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筛选调控Sonic Hedgehog信号转导的泛素连接酶 被引量:2
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作者 汤颖 乐珅 程雁 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期715-721,共7页
目的 :发现调控Sonic Hedgehog(Shh)信号转导的泛素连接酶。方法 :第一轮筛选,利用荧光素酶报告基因(8×GliBS-Luc)检测系统,检测相应HECT家族E3泛素连接酶的siRNA对Shh信号通路活性的影响;第二轮筛选,利用细胞免疫荧光激光共聚焦... 目的 :发现调控Sonic Hedgehog(Shh)信号转导的泛素连接酶。方法 :第一轮筛选,利用荧光素酶报告基因(8×GliBS-Luc)检测系统,检测相应HECT家族E3泛素连接酶的siRNA对Shh信号通路活性的影响;第二轮筛选,利用细胞免疫荧光激光共聚焦检测系统,检测上述siRNA对Shh的受体Ptch1蛋白原纤毛定位的影响。综合2轮筛选结果,初步发现影响Shh信号通路活性的HECT家族E3泛素连接酶。结果:通过2轮筛选,发现Smurf1、Smurf2、Ube3c、Wwp1、Wwp2共5个泛素连接酶,不仅能调节Ptch1蛋白的原纤毛定位,也可以增加通路下游转录因子Gli的活性。结论:建立了筛选调控Shh信号通路的泛素连接酶的平台。在初步筛选的27个HECT E3泛素连接酶中,有5个成员参与调控Shh信号通路。 展开更多
关键词 Sonic HEDGEHOG信号通路 HECT E3泛素连接酶 patched1 原纤毛
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