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稳定表达猪Viperin的PK-15细胞系的构建与鉴定
被引量：
5
1
作者
李文良
毛立
+3 位作者
杨蕾蕾
郝飞
张纹纹
江杰元
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2016年第1期128-132,共5页
为了探讨先天免疫效应因子Viperin的抗病毒作用,从猪外周血单核细胞中成功扩增了猪Viperin基因完整阅读框,克隆到真核表达载体p EGFP-C1中构建重组表达质粒p EGFP-Vi。阳性质粒经PCR、酶切和测序鉴定后通过脂质体Lipofectamine 2000介...
为了探讨先天免疫效应因子Viperin的抗病毒作用,从猪外周血单核细胞中成功扩增了猪Viperin基因完整阅读框,克隆到真核表达载体p EGFP-C1中构建重组表达质粒p EGFP-Vi。阳性质粒经PCR、酶切和测序鉴定后通过脂质体Lipofectamine 2000介导转染PK-15细胞,荧光显微镜观察发现融合蛋白质EGFP-Viperin定位于细胞质中,不同于对照质粒EGFP在细胞中的均匀分布。共聚焦检测结果表明,重组蛋白质主要定位于细胞的内质网上。Western blot检测结果表明,猪Viperin蛋白质在PK-15细胞中以融合蛋白质的形式稳定表达,分子量约为7.0×104。
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关键词
猪
Viperin
pk-15细胞系
表达
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职称材料
题名
稳定表达猪Viperin的PK-15细胞系的构建与鉴定
被引量：
5
1
作者
李文良
毛立
杨蕾蕾
郝飞
张纹纹
江杰元
机构
江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2016年第1期128-132,共5页
基金
江苏省自然科学基金项目(BK20130729)
国家自然科学基金项目(31402180)
文摘
为了探讨先天免疫效应因子Viperin的抗病毒作用,从猪外周血单核细胞中成功扩增了猪Viperin基因完整阅读框,克隆到真核表达载体p EGFP-C1中构建重组表达质粒p EGFP-Vi。阳性质粒经PCR、酶切和测序鉴定后通过脂质体Lipofectamine 2000介导转染PK-15细胞,荧光显微镜观察发现融合蛋白质EGFP-Viperin定位于细胞质中,不同于对照质粒EGFP在细胞中的均匀分布。共聚焦检测结果表明,重组蛋白质主要定位于细胞的内质网上。Western blot检测结果表明,猪Viperin蛋白质在PK-15细胞中以融合蛋白质的形式稳定表达,分子量约为7.0×104。
关键词
猪
Viperin
pk-15细胞系
表达
Keywords
swine
Viperin
pk-
15
cell line
expression
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
稳定表达猪Viperin的PK-15细胞系的构建与鉴定
李文良
毛立
杨蕾蕾
郝飞
张纹纹
江杰元
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2016
5
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