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葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠胰腺组织PERK/ATF4/CHOP信号通路的影响 被引量：3
1
作者 关晓文 梁永林 +3 位作者 朱向东 苏菲 张媛媛 翟艳会 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第1期97-103,共7页
目的观察葛根芩连汤对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺内质网应激的影响,探讨其治疗T2DM的作用机制。方法75只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和葛根芩连汤高、中、低剂量组,每组15只,15只db/m小鼠作为空白组,给药组分别予相应... 目的观察葛根芩连汤对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰腺内质网应激的影响,探讨其治疗T2DM的作用机制。方法75只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和葛根芩连汤高、中、低剂量组,每组15只,15只db/m小鼠作为空白组,给药组分别予相应药物灌胃12周。检测小鼠体质量、空腹血糖(FBG)及糖化血红蛋白(HbA1c),HE染色观察胰腺组织病理变化,TUNEL染色检测胰岛细胞凋亡情况,Western blot检测胰腺组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达,实时荧光定量PCR检测胰腺组织PERK、ATF4、CHOP mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、FBG和HbA1c含量显著增加(P<0.01);胰腺组织结构不完整,边界模糊,内有空泡,胰岛细胞凋亡明显增加(P<0.01);胰腺组织GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP蛋白表达显著升高(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠体质量、FBG和HbA1c含量显著减少(P<0.05,P<0.01);胰腺组织病理改变有所减轻,胰岛细胞凋亡不同程度减少(P<0.05,P<0.01);葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组胰腺组织GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01),PERK、ATF4、CHOP mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论葛根芩连汤可能通过抑制内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路,下调相关基因和蛋白表达,减少胰岛细胞凋亡,保护胰岛细胞功能,延缓T2DM进展。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 2型糖尿病 内质网应激 perk/atf4/CHOP信号通路 小鼠
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PERK/ATF4/CHOP通路对BCG诱导THP-1细胞NLRP3炎性小体活化的调控作用 被引量：4
2
作者 马伯利 聂雪伊 +4 位作者 刘悦阳 苗申奥 陈通 杨易 徐金瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2268-2281,共14页
旨在探讨牛分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体的调控作用。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞后,采用qRT-PCR和Western blot方法... 旨在探讨牛分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体的调控作用。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞后,采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达;在BCG单独感染或与PERK抑制剂GSK2656157共处理THP-1细胞后,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达,采用ELISA方法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的释放量,采用CCK-8方法检测THP-1细胞活率,采用免疫荧光检测NLRP3与ASC的共定位。结果表明:在BCG单独感染THP-1细胞不同时间后,PERK、NLRP3、ASC和Caspase-1在蛋白水平的表达均随感染时间延长而升高,且在24 h达到最高(P<0.001),IL-1β和IL-18的释放随时间递增,24 h达到最高(P<0.001)。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,siNC+BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.001)上调,而siPERK+BCG感染组与siNC+BCG感染组相比,NLRP3等关键分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01,P<0.001);在BCG单独感染或与GSK2656157共同作用THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,IL-1β和IL-18的释放极显著增加(P<0.001),细胞活率极显著下调(P<0.001),而BCG+GSK2656157感染组与BCG单独感染组相比,上述分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01),IL-1β和IL-18的释放显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)减少,细胞活率显著上调(P<0.05),免疫荧光的结果显示NLRP3与ASC存在共定位,且GSK2656157可以极显著抑制BCG感染引起的NLRP3和ASC的表达上调(P<0.001)。以上研究结果表明,PERK/ATF4/CHOP通路对BCG感染巨噬细胞后NLRP3炎性小体的活化具有调控作用。 展开更多
关键词 卡介苗 perk/atf4/CHOP通路 NLRP3炎性小体 THP-1细胞
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基于内质网应激PERK/eIF2α信号通路探讨温针灸足三里联合香砂六君子汤治疗脾胃气虚型功能性消化不良的作用 被引量：2
3
作者 屈学斌 廖文力 +2 位作者 卢允健 黎灿文 李霭燕 《当代医药论丛》 2023年第15期181-185,共5页
目的:通过观察温针灸足三里联合香砂六君子汤对大鼠PERK/eIF2α信号通路的影响,探讨温针灸足三里联合香砂六君子汤对脾胃气虚型功能性消化不良的治疗作用。方法:选取SPF级SD大鼠60只,建立功能性消化不良大鼠模型;经验证模型后,随机分为... 目的:通过观察温针灸足三里联合香砂六君子汤对大鼠PERK/eIF2α信号通路的影响,探讨温针灸足三里联合香砂六君子汤对脾胃气虚型功能性消化不良的治疗作用。方法:选取SPF级SD大鼠60只,建立功能性消化不良大鼠模型;经验证模型后,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组、温针灸组、联合组,每组10只。分别进行相应的干预后,测量大鼠的体重、胃排空率;HE染色观察胃窦组织病理形态变化;免疫组化检测胃窦组织PERK、p-eIF2α表达情况;Western blot检测胃窦组织PERK、p-eIF2α、elF2α蛋白相对表达量。结果:在实验第14天、实验第28天,与正常组相比,模型组的体重均较小,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,西药组、中药组、温针灸组和联合组的体重均较大,差异有统计学意义(P<0.05);与中药组、温针灸组相比,西药组、联合组的体重均较大,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,模型组的胃排空率较低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,西药组、中药组、温针灸组和联合组的胃排空率均较高,差异有统计学意义(P<0.05);与西药组、中药组、温针灸组相比,联合组的胃排空率较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织的PERK、p-eIF2α着色显著降低;与模型组相比,西药组、中药组、温针灸组、联合组均表现为PERK、p-eIF2α着色显著增多。与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织的PERK、p-eIF2α蛋白表达显著降低,eIF2α蛋白表达升高;与模型组相比,西药组、中药组、温针灸组、联合组均表现为PERK、p-eIF2α蛋白表达显著升高,eIF2α蛋白表达降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:温针灸足三里+香砂六君子汤可以有效治疗脾胃气虚型功能性消化不良可能与其调节内质网应激PERK-eIF2α-ATF4信号通路的作用有关。 展开更多
关键词 内质网应激 perk/eif2α信号通路 足三里 香砂六君子汤 消化不良
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14-3-3β对奶牛乳腺上皮细胞内质网应激相关基因以及泌乳效应的影响 被引量：1
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作者 黄冠 曹慧 +1 位作者 符海鑫 张娜 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第11期19-23,共5页
以奶牛乳腺组织和正常生长的奶牛乳腺上皮细胞为研究对象,通过使用qRT-PCR检测青春期、泌乳期和退化期奶牛乳腺组织中14-3-3β(tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein beta)、eIF2α(eukaryotic tran... 以奶牛乳腺组织和正常生长的奶牛乳腺上皮细胞为研究对象,通过使用qRT-PCR检测青春期、泌乳期和退化期奶牛乳腺组织中14-3-3β(tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein beta)、eIF2α(eukaryotic translation initiation factor 2 subunit alpha)和ATF4(activating transcription factor 4)的mRNA表达水平以及Western Blot检测14-3-3β、p-eIF2α和ATF4的蛋白表达水平。结果表明,在泌乳期的奶牛乳腺组织中14-3-3β蛋白表达水平最低,而p-eIF2α蛋白表达水平最高。运用RNAi技术将乳腺上皮细胞中14-3-3β基因敲除,用毒胡萝卜素(TG,Thapsigargin)诱导细胞内质网应激,检测14-3-3β、eIF2α、ATF4、CHOP(DNA damage inducible transcript 3)、Caspase-3的mRNA表达水平的变化,同时检测β-酪蛋白的mRNA和蛋白水平的表达变化,以及用甘油三酯检测试剂盒和MTT细胞增殖检测试剂盒检测奶牛乳腺上皮细胞的乳脂含量、增殖情况的变化。结果表明,在14-3-3β敲除之后,eIF2α、ATF4、CHOP和Caspase-3的mRNA表达水平显著升高,而β-casein的mRNA和蛋白表达水平都显著降低,同时乳脂含量和细胞增殖率也显著下降。揭示14-3-3β参与奶牛乳腺上皮细胞内质网应激关键因子eIF2α和ATF4的调控并调节泌乳效应,进一步完善了14-3-3β与泌乳调控和内质网应激有关的分子机制。 展开更多
关键词 泌乳 奶牛乳腺上皮细胞 14-3-3β eif2α atf4
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左归降糖舒心方含药血浆对ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响 被引量：4
5
作者 杨金伟 赵灿 +2 位作者 刘秀 吴勇军 喻嵘 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期370-375,共6页
目的探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响及其作用机制。方法将巨噬细胞J774A.1随机分为正常组、模型组、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组、左归降糖舒心方含药血浆组、西药联合含药血浆组,每... 目的探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响及其作用机制。方法将巨噬细胞J774A.1随机分为正常组、模型组、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组、左归降糖舒心方含药血浆组、西药联合含药血浆组,每组5个复孔。除正常组外其余各组以ox-LDL(100 mg/L)处理构建巨噬细胞泡沫化模型。正常组和模型组正常培养,其余各组分别用10%相应含药血浆培养24 h。CCK-8法比较各组J774A.1细胞增殖情况,计算细胞抑制率;油红O染色检测细胞内脂质蓄积水平;Western blot检测双链RNA样内质网激酶(PEPK)、活化转录因子4(ATF4)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)及半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)的表达水平。结果与正常组比较,模型组细胞抑制率增高,在ox-LDL浓度为100 mg/L时细胞抑制率为(50.06±0.09)%,有明显的脂质颗粒蓄积(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组细胞抑制率降低,可有效阻断ox-LDL的摄入及脂质堆积,其中左归降糖舒心方含药血浆组优于西药联合含药血浆组,与TUDCA组作用效应相当。ox-LDL可诱导细胞内质网应激相关蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP与Caspase-12表达上调。左归降糖舒心方含药血浆可显著抑制100 mg/L ox-LDL所致的p-PERK、p-eIF2α、ATF4的上调,降低内质网相关凋亡蛋白CHOP与Caspase-12的表达(P<0.01),和TUDCA组作用相当(P>0.05),其效果较西药联合含药血浆组明显(P<0.01)。结论左归降糖舒心方含药血浆能有效改善ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化、细胞凋亡及内质网应激状态,其作用机制可能与调控内质网应激信号通路PERK/eIF2α/ATF4通路,降低细胞内CHOP与Caspase-12表达有关。 展开更多
关键词 左归降糖舒心方含药血浆 J774A.1细胞 内质网应激 perk/eif2α/atf4通路
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岩白菜素治疗特发性肺间质纤维化的研究 被引量：3
6
作者 魏祎 齐鸣 +1 位作者 黄丽羽 刘超 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第5期493-498,共6页
目的目前岩白菜素对特发性肺间质纤维化(IPF)的治疗作用尚未进行深入研究。文中旨在探讨岩白菜素通过抑制PERK/ATF4/CHOP信号通路治疗IPF的作用机制。方法动物实验利用博来霉素(BLM)构建IPF小鼠模型。经适应性饲养7 d后,按随机数字表法... 目的目前岩白菜素对特发性肺间质纤维化(IPF)的治疗作用尚未进行深入研究。文中旨在探讨岩白菜素通过抑制PERK/ATF4/CHOP信号通路治疗IPF的作用机制。方法动物实验利用博来霉素(BLM)构建IPF小鼠模型。经适应性饲养7 d后,按随机数字表法分为对照组(不作任何处理)、模型组(BLM 5 mg/kg气管内滴注制作模型)、阳性药组(造模后给予地塞米松5 mg/kg灌胃)、岩白菜素高剂量组(造模后给予岩白菜素100 mg/kg灌胃)、岩白菜素低剂量组(造模后给予岩白菜素50 mg/kg灌胃),每组10只。记录小鼠体重变化,计算肺指数;通过HE染色观察肺组织病理变化;Masson染色观察胶原纤维变化;免疫荧光观察Collagen III的表达;q-PCR检测PERK、ATF4、CHOP mRNA的表达;Western-blot检测PERK、ATF4、CHOP蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠中Collagen III的荧光强度明显升高;与模型组比较,阳性药组、岩白菜素高剂量组、岩白菜素低剂量组干预的荧光强度降低。与对照组PERK mRNA表达(1.005±0.069)比较,模型组明显升高(14.930±1.120),差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组IPF小鼠肺组织中PERK、ATF4、CHOP mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,岩白菜素高剂量组、岩白菜素低剂量组和阳性药组肺组织PERK、ATF4、CHOP mRNA及蛋白表达下降(P<0.05)。结论岩白菜素可以通过抑制内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路,为岩白菜素缓解IPF提供了实验依据。 展开更多
关键词 岩白菜素 特发性肺间质纤维化 内质网应激 perk/atf4/CHOP信号通路
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