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ASFV基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株与基因Ⅰ型、Ⅱ型高毒力毒株的致病力试验数据比较
1
作者 戈胜强 左媛媛 +5 位作者 常星 巩明霞 刘春菊 于小静 李金明 王志亮 《中国动物检疫》 2025年第8期72-77,共6页
非洲猪瘟病毒(ASFV)按其毒力分为高毒力、中毒力和低毒力三类。我国现有两类高毒力毒株,分别为2018年传入的基因Ⅱ型毒株和2021年出现的基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株。2023年越南和俄罗斯均发现了基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒,且其全基因组序列与中国分... 非洲猪瘟病毒(ASFV)按其毒力分为高毒力、中毒力和低毒力三类。我国现有两类高毒力毒株,分别为2018年传入的基因Ⅱ型毒株和2021年出现的基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株。2023年越南和俄罗斯均发现了基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒,且其全基因组序列与中国分离株高度相似。为研究基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒的毒力水平,汇总了中国、越南和俄罗斯开展的重组病毒动物试验数据,并与基因Ⅰ型、Ⅱ型高毒力毒株进行致病力比较。结果显示同等攻毒剂量下,重组病毒导致的死亡起始或终止时间更早,提示其毒力可能更强。本文为非洲猪瘟相关研究和防控提供了参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因Ⅰ/Ⅱ型重组毒株 高毒力毒株
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青海省部分地区非洲猪瘟病毒弱毒株流行病学调查分析
2
作者 李秀英 张立成 +7 位作者 逯玉 傅义娟 炊文婷 张燕 应兰 黄龙 宋长芳 杨峻鹏 《山东畜牧兽医》 2025年第6期9-10,共2页
为掌握青海省非洲猪瘟病毒(ASFV)弱毒株感染现状并评估疫情风险,本研究通过现场问卷调查与实验室监测相结合的方法,在西宁市、海东市及环湖地区部分农区县(市区)开展ASFV弱毒株流行病学调查,旨在提升全省非洲猪瘟防控预警能力,为科学防... 为掌握青海省非洲猪瘟病毒(ASFV)弱毒株感染现状并评估疫情风险,本研究通过现场问卷调查与实验室监测相结合的方法,在西宁市、海东市及环湖地区部分农区县(市区)开展ASFV弱毒株流行病学调查,旨在提升全省非洲猪瘟防控预警能力,为科学防控提供技术支撑。结果显示,生猪样本阳性率为0.10%,较2022年上升0.05%;环境样本阳性率达1.85%。结果表明,当前病毒环境污染范围较广,生猪及其产品的生产、调运、屠宰及市场流通等环节的生物安全防控仍存在薄弱环节。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒弱毒株 流行病学调查 分析
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鸭瘟病毒强毒株与弱毒株双重PCR鉴别检测方法的建立与应用
3
作者 周婉婷 崔雪志 +9 位作者 毛秋艳 汪建华 李玉峰 李金平 刘朔 彭程 杨吉喆 侯广宇 刘华雷 蒋文明 《中国动物检疫》 2025年第8期108-114,共7页
鸭瘟是一种由鸭瘟病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,对养鸭业造成了严重威胁。目前,该病主要依靠鸭瘟弱毒活疫苗进行防控。鸭瘟病毒属于疱疹病毒科,其基因组为双链DNA,具有复杂的结构和多种变异类型。为建立一种能够区分鸭瘟病... 鸭瘟是一种由鸭瘟病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,对养鸭业造成了严重威胁。目前,该病主要依靠鸭瘟弱毒活疫苗进行防控。鸭瘟病毒属于疱疹病毒科,其基因组为双链DNA,具有复杂的结构和多种变异类型。为建立一种能够区分鸭瘟病毒强毒株与弱毒株的双重PCR鉴别检测方法,以提高临床诊断的准确性和效率,通过分析鸭瘟病毒基因组序列,设计针对UL2和LORF5基因的特异性引物,建立了双重PCR方法。该方法具有良好的特异性,能够准确区分鸭瘟病毒强毒株与弱毒株,同时对其他禽类病原无交叉反应:最低可检测到10拷贝的鸭瘟病毒DNA,表现出较高的灵敏度。使用建立的方法对2019-2024年收集的临床疑似鸭瘟病料进行检测,发现经典强毒株集中流行于2019-2022年,而变异强毒株在2023-2024年更为常见,表明鸭瘟病毒优势流行株可能正在发生变化。综上,本研究建立的双重PCR鉴别检测方法为鸭瘟病毒的快速、准确检测提供了技术支持,对鸭瘟防控及流行病学调查具有重要意义。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 UL2基因 LORF5基因 双重PCR 强毒株 变异株
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一株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及致病力分析
4
作者 李明桃 刘云涛 +4 位作者 邹立宏 柳珊 刘茜 焦玉兰 郁宏伟 《中国畜禽种业》 2025年第2期104-111,共8页
该研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30流行毒株的感染模型评价其致病性。从广西某猪场发病猪肺脏组织中分离到1株类NADC30毒株(RP-1株),为探究其对仔猪的致病性,将其作为感染毒株接种易感染猪只,其中感染组3头猪,对照组1头猪,... 该研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30流行毒株的感染模型评价其致病性。从广西某猪场发病猪肺脏组织中分离到1株类NADC30毒株(RP-1株),为探究其对仔猪的致病性,将其作为感染毒株接种易感染猪只,其中感染组3头猪,对照组1头猪,感染后每日观察临床症状,测量直肠温度,并采集血液、口腔拭子、肛拭子以检测病毒血症与排毒情况,试验结束后进行病理剖检,观察大体病理变化。结果显示,感染组在感染后体温升高,第7天1头猪出现发热,第9天1头猪直肠温度达到峰值41.16℃;感染后第2天出现病毒血症及排毒,持续至感染后第21天;病理剖检发现肺部呈暗红色,局部发生实质性病变,未感染对照组未出现上述情况。可见,RP-1株可引起易感染猪只发病,并表现出明显的临床症状,但未致死,是一株中等毒力毒株,可为疫苗效力的评价提供毒株来源。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 类NADC30毒株 病毒分离 致病力
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鸭甲肝病毒基因3型弱毒株与其返强毒株的生物学特性比较
5
作者 胡晓阳 黄晶晶 +1 位作者 彭铎 张大丙 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期4284-4290,共7页
【目的】探究鸭甲肝病毒基因3型(Duck hepatitis A virus genotype 3,DHAV-3)弱毒株毒力返强的机制,通过雏鸭试验和基因组序列分析对DHAV-3弱毒株与其返强毒株的生物学特性进行比较。【方法】用DHAV-3分离株YDF的第140代鸡胚化弱毒株Y14... 【目的】探究鸭甲肝病毒基因3型(Duck hepatitis A virus genotype 3,DHAV-3)弱毒株毒力返强的机制,通过雏鸭试验和基因组序列分析对DHAV-3弱毒株与其返强毒株的生物学特性进行比较。【方法】用DHAV-3分离株YDF的第140代鸡胚化弱毒株Y140及其第4代雏鸭传代毒株Y140/4R接种1日龄北京鸭,观察临床症状、病理变化、发病率和死亡率,用实时荧光定量PCR检测雏鸭肝脏、肾脏和血清中的病毒RNA水平。对Y140株及其第1~4代雏鸭传代病毒基因组序列进行测序分析,探究与毒力返强有关的分子机制。【结果】接种Y140株的雏鸭均未出现临床症状和病理变化,接种Y140/4R株的雏鸭出现鸭病毒性肝炎的特征性临床症状和大体病变,死亡率为40%。与Y140株相比,Y140/4R株感染后3 d存活鸭肝脏和肾脏中病毒RNA水平显著升高(P<0.05),感染后2~3 d死亡鸭肝脏和肾脏中病毒RNA水平极显著升高(P<0.01)。感染后2~4 d,Y140/4R株产生的病毒血症水平显著高于Y140株(P<0.05)。基因组测序结果显示,从第2代开始,2C、3D蛋白和3′-非翻译区分别发生I149V、V236I和A25G突变;从第3代开始,VP1蛋白发生E202D突变。【结论】雏鸭传代可驱动DHAV-3弱毒株基因组发生突变,导致毒力变异株出现,使病毒在靶器官的复制能力以及形成病毒血症的能力显著提高。 展开更多
关键词 鸭甲肝病毒基因3型(DHAV-3) 弱毒株 毒力返强 复制 病毒血症
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羊口疮病毒云南流行毒株毒力基因遗传多样性分析
6
作者 谢佳芮 王轶男 +3 位作者 寇美玲 苏晓航 高华峰 苗海生 《中国动物检疫》 2025年第6期117-127,共11页
为深入探究云南省羊口疮病毒(ORFV)流行毒株主要毒力因子的分子及遗传变异特征,针对分离的4个2021—2023年云南流行毒株,进行VIR、GIF、vIL-10、VEGF-E、CBP毒力基因分子遗传分析。经基因测序与数据分析,发现不同毒力基因序列下,各毒株... 为深入探究云南省羊口疮病毒(ORFV)流行毒株主要毒力因子的分子及遗传变异特征,针对分离的4个2021—2023年云南流行毒株,进行VIR、GIF、vIL-10、VEGF-E、CBP毒力基因分子遗传分析。经基因测序与数据分析,发现不同毒力基因序列下,各毒株在群属划分、关联毒株及序列同源性上均有显著差异。各毒株毒力基因呈现复杂变异特性,推测病毒在传播繁衍中存在自身变异与基因重配,进而形成遗传多样性。本研究对掌握ORFV传播途径、解析演化特征具有重要意义,可为后续的致病性研究与防控策略制定提供关键依据。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 云南毒株 毒力基因 遗传多样性
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猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30毒株鉴别诊断荧光RT-PCR检测方法的建立
7
作者 覃国喜 米树运 +3 位作者 孙竹筠 刘德清 罗婷婷 熊炜 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期84-90,共7页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的危害生猪养殖业的重要传染病之一。NADC30毒株是PRRSV的一种新毒株,其Nsp2存在131个不连续氨基酸缺失。该毒株在临床流行中致病力不同,且常规PRRSV疫苗免疫无法有效预... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的危害生猪养殖业的重要传染病之一。NADC30毒株是PRRSV的一种新毒株,其Nsp2存在131个不连续氨基酸缺失。该毒株在临床流行中致病力不同,且常规PRRSV疫苗免疫无法有效预防其感染,给养殖企业防控PRRSV带来困难。本研究基于TaqMan探针技术,针对经典型PRRSV保守基因序列及PRRSV NADC30缺失区域保守序列,设计不同荧光标记探针,建立双重实时荧光RT-PCR鉴别方法,可区分经典型PRRSV与PRRSV NADC30毒株。结果表明,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可快速区分经典型PRRSV毒株与PRRSV NADC30毒株,对PRRSV经典型疫苗毒株及临床NADC30毒株样本检测效果良好,适用于猪场临床样品中PRRSV NADC30毒株的快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NDAC30毒株 双重实时荧光RT-PCR
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新城疫病毒不同毒株的致病性
8
作者 吕艳峰 《中国畜牧业》 2025年第10期79-80,共2页
新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)是一种具有高度传染性和致死性的禽类病原体,对全球家禽业造成了严重威胁。该病毒不仅感染家禽如鸡、鸭、鹅等,还能够跨越种间障碍感染多种野生鸟类,具有广泛的宿主范围。根据其致病性不同,NDV... 新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)是一种具有高度传染性和致死性的禽类病原体,对全球家禽业造成了严重威胁。该病毒不仅感染家禽如鸡、鸭、鹅等,还能够跨越种间障碍感染多种野生鸟类,具有广泛的宿主范围。根据其致病性不同,NDV被分为强毒株、中毒株和弱毒株三类,其中强毒株通常引起高死亡率的急性疾病,而弱毒株则常用于疫苗研发和预防免疫。 展开更多
关键词 中毒株 新城疫病毒 NDV 致病性 强毒株
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6种商品化PRRSV美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒性能比对
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作者 高晓龙 栗云鹏 +5 位作者 李志军 张启龙 傅彩霞 高敏 雷琪莉 王林 《中国动物检疫》 2025年第2期80-86,共7页
为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV... 为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV美洲经典毒株VR2332和高致病性毒株JXA1,A品牌试剂盒最低检测限均可达到1 copy/μL,D品牌试剂盒最低检测限分别为100和1000 copies/μL,其他品牌试剂盒最低检测限为1~10 copies/μL;6种试剂盒对猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪细小病毒(PPV)的检测均为阴性,特异性良好;对不同浓度模板进行检测,除1个变异系数为6.5%以外,其余均小于5.0%,重复性较好。临床样品检测结果显示,F品牌试剂盒阴性样品检测符合率为95%,其余试剂盒为100%;D品牌试剂盒阳性样品检测符合率为50%,其余试剂盒为100%。综上所述,6种试剂盒的特异性、重复性均较好,但其敏感性及临床检测性能存在一定差异。建议在使用荧光定量PCR试剂盒检测PRRSV前,对其性能进行科学评估,选用性能良好的试剂盒以满足检测需求。本研究为检测机构和养殖场选择PRRSV检测试剂盒提供了依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲经典毒株 高致病性毒株 PCR检测试剂盒 性能对比
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当前形势下非洲猪瘟病毒弱毒株防控策略
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作者 赵云 《特种经济动植物》 2025年第3期71-73,共3页
非洲猪瘟作为一种高度传染性的猪病,对全球养猪业构成了严重威胁。近年来,随着病毒的不断变异,非洲猪瘟病毒弱毒株的出现及其在全球范围内的扩散,使得疫情防控形势愈发复杂。本文旨在探讨当前形势下非洲猪瘟病毒弱毒株的防控策略,以期... 非洲猪瘟作为一种高度传染性的猪病,对全球养猪业构成了严重威胁。近年来,随着病毒的不断变异,非洲猪瘟病毒弱毒株的出现及其在全球范围内的扩散,使得疫情防控形势愈发复杂。本文旨在探讨当前形势下非洲猪瘟病毒弱毒株的防控策略,以期为养猪业提供科学指导和借鉴。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 弱毒株 防控
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非洲猪瘟基因Ⅰ型毒株检测和防控策略构思
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作者 李颂潮 刘文 +1 位作者 江飙 苏伟桐 《广东畜牧兽医科技》 2025年第3期111-114,共4页
非洲猪瘟基因Ⅰ型毒株与基因Ⅱ型毒株感染猪只临床表现存在明显的差异。养殖场除了做好日常生物安全外,检测方案也需要根据病毒特点进行调整,确保能尽早发现场内存在的风险。合理的检测和防控方案,对非洲猪瘟临床防控至关重要。该文就... 非洲猪瘟基因Ⅰ型毒株与基因Ⅱ型毒株感染猪只临床表现存在明显的差异。养殖场除了做好日常生物安全外,检测方案也需要根据病毒特点进行调整,确保能尽早发现场内存在的风险。合理的检测和防控方案,对非洲猪瘟临床防控至关重要。该文就基因Ⅰ型毒株的特点,浅谈一下临床检测策略的一些构思,以期为非洲猪瘟的科学防控提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 基因Ⅰ型毒株 防控 检测策略
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口蹄疫病毒弱毒株遗传稳定性构建
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作者 王赛措 马志鹏 +1 位作者 杨亚芹 陈娟 《中国动物保健》 2025年第7期162-164,共3页
口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)对全球畜牧业造成严重的威胁,该病毒有高度传染性及变异能力,给疫苗的研发工作带来很多挑战。本文聚焦弱毒株的遗传稳定性展开构建工作,深入分析其生物学特性及遗传变异机制。这些生物学... 口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)对全球畜牧业造成严重的威胁,该病毒有高度传染性及变异能力,给疫苗的研发工作带来很多挑战。本文聚焦弱毒株的遗传稳定性展开构建工作,深入分析其生物学特性及遗传变异机制。这些生物学特性覆盖生长特性、抗原性、遗传稳定性以及安全性等多个方面。本研究成功筛选出了最为优质的弱毒株候选疫苗。该研究成果为口蹄疫疫苗的开发开拓了全新的思路与方法,对控制口蹄疫疫情、保障畜牧业的发展具有重要意义。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 弱毒株 遗传稳定性
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PRRS NADC30 GX-R18弱毒株对后备母猪免疫驯化效果的评估
13
作者 赵志超 张鹏轩 +3 位作者 张伟超 王庚 夏丽兰 钱平 《养殖与饲料》 2025年第10期1-6,共6页
[目的]为评估PRRS NADC30 GX-R18弱毒株对后备母猪的驯化效果。[方法]选取某后备猪场1930头PRRSV抗体阳性、抗原阴性的后备母猪,使用“两活一灭”的免疫驯化方式进行研究。分别在全场进满苗后的第7天和第28天免疫1针NADC30 GX-R18弱毒... [目的]为评估PRRS NADC30 GX-R18弱毒株对后备母猪的驯化效果。[方法]选取某后备猪场1930头PRRSV抗体阳性、抗原阴性的后备母猪,使用“两活一灭”的免疫驯化方式进行研究。分别在全场进满苗后的第7天和第28天免疫1针NADC30 GX-R18弱毒株、第58天免疫1针PRSS灭活疫苗。分别在免疫前、一免后21 d、二免后30 d、三免后30、45、60、90 d和转至母猪场后30 d进行前腔静脉采血,检测血液中PRRSV和N蛋白抗体。[结果]抗原单阴的断奶仔猪在免疫NADC30 GX-R18弱毒株后,分别在二免后30 d和三免后30 d检测到PRRSV病毒血症,其他阶段血液及引种前后备母猪扁桃体PRRSV检测呈阴性。一免后21 d和二免后30 d抗体显著上升,到三免后30 d达到100%,并持续到引种后30 d(N-ELISA抗体阳性率97.51%)。与免疫前相比,免疫后不同阶段抗体水平极显著升高(P<0.01),且抗体S/P值呈正态分布。生产性能统计分析该批次猪只生产成绩稳定。[结论]NADC30 GX-R18弱毒株具有高度安全性,对后备母猪免疫驯化效果良好,可以用于PRRS阳性后备母猪的免疫驯化。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NADC30 GX-R18弱毒株 免疫驯化 后备母猪 生产性能
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紫外照射对两种猪流行性腹泻病毒毒株体外感染细胞的影响比较
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作者 谢春芳 马嘉 +4 位作者 于瑞嵩 董世娟 陈冰清 李震 李春华 《上海农业学报》 2024年第6期96-102,共7页
猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引起仔猪腹泻死亡的重要病因之一,目前尚无有效治疗药物。不同的PEDV毒株,其感染细胞方式、病毒增殖速度有所不同。目前,主要依靠消毒等预防管理措施防止病毒的传播和污染。... 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引起仔猪腹泻死亡的重要病因之一,目前尚无有效治疗药物。不同的PEDV毒株,其感染细胞方式、病毒增殖速度有所不同。目前,主要依靠消毒等预防管理措施防止病毒的传播和污染。本研究运用不添加胰酶法在体外贴壁培养细胞上分别感染PEDV CV777毒株和DR13毒株,检测紫外线对不同毒株的杀灭效果。结果显示:100 TCID_(50)DR13和CV777毒株需要使用48.6 m J∕cm^(2)的UV能量值灭活,10 000 TCID_(50)DR13和CV777毒株需要291.6 m J∕cm^(2)的UV能量值灭活。本研究对PEDV的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 DR13毒株 CV777毒株 紫外线照射 感染 灭活
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非洲猪瘟病毒弱毒株感染流行病学调查分析 被引量：1
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作者 李秀英 张立成 +7 位作者 逯玉 傅义娟 炊文婷 张燕 应兰 黄龙 宋长芳 杨峻鹏 《青海畜牧兽医杂志》 2024年第5期60-61,共2页
调查青海省非洲猪瘟病毒弱毒株感染情况并分析疫情风险,可提升青海省对非洲猪瘟的防控预警水平,为有效防控非洲猪瘟提供技术依据。通过现场问卷调查和监测的方式,在生猪养殖量较集中的西宁市、海东市及环湖沿线部分农区县(市、区)开展... 调查青海省非洲猪瘟病毒弱毒株感染情况并分析疫情风险,可提升青海省对非洲猪瘟的防控预警水平,为有效防控非洲猪瘟提供技术依据。通过现场问卷调查和监测的方式,在生猪养殖量较集中的西宁市、海东市及环湖沿线部分农区县(市、区)开展非洲猪瘟病毒弱病毒感染情况流行病学调查工作。结果显示,2023年生猪非瘟阳性率为0.10%,环境监测阳性率为1.85%。病毒环境污染面较广,生猪及其产品的生产、调运、屠宰及市场交易等环节防控工作仍然存在薄弱之处,亟待改善。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 病毒弱毒株 流行病学调查 分析
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紫草素(shikonin)抗奥密克戎毒株的实验研究及机制分析
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作者 王秀民 谢小华 +7 位作者 孙永 袁媛 崔志梅 张涛 苏彦雷 孙殿兴 吴红海 张晶 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第9期23-25,I0001,共4页
目的探讨右旋体紫草素(shikonin)抗奥密克戎毒株的药理作用和对新型冠状病毒主蛋白酶的抑制活性。方法使用奥密克戎毒株BA.2.2转染的Vero细胞模型检测shikonin的抗病毒活性;利用体外主蛋白酶荧光偏振模型测试shikonin对于新型冠状病毒... 目的探讨右旋体紫草素(shikonin)抗奥密克戎毒株的药理作用和对新型冠状病毒主蛋白酶的抑制活性。方法使用奥密克戎毒株BA.2.2转染的Vero细胞模型检测shikonin的抗病毒活性;利用体外主蛋白酶荧光偏振模型测试shikonin对于新型冠状病毒主蛋白酶的抑制活性,实验以奈玛特韦为阳性对照化合物。结果Vero细胞模型药理活性测试发现shikonin具有抑制奥密克戎毒株核酸复制的作用;而在体外荧光偏振模型活性测试实验中,shikonin在20、50μM药物浓度并未表现出对主蛋白酶的显著抑制活性。结论紫草素(shikonin)在细胞水平的实验中表现出抗奥密克戎毒株的药理活性,但其可能是主蛋白酶的非特异性抑制剂,抗病毒的作用机理极可能为抑制新型冠状病毒RNA聚合酶。 展开更多
关键词 紫草素 奥密克戎毒株 RNA聚合酶 主蛋白酶 荧光偏振筛选模型 分子对接
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烟草品种对辣椒脉斑驳病毒的抗性鉴定
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作者 申莉莉 张万红 +6 位作者 赵忠利 丁立合 刘东阳 沈广材 刘艳华 焦裕冰 杨金广 《中国烟草科学》 北大核心 2025年第1期40-45,共6页
辣椒脉斑驳病毒(chilli veinal mottle virus,ChiVMV)是西南烟区的主要病毒种类之一,近年对烟草的为害迅速上升。本文通过分子生物学检测和苗期汁液摩擦接种,鉴定了四川凉山和云南保山烟草ChiVMV分离物毒株、病害表型和主栽品种抗性。... 辣椒脉斑驳病毒(chilli veinal mottle virus,ChiVMV)是西南烟区的主要病毒种类之一,近年对烟草的为害迅速上升。本文通过分子生物学检测和苗期汁液摩擦接种,鉴定了四川凉山和云南保山烟草ChiVMV分离物毒株、病害表型和主栽品种抗性。结果显示:凉山和保山烟草ChiVMV分离物为引起叶片黄圆斑及坏死症状的重症株系。ChiVMV典型病叶为褪绿黄化的圆形亮斑、疱斑皱缩和病斑连片干枯。烤烟品种K326、NC89、G28、云烟85、云烟87、云烟105、云烟116、红花大金元、中烟100对ChiVMV表现不同程度的感病;N基因型烟草Samsun NN、CV91,以及va型烟草VAM,亦无明显的抗性。湄潭晒烟X45中抗ChiVMV,接种叶和系统侵染叶中病毒含量显著低于感病品种本氏烟和K326,是抗病育种的重要资源。 展开更多
关键词 辣椒脉斑驳病毒 毒株 抗病性 烟草品种
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应用Cre-LoxP系统构建牛结节性皮肤病病毒缺失TK基因毒株 被引量：1
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作者 张玉哲 任善会 +10 位作者 姚威 龚真莉 张红强 柳民意 尤婷 王相伟 李积雲 殷相平 孙跃峰 陈豪泰 万学瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4517-4529,共13页
利用同源重组技术及Cre-LoxP系统平台,构建牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)缺失TK基因毒株,为研制出安全、高效的LSDV基因工程疫苗提供备选毒株。以TK基因为靶基因,利用Cre-LoxP系统平台,红色荧光蛋白(RFP)为筛选标... 利用同源重组技术及Cre-LoxP系统平台,构建牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)缺失TK基因毒株,为研制出安全、高效的LSDV基因工程疫苗提供备选毒株。以TK基因为靶基因,利用Cre-LoxP系统平台,红色荧光蛋白(RFP)为筛选标记,采用重叠PCR方法扩增左、右同源臂以及RFP基因表达框并进行融合,将其克隆至pUC19T载体,构建基因缺失转移载体pUC19T-LSDV-ΔTK-RFP。将转移载体重组质粒转染至Vero细胞,并感染LSDV/CHA/FJ/2021毒株,构建LSDV-ΔTK-RFP重组病毒。采取蚀斑法、有限稀释法纯化LSDV-ΔTK-RFP。然后,利用Cre-LoxP系统,在MDBK-Cre细胞中从病毒基因组中切除RFP标签,采取蚀斑法和有限稀释法筛选并纯化LSDV-ΔTK毒株。利用PCR及测序方法对重组毒株进行鉴定,并测定其一步生长曲线。结果表明成功构建缺失TK基因的重组毒株(LSDV-ΔTK),重组毒株复制力略低于野生毒株。应用Cre-LoxP系统构建的缺失TK基因LSDV毒株,具有良好的遗传稳定性和复制生长特性,为后续LSDV基因工程疫苗的研制提供了候选毒株,同时拓展了Cre-LoxP系统的应用范围。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 TK基因 CRE/LOXP系统 重组毒株
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猫疱疹病毒Ⅰ型gIgE基因缺失毒株的构建及生物学特性分析 被引量：1
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作者 张晶晶 孙慧敏 +1 位作者 宋家升 鲍恩东 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期515-521,共7页
[目的]为了开发一种能够预防感染、阻止潜伏期建立的猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)弱毒疫苗,利用同源重组以及CRISPR/Cas9技术将FHV-1的gIgE基因替换为红色荧光蛋白基因(RFP)。[方法]构建针对gIgE基因的3条sgRNA及表达Cas9蛋白的质粒,将含有sg... [目的]为了开发一种能够预防感染、阻止潜伏期建立的猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)弱毒疫苗,利用同源重组以及CRISPR/Cas9技术将FHV-1的gIgE基因替换为红色荧光蛋白基因(RFP)。[方法]构建针对gIgE基因的3条sgRNA及表达Cas9蛋白的质粒,将含有sgRNA及Cas9蛋白的质粒与含有RFP的转移载体共转染到猫肾细胞(F81),通过噬斑纯化以及有限稀释方法进行病毒纯化,以重组病毒感染F81细胞连续10代验证其遗传稳定性,通过测定重组病毒以及亲本病毒H07的病毒滴度、一步生长曲线以及判断噬斑大小评价其生物学特性。[结果]成功构建了FHV-1 gIgE基因缺失毒株并将其命名为FHV-ΔgIgE-RFP;提取重组病毒DNA,通过PCR验证gIgE基因无目的条带,表明重组病毒纯化成功,再通过PCR验证RFP基因有目的条带,表明重组病毒成功插入外源基因。病毒滴度测定结果显示,与亲本病毒相比重组病毒的病毒滴度下降了90%;在F 1—F 10连续传代过程中RFP荧光表达且无减弱现象,表明重组病毒可稳定表达外源基因;测定FHV-ΔgIgE-RFP以及H07的生长曲线,重组病毒的生长趋势与亲本病毒大致相同,表明插入外源基因并不会改变病毒本身的生长特性;噬斑观察及染色结果显示,在病毒感染细胞前、后期,重组病毒的噬斑都小于亲本病毒,表明缺失gIgE基因后病毒毒力下降。[结论]成功构建并筛选出FHV-1 gIgE基因缺失致弱毒株,为开发疱疹病毒弱毒活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1) 致弱毒株 重组病毒 病毒筛选
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一株猪流行性腹泻病毒变异株的分离、鉴定与全基因组序列分析 被引量：1
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作者 刘曦 贾相超 +1 位作者 李晨曦 李自力 《湖北农业科学》 2024年第7期134-140,共7页
江苏省某猪场疑似发生猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),采集病料后,经RT-PCR检测PEDV呈阳性。病毒感染Vero细胞能够引起明显的细胞病变,间接免疫荧光鉴定结果显示病毒感染细胞后能被抗PEDV N蛋白的特异性单克隆抗体识别。... 江苏省某猪场疑似发生猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),采集病料后,经RT-PCR检测PEDV呈阳性。病毒感染Vero细胞能够引起明显的细胞病变,间接免疫荧光鉴定结果显示病毒感染细胞后能被抗PEDV N蛋白的特异性单克隆抗体识别。通过全基因组序列分析,鉴定该毒株为PEDV G2b亚型变异株,并将其命名为PEDV JS-B株。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离鉴定 变异毒株 分段测序 序列分析
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