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半夏泻心汤对幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1生长的影响 被引量：12
1
作者 姜成 刘芬 +1 位作者 鄢春锦 严晓丹 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第2期351-352,共2页
目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞... 目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞:细菌比例在1∶10以上时,Hp显著抑制细胞的增殖(P<0.05),而且呈量效关系;与模型组相比,半夏泻心汤能降低细菌对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:Hp抑制细胞增殖,半夏泻心汤能扭转细菌的抑制作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胃上皮细胞GES-1 半夏泻心汤 增殖
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E2F-1基因过表达影响胃癌MGC-803细胞对化疗药物敏感性的研究 被引量：3
2
作者 钱倩 王长青 +2 位作者 李雷 谢玉波 肖强 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期945-947,956,共4页
目的:构建E2F-1真核表达载体,建立稳定过表达E2F-l的胃癌细胞株,探讨E2F-l基因过表达对胃癌MCC-803细胞化疗敏感性的影响方法:应用Tri zol法从胃癌的癌组织中提取mRNA逆转录合成cDNA,按Gene-Bank公布的E2F-1基因序列设计带有酶切位点的... 目的:构建E2F-1真核表达载体,建立稳定过表达E2F-l的胃癌细胞株,探讨E2F-l基因过表达对胃癌MCC-803细胞化疗敏感性的影响方法:应用Tri zol法从胃癌的癌组织中提取mRNA逆转录合成cDNA,按Gene-Bank公布的E2F-1基因序列设计带有酶切位点的引物并行扩增获得E2F-1的ORF片段;然后经限制性内切酶EcoR l和Hind Ⅲ双酶切后将E2F-1定向克隆到真核表达载体pCMV-HA2中转化筛选用脂质体Lipofectamine2000将该载体转染MGC-803胃癌细胞,然后用含G418的培养基筛选获得具Genectin抗性的过表达E2F-1的胃癌细胞株实时定量PCR( real-time quantitative PCR)和蛋白印迹(Western blotting)技术检测MGC-803/E2F-1细胞内E2F-1表达情况四唑蓝(MTT)法检测MGC-803/E2 F-1组(实验组)、MGC-803/EV组(阴性对照组)和MCC-803组(未转染组)细胞对化疗药物的敏感性结果:重组载体pCMV-E2F-1-HA2经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切后得到预期片段,测序结果与报道的E2F-1基因之0RF完全一致,证明目的基因已成功克隆入真核表达载体,获取具Genectin抗性的细胞克隆、并进行了扩增。RT-PCR和Western blotting实验证实重组载体pCMV-E2F-l-HA2成功转入胃癌细胞内,并稳定过表达E2F-1 MTT法检测发现,5-氟尿嘧啶(5-FL)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)对MGC-803/E2F、-1组细胞的抑制率分别为71.45%、74.03%、76.72%,均明显高于MGC-803/EV组(45.58%、53.69%、54.58%)和MGC-803组(53.70%、54.67%、55.05%) (P<0.05)结论:成功构建了真核表达载体pCMV-E2F-1-HA2,并建立了稳定过表达E2F-1的胃癌细胞株MGC-803/E2F-1。E2F-1过表达增强了胃癌细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 E2F-1 转染 MGC-803胃癌细胞 药敏试验
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TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响
3
作者 王芬 杨燕 +6 位作者 冯茜 步光奎 黄利华 闾宏伟 郭勤 徐灿霞 沈守荣 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期876-882,共7页
目的：构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型，然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法：首先通过rea1—tin1ePCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC82... 目的：构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型，然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法：首先通过rea1—tin1ePCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC823，SGC7901，MGC803中的表达，筛选出TRAF1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞；设计及构建3个TRAF1的shRNA表达载体pLVX-shRNA-TRAF1．shRNA1～3，将其分别转染至目标胃癌细胞系中，应用rea1．timePCR和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA，最后通过MTF及流式细胞术检测TRAF1对胃癌细胞凋亡能力的影响，通过Transwe11小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响。结果：与GES．1比较，TRAF1基因在BGC823，SGC7901，MGC803中的表达均有上调（P〈O．05），其中以BGC823表达最高；3个TRAF1shRNA对TRAF1基因均有抑制作用，以pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2干扰效果最强；干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1可使细胞生长活力减弱，凋亡明显增加，但对其迁移功能无明显影响。结论：TRAF1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显；pLVX-shRNA-TRAF1．shRNA2可成功干扰BGC823中TRAF1的表达；TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡。 展开更多
关键词 TRAF1 干扰 胃癌细胞系
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细小病毒H－1对肿瘤细胞株的杀伤研究
4
作者 范竹萍 童菊芳 萧树东 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1994年第1期35-37,共3页
本文利用细胞集落形成测定细胞存活率的方法，检测了仓鼠细小病毒（ＰＶＨ－１）对２株不同分化程度的胃癌细胞的抑制作用。同时收集感染后４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ、１４４ｈ的胃癌细胞，利用电镜观察胃癌细胞的变化。结果表明，ＰＶＨ... 本文利用细胞集落形成测定细胞存活率的方法，检测了仓鼠细小病毒（ＰＶＨ－１）对２株不同分化程度的胃癌细胞的抑制作用。同时收集感染后４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ、１４４ｈ的胃癌细胞，利用电镜观察胃癌细胞的变化。结果表明，ＰＶＨ－１能抑制不同分化程度的胃癌细胞株，其敏感性与胃癌细胞的分化程度有关。 展开更多
关键词 细小病毒H-1 胃癌 细胞株
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