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丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂基因nvpp-1和nvpp-2的功能研究 被引量：7
1
作者 钱岑 方琦 +1 位作者 王磊 叶恭银 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期841-853,共13页
Pacifastin蛋白酶抑制剂在昆虫免疫与发育中起着重要作用。为了明确其在寄生蜂中的相关功能,本研究分别克隆获得编码丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂开放阅读框的cDNA序列nvpp-1和nvpp-2,序列长度分别为723和888 bp,分别编码240和... Pacifastin蛋白酶抑制剂在昆虫免疫与发育中起着重要作用。为了明确其在寄生蜂中的相关功能,本研究分别克隆获得编码丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂开放阅读框的cDNA序列nvpp-1和nvpp-2,序列长度分别为723和888 bp,分别编码240和295个氨基酸残基。预测结果表明,nvpp-1和nvpp-2推导氨基酸序列N端均含一个长度为17个氨基酸残基的信号肽序列。序列分析和进化树构建结果表明,NVPP-1和NVPP-2分别含有5个和4个典型的Pacifastin保守结构域,并与疑黑瘤姬蜂Pimpla hypochondriaca毒液蛋白CVP4聚为一类。实时荧光定量RT-PCR结果表明,nvpp-1和nvpp-2于该蜂雌蜂各组织中均发生转录,且在胸、腹部残体(解剖后腹部剩余部分)和毒器官中的转录水平较高;于毒器官中,其在羽化初期(0和1 d)转录水平较高,其转录水平显著降低。Western blot结果表明,NVPP-1和NVPP-2均只在毒液中被大量检出,在其他待测组织中均未被检出,而刚羽化时(0 d)其在毒液中含量较低。利用pET-28a(+)载体分别对nvpp-1和nvpp-2进行了原核表达,并对重组表达产物进行纯化。分别测定重组NVPP-1和NVPP-2对4种不同丝氨酸蛋白酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、蛋白酶K和弹性蛋白酶)的抑制效果,结果表明,重组NVPP-1和NVPP-2分别能显著抑制糜蛋白酶和胰蛋白酶活性。同时还分别测定了两种重组蛋白对寄主家蝇蛹血淋巴自身的酚氧化酶活性及原酚氧化酶激活反应的影响,结果表明,重组蛋白对家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应亦有抑制效果,但其均不能显著影响血淋巴自身的酚氧化酶活性。综上所述,丽蝇蛹集金小蜂毒液中含有Pacifastin蛋白酶抑制剂NVPP-1和NVPP-2,分别为糜蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶抑制剂家族成员,均能显著影响寄主家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应,从而削弱寄主体液免疫水平。本研究所获结果加深了我们对昆虫尤其是寄生蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂作用的认识。 展开更多
关键词 丽蝇蛹集金小蜂 家蝇 丝氨酸蛋白酶抑制剂 pacifastin蛋白酶 体液免疫 转录水平 酶活性
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超声协同中性蛋白酶辅助提取青鱼皮明胶的响应面优化工艺研究 被引量：1
2
作者 陈文娟 陈建福 庄远红 《渔业现代化》 北大核心 2025年第1期110-118,共9页
为探究青鱼皮明胶的最佳提取工艺,提高青鱼的附加产值。以青鱼皮为原料,以明胶提取率为响应值,基于单因素试验结果,选定关键工艺参数超声时间、酶用量、酶解时间和酶解温度进行Box-Behnken试验设计,探讨各参数及其交互作用对明胶提取率... 为探究青鱼皮明胶的最佳提取工艺,提高青鱼的附加产值。以青鱼皮为原料,以明胶提取率为响应值,基于单因素试验结果,选定关键工艺参数超声时间、酶用量、酶解时间和酶解温度进行Box-Behnken试验设计,探讨各参数及其交互作用对明胶提取率的影响,构建了回归模型,并用红外光谱对所取的明胶进行表征。结果显示:青鱼皮明胶的最佳提取工艺条件为:超声时间125 min、酶用量0.22%、酶解时间154 min和酶解温度45℃,在此条件下进行3次平行试验验证,得到的青鱼皮明胶提取率平均值为18.28%,与预测值之间的相对误差仅为0.22%,这充分证明了所建回归模型的可靠性和高精度。红外光谱表明所提取的物质具有明胶的基本特征。该研究为青鱼皮资源在明胶的开发与应用提供技术参考。 展开更多
关键词 超声 中性蛋白酶 青鱼皮 明胶 响应面优化工艺
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前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9在动脉粥样硬化中多重性效应的研究进展 被引量：1
3
作者 张丹 张小杉 +4 位作者 施依璐 刘笑笑 马岚 赵捷 王雅皙 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第2期245-247,共3页
动脉粥样硬化是大动脉慢性炎症性疾病,是心血管疾病(cardiovascular diseases, CVD)和脑卒中的主要原因[1]。脂质、炎性细胞、泡沫细胞、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)和坏死细胞碎片在血管内壁单层内皮细胞下与... 动脉粥样硬化是大动脉慢性炎症性疾病,是心血管疾病(cardiovascular diseases, CVD)和脑卒中的主要原因[1]。脂质、炎性细胞、泡沫细胞、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)和坏死细胞碎片在血管内壁单层内皮细胞下与内膜空间中积累和转化导致动脉粥样硬化病变,为世界范围内死亡的主要原因,发病及病死率较高[2-4]。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 心血管疾病 卒中 前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9
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产蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定、生长特性及全基因组分析
4
作者 车建美 王阶平 +3 位作者 郑雪芳 陈燕萍 陈冰星 刘波 《中国饲料》 北大核心 2025年第17期34-45,共12页
本研究通过产蛋白酶培养基筛选具有产蛋白酶能力的芽孢杆菌并进行菌株鉴定;利用生长曲线、培养温度、pH及NaCl耐受性测定,研究该菌株的生长特性;采用全基因组分析挖掘其产蛋白基因。结果表明:筛选获得产蛋白酶能力的菌株FJAT-26384,该... 本研究通过产蛋白酶培养基筛选具有产蛋白酶能力的芽孢杆菌并进行菌株鉴定;利用生长曲线、培养温度、pH及NaCl耐受性测定,研究该菌株的生长特性;采用全基因组分析挖掘其产蛋白基因。结果表明:筛选获得产蛋白酶能力的菌株FJAT-26384,该菌株的蛋白酶活性为66.67 U/mL。经鉴定,该菌株为侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)。该菌株在30~50℃,pH 7~9及NaCL浓度为0~2%时均可生长。菌株FJAT-26384的基因组由1条环状染色体组成,大小约为5523271 bp,GC含量为40.72%。经Antismash 5.1.2预测和分析,菌株FJAT-26384基因组具有19个次级代谢产物基因簇;通过对菌株FJAT-26384全基因组上蛋白酶相关基因的筛查与统计发现,共筛查到33个与蛋白酶相关的基因。 展开更多
关键词 蛋白酶 侧孢短芽孢杆菌 生长特性 基因组 基因
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慢性心功能不全急性加重患者血清组织蛋白酶与血脂代谢及病情程度的关系
5
作者 许静 牛林 +2 位作者 王卫国 储红颍 王伟 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第7期858-862,共5页
目的探讨血清组织蛋白酶L(cathepsin-L,CTSL)在慢性心力衰竭(chronicheartfailure,CHF)急性加重患者中的变化,及其与血脂代谢指标和病情程度的关系。方法前瞻性选取2021年2月至2024年10月阜阳市人民医院心血管内科收治的老年CHF急性加... 目的探讨血清组织蛋白酶L(cathepsin-L,CTSL)在慢性心力衰竭(chronicheartfailure,CHF)急性加重患者中的变化,及其与血脂代谢指标和病情程度的关系。方法前瞻性选取2021年2月至2024年10月阜阳市人民医院心血管内科收治的老年CHF急性加重患者186例,测定患者血清CTSL和血脂代谢指标,根据CTSL四分位数分为A组(CTSL≤3.31μg/L)47例、B组(3.31μg/L<CTSL≤3.70μg/L)46例、C组(3.70μg/L<CTSL<4.41μg/L)47例和D组46例(CTSL≥4.41μg/L)。比较4组患者一般临床资料、血脂代谢和病情程度。采用Pearson相关性分析CTSL与血脂代谢指标,用有序回归模型、限制性立方样条图分析血清CTSL与CHF急性加重患者病情程度的关系。结果各组CHF急性加重患者总胆固醇(totalcholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoproteincholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-densitylipoprotein cholesterol,LDL-C)比较有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。Pearson相关性分析显示,血清CTSL与CHF急性加重患者TC、TG、LDL-C呈正相关(r=0.203,P=0.005;r=0.178,P=0.015;r=0.184,P=0.012),与HDL-C呈负相关(r=-0.344,P=0.000)。有序回归分析显示,血清CTSL水平是影响CHF急性加重患者病情程度独立危险因素(P<0.05)。限制性立方样条图分析显示,血清CTSL水平与老年CHF急性加重患者病情程度呈线性关系(χ^(2)=3.140,P=0.371),血清CTSL>3.73μg/L时,老年CHF急性加重患者病情程度显著增加。结论血清CTSL水平与老年CHF急性加重患者血脂代谢水平密切相关,且是影响患者病情程度的独立危险因素。 展开更多
关键词 脂类 代谢 组织蛋白酶L 心力衰竭 病情程度
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胱天蛋白酶募集域蛋白9在重症急性胰腺炎巨噬细胞M1极化中的作用
6
作者 王琳 徐萍 +3 位作者 张乔婷 田军 娄晓丽 王静 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第8期981-989,共9页
目的·探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containing protein 9,CARD9)是否参与调控重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)巨噬细胞极化。方法·将SD大鼠随机分为4组,分别为对照组、SAP组、SAP+C... 目的·探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containing protein 9,CARD9)是否参与调控重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)巨噬细胞极化。方法·将SD大鼠随机分为4组,分别为对照组、SAP组、SAP+CARD9 shRNA组和SAP+Control shRNA组,每组6只。在SAP大鼠造模前48 h,经尾静脉注射CARD9 shRNA干扰腺病毒。造模后12 h收集标本,采用H-E染色评估胰腺组织病理变化,运用real-time PCR法检测大鼠腹腔巨噬细胞CARD9及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、精氨酸酶-1(arginase 1,Arg-1)的基因表达水平,通过Western blotting法检测腹腔巨噬细胞CARD9蛋白表达水平,利用流式细胞技术检测大鼠腹腔巨噬细胞极化类型。结果·SAP组、SAP+CARD9 shRNA组、SAP+Control shRNA组中CARD9基因及CARD9蛋白表达水平均明显高于对照组,显示CARD9干扰成功(P<0.001)。SAP+CARD9 shRNA组与SAP组相比:血清淀粉酶水平、胰腺组织病理评分明显降低;腹腔巨噬细胞促炎细胞因子TNF-α、IL-6水平明显降低,抗炎细胞因子IL-10、Arg-1水平升高;M1型巨噬细胞明显减少、M1/M2比值降低。腹腔巨噬细胞CARD9 mRNA水平与TNF-α mRNA、IL-6 mRNA水平及M1型巨噬细胞数量呈正相关。结论·CARD9促进SAP大鼠巨噬细胞M1型极化;下调CARD9表达可通过抑制巨噬细胞M1极化,减轻SAP大鼠炎症反应。 展开更多
关键词 巨噬细胞极化 重症急性胰腺炎 胱天蛋白酶募集域蛋白9 SD大鼠 腹腔巨噬细胞
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白茶柱层析分离过程中化学组分含量与弹性蛋白酶抑制活性的变化
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作者 王丽丽 林清霞 +1 位作者 王晨旭 陈林 《茶叶学报》 2025年第3期51-59,共9页
【目的】测定白茶水提物经大孔吸附树脂分离后的弹性蛋白酶抑制活性与化学组分含量变化,为白茶有效活性部位及其组分的提纯制备与综合利用提供基础数据。【方法】以XAD-4离子交换大孔树脂为吸附剂,对白茶水提取物(E0)进行上柱吸附,同步... 【目的】测定白茶水提物经大孔吸附树脂分离后的弹性蛋白酶抑制活性与化学组分含量变化,为白茶有效活性部位及其组分的提纯制备与综合利用提供基础数据。【方法】以XAD-4离子交换大孔树脂为吸附剂,对白茶水提取物(E0)进行上柱吸附,同步收集流出液(E1),再依次用0.5 mol·L^(-1) NaCl和1 mol·L^(-1) HCl混合酸溶液(1∶40,V/V)、纯水和85%乙醇洗脱,分别收集流出液E2、E3和E4,测定柱分离过程中各流出液的茶多酚(Tea polyphenols,TP)、总黄酮(Total flavonoids,TFls)、咖啡碱(Caffeine,CAF)、没食子酸(Gallic acid,GA)和儿茶素类(EGCG、GCG、EC、C、EGC、GC、ECG、CG)等化学组分含量,并评价其对猪胰弹性蛋白酶(Porcine pancreatic elastase,PPE)的荧光猝灭效果,以及分析二者相关性。【结果】白茶提取物(E0)及其4个柱流出液(E1、E2、E3、E4)化学组分测定结果表明,TP和TFls含量排序为E0>E1>E4>E2>E3,且E0、E1、E4相互间差异显著(P<0.05);CAF含量为E0>E4>E1>E2>E3,除E1与E2差异不显著外,其余相互间均差异显著(P<0.05);GA、GC、EGC、C含量为E0>E1>E4,EGCG、EC、GCG、ECG、CG为E0>E4>E1,且相互间均分别达到显著差异(P<0.05)。PPE荧光猝灭活性试验表明,E0、E1和E4对PPE的荧光猝灭率分别为46.0%、29.3%和26.0%,且相互间达到显著差异。皮尔逊相关性分析表明,样品对PPE的荧光猝灭率与其TP、TFls含量的相关系数均达到0.99,呈极显著正相关(P<0.01),与CAF、GA和儿茶素类组分呈正相关,但不显著。【结论】与E0相比,E4中各化学组分均显著降低,荧光猝灭活性也显著降低。白茶对PPE的荧光猝灭活性与其多酚、总黄酮含量密切相关,推测白茶中具有PPE抑制活性的功能物质基础是多酚、总黄酮。 展开更多
关键词 白茶 柱分离 化学组分 弹性蛋白酶 荧光猝灭活性
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肉鸡低蛋白质饲粮添加外源蛋白酶对净能效率的影响 被引量：1
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作者 陈思淼 闫晓刚 +8 位作者 燕磊 卢长吉 安沙 赵晓东 梁浩 李立佳 张琦玉 呙于明 班志彬 《动物营养学报》 北大核心 2025年第2期961-972,共12页
本试验旨在探究在低蛋白质饲粮中添加外源蛋白酶对肉鸡生长性能、屠宰性能和净能利用效率的影响。试验采用2×2析因设计,其中2个饲粮粗蛋白质(CP)水平为参照《爱拔益加(AA)肉鸡饲养管理手册2019》分别降低1(22%)和2个百分点(21%),2... 本试验旨在探究在低蛋白质饲粮中添加外源蛋白酶对肉鸡生长性能、屠宰性能和净能利用效率的影响。试验采用2×2析因设计,其中2个饲粮粗蛋白质(CP)水平为参照《爱拔益加(AA)肉鸡饲养管理手册2019》分别降低1(22%)和2个百分点(21%),2个蛋白酶添加水平分别为0和300 mg/kg。选取1日龄体重接近的AA肉鸡288只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只。试验期21 d。于14~17日龄(其中预试期1 d,正试期3 d)开展呼吸测热试验,并分别于10和21日龄开展屠宰试验。结果表明:1)饲粮CP水平对肉鸡生长性能无显著影响(P>0.05);与未添加蛋白酶相比,饲粮添加300 mg/kg蛋白酶极显著提高1~10日龄和11~21日龄平均日增重(ADG)(P<0.01),显著降低1~10日龄料重比(F/G)(P<0.05)。2)与22%CP水平饲粮相比,21%CP水平饲粮显著降低肉鸡21日龄胸肌率(P<0.05);饲粮添加蛋白酶对屠宰性能无显著影响(P>0.05)。3)与22%CP水平饲粮相比,21%CP水平饲粮极显著降低肉鸡总产热量(THP)和热增耗(HI)(P<0.01),显著降低蛋白质沉积能和氮沉积量(P<0.05),显著提高脂肪沉积能(P<0.05);与未添加蛋白酶相比,饲粮添加300 mg/kg蛋白酶极显著降低THP和HI(P<0.01),显著提高脂肪沉积能(P<0.05),极显著提高净能(P<0.01),并极显著提高净能/表观代谢能和净能/氮校正表观代谢能值(P<0.01)。综上所述,降低饲粮CP水平1~2个百分点对肉鸡生长性能无显著影响,在低蛋白质饲粮中添加外源蛋白酶可以提高净能利用效率并影响能量分配,提高ADG;饲粮净能参数与肉鸡生长性能和屠宰性能指标一致,净能体系可作为外源酶制剂对饲粮能量利用效果的评价指标。 展开更多
关键词 肉鸡 低蛋白质饲粮 蛋白酶 净能效率
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酿酒酵母L3蛋白酶对哈尔滨风干肠品质特性和风味的影响 被引量：1
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作者 刘新平 田佳奇 +2 位作者 王琳 孙方达 孔保华 《食品工业科技》 北大核心 2025年第5期108-117,共10页
为探究酿酒酵母L3蛋白酶对发酵肉制品的品质特性和风味的影响,本实验探讨了不同添加量的酿酒酵母L3蛋白酶对风干肠发酵过程中的蛋白水解、脂质氧化和理化特性的影响,并利用气相色谱法-质谱法联用(Gas chromatograohy-mass spectrometry,... 为探究酿酒酵母L3蛋白酶对发酵肉制品的品质特性和风味的影响,本实验探讨了不同添加量的酿酒酵母L3蛋白酶对风干肠发酵过程中的蛋白水解、脂质氧化和理化特性的影响,并利用气相色谱法-质谱法联用(Gas chromatograohy-mass spectrometry,GC-MS)技术和感官评定对哈尔滨风干肠进行了分析。结果表明,添加酿酒酵母L3蛋白酶能够加速风干肠pH的降低。与自然发酵的风干肠相比,随着蛋白酶添加量的提高,加快了风干肠的水分含量和水分活度的降低,同时红度值(a^(*))和剪切力显著升高(P<0.05)。另外,酿酒酵母L3蛋白酶降低了风干肠发酵过程中的脂质氧化程度。添加酿酒酵母L3蛋白酶后,风干肠中的总游离氨基酸含量增加,同时促进了风味物质的形成。感官评价结果表明,添加1.0 g/kg的酿酒酵母L3蛋白酶对风干肠的气味和鲜味的改善效果最佳,总体可接受度最好。综上所述,酿酒酵母L3蛋白酶对改善发酵肉制品的品质和风味具有积极作用。 展开更多
关键词 酿酒酵母 蛋白酶 哈尔滨风干肠 品质特性 风味
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不同蛋白酶酶解魔芋飞粉工艺优化 被引量：1
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作者 付镓榕 马尚玄 +5 位作者 黄克昌 兰秀华 徐文婷 杨悦雪 魏元苗 郭刚军 《饲料研究》 北大核心 2025年第4期74-79,共6页
试验旨在研究不同蛋白酶对魔芋飞粉的酶解效果。采用液态法酶解魔芋飞粉,以酶解液中多肽含量为指标,采用单因素试验、正交试验优化不同蛋白酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶)的酶解工艺,对比最优酶解条... 试验旨在研究不同蛋白酶对魔芋飞粉的酶解效果。采用液态法酶解魔芋飞粉,以酶解液中多肽含量为指标,采用单因素试验、正交试验优化不同蛋白酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶)的酶解工艺,对比最优酶解条件下不同蛋白酶的酶解液中多肽含量。结果显示,不同蛋白酶的最适条件、酶解效果均存在差异,通过优化酶解工艺能够显著提高酶解效果。酸性蛋白酶的对魔芋飞粉的酶解效果优于其他4种蛋白酶,最优酶解条件为酶解温度65℃、pH值1.5、酶解时间3.0 h、加酶量3600 U/g,其酶解液中多肽含量为7.51g/L。研究表明,酸性蛋白酶酶解有助于实现魔芋飞粉在饲料产业中的高值化利用。 展开更多
关键词 魔芋飞粉 蛋白酶 酶解液 工艺优化 多肽含量
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东方蜜蜂基质金属蛋白酶14基因AcMMP 14的分子特征与表达模式 被引量：1
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作者 刘治滩 叶道有 +8 位作者 宓诗雨 王宁 郑一荻 蒋海宾 吴鹰 徐细建 陈大福 邱剑丰 郭睿 《昆虫学报》 北大核心 2025年第3期282-290,共9页
【目的】本研究旨在克隆东方蜜蜂Apis cerana基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase-14,MMP14)基因AcMMP 14,分析其分子特征和表达模式,为持续深入开展AcMMP 14的功能研究提供参考和依据。【方法】提取东方蜜蜂6日龄工蜂幼虫肠道总... 【目的】本研究旨在克隆东方蜜蜂Apis cerana基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase-14,MMP14)基因AcMMP 14,分析其分子特征和表达模式,为持续深入开展AcMMP 14的功能研究提供参考和依据。【方法】提取东方蜜蜂6日龄工蜂幼虫肠道总RNA,PCR扩增AcMMP 14的编码序列(coding sequence,CDS)。使用相关生物信息学软件预测AcMMP14的理化性质和分子特征,鉴定东方蜜蜂和其他蜂种MMP14的结构域和保守基序,并进行系统进化分析。采用RT-qPCR检测AcMMP 14在工蜂卵、幼虫、预蛹、蛹和不同日龄成虫,工蜂成虫触角、脑、表皮、脂肪体、毒腺、中肠和咽下腺及东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae接种刚出房的1日龄工蜂后1-4 d时中肠中的相对表达量。【结果】AcMMP14的分子式为C 3068 H 4581 N 803 O 915 S 20,分子量约为68.00 kD,脂溶系数为64.12,等电点为5.85,平均亲水系数为-0.47,含1个信号肽和36个磷酸化位点,可同时定位于线粒体、细胞核和细胞质。东方蜜蜂与其他10种蜂的MMP14中均含有3个相同的结构域和5个相同的保守基序。东方蜜蜂与大蜜蜂A.dorsata的MMP14的氨基酸序列一致性达94.23%,且在进化树上聚为一支。AcMMP 14在东方蜜蜂工蜂卵、3日龄幼虫、1和2日龄预蛹及4日龄蛹中差异表达,在4日龄蛹中的表达量最高且显著高于3日龄幼虫和2日龄预蛹中的表达量。AcMMP 14在不同日龄工蜂成虫体内差异表达,在15日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1,2,6,12和17日龄成虫体内的表达量。AcMMP 14在东方蜜蜂工蜂成虫的7种不同组织中差异表达,在触角中的表达量最高且显著高于脑、表皮、脂肪体、毒腺、中肠和咽下腺中的表达量。与未接种的对照组相比,东方蜜蜂微孢子虫接种后1和2 d时工蜂成虫中肠中AcMMP14的表达量显著下调,3和4 d时工蜂成虫中肠中AcMMP14的表达量下调但差异不显著。【结论】AcMMP14为潜在的亲水性蛋白和分泌蛋白;AcMMP 14在东方蜜蜂工蜂不同发育阶段和成虫组织中发挥潜在的重要功能;工蜂成虫中肠中AcMMP 14在东方蜜蜂微孢子虫的第一个增殖周期前期被激活表达。 展开更多
关键词 东方蜜蜂 基质金属蛋白酶 东方蜜蜂微孢子虫 表达模式 分子特征
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蛋白酶体抑制剂心血管毒性监测和管理中国专家共识(2025版) 被引量：1
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作者 中国抗癌协会整合肿瘤心脏病学分会 《蛋白酶体抑制剂心血管毒性监测和管理中国专家共识》专家组 +5 位作者 刘彤 李悦 张志仁 王卫定 邵群 赵志强 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第4期163-171,共9页
蛋白酶体抑制剂是多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)联合治疗的重要组成部分。硼替佐米、卡非佐米和伊沙佐米已批准用于MM治疗,并广泛用于临床。然而蛋白酶体抑制剂(proteasomeinhibitors,PIs)治疗过程中表现出多种心血管不良反应,如心... 蛋白酶体抑制剂是多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)联合治疗的重要组成部分。硼替佐米、卡非佐米和伊沙佐米已批准用于MM治疗,并广泛用于临床。然而蛋白酶体抑制剂(proteasomeinhibitors,PIs)治疗过程中表现出多种心血管不良反应,如心力衰竭、高血压、心律失常、缺血性心脏病、血栓栓塞等增加了多发性骨髓瘤治疗风险,影响患者的预后。因此,识别、监测并管理PIs相关心血管不良反应对改善MM患者生存及预后至关重要。本共识就PIs相关心血管不良反应的监测及管理提出推荐意见,旨在规范PIs的临床应用。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 心血管不良反应 多发性骨髓瘤
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内源蛋白酶对肉品风味的影响研究进展
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作者 刘丽萍 郝丹妮 +4 位作者 张新笑 卞欢 李鹏鹏 王道营 徐为民 《肉类研究》 北大核心 2025年第11期72-81,共10页
内源蛋白酶在肉类风味形成中发挥关键作用,通过水解肌肉中的蛋白质释放多肽、小肽和游离氨基酸等风味前体物质,进而影响肉品的非挥发性和挥发性风味。本文系统综述内源蛋白酶(如组织蛋白酶、钙蛋白酶、Caspase、氨肽酶、羧肽酶及蛋白酶... 内源蛋白酶在肉类风味形成中发挥关键作用,通过水解肌肉中的蛋白质释放多肽、小肽和游离氨基酸等风味前体物质,进而影响肉品的非挥发性和挥发性风味。本文系统综述内源蛋白酶(如组织蛋白酶、钙蛋白酶、Caspase、氨肽酶、羧肽酶及蛋白酶体等)在肉类风味形成中的作用机制及其影响因素。内源蛋白酶通过降解肌原纤维蛋白释放风味前体物质,参与Maillard反应和Strecker降解,促进肉品特征风味的形成。旨在为深入了解内源蛋白酶对肉品风味的贡献提供参考,尽管内源蛋白酶在非挥发性风味物质生成中的作用已有较深入的研究,但其对挥发性风味物质的影响机制仍需进一步探讨。 展开更多
关键词 肉品 内源蛋白酶 水解 风味
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组织蛋白酶B/NLRP3通路对LPS诱导巨噬细胞M1/M2极化的影响 被引量：1
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作者 王宜博 代玉婷 +4 位作者 蔡江晓 李忠林 秦伟伟 孙立新 韩伟 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期63-68,共6页
目的:评价组织蛋白酶B(CTSB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)通路对LPS诱导巨噬细胞极化的影响。方法:体外培养生长状态良好的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞系,根据随机数字表法分为3组(n=6):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CA074-me... 目的:评价组织蛋白酶B(CTSB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)通路对LPS诱导巨噬细胞极化的影响。方法:体外培养生长状态良好的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞系,根据随机数字表法分为3组(n=6):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CA074-me(CTSB抑制剂)组(B组)。C组常规培养24 h,L组加入LPS浓度为1μg/ml的培养基培养24 h,B组在LPS诱导前予以CTSB抑制剂CA074-me 30μmol/L预处理1 h后在含LPS 1μg/ml的培养基中共培养24 h。24 h后通过显微镜观察细胞形态变化,通过采用ELISA法测定上清液IL-1β、IL-18的浓度,Western blot检测细胞中组织蛋白酶B前体(pro-CTSB)、成熟组织蛋白酶B(mature-CTSB)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的表达,采用qRT-PCR法检测细胞CD32、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、CD206 mRNA表达水平,流式细胞术检测M1型巨噬细胞表面标志物CD86和M2型巨噬细胞表面标志物CD206阳性表达率。结果:与C组相比,L组和B组细胞形态均改变,细胞变大并出现伪足,细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度均上升,pro-CTSB、mature-CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1表达升高,CD32、iNOS mRNA表达上调,CD86阳性率、CD206阳性率均上升(P<0.01),B组Arg-1、CD206 mRNA表达上调(P<0.01);与L组相比,B组细胞伪足减少,形态更接近C组,细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度下降,mature-CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1表达降低,CD32、iNOS mRNA及CD86阳性率下降,pro-CTSB表达、Arg-1、CD206 mRNA表达及CD206阳性率升高(P<0.01)。结论:抑制CTSB/NLRP3通路能够减轻炎症反应,减少LPS诱导的RAW264.7细胞向M1型巨噬细胞极化,促进其向M2型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 组织蛋白酶B NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 脂多糖类 巨噬细胞
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不同蛋白酶抑制剂对梨茎蜂和梨瘿蚊幼虫中肠蛋白酶活性的影响
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作者 杨晓燕 李俊杰 +8 位作者 高俊恒 唐慧琳 郭子坤 郭春阳 王冬寒 叶佳成 李引 袁向群 李怡萍 《昆虫学报》 北大核心 2025年第4期386-396,共11页
【目的】本研究旨在调查不同蛋白酶抑制剂对梨茎蜂Janus piri和梨瘿蚊Dasineura pyri幼虫中肠蛋白酶活性的影响。【方法】运用生化技术分别测定梨茎蜂2-5龄幼虫和梨瘿蚊1-4龄幼虫中肠pH值和4种中肠蛋白酶(总蛋白酶、强碱性胰蛋白酶、弱... 【目的】本研究旨在调查不同蛋白酶抑制剂对梨茎蜂Janus piri和梨瘿蚊Dasineura pyri幼虫中肠蛋白酶活性的影响。【方法】运用生化技术分别测定梨茎蜂2-5龄幼虫和梨瘿蚊1-4龄幼虫中肠pH值和4种中肠蛋白酶(总蛋白酶、强碱性胰蛋白酶、弱碱性胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶)活性,进一步在最适pH和幼虫龄期分别测定10种抑制剂对两种害虫幼虫中肠蛋白酶活性的影响。【结果】梨茎蜂和梨瘿蚊幼虫中肠平均pH值分别为8.2和7.6,两种害虫4种中肠蛋白酶活性均在3龄幼虫期最高。对梨茎蜂幼虫中肠总蛋白酶抑制效果最好的是5 mmol/L EDTA,其次是1 mmol/L TPCK;抑制强碱性胰蛋白酶活性效果最好的是1 mmol/L TPCK,抑制弱碱性胰蛋白酶效果最好的是10 mmol/L PMSF,抑制胰凝乳蛋白酶活性效果最好的是5 mmol/L EGTA。对梨瘿蚊幼虫中肠总蛋白酶活性抑制效果最好的是1 mmol/L TPCK,其次是50μg/mL STI;抑制强碱性胰蛋白酶活性效果最好的是5 mmol/L EDTA,抑制弱碱性胰蛋白酶活性效果最好的是10 mmol/L EDTA,抑制胰凝乳蛋白酶活性效果最好的是50μg/mL STI。【结论】对梨茎蜂和梨瘿蚊幼虫中肠总蛋白酶活性抑制效果较好的是TPCK,STI和EDTA;对幼虫中肠强碱性胰蛋白酶活性抑制效果较好的是EDTA和EGTA;对幼虫中肠弱碱性胰蛋白酶活性抑制效果较好的是PMSF,EDTA和TPCK;对幼虫中肠胰凝乳蛋白酶活性抑制效果较好的是EGTA。研究结果为开发与昆虫中肠蛋白酶和抑制剂有关的新型生物农药提供一定的理论参考价值。 展开更多
关键词 梨茎蜂 梨瘿蚊 中肠蛋白酶 肠道PH 蛋白酶抑制剂 酶活性
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纤维素酶预处理对兰茂牛肝菌蛋白酶解效果及风味的影响评价
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作者 杨宁 周锫 +4 位作者 张沙沙 曹晶晶 罗晓莉 张微思 孙达锋 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第9期239-245,共7页
为探究纤维素酶预处理对风味蛋白酶酶解兰茂牛肝菌的影响,该研究以兰茂牛肝菌为研究对象,以还原糖含量为评价指标,通过单因素试验和正交试验确定了纤维素酶预处理工艺。以肽含量及氨基酸态氮含量为指标,进一步评价纤维素酶辅助风味蛋白... 为探究纤维素酶预处理对风味蛋白酶酶解兰茂牛肝菌的影响,该研究以兰茂牛肝菌为研究对象,以还原糖含量为评价指标,通过单因素试验和正交试验确定了纤维素酶预处理工艺。以肽含量及氨基酸态氮含量为指标,进一步评价纤维素酶辅助风味蛋白酶酶解的效果。最后采用智能感官评价技术(电子鼻、电子舌)对酶解物进行风味分析。结果表明,纤维素酶预处理最佳工艺为纤维素酶添加量0.3%、初始pH 4.0、反应温度45℃、反应时间4 h,此条件下还原糖释放量为(5.002±0.02)μg/mL。与直接酶解相比,经纤维素酶预处理后再进行风味蛋白酶酶解,肽含量及氨基酸态氮含量显著提高。智能感官评价结果表明,经纤维素酶预处理的酶解产物香气轮廓发生变化,香气、滋味差异明显。综上所述,纤维素酶预处理后再进行风味蛋白酶酶解可以有效促进兰茂牛肝菌风味物质的释放。 展开更多
关键词 兰茂牛肝菌 纤维素酶 风味蛋白酶 风味 电子鼻 电子舌
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三株副干酪乳酪杆菌蛋白酶基因的差异性分析
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作者 郝燕萍 刘振民 +6 位作者 张欢畅 韩瑨 贾向飞 吴涵清 徐杏敏 郑远荣 吴正钧 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第11期150-162,I0004-I0012,共22页
为探索3株副干酪乳酪杆菌BDⅡ、J4、J17蛋白酶基因特征与表型的联系和差异,采用透明圈法和福林法筛选出蛋白酶活力较高的3株副干酪乳酪杆菌,然后对其进行全基因组测序,并结合15株已公开的副干酪乳酪杆菌和约氏乳杆菌进行比较基因组分析... 为探索3株副干酪乳酪杆菌BDⅡ、J4、J17蛋白酶基因特征与表型的联系和差异,采用透明圈法和福林法筛选出蛋白酶活力较高的3株副干酪乳酪杆菌,然后对其进行全基因组测序,并结合15株已公开的副干酪乳酪杆菌和约氏乳杆菌进行比较基因组分析,重点研究影响副干酪乳酪杆菌产蛋白酶能力的关键基因。结果显示,BDⅡ、J4、J17的蛋白酶活力相对较高,其中BDⅡ的蛋白酶活力最高,为22.017 U/mL;全基因组测序分析表明3株菌GC含量为46.14%~46.64%,基因组大小为2.3~3.2 Mb。通过CAZys注释,发现BDⅡ含有与细菌细胞壁的合成密切相关的特有蛋白家族GT51(间接参与蛋白水解调控)和特有的肽酶pepX(分解肽),因此推测肽酶pepX和GT51的存在是BDⅡ蛋白酶活力最高的原因。该研究通过表型与基因组结合的方法筛选出1株高产蛋白酶的副干酪乳酪杆菌BDⅡ,阐明了蛋白水解机制和蛋白水解相关基因的调控机制,发现BDⅡ在功能性乳制品中具有巨大的应用潜力。 展开更多
关键词 蛋白酶活力 基因组 副干酪乳酪杆菌BDⅡ
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高产酸性蛋白酶的菌株筛选及培养条件优化
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作者 何文彬 张捷文 +4 位作者 徐晴元 侯莎 吴昌正 郭丽琼 林俊芳 《中国调味品》 北大核心 2025年第2期10-16,共7页
近年来,食品工业和饲料工业快速发展,企业对酸性蛋白酶的需求不断增长。发酵酱醪作为天然的微生物菌种库,含有各种特性优越的菌株。该研究旨在发酵酱醪中筛选出高产酸性蛋白酶的微生物菌株。共筛选出14株不同形态的霉菌,经过复筛,最后... 近年来,食品工业和饲料工业快速发展,企业对酸性蛋白酶的需求不断增长。发酵酱醪作为天然的微生物菌种库,含有各种特性优越的菌株。该研究旨在发酵酱醪中筛选出高产酸性蛋白酶的微生物菌株。共筛选出14株不同形态的霉菌,经过复筛,最后筛选出一株高产酸性蛋白酶的菌株黑曲霉(Aspergillus niger),命名为JL-08。随后,通过对黑曲霉JL-08产生的酸性蛋白酶进行性能评价,发现其具有在高盐发酵产品中的应用潜力。再采用单因素试验探索影响黑曲霉JL-08酸性蛋白酶酶活力的重要因素并利用Plackett-Burman试验筛选出碳氮比(C/N)、酪蛋白添加量、天冬氨酸添加量和苏氨酸添加量4个因素。最后进行四因素三水平的正交试验,确定了最优的因素组合为(C/N)16∶1、1%酪蛋白1.5 mL、30 mmol/L天冬氨酸1.5 mL。在此条件下,酸性蛋白酶酶活力提高至(5507±426)U/g。 展开更多
关键词 酸性蛋白酶 筛选 黑曲霉 因素优化
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钙蛋白酶在动脉粥样硬化中的作用及研究进展
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作者 张嘉祺 王茜婷 +1 位作者 陈夏欢 刘梅林 《中国循环杂志》 北大核心 2025年第2期203-208,共6页
动脉粥样硬化是威胁人类健康的主要疾病,可导致急性冠状动脉综合征、心肌梗死、脑卒中等疾病。动脉粥样硬化的发生与进展是一种慢性炎症性过程,与多种细胞的生物学活动相关。钙蛋白酶是Ca2+依赖性细胞内半胱氨酸蛋白酶,通过限制性催化... 动脉粥样硬化是威胁人类健康的主要疾病,可导致急性冠状动脉综合征、心肌梗死、脑卒中等疾病。动脉粥样硬化的发生与进展是一种慢性炎症性过程,与多种细胞的生物学活动相关。钙蛋白酶是Ca2+依赖性细胞内半胱氨酸蛋白酶,通过限制性催化蛋白水解调控多种底物,参与内皮损伤、炎症反应、脂质代谢等病理生理过程,在动脉粥样硬化的发生与进展中发挥着重要作用。本文综述了钙蛋白酶在动脉粥样硬化中的作用以及最新研究进展,为临床实现动脉粥样硬化个体化与精准化防治提供新思路。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 钙蛋白酶 炎症 心血管疾病
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米曲霉产蛋白酶条件优化及降解牛血效果探究
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作者 曾嵩玉 蓝本翔 +5 位作者 廖庆艳 马忠仁 王子凡 丁功涛 赵蕾 周雪雁 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期40-47,共8页
本研究采用单因素试验、Plackett-Burman和响应面试验方法对米曲霉BNCC 142787的产蛋白酶条件进行优化,并探究其降解屠宰牛血液的效果。结果表明:米曲霉产蛋白酶的最佳发酵条件为发酵时间100 h,蛋白胨添加量4%,料液比1:1,此条件下的蛋... 本研究采用单因素试验、Plackett-Burman和响应面试验方法对米曲霉BNCC 142787的产蛋白酶条件进行优化,并探究其降解屠宰牛血液的效果。结果表明:米曲霉产蛋白酶的最佳发酵条件为发酵时间100 h,蛋白胨添加量4%,料液比1:1,此条件下的蛋白酶活力达(10221.65±53.91)U/g,较优化前升高了1.73倍。另外,通过探究该菌株对牛血液的降解效果,发现其在牛血含量33.3%的条件下,血液水解度达37%,说明该菌具有良好的血液降解效果,可用作废弃屠宰血液降解的候选菌株。 展开更多
关键词 米曲霉 响应面优化 蛋白酶 血液降解
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