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基于PacBio Iso-Seq构建低温胁迫后中华蜜蜂工蜂全长转录组 被引量:1
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作者 姚丹 周文才 +4 位作者 詹洪平 于瀛龙 贺兴江 万炜 韦小平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期611-621,共11页
【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana是东方蜜蜂Apis cerana在中国地区分布最广泛的亚种,在地理适应和生态多样性方面有显著优势。中华蜜蜂的低温适应性优于西方蜜蜂A.mellifera,可用于高海拔高山地区和冬季蜜源的采集,该性能在生产方... 【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana是东方蜜蜂Apis cerana在中国地区分布最广泛的亚种,在地理适应和生态多样性方面有显著优势。中华蜜蜂的低温适应性优于西方蜜蜂A.mellifera,可用于高海拔高山地区和冬季蜜源的采集,该性能在生产方面有重要作用,探究中华蜜蜂低温耐受性可有助于优良品系的筛选,为农业经济创造更大价值。【方法】收集分别在常温(25.0±0.2)℃(对照)和低温(4.0±0.2)℃下处理6 h时的中华蜜蜂3,10和21日龄工蜂6组样本,进行转录组二代测序(Illumina RNA-Seq)和全长转录组三代测序(PacBio Iso-Seq),利用二代测序数据对三代测序数据进行校正,基于高质量的测序数据对比NR,NT,Pfam,KOG/COG,Swiss-Prot,KEGG和GO数据库,对新转录本和新基因进行功能注释。【结果】中华蜜蜂工蜂6组样本全长转录组测序分别获得71.17,42.76,58.82,53.45,40.33和42.79 Gb读段,平均N50达到205895 bp,质控后得到164194条一致性序列;通过比对到东方蜜蜂参考基因组可获得21519条新转录本,与中华蜜蜂物质代谢、神经系统和信号转导等密切相关,且不同日龄中华蜜蜂受低温胁迫后,物质代谢、细胞发育、寿命及神经发育等受到影响,同时还鉴定到28647条长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),其中lincRNA和sense_intronic两种类型LncRNA的占比最多,分别为35%和45%。【结论】本研究利用矫正后的中华蜜蜂工蜂PacBio Iso-Seq转录组数据鉴定到大量未注释的新基因和新转录本,并对其进行了功能注释,分析了LncRNA的数量和类型,研究结果完善了东方蜜蜂参考基因组,为中华蜜蜂抗寒机制的探究提供了良好的数据背景。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 低温 转录组 参考基因组 发育阶段 PacBio测序
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保留非全长读段的ISO-seq数据转录组表达分析 被引量:2
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作者 刘学军 瞿锡垚 张礼 《数据采集与处理》 CSCD 北大核心 2019年第4期594-604,共11页
近年来,基于单分子测序技术的ISO-seq数据以其超长读段长度被越来越多地应用于转录组新型异构体预测研究,但目前大多数研究工作只用到全长读段数据,丢失了非全长读段数据中较多有用信息,因而数据没有得到充分利用。针对这一问题,本文在... 近年来,基于单分子测序技术的ISO-seq数据以其超长读段长度被越来越多地应用于转录组新型异构体预测研究,但目前大多数研究工作只用到全长读段数据,丢失了非全长读段数据中较多有用信息,因而数据没有得到充分利用。针对这一问题,本文在保留非全长读段的基础上提出了两个能同时预测异构体结构和计算其表达比例的模型基于狄利克雷采样的异构体探测与预测(Dirichletsampling for isoform detection and prediction,DSIDP)和基于马尔科夫链的异构体探测与预测(Markovchain for isoform detection and predition,MCIDP)。两个模型均从全长读段中建立异构体预测集,并采用全长读段和非全长读段计算异构体表达比例。DSIDP将所有读段比对至异构体预测集,并使用Dirichlet采样解决多源映射问题,MCIDP使用马尔科夫链模拟基因外显子之间的选择性剪切,该模型还能预测出数据中没有全长读段的异构体。本文采用模拟数据和真实数据验证了两个模型的有效性。 展开更多
关键词 PacBio ISO-seq 转录组表达 第三代测序技术 新型异构体检测 多源映射
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低温胁迫下巴西橡胶树三倍体全长转录组测序分析 被引量:3
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作者 毛常丽 李玲 +3 位作者 张凤良 李小琴 杨湉 吴裕 《热带农业科技》 2022年第1期1-6,共6页
低温寒害是制约我国橡胶树种植业发展的关键因素,为了增加国内橡胶自给率,培育抗寒能力强的无性系以扩大种植面积是有效途径之一。本研究以云南培育的三倍体无性系“云研77-4”为材料,采用PacBio测序技术对不同时间低温胁迫处理的混合... 低温寒害是制约我国橡胶树种植业发展的关键因素,为了增加国内橡胶自给率,培育抗寒能力强的无性系以扩大种植面积是有效途径之一。本研究以云南培育的三倍体无性系“云研77-4”为材料,采用PacBio测序技术对不同时间低温胁迫处理的混合样进行全长转录组测序及分析,共产出41.85 Gb的clean data数据,分析得到高质量转录本154484条,平均每条序列长度为2181 bp,其中新转录本70055条。经对新发现转录本的SSR、编码区序列预测、lncRNA及转录因子分析,并对新转录本进行功能注释,共发现80432个SSRs,66182个ORF,66684个功能基因,预测到转录因子12064个,其中包含了与抗逆性相关的MYB、C3H转录因子。本研究可为进一步筛选抗寒性相关的转录因子和抗寒三倍体育种提供参考。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 三倍体无性系 RNA-SEQ PacBio测序
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Towards complete deconstruction of cotton transcriptional landscape 被引量:1
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作者 LI Fuguang 《Journal of Cotton Research》 2020年第1期65-67,共3页
Recently,Wang et al.systematically explored the transcription landscape in diploid cotton Gossypium arboreum.In the study,they integrated four high-throughput sequencing techniques,including Pacbio sequencing,strandsp... Recently,Wang et al.systematically explored the transcription landscape in diploid cotton Gossypium arboreum.In the study,they integrated four high-throughput sequencing techniques,including Pacbio sequencing,strandspecific RNA sequencing(ss RNA-seq),Cap analysis gene expression sequencing(CAGE-seq),and Poly A sequencing(Poly A-seq)to profile the RNA transcriptome of G.arboreum.They developed a pipeline,IGIA to construct accurate gene structure annotation based on the updated genome of G.arboreum and the multi-strategic RNA-seq data.Their study revealed some intriguing phenomena and potential novel mechanisms in the regulation of RNA transcription in plants,and also provided valuable resources for further functional genomic research in cotton. 展开更多
关键词 COTTON CAGE-seq PolyA-seq pacbio-seq Transcriptome GOSSYPIUM arboreum IGIA MagenDB
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