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RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究
被引量：
5
1
作者
程光
章翔
+5 位作者
鲍炜
张赟
张新海
曹卫东
高大宽
宋蕾
《医学研究生学报》
CAS
2006年第4期292-297,i0011,共7页
目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上...
目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。
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关键词
psuper
短片段双链核糖核酸
核糖核酸干扰
MAGE—1
胶质瘤
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题名
RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究
被引量：
5
1
作者
程光
章翔
鲍炜
张赟
张新海
曹卫东
高大宽
宋蕾
机构
第四军医大学西京医院解放军神经外科研究所
第四军医大学西京医院免疫教研室
出处
《医学研究生学报》
CAS
2006年第4期292-297,i0011,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:39970752)
文摘
目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。
关键词
psuper
短片段双链核糖核酸
核糖核酸干扰
MAGE—1
胶质瘤
Keywords
psuper
siRNA
RNA interference
MAGE-1
Glioma
分类号
R730.264 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究
程光
章翔
鲍炜
张赟
张新海
曹卫东
高大宽
宋蕾
《医学研究生学报》
CAS
2006
5
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