柔嫩艾美耳球虫重组Profilin蛋白对鸡的免疫保护效果评价 被引量：1

1

作者 刘倩琳 李翌琳 +5 位作者 周爽 武欣欣 刘永宁 段思彰 安健 张建军 《北京农学院学报》 2024年第2期66-72,78,共8页

【目的】通过对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)Profilin基因进行原核表达和纯化,探明重组Profilin蛋白对鸡的免疫保护效果。【方法】设计合成Profilin基因特异性引物,提取E.tenella孢子化卵囊总RNA,反转录成cDNA,用PCR扩增获得Profilin基因... 【目的】通过对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)Profilin基因进行原核表达和纯化,探明重组Profilin蛋白对鸡的免疫保护效果。【方法】设计合成Profilin基因特异性引物,提取E.tenella孢子化卵囊总RNA,反转录成cDNA,用PCR扩增获得Profilin基因后连接至pET-32a(+)载体构建重组质粒pET-32a(+)-Profilin,在IPTG诱导下进行表达并纯化。用重组Profilin蛋白免疫雏鸡,随后经口服感染柔嫩艾美耳球虫卵囊,测定和统计雏鸡存活率、平均增重、血便计数、每克粪便卵囊数、卵囊产量、盲肠病变,计算抗球虫指数,观察盲肠组织病理学变化并测定血清中IL-2、IL-10、TNF-α、sIgA的水平以评估重组Profilin蛋白的免疫保护效果。【结果】成功表达了重组Profilin蛋白,大小为39.1 kDa。免疫保护试验表明:Profilin重组蛋白组鸡只存活率、鸡只血便数和OPG相对于感染不免疫攻虫组显著减少(P<0.05);50μg重组蛋白免疫组的体增重效果最好,达93%,卵囊产量最少,ACI效果最好;100μg重组蛋白免疫组的盲肠损伤最小,而免疫器官指数未见显著差异(P>0.05)。在攻虫后7 d,感染不免疫攻虫组血清中IL-2、TNF-α、IL-10以及sIgA水平相比于空白对照组均极显著升高(P<0.01),而重组蛋白免疫组血清中IL-2、TNF-α、IL-10以及sIgA水平极显著低于攻虫不免疫组(P<0.01)。【结论】柔嫩艾美耳球虫重组Profilin蛋白可减少感染雏鸡的增重损失和卵囊排出,引发雏鸡体内的细胞免疫和体液免疫,具有一定的免疫保护效果。 展开更多

关键词 柔嫩艾美耳球虫 原核表达 profilin 雏鸡 免疫保护

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大豆泛变应原profilin基因的克隆、序列分析和表位预测 被引量：3

2

作者 吴凯威 余晓 +2 位作者 刘志刚 宋娟娟 张红云 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-5,共5页

通过生物信息学方法对多种植物性食物和花粉泛变应原proflin基因进行比对,利用其中的高度保守区域设计并合成简并引物,通过RT-PCR克隆得到一个新的大豆profilin基因(396bp,pI为5.21,MW为14,1kD),序列同源性分析发现该基因和已知的多种... 通过生物信息学方法对多种植物性食物和花粉泛变应原proflin基因进行比对,利用其中的高度保守区域设计并合成简并引物,通过RT-PCR克隆得到一个新的大豆profilin基因(396bp,pI为5.21,MW为14,1kD),序列同源性分析发现该基因和已知的多种植物性食物、花粉变应原profilin有较高的同源性(>75%),因此认为其系大豆蛋白泛变应原profilin,命名为Gly m3.02,EMBL/GeneBank数据库登录号为DQ784852,这为进一步重组表达和抗原表位分析等奠定了实验基础。 展开更多

关键词 大豆 泛变应原 profilin 基因克隆

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Profilin-Ⅰ与心血管疾病 被引量：2

3

作者 程晋芳 倪国华 +1 位作者 胡长平 杨天伦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期564-566,共3页

Profilin-Ⅰ广泛存在于除骨骼肌之外的机体组织,是一种小分子量的肌动蛋白结合蛋白,调节肌动蛋白聚合及解聚过程;参与调节细胞的增殖、分化和运动过程以及信号转导。研究显示,Profilin-Ⅰ的改变可影响内皮细胞及平滑肌细胞等心血管主要... Profilin-Ⅰ广泛存在于除骨骼肌之外的机体组织,是一种小分子量的肌动蛋白结合蛋白,调节肌动蛋白聚合及解聚过程;参与调节细胞的增殖、分化和运动过程以及信号转导。研究显示,Profilin-Ⅰ的改变可影响内皮细胞及平滑肌细胞等心血管主要构成细胞的迁移、粘附、血管形成、收缩力、信号转导等,在冠心病、高血压、糖尿病等心血管疾病的发生中起重要作用。该文综述profilin-Ⅰ的结构、功能及其在心血管疾病中的研究进展。 展开更多

关键词 profilin-Ⅰ 心血管疾病 高血压 冠心病 糖尿病 内皮细胞 平滑肌细胞

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椰子花粉过敏原profilin蛋白体外重折叠过程的光谱学研究 被引量：1

4

作者 罗海梅 肖杰 +3 位作者 邬玉兰 刘志刚 Jun Lu 徐宏 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期2428-2432,共5页

在基因工程技术中,采用原核表达系统获得的重组蛋白通常都是以包涵体的形式存在。利用圆二色性光谱、荧光光谱和同步荧光光谱对尿素诱导的重组椰子花粉泛过敏原profilin蛋白包涵体的复性过程进行了系统的光谱学研究,得到了profilin蛋白... 在基因工程技术中,采用原核表达系统获得的重组蛋白通常都是以包涵体的形式存在。利用圆二色性光谱、荧光光谱和同步荧光光谱对尿素诱导的重组椰子花粉泛过敏原profilin蛋白包涵体的复性过程进行了系统的光谱学研究,得到了profilin蛋白复性过程的光谱学特征;结合生物信息学方法,通过对profilin蛋白的二级结构和三级结构的预测,进一步分析了复性过程中profilin蛋白构象变化的特点,初步建立了一种新的检测重组变应原蛋白复性程度的光谱学实验方法,为重组蛋白包涵体复性机理的深入研究进行了有益的探索。 展开更多

关键词 椰子花粉 变应原 profilin 体外重折叠 透析 生物信息学

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家蚕过敏原Profilin的表达、纯化、免疫学鉴定及其生物信息学分析 被引量：1

5

作者 胡维 梁志林 +2 位作者 王良录 钟慧玲 刘志刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期81-84,共4页

目的:克隆表达家蚕(Bombyx mori)Profilin蛋白,鉴定其免疫原性并进行B细胞抗原表位预测和构建分子进化树。方法:从NCBI上获取家蚕Profilin蛋白的基因序列,合成该基因并构建到pet-28a表达载体上,重组质粒转化至E.coli BL21,IPTG诱导基因... 目的:克隆表达家蚕(Bombyx mori)Profilin蛋白,鉴定其免疫原性并进行B细胞抗原表位预测和构建分子进化树。方法:从NCBI上获取家蚕Profilin蛋白的基因序列,合成该基因并构建到pet-28a表达载体上,重组质粒转化至E.coli BL21,IPTG诱导基因表达,通过亲和层析获取高纯度蛋白;用Western blot方法对重组蛋白进行过敏原性鉴定;通过DNAStar软件分析其潜在的B细胞抗原表位;应用MEGA5.05进行序列比对,并构建分子进化树。结果:成功表达出重组蛋白,且重组蛋白与家蚕过敏患者血清有一定的Ig E结合。结论:成功克隆表达出具有免疫原性的Profilin蛋白,并成功预测出其B细胞抗原表位和构建出分子进化树。 展开更多

关键词 家蚕 profilin蛋白 过敏原

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Profilin在弓形虫侵入宿主细胞及诱导免疫应答中作用的研究进展 被引量：1

6

作者 熊乙丁 杨瑞 +1 位作者 岳续鹏 寥业 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1110-1114,共5页

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的专性细胞内寄生原虫,可寄生在除红细胞外的所有有核细胞中,引起人兽共患病。弓形虫主要通过粪口途径传播,以受损皮肤、黏膜及垂直传播为次要途径。感染后,弓形虫需侵入宿主细胞并形... 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的专性细胞内寄生原虫,可寄生在除红细胞外的所有有核细胞中,引起人兽共患病。弓形虫主要通过粪口途径传播,以受损皮肤、黏膜及垂直传播为次要途径。感染后,弓形虫需侵入宿主细胞并形成纳虫空泡才能完成繁殖周期,研究表明弓形虫的肌动蛋白结合蛋白profilin(TgPRF)在调节虫体肌动蛋白聚合及侵入宿主细胞中发挥重要作用。同时,TgPRF也可通过Toll样受体(TLR)作为诱导宿主免疫应答尤其是固有免疫的优势抗原。本文就TgPRF的结构特点及其在虫体侵袭性、诱导宿主免疫应答方面的研究进行综述,为深入了解弓形虫的致病机制和免疫预防提供参考。 展开更多

关键词 弓形虫 profilin TOLL样受体 树突细胞 免疫应答

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刚地弓形虫肌动蛋白profilin的原核表达和纯化

7

作者 李会敏 伊焕发 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1109-1114,共6页

目的:探讨刚地弓形虫肌动蛋白profilin(TgPRF)的原核表达体系和纯化条件,为后续的抗肿瘤免疫佐剂研究提供依据。方法:以弓形虫RH株速殖子的cDNA为模板,采用一对特定的引物扩增TgPRF基因的编码区。PCR产物双酶切后克隆入pET28a(+)载体中... 目的:探讨刚地弓形虫肌动蛋白profilin(TgPRF)的原核表达体系和纯化条件,为后续的抗肿瘤免疫佐剂研究提供依据。方法:以弓形虫RH株速殖子的cDNA为模板,采用一对特定的引物扩增TgPRF基因的编码区。PCR产物双酶切后克隆入pET28a(+)载体中。重组的pET28a(+)-TgPRF质粒转化E.coli DH5α感受态细胞。双酶切鉴定阳性克隆,并选取测序正确的质粒转化E.coli BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达4 h,SDS-PAGE法检测TgPRF蛋白的表达,Western blotting法检测重组蛋白His-prolilin的表达。结果:PCR扩增产物长度为492bp。经双酶切和测序,重组质粒pET28a-TgPRF连接产物构建成功。SDSPAGE检测,目的蛋白在超声菌液的上清中表达。经Ni-NTA琼脂糖凝胶柱纯化,获得纯化的TgPRF蛋白(纯度>90%)。Western blotting检测,重组TgPRF蛋白能被Anti-His抗体识别。结论:成功构建重组质粒pET28a-TgPRF,并实现可溶性原核表达。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 profilin 原核表达 蛋白纯化

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猪血小板外廓蛋白（profilin）的分离纯化和鉴定 被引量：3

8

作者 黄才 梁念慈 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第1期55-57,共3页

本文合成了一种聚脯氨酸亲和层析凝胶，并用这种凝胶纯化了猪血小板外廓蛋白。纯化的外廓蛋白在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈单一蛋白带，分子量１４ｋＤ；在体外能显著抑制肌动蛋白聚合。

关键词 猪 外廓蛋白 血小板 分离 提纯

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橡胶树前纤维蛋白(profilin)基因家族的鉴定及表达分析

9

作者 邓治 李德军 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第9期2443-2450,共8页

肌动蛋白细胞骨架可能在橡胶树乳管伤口堵塞过程中发挥重要作用。前纤维蛋白(profilin)是肌动蛋白动态平衡的重要调节子,但对橡胶树profilin基因家族系统研究的报道较少。通过分析橡胶树基因组和转录组数据,鉴定到6个橡胶树profilin基因... 肌动蛋白细胞骨架可能在橡胶树乳管伤口堵塞过程中发挥重要作用。前纤维蛋白(profilin)是肌动蛋白动态平衡的重要调节子,但对橡胶树profilin基因家族系统研究的报道较少。通过分析橡胶树基因组和转录组数据,鉴定到6个橡胶树profilin基因,对其基本特性及蛋白保守基序、结构特征、进化关系和表达模式等进行分析。基因结构分析表明,橡胶树profilin基因都包含3个外显子2个内含子,编码的蛋白序列含有profilin蛋白特有的保守基序KYMVIQGE和VIRGKKG。进化分析显示,橡胶树profilin并未严格分为营养型和生殖型2种类型。profilin蛋白二级结构以无规则卷曲为主,三级结构均包含3个α螺旋和7个β折叠。表达分析结果显示,4个profilin基因在胶乳中高表达,橡胶树排胶和碘化钾处理调控这4个profilin基因表达,推测profilin基因参与橡胶树排胶过程。该研究结果为进一步阐明橡胶树profilin基因在乳管伤口堵塞和排胶中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 前纤维蛋白基因家族 橡胶树 排胶 表达分析

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盐胁迫对拟南芥Profilins和ADFs转录水平的影响

10

作者 倪娇娇 马文佳 +1 位作者 曹树青 樊婷婷 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第10期1425-1428,共4页

盐胁迫是影响植物生长发育的重要影响因子,是造成农业减产的重要因素之一。因此抗盐基因的功能研究具有重要的理论意义和应用价值。以往的研究表明,肌动蛋白细胞骨架在植物对盐胁迫的响应中起着重要作用,但肌动蛋白结合蛋白在盐胁迫中... 盐胁迫是影响植物生长发育的重要影响因子,是造成农业减产的重要因素之一。因此抗盐基因的功能研究具有重要的理论意义和应用价值。以往的研究表明,肌动蛋白细胞骨架在植物对盐胁迫的响应中起着重要作用,但肌动蛋白结合蛋白在盐胁迫中的作用尚不清楚。文章以拟南芥为试验材料,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术探讨profilins和ADFS基因在盐胁迫处理下的表达。结果表明,用150mmol/L NaCl处理2周野生型拟南芥幼苗时profilins和ADFs基因的表达量明显升高,说明profilins和ADFs基因可能受到NaCl诱导。该实验结果为进一步研究该基因调控植物抗盐的机制提供了基础。 展开更多

关键词 盐胁迫 ADFs基因 拟南芥 profilins基因 基因表达

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Characterization and Functional Analysis of a Cotton Profilin Gene

11

作者 Yuan-li LI , Jie SUN, Chun-hong LI, Yong-qing ZHU,Gui-xian XIA(1. Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, China 2. Institute of Plant Physiology and Ecology,Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2002年第S1期44-44,共1页

In plants,several cellular processes like celldivision,differentiation,polar growth,andresponse to pathogen attack depend on rapidreorganization of the actin cytoskeleton.Thereconstruction of actin filaments is contro... In plants,several cellular processes like celldivision,differentiation,polar growth,andresponse to pathogen attack depend on rapidreorganization of the actin cytoskeleton.Thereconstruction of actin filaments is controlled bya wide variety of actin-binding proteins,ofwhich,profilin is one of the key modulators. 展开更多

关键词 COTTON COTTON ELONGATION profilin pathogen CYTOSKELETON designated phenotype FILAMENTS polar

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Profilin1的生物学作用研究进展

12

作者 訾晶晶 杨旭 +3 位作者 来裕婷 李新 丁向彬 张林林 《天津农学院学报》 CAS 2022年第3期78-83,共6页

Profilin最初发现于1976年,是最早确定的肌动蛋白(actin)结合蛋白之一,因其重要的生物学作用而被广泛研究。Profilin1因可以与肌动蛋白结合从而调控细胞骨架的聚合,成为最普遍存在的亚型。最近许多研究表明,Profilin1在癌症和人类疾病... Profilin最初发现于1976年,是最早确定的肌动蛋白(actin)结合蛋白之一,因其重要的生物学作用而被广泛研究。Profilin1因可以与肌动蛋白结合从而调控细胞骨架的聚合,成为最普遍存在的亚型。最近许多研究表明,Profilin1在癌症和人类疾病中也有重要的作用。本文介绍Profilin1的生物学作用,进一步解释其对细胞骨架的调控机制,并讨论Profilin1在癌症和人类疾病中的生理和病理作用。 展开更多

关键词 profilin1 细胞骨架 肌动蛋白 癌症 疾病

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糖尿病肾病小鼠中前纤维蛋白1的表达和免疫细胞浸润分析

13

作者 麦丽萍 黄桂萍 +3 位作者 邓春玉 郑丹琳 李晓红 何国东 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期484-492,共9页

目的:探讨前纤维蛋白1(profilin 1,PFN1)在糖尿病肾病小鼠中的表达及其与免疫细胞浸润的相关性。方法:利用糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据分析PFN1的表达水平和免疫细胞浸润情况,并通过小鼠动物实验进行验证。将16只C57BL/6小... 目的:探讨前纤维蛋白1(profilin 1,PFN1)在糖尿病肾病小鼠中的表达及其与免疫细胞浸润的相关性。方法:利用糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据分析PFN1的表达水平和免疫细胞浸润情况,并通过小鼠动物实验进行验证。将16只C57BL/6小鼠随机分为正常组和模型组,每组8只。模型组采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病肾病小鼠模型,造模成功后检测小鼠肾组织中CD11b、F4/80、CC趋化因子受体4(CC chemo kine receptor 4,CCR4)、白细胞介素1受体I型(interleukin-1 receptor type I,IL-1R1)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lympho ma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达水平。另外,在糖尿病肾病细胞模型中过表达PFN1,检测单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和cas pase-3蛋白的表达情况。结果:糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据集GSE30122中,PFN1基因表达量显著升高(P<0.01),且与巨噬细胞和T细胞有显著相关性。糖尿病肾病小鼠模型组肾脏组织可见明显病理改变,肾脏组织中PFN1表达量显著升高(P<0.01),免疫指标CD11b、F4/80、CCR4、IL-1R1和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cas pase-3表达升高(P<0.01)。过表达PFN1可促进MCP-1和caspase-3蛋白的表达。结论:糖尿病肾病小鼠肾组织中可见巨噬细胞和Th17免疫细胞浸润且PFN1表达上调,促进糖尿病肾病细胞凋亡。 展开更多

关键词 前纤维蛋白1 糖尿病肾病 细胞免疫浸润 细胞凋亡

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1,25(OH)2VD3在过敏原特异性免疫治疗花粉过敏哮喘中的应用 被引量：3

14

作者 肖小军 张慧云 +3 位作者 林瑛姿 刘志刚 杨平常 刘晓宇 《江西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期186-189,共4页

以1,25(OH)_2VD_3为佐剂制备软叶针葵花粉变应原疫苗,以小鼠致敏哮喘模型为研究对象进行特异性免疫治疗.通过检测小鼠气道高反应性、血清中特异性抗体、细胞因子以及肺组织病理学切片等指标对治疗模型的构建进行评价,探讨1,25(OH)_2VD_... 以1,25(OH)_2VD_3为佐剂制备软叶针葵花粉变应原疫苗,以小鼠致敏哮喘模型为研究对象进行特异性免疫治疗.通过检测小鼠气道高反应性、血清中特异性抗体、细胞因子以及肺组织病理学切片等指标对治疗模型的构建进行评价,探讨1,25(OH)_2VD_3在过敏原特异性免疫治疗花粉过敏哮喘免疫机制中的作用.结果表明:以1,25(OH)_2VD_3为变应原疫苗能有效抑制花粉特异性Ig E的产生和Th2细胞因子IL-4分泌,促进封闭性抗体Ig G2a产生和Th1细胞因子IFN-γ的分泌,增加耐受性细胞因子IL-10生产,使Th2反应向Th1反应转变.1,25(OH)_2VD_3在花粉过敏性哮喘治疗中能大幅提高过敏原特异性免疫治疗的疗效. 展开更多

关键词 1 25(OH)2VD3 特异性免疫治疗 过敏哮喘 软叶针葵 profilin

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椰子花粉过敏原基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定 被引量：2

15

作者 孟光 姚敏 +2 位作者 刘志刚 邬玉兰 张红云 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期532-535,共4页

目的:克隆并表达椰子花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(Profilin)。方法:利用RT-PCR结合RACE技术克隆椰子花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个椰子花粉profilin的开... 目的:克隆并表达椰子花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(Profilin)。方法:利用RT-PCR结合RACE技术克隆椰子花粉中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。然后设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个椰子花粉profilin的开放阅读框,将其与pET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性。结果:克隆获得了椰子花粉profilin的全长基因,由608个碱基组成,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。经分析,这个序列编码的蛋白为小分子量酸性蛋白,等电点为4.61,分子量约为14 kD。此序列已被GeneBank收录,登陆号为EF173598。重组椰子花粉profilin在大肠杆菌中高效的表达和纯化后,经Western blot检测具有良好的免疫学活性。结论:成功地克隆和表达了椰子花粉profilin,为该花粉profilin用于椰子花粉过敏诊断和免疫治疗提供了理论依据。 展开更多

关键词 椰子花粉 profilin 基因表达 纯化 鉴定

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细粒棘球蚴和多房泡球蚴在人体内蛋白质表达谱初步分析 被引量：3

16

作者 张耀刚 李超群 +1 位作者 毋德芳 曹得萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期21-23,共3页

目的 初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴（原头节、囊壁、囊液）和多房棘球绦虫幼虫泡球蚴在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法 利用SDS-PAGE和Western-blot分析棘球蚴原头节、囊壁、囊液蛋白质和泡球蚴总蛋白表达谱。结果... 目的 初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴（原头节、囊壁、囊液）和多房棘球绦虫幼虫泡球蚴在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法 利用SDS-PAGE和Western-blot分析棘球蚴原头节、囊壁、囊液蛋白质和泡球蚴总蛋白表达谱。结果 细粒棘球蚴原头节的蛋白质浓集在分子量72kDa处,囊壁的蛋白质浓集在72kDa、26kDa和17kDa处,囊液的蛋白浓集在72kDa、43~55kDa、26kDa和17kDa;泡球蚴总蛋白质浓集在分子量72kDa、55~72kDa和26kDa处。结论 不同地区细粒棘球蚴在人体内蛋白的表达存在差异;不同亚种泡球蚴原头节蛋白的表达存在差异。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 多房泡球蚴 蛋白质表达谱

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三叶木通花粉前纤维蛋白基因的克隆与表达 被引量：1

17

作者 熊大胜 周精华 +2 位作者 喻娇 刘海军 席在星 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1505-1511,共7页

以三叶木通花蕾为材料,采用RT-PCR、3-′RACE方法克隆了三叶木通花粉前纤维蛋白基因,命名为Atf-Pro(GenBank登录号GQ478584)。结果表明:AtfPro的cDNA全长735 bp、阅读框393 bp、编码131个氨基酸,有1个342 bp的3′端非翻译区。预测分子... 以三叶木通花蕾为材料,采用RT-PCR、3-′RACE方法克隆了三叶木通花粉前纤维蛋白基因,命名为Atf-Pro(GenBank登录号GQ478584)。结果表明:AtfPro的cDNA全长735 bp、阅读框393 bp、编码131个氨基酸,有1个342 bp的3′端非翻译区。预测分子量约为14.081 kD,等电点4.74。氨基酸和核苷酸序列的同源性分析发现,AtfPro基因属于植物花粉profilin基因家族的新成员。RT-PCR定性分析表明,AtfPro基因在三叶木通花蕾、花药、雌花花瓣和柱头组织中均有表达,但在幼叶、茎尖、根尖组织中低水平表达或不表达,生殖器官中的表达时期从花序分化发育开始到开花散粉结束。 展开更多

关键词 三叶木通 花粉前纤维蛋白 克隆与分析 表达

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猪新基因PFN3电子克隆、RT-PCR验证和组织表达分析 被引量：1

18

作者 张永云 赵跃 +9 位作者 王锐 秦彩艳 王配 王淑燕 李福泉 刘丽仙 霍海龙 李卫真 卢健 霍金龙 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第2期179-186,共8页

通过NCBI下载猪近缘物种的PFN3基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列,利用Lasergene软件电子克隆猪PFN3基因编码区序列及部分侧翼序列。针对编码区设计特异引物并以滇南小耳猪为研究材料进行实验验证,同时应用半定量RT-PCR技术对30个组... 通过NCBI下载猪近缘物种的PFN3基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列,利用Lasergene软件电子克隆猪PFN3基因编码区序列及部分侧翼序列。针对编码区设计特异引物并以滇南小耳猪为研究材料进行实验验证,同时应用半定量RT-PCR技术对30个组织进行了表达分析。研究获得了猪PFN3 414 bp的编码区序列(GenBank登录号:JX457348,对应的氨基酸登录号:AFU74013)。生物信息学分析表明,该基因编码137个氨基酸,预测的蛋白质分子量(Mw)为14.73 ku,等电点(pI)为9.30。蛋白质结构分析显示,PFN3存在1个保守域,无信号肽;疏水性分析表明其N端和C端均具有亲水性;亚细胞定位显示,该蛋白位于细胞质的概率是94.1%。系统进化分析表明,猪与牛亲缘关系最近。组织表达分析表明,PFN3基因在30个被检组织中均有表达,在睾丸、肝、肾、结肠、盲肠、直肠及食管中高表达,在胸腺、甲状腺、附睾、淋巴结、十二指肠、空肠、回肠、胃、皮肤、大脑、小脑、垂体及下丘脑中中度表达,在颌下腺、肺、心、脾、肾上腺、肌肉、胰脏、脑干、舌下腺及脊髓中低表达。研究结果将为该基因在猪中的进一步功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 肌动蛋白结合蛋白-3 电子克隆 滇南小耳猪 生物信息学 组织表达

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白菜花药特异基因BcPRO的克隆及表达分析 被引量：2

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作者 蒋明 曹家树 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-6,共6页

根据基因数据库已有的Profilin 4序列设计简并引物,在白菜花蕾cDNA中成功克隆到前纤维蛋白基因,命名为BcPRO,在基因库中的登陆号为EF492988.BcPRO基因编码区由405个核苷酸组成,编码134个氨基酸,推导的氨基酸序列与甘蓝型油菜和拟南芥的... 根据基因数据库已有的Profilin 4序列设计简并引物,在白菜花蕾cDNA中成功克隆到前纤维蛋白基因,命名为BcPRO,在基因库中的登陆号为EF492988.BcPRO基因编码区由405个核苷酸组成,编码134个氨基酸,推导的氨基酸序列与甘蓝型油菜和拟南芥的花粉前纤维蛋白分别有95%和92%的同源性.RT-PCR表明,BcPRO基因仅在保持系的Ⅲ级、Ⅳ级和Ⅴ级花蕾及Polima雄性不育系的Ⅲ级和Ⅳ级花蕾中表达,并且表达量逐级增大,而在莲座叶、花茎叶、茎、根及Ogura雄性不育系的所有部位均未能检测到.进一步研究发现,BcPRO基因在花药中表达,在萼片、花丝、雌蕊、花瓣等部位均未见表达.这些实验结果表明,BcPRO基因为花药特异基因,可能在花粉发育过程中起着重要作用,并且在相同核背景下,有着不同的细胞核-细胞质互作模式.文中还就不同植物花粉前纤维蛋白氨基酸序列进行了比对、分析. 展开更多

关键词 白菜 花药特异 雄性不育 前纤维蛋白基因

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丝切蛋白1及前纤维蛋白1在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义 被引量：4

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作者 崔守斌 姜英 武昕 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期10-14,共5页

目的探究丝切蛋白1(CFL1)及前纤维蛋白1(PFN1)在外阴鳞状细胞癌(VSCC)中的表达与意义。方法采用免疫组化和免疫印迹方法检测CFL1及PFN1在VSCC中的表达及其与临床病理资料相关性。结果 CFL1在VSCC中的表达显著高于外阴的正常皮肤(P<0.... 目的探究丝切蛋白1(CFL1)及前纤维蛋白1(PFN1)在外阴鳞状细胞癌(VSCC)中的表达与意义。方法采用免疫组化和免疫印迹方法检测CFL1及PFN1在VSCC中的表达及其与临床病理资料相关性。结果 CFL1在VSCC中的表达显著高于外阴的正常皮肤(P<0.05);临床Ⅲ期的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);在低分化、中分化的VSCC中的表达明显高于高分化VSCC(P<0.05);伴淋巴结转移的表达明显高于无淋巴结转移(P<0.05)。PFN1在VSCC中的表达显著高于外阴的正常皮肤(P<0.05);临床Ⅲ期的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);伴淋巴结转移的表达明显高于无淋巴结转移(P<0.05);VSCC低、中分化和高分化之间没有统计学差异(P>0.05)。Pearson相关性分析结果表明:CFL1及PFN1在VSCC中的表达呈正相关(r2=0.753,P<0.001)。结论 CFL1及PFN1的表达与VSCC的发生和发展有关。 展开更多

关键词 丝切蛋白1 前纤维蛋白1 外阴鳞状细胞癌 免疫组化 免疫印迹

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