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活动性结核病人PBMCs中转录因子PLZF的表达降低与iNKT细胞的减少相关 被引量：6
1
作者 刘艳华 翟斐 +3 位作者 王心静 曹志红 杨秉芬 程小星 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期831-834,839,共5页
目的:比较活动性结核病人和健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子PLZF(Promyelocytic leukemiazinc finger)的表达和iNKT细胞含量的差异,研究活动性结核病人PBMCs中PLZF的表达与iNKT细胞含量的相关性。方法:采集活动性结核病人和健... 目的:比较活动性结核病人和健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子PLZF(Promyelocytic leukemiazinc finger)的表达和iNKT细胞含量的差异,研究活动性结核病人PBMCs中PLZF的表达与iNKT细胞含量的相关性。方法:采集活动性结核病人和健康人新鲜的抗凝血,淋巴细胞分离液分离PBMCs。每个样本的PBMCs分两份,一份细胞用Trizol法提取总RNA,荧光定量PCR检测PLZF mRNA的相对表达量;另一份细胞用特异性抗体标记iNKT细胞,流式细胞仪检测iNKT细胞的含量。统计学软件分析两组样本PLZF的表达和iNKT细胞含量的差异,以及PLZF的表达与iNKT细胞含量的相关性。结果:活动性结核病人PMBCs中PLZF的表达和iNKT细胞含量均显著低于健康对照(P值分别为0.010 2和0.001 2),PLZF的表达与iNKT细胞的含量成正相关(r=0.480 4,P=0.027 5)。结论:活动性结核病人PLZF的表达降低与iNKT细胞百分含量的减少相关。 展开更多
关键词 活动性结核病人 plzf INKT细胞
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氧化砷和维甲酸对PLZF-RARa阳性U937细胞的作用 被引量：2
2
作者 陈思宇 马立恒 +2 位作者 董颖 郭伟剑 王振义 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期824-826,833,共4页
目的:研究氧化砷(As2O3)和全反式维甲酸(AT-RA)对PLZF-RARα阳性细胞的作用。方法:稳定转染PLZF-RARα基因的U937细胞(U937/PLZF)经As2O3、ATRA处理后,Wright-Giemsa染色观察细胞形态,MTT法检测细胞生长增殖状态,流式细胞术(FCM)检测细... 目的:研究氧化砷(As2O3)和全反式维甲酸(AT-RA)对PLZF-RARα阳性细胞的作用。方法:稳定转染PLZF-RARα基因的U937细胞(U937/PLZF)经As2O3、ATRA处理后,Wright-Giemsa染色观察细胞形态,MTT法检测细胞生长增殖状态,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞表面分化抗原CD11b、CD64、CD14等的表达变化,荧光免疫细胞化学染色检测融合蛋白表达,细胞化学染色和硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验观察细胞功能分化情况。结果:U937/PLZF细胞在去除四环素条件培养后,PLZF-RARα表达明显增加。As2O3(0.5μmol/L)联合ATRA(1μmol/L)使U937/PLZF细胞核质比缩小,核仁减少但未消失;生长增殖受抑;S期细胞减少;CD11b表达增高;PLZF-RARα蛋白表达减弱,分布以胞核弥漫细小颗粒为主。细胞化学染色和NBT反应变化不明显。结论:0.5μmol/L As2O3联合1μmol/L ATRA可使PLZF-RARα阳性U937细胞产生轻微的形态学分化趋势,尚不足以引起其发生功能分化。 展开更多
关键词 plzf 维甲酸 氧化砷 急性早幼粒白血病
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PLZF-RARα/RARα-PLZF双阳性转基因小鼠发生白血病模型研究 被引量：3
3
作者 陈丽娟 董颖 +6 位作者 陈思宇 张龙 周光飚 陈冰 王龙 陈竺 陈赛娟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期924-931,共8页
本研究目的是从生物整体水平上研究PLZFRARα/RARαPLZF双融合基因的表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病中的作用及发病机制。通过交配建立PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠(TM)模型;采用PCR、RTPCR方法检测融合基因的整合和表达... 本研究目的是从生物整体水平上研究PLZFRARα/RARαPLZF双融合基因的表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病中的作用及发病机制。通过交配建立PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠(TM)模型;采用PCR、RTPCR方法检测融合基因的整合和表达;应用血象、骨髓象、病理和流式细胞术等对疾病表型进行检测分析;并观察全反式维甲酸(ATRA)或ATRA与tricostatinA(TSA)联合用药对PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠骨髓细胞的作用。结果表明,在近18个月的时间观察到51只PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠中有5只小鼠发病,发病率约10%,与我所同期的仅PLZFRARα转基因阳性小鼠11.3%的发病率相似。发病时间均在6月龄以后,与PLZFRARα转基因阳性发病小鼠相比示提前,但疾病表型不同,2只(40%)为急性早幼粒细胞白血病(APL)改变,3只(60%)为慢性粒细胞白血病(CML)改变。ATRA处理组的骨髓细胞形态无改变,而ATRA+TSA组骨髓原始细胞核浆比例降低,染色质固缩,呈现粒细胞分化趋势。结论PLZFRARα/RARαPLZFTM小鼠发病存在异质性,其骨髓细胞对ATRA无反应,而ATRA与TSA联合用药可诱导骨髓原始早幼粒细胞分化。 展开更多
关键词 plzf-RARα/RARα-plzf 急性早幼粒细胞白血病 慢性粒细胞白血病 转基因小鼠
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PLZF与哺乳动物雄性生殖干细胞的发育分化 被引量：3
4
作者 宋文聪 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期825-832,共8页
早幼粒细胞白血病锌指蛋白(promyelocytic leukemia zinc finger,PLZF),也被称为ZBTB16(zinc finger and BTB domain containing 16,ZBTB16)或锌指蛋白145(zinc finger protein 145,ZFP145),是我国学者发现与人类疾病相关的蛋白质.人类P... 早幼粒细胞白血病锌指蛋白(promyelocytic leukemia zinc finger,PLZF),也被称为ZBTB16(zinc finger and BTB domain containing 16,ZBTB16)或锌指蛋白145(zinc finger protein 145,ZFP145),是我国学者发现与人类疾病相关的蛋白质.人类PLZF的是由673个氨基酸残基组成的转录抑制因子,属于蛋白质超家族.该超家族以N端的BTB/POZ(bric-à-brac,tramtrack,brad complex(BTB)/poxvirus zinc finger(POZ)domain)结构为特征.PLZF蛋白的BTB/POZ结构与个体发育、胚胎发生、染色体的重构等事件相关.近年发现,PLZF在哺乳动物雄性生殖干细胞(male germline stem cells,mGSCs)发育分化过程中也发挥重要作用.探讨PLZF的生物学功能和作用机制,将有助于理解其在mGSCs发育过程中的重要作用.本文就PLZF在维持mGSCs自我更新和在发育分化调控中的作用给予综述. 展开更多
关键词 早幼粒细胞白血病锌指蛋白(plzf) 雄性生殖干细胞 自我更新 发育 分化 哺乳动物
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热应激对小鼠睾丸组织和精原干细胞中Sirt1、PLZF和Oct4基因表达的影响 被引量：2
5
作者 田贝贝 康恺 +4 位作者 傅诗洁 赵一 效梅 安立龙 吴江 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第10期20-27,共8页
高温应激会损伤哺乳动物生殖系统,造成生殖器官组织形态和基因表达的改变,导致精子发生异常。成年动物睾丸中精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)具有不断增殖和自我更新的能力,是精子发生的基础,而 PLZF (Promyelocytic Leukem... 高温应激会损伤哺乳动物生殖系统,造成生殖器官组织形态和基因表达的改变,导致精子发生异常。成年动物睾丸中精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)具有不断增殖和自我更新的能力,是精子发生的基础,而 PLZF (Promyelocytic Leukemia Zinc Finger)和 Oct4 (octamer-binding transcription factor)证实均是维持精原干细胞自我更新和增殖的重要基因。在精原干细胞中过表达 Sirt1 (Sirtuin type 1)基因能上调 PLZF和Oct4 的表达。此试验以雄性小鼠为研究对象,利用组织切片免疫染色、精原干细胞体外培养、细胞免疫荧光染色和荧光定量PCR等技术,检测热应激处理的活体小鼠睾丸组织和体外培养SSCs中的 Sirt1、PLZF和Oct4 基因表达变化。结果发现,所有热应激组样品中 Sirt1、PLZF和Oct4 基因的核酸、蛋白水平表达量均下调,小鼠睾丸组织切片中热应激组的 Sirt1、PLZF和Oct4 基因在曲细精管基底膜附近细胞群(含精原干细胞)中的特异性染色点减少,定量PCR检测证实该三个基因的相对表达量在热应激组中均显著下调( P <0.01);体外培养SSCs中热应激组的 Sirt1、PLZF和Oct4 基因染色阳性细胞数目减少,定量PCR检测证实该三个基因的相对表达量在热应激组细胞中均显著下调( P <0.01)。以上结果为进一步研究 Sirt1 在精原干细胞热应激过程中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 热应激 SIRT1 plzf OCT4 小鼠精原干细胞
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大鼠pEGFP-PLZF真核载体的构建及在精原细胞中的表达
6
作者 夏伟 白杨 +2 位作者 叶哲伟 曾甫清 邬喻 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期831-834,842,F0003,共6页
目的:构建真核表达重组质粒pEGFP-N1-PLZF,并了解其在大鼠精原细胞中的融合蛋白表达情况。方法:参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF),将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP... 目的:构建真核表达重组质粒pEGFP-N1-PLZF,并了解其在大鼠精原细胞中的融合蛋白表达情况。方法:参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF),将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,并用双酶切、测序进行鉴定;将重组质粒用脂质体转染的方法导入精原细胞中,观察有无荧光的表达及用Western blot检测蛋白表达情况。结果:实验从大鼠睾丸组织中获取了编码plzf基因的全序列cDNA,产生了2 kb的目的插入片段,与pEGFP-N1载体连接后经酶切电泳鉴定及DNA测序证实序列正确;重组质粒转染精原细胞24 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,并用Western blot检测到106 kD目的蛋白的表达。结论:新构建的重组质粒pEGFP-N1-PLZF通过鉴定,结构正确。转染到精原细胞后能在其中表达,发挥功能,为后续研究奠定了基础,对研究PLZF调控精原细胞增殖和分化机制具有重要的意义。 展开更多
关键词 早幼粒细胞白血病锌指蛋白 重组质粒 绿色荧光蛋白 精原细胞
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PLZF调控小鼠早期T细胞发育和自我更新的功能
7
作者 李凤迪 袁肇方 +3 位作者 刘新宇 黄海岩 杜江龙 蔡葵蒸(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期247-251,共5页
目的:研究PLZF调控小鼠早期T细胞发育与自我更新的功能,以及PLZF对胸腺细胞发育和自我更新的影响。方法:利用新生小鼠进行胸腺移植,以Rag2/γc−/−小鼠为受体。首先比较PLZF−/−与野生型(PLZF+/+)小鼠胸腺细胞总数的差异,再通过流式细胞... 目的:研究PLZF调控小鼠早期T细胞发育与自我更新的功能,以及PLZF对胸腺细胞发育和自我更新的影响。方法:利用新生小鼠进行胸腺移植,以Rag2/γc−/−小鼠为受体。首先比较PLZF−/−与野生型(PLZF+/+)小鼠胸腺细胞总数的差异,再通过流式细胞术和细胞分选,筛选小鼠的骨髓造血干细胞和胸腺的DN2a细胞以及PLZF−/−小鼠的早期T细胞系前体(ETP),以及PLZF−/−或野生型小鼠在新生小鼠胸腺移植模型的移植物DN1细胞中的表达情况。结果:PLZF−/−小鼠的胸腺细胞总数和早期T细胞系前体数目与野生型小鼠相比显著下降,并且细胞总数的减少不是由细胞内源性引起的。通过研究PLZFEGFP报告基因小鼠和新生小鼠胸腺的肾移植模型,发现PLZF在Rag2/γc−/−受体小鼠胸腺移植物的DN1(Lineage−CD44+CD25−)细胞中高表达,且供体细胞的PLZF缺失会显著影响来源胸腺移植物的DN1细胞的比例。结论:PLZF可能在T细胞的正常增殖发育过程中不是必需的,但很可能参与维持早期T细胞系前体的自我更新。 展开更多
关键词 plzf T细胞 增殖发育 胸腺细胞
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常见白血病融合基因筛查在白血病诊断与分型中的意义 被引量：11
8
作者 祝毓琳 张英 +3 位作者 朱平 杨英 杜金伟 刘静 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期236-239,共4页
目的: 分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值。方法: 收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取R... 目的: 分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值。方法: 收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取RNA,用32条特异性引物逆转录为cDNA,利用白血病29种染色体畸变形成的融合基因的86种mRNA剪接变异体引物,分8管进行多重RT PCR,筛查白血病融合基因。结合临床状态和形态学观察了解融合基因与白血病类型的关系。结果: 白血病中115例(71% )分别检测出10种白血病常见融合基因,包括AML1 /ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、dupMLL、MLL/AF6、MLL/AF10、CBFβ/MYH11、BCR/ABL、Hox11、Evi1。其中52例慢性粒细胞白血病(CML)100%检出BCR/ABL; 25例急性早幼粒细胞白血病(APL)中88%检出融合基因,其中21例APL检测出PML/RARα, 1例APL检测出PLZF/RARα; AML1 /ETO阳性的17例急性白血病(AL)16例为FAB M2亚型, 1例为混合型白血病; CBFβ/MYH11阳性的4例AL3例为FAB分型的M4, 1例为M5,属于向粒单细胞系统分化的白血病。16例AL检测出MLL基因异常,其中MLL/AF6白血病均为FAB分型的M5,具有典型的原始单核细胞白血病的特征。17例急性淋巴细胞白血病(ALL) 5例检测出BCR/ABL。8例MDS病人中2例检测出融? 展开更多
关键词 白血病诊断 骨髓增生异常综合征(MDS) PML/RARΑ BCR/ABL 急性早幼粒细胞白血病 急性淋巴细胞白血病 慢性粒细胞白血病 融合基因 单核细胞白血病 基因筛查法 FAB分型 人白血病细胞 RT-PCR plzf 染色体畸变 白血病患者
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内在调节蛋白及生长因子对精原干细胞增殖与分化的调控
9
作者 李宁 李先军 +4 位作者 李树峰 张岩 郑可佳 杨彩荣 严云勤 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期115-119,共5页
文章阐述了在转录水平上精原干细胞在增殖与分化过程中的内在调节蛋白Plzf、Sohlh及其对精原干细胞的调节机制。介绍了胶质细胞源性神经营养因子、干细胞因子、Ets相关分子、骨形态发生蛋白、肝细胞生长因子、斯里兰卡肉桂碱受体等由支... 文章阐述了在转录水平上精原干细胞在增殖与分化过程中的内在调节蛋白Plzf、Sohlh及其对精原干细胞的调节机制。介绍了胶质细胞源性神经营养因子、干细胞因子、Ets相关分子、骨形态发生蛋白、肝细胞生长因子、斯里兰卡肉桂碱受体等由支持细胞分泌的对精原细胞增殖与分化有重要作用的生长因子。 展开更多
关键词 plzf Sohlh 精原干细胞 生长因子
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白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白表达与定位的影响
10
作者 任高雅 范小瑞 +2 位作者 张警文 张欣荣 贺俊平 《山西农业科学》 2023年第9期1107-1114,共8页
为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染... 为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染色检测形态变化,采用免疫组化、qRT-PCR和Western blot法分别检测PCNA、PLZF和GATA4表达和定位的变化。HE染色结果显示,各试验组曲精小管内均含有支持细胞和生殖细胞;免疫组织化学结果显示,各试验组的PCNA蛋白定位于生殖细胞和支持细胞的细胞核,白消安作用可导致PCNA染色变深,表达量升高。各试验组GATA4蛋白定位于支持细胞的细胞核,且与对照组相比无明显差异;各试验组的PLZF蛋白定位于生殖细胞的细胞核,与对照组相比,白消安作用2 d时PLZF染色无显著差异,白消安作用1、3 d时PLZF染色变深,表达量升高。qRT-PCR和Western Blot结果显示,与对照组相比,试验组PCNA和GATA4 mRNA及其蛋白表达量均显著升高;白消安作用2 d的PLZF mRNA和蛋白表达量差异不显著,白消安作用1、3 d的PLZF mRN以及蛋白表达量均显著升高。综上所述,PCNA、PLZF和GATA4均表达于体外培养仔猪曲精小管,白消安作用可导致PCNA、PLZF和GATA4在曲精小管内表达水平改变,提示白消安通过影响增殖分化相关蛋白的表达导致猪睾丸精子发生受损。 展开更多
关键词 白消安 仔猪睾丸曲精小管 Western blot法 PCNA GATA4 plzf
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