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人BMP4基因的克隆及其原核表达载体的构建
1
作者
刘秋英
陈伟
+4 位作者
毛国梁
熊盛
钱垂文
利奕成
王一飞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期90-92,共3页
以成熟人胎盘组织为材料来源,克隆人BMP-4基因的全长cDNA,经过PCR扩增后与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-BMP4克隆质粒。酶切后回收小片段与表达载体pET-22b的多克隆酶切位点连接,构建原核表达载体pET22b-BMP4,酶切及测序鉴定重组子。重...
以成熟人胎盘组织为材料来源,克隆人BMP-4基因的全长cDNA,经过PCR扩增后与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-BMP4克隆质粒。酶切后回收小片段与表达载体pET-22b的多克隆酶切位点连接,构建原核表达载体pET22b-BMP4,酶切及测序鉴定重组子。重组质粒转化至感受态的Rosseta宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示,从胎盘组织中成功地克隆到人BMP4基因,与NCBI中公布的序列100%相符合,原核表达载体pET22b-BMP4转化至Rosseta构建表达菌体,经IPTG诱导后电泳分析可见重组蛋白表达的条带。
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关键词
骨形成蛋白4
基因克隆
原核表达
pmd18-t载体
pET-22b
载体
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职称材料
伪狂犬病毒粤A毒株TK基因的扩增、克隆与序列测定
被引量：
3
2
作者
吴德铭
罗满林
+2 位作者
黄毓茂
刘镇明
邬苏晓
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期71-73,共3页
以华南农业大学兽医学院传染病教研室分离的伪狂犬病毒粤A毒株 (PRVYA)的基因组为模板 ,利用聚合酶链反应 (PCR)扩增TK基因 ,获得预定大小的片段 ,将这一片段克隆到PMD18-T载体中 .对重组质粒PMD18-TK进行PCR鉴定、限制性内切酶分析和...
以华南农业大学兽医学院传染病教研室分离的伪狂犬病毒粤A毒株 (PRVYA)的基因组为模板 ,利用聚合酶链反应 (PCR)扩增TK基因 ,获得预定大小的片段 ,将这一片段克隆到PMD18-T载体中 .对重组质粒PMD18-TK进行PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较 ,证实了克隆片段的可靠性 .
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关键词
伪狂犬病毒
粤A毒株
TK基因
扩增
克隆
序列测定
聚合酶链反应
pmd18-t载体
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职称材料
题名
人BMP4基因的克隆及其原核表达载体的构建
1
作者
刘秋英
陈伟
毛国梁
熊盛
钱垂文
利奕成
王一飞
机构
暨南大学生命科学技术学院生物医药研究开基地
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期90-92,共3页
基金
广东省教育部产学研结合项目(2009B090200070)
文摘
以成熟人胎盘组织为材料来源,克隆人BMP-4基因的全长cDNA,经过PCR扩增后与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-BMP4克隆质粒。酶切后回收小片段与表达载体pET-22b的多克隆酶切位点连接,构建原核表达载体pET22b-BMP4,酶切及测序鉴定重组子。重组质粒转化至感受态的Rosseta宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示,从胎盘组织中成功地克隆到人BMP4基因,与NCBI中公布的序列100%相符合,原核表达载体pET22b-BMP4转化至Rosseta构建表达菌体,经IPTG诱导后电泳分析可见重组蛋白表达的条带。
关键词
骨形成蛋白4
基因克隆
原核表达
pmd18-t载体
pET-22b
载体
Keywords
Bone morphogenetic protein 4 Gene clone Prokaryotic expression
pmd
18
-t
vector pET-22b vector
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
伪狂犬病毒粤A毒株TK基因的扩增、克隆与序列测定
被引量：
3
2
作者
吴德铭
罗满林
黄毓茂
刘镇明
邬苏晓
机构
华南农业大学兽医学院
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期71-73,共3页
基金
广东省科技攻关课题 (ZKM0 35 0 7N)
国家自然科学基金项目 (39770 0 33)
文摘
以华南农业大学兽医学院传染病教研室分离的伪狂犬病毒粤A毒株 (PRVYA)的基因组为模板 ,利用聚合酶链反应 (PCR)扩增TK基因 ,获得预定大小的片段 ,将这一片段克隆到PMD18-T载体中 .对重组质粒PMD18-TK进行PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较 ,证实了克隆片段的可靠性 .
关键词
伪狂犬病毒
粤A毒株
TK基因
扩增
克隆
序列测定
聚合酶链反应
pmd18-t载体
Keywords
pseudorabies virus(PRV)
YA strain
PCR
TK gene fragment
pmd
18
-t
vector
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人BMP4基因的克隆及其原核表达载体的构建
刘秋英
陈伟
毛国梁
熊盛
钱垂文
利奕成
王一飞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
2
伪狂犬病毒粤A毒株TK基因的扩增、克隆与序列测定
吴德铭
罗满林
黄毓茂
刘镇明
邬苏晓
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
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参考文献
引证文献
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