。 结论 角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均具有Pax-6基因,该基因的正常表达是维持角膜上皮细胞特性的必要条件。 展开更多
关键词 角膜上皮细胞 pax-6基因 免疫印迹分析
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同源盒基因Pax-6在晶状体发育过程中的表达分析 被引量:3
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作者 夏朝霞 刘奕志 刘欣华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第1期4-7,共4页
目的 建立晶状体连续发育模型,检测Pax-6基因在小鼠晶状体发育的不同阶段的表达情况,探讨该基因在小鼠晶状体发育中的作用。 方法 利用RT-PCR法和Western blot法,检测Pax-6在小鼠晶状体发育不同阶段中的表达状况。 结果 在鼠胚9.5 d(E 9... 目的 建立晶状体连续发育模型,检测Pax-6基因在小鼠晶状体发育的不同阶段的表达情况,探讨该基因在小鼠晶状体发育中的作用。 方法 利用RT-PCR法和Western blot法,检测Pax-6在小鼠晶状体发育不同阶段中的表达状况。 结果 在鼠胚9.5 d(E 9.5)即可检测到Pax-6的表达,在其连续发育阶段的E12.5,E17.5及新生10、20、60 d均可检测到Pax-6的表达。Western blot法同样发现在体外培养的原代细胞,传第1、第2及第3代的晶状体上皮细胞(LECs)中均能检测到Pax-6蛋白水平的表达。 结论 小鼠晶状体发育的各个阶段均具有Pax-6基因,该基因的正常表达是晶状体发育的必要条件。 展开更多
关键词 pax-6基因 晶状体 发育模型 蛋白 同源盒基因
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同源盒基因Pax-6在鼠晶状体上皮细胞中的表达分析
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作者 夏朝霞 刘奕志 吴艺 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期54-56,共3页
【目的】检测体外培养的鼠晶状体上皮细胞 LECs,内 Pax-6基因的表达,探讨维持晶状体上皮细胞特性的基因因素。【方法】利用免疫组织化学法和免疫印迹法,检测培养的 LgCs 中 Pax-6基因的表达状况。【结果】在原代培养细胞、传第1代及传第... 【目的】检测体外培养的鼠晶状体上皮细胞 LECs,内 Pax-6基因的表达,探讨维持晶状体上皮细胞特性的基因因素。【方法】利用免疫组织化学法和免疫印迹法,检测培养的 LgCs 中 Pax-6基因的表达状况。【结果】在原代培养细胞、传第1代及传第2代的 LgCs 中明显检测到 Pax-6的阳性表达。免疫印迹同样发现在原代培养细胞、传第1代及传第2代的 LECs 中均能检测到 Pax-6蛋白水平的表达,传第3代细胞表达微弱。阴性对照在各阶段点未见 Pax-6的表达。【结论】晶状体囊膜上的 LECs 具有 Pax-6基因,该基因的正常表达是维持 LECs 特性的必要条件。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 pax-6基因 免疫组织化学 免疫印迹 基因表达 小鼠
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晶状体上皮细胞增生与Pax-6表达的相关分析 被引量:2
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作者 夏朝霞 吴艺 +1 位作者 冯志贞 陈向华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第7期618-622,共5页
目的检测Pax-6基因在体外培养的不同阶段小鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)中的表达,分析其与LECs增生特性的关系。方法 利用囊膜组织块贴壁法及胰酶消化法体外培养不同阶段LECs;免疫组织化学法检测LECs中Pax-6蛋白表达... 目的检测Pax-6基因在体外培养的不同阶段小鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)中的表达,分析其与LECs增生特性的关系。方法 利用囊膜组织块贴壁法及胰酶消化法体外培养不同阶段LECs;免疫组织化学法检测LECs中Pax-6蛋白表达情况;并利用RT-PCR法检测其mRNA水平的表达情况。结果 在原代培养细胞、传第1代及传第2代的LECs中明显检测到Pax-6mRNA水平的阳性表达,LECs相应各泳道有一与227 bp相一致的扩增片段;RT-PCR法同样发现在原代培养细胞、传第1代及传第2代、传第3代的LECs中均能检测到Pax-6蛋白水平的表达,Pax-6标记指数分别为11.75%、20.00%、26.75%、5.25%,Pax-6阳性物质染色呈弥漫性、均一性分布于LECs细胞核内。阴性对照组在各阶段均未见Pax-6的表达。结论 LECs中有Pax-6基因存在,该基因的正常表达与LECs增生特性相关。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 增生 pax-6基因 免疫组织化学 RT—PCR
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