解毒生肌膏通过抑制过度内质网应激和调控PERK/IRE1/NLRP3信号通路促进糖尿病大鼠创面修复

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作者 杨柳 丁雅容 +5 位作者 贺梅津 王栩冰 杨双喜 廖亮英 黄新灵 周忠志 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期945-952,共8页

目的:从蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/肌醇需求酶1(IRE1)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路角度探讨解毒生肌膏(JDSJG)调控内质网应激(ERS)对糖尿病大鼠创面愈合的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、解毒生肌... 目的:从蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/肌醇需求酶1(IRE1)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路角度探讨解毒生肌膏(JDSJG)调控内质网应激(ERS)对糖尿病大鼠创面愈合的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、解毒生肌膏组和磺胺嘧啶银乳膏组,除对照组不进行糖尿病造模外,其余3组大鼠均通过腹腔注射45 mg/kg链脲佐菌素构建糖尿病模型,造模成功后4组均手术切除大鼠背部全层皮肤制备大鼠创面模型;对照组和模型组每日用生理盐水涂抹创面,解毒生肌膏组每日外敷解毒生肌膏,磺胺嘧啶银乳膏组每日外敷磺胺嘧啶银乳膏,换药后创面均用无菌纱布包扎固定;连续给药14 d后分析大鼠创面愈合情况,计算创面愈合率;HE染色观察创面组织病理学变化;透射电镜检测创面组织内质网数量、形态及其肿胀情况;免疫组织化学检测创面PERK、IRE1和硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达;Western blot法检测创面组织中CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、TXNIP和NLRP3表达;ELISA检测创面组织中白细胞介素18(IL-18)和IL-1β表达水平。结果:各组干预14 d后,相较于对照组,模型组创面愈合率显著低于对照组(P<0.01),创面炎性渗出多和肉芽组织生长差,模型组中PERK、IRE1、TXNIP、CHOP、NLRP3和ASC蛋白含量均显著升高(P<0.01),炎症因子IL-1β、IL-18含量显著增加(P<0.01);与模型组相比,解毒生肌膏组创面愈合率显著提高(P<0.01),且炎症渗出减少,肉芽组织的生长明显改善,创面组织TXNIP、PERK、IRE1、CHOP、ASC和NLRP3表达显著下降(P<0.01),炎症因子IL-1β和IL-18含量显著降低(P<0.01)。结论:解毒生肌膏可能通过抑制PERK/IRE1/NLRP3通路的过度激活,减轻过度的ERS及持续的炎症反应,从而促进糖尿病创面愈合。 展开更多

关键词 解毒生肌膏 内质网应激 perk/ire1/nlrp3信号通路 糖尿病创面

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基于NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路探讨电针改善阿尔茨海默病模型大鼠认知功能障碍的机制 被引量：2

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作者 李荣鑫 黄丽 +4 位作者 曾悦阳 张淑慧 陈怡然 刘玉丽 马铁明 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第3期322-329,共8页

目的观察电针百会、脾俞、足三里对Aβ1-42所致阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆功能的影响,并从NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路介导的炎症级联反应探讨电针治疗AD的作用机制。方法采用双侧海马C1区注射Aβ1-42溶液制备AD大鼠模型。按随... 目的观察电针百会、脾俞、足三里对Aβ1-42所致阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆功能的影响,并从NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路介导的炎症级联反应探讨电针治疗AD的作用机制。方法采用双侧海马C1区注射Aβ1-42溶液制备AD大鼠模型。按随机数字表法将32只SPF级雄性大鼠分为4组,假手术组、模型组、电针组、西药组(盐酸多奈哌齐),每组8只。电针组予“百会”、“脾俞”和“足三里”穴位电针刺激,西药组予药物灌胃治疗。治疗结束后Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;用HE染色观察海马组织形态变化;用ELISA测定血清TNF-α、IL-1β含量;用Western blot和免疫荧光染色分别检测海马区NF-κB p65、NLRP3及Caspase-1的蛋白和荧光双标共表达水平。结果与假手术组比较,造模后模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),穿越原平台次数减少,目标象限停留时间减少(P<0.05);细胞核形态改变,海马周围神经元出现坏死、空泡变性,染色质边集;血清TNF-α、IL-1β含量升高(P<0.05);大鼠海马区NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平和荧光阳性表达升高(P<0.05)。与模型组比较,电针组和西药组大鼠逃避潜伏期有缩短趋势(P<0.05),穿越原平台次数和目标象限停留时间增加(P<0.05),细胞结构基本完整,少许细胞核轻度不规则,染色质部分边集;血清TNF-α、IL-1β含量降低(P<0.05);海马区NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平和荧光阳性表达降低(P<0.05)。结论电针提高AD大鼠学习记忆能力,可能是通过下调NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路,减少神经炎性因子的释放,从而改善AD大鼠认知功能障碍。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 电针 NF-κB/nlrp3/Caspase-1信号通路 神经炎症

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消疹方通过NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡而减轻EGFR抑制剂所致小鼠皮肤毒性

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作者 王心甜 程呈 +3 位作者 罗玲 陈彦 刘玉萍 邢海燕 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第7期1392-1399,共8页

目的:探讨消疹方(Xiaozhen Fang,XZF)减轻表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂诱导的小鼠皮肤毒性的作用及其潜在机制。方法:建立皮肤毒性小鼠模型,设置空白组、厄洛替尼(150 mg/kg)组、厄洛替尼(150 mg/kg... 目的:探讨消疹方(Xiaozhen Fang,XZF)减轻表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂诱导的小鼠皮肤毒性的作用及其潜在机制。方法:建立皮肤毒性小鼠模型,设置空白组、厄洛替尼(150 mg/kg)组、厄洛替尼(150 mg/kg)和消疹方(45 g/kg)联合给药组,每组5只。评估动物皮肤毒性严重程度、体重变化、利用Western blot检测皮肤组织中消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、胱天蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平,同时利用免疫荧光分析皮肤组织中GSDME、IL-1β、caspase-1和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;体外培养HacaT细胞,制备XZF含药血清,厄洛替尼刺激细胞24 h后,分别给予不同浓度的XZF含药血清干预24 h,采用MTT法评估细胞活力,通过透射电镜观察细胞超微结构,同时通过免疫荧光分析p53结合蛋白1(p53-binding protein 1,53BP1)的表达情况。结果:皮肤毒性小鼠模型经XZF治疗后,皮疹发生率降低,四肢红肿程度减轻,体重显著升高(P<0.05),背部组织中GSDMD、GSDME、IL-1β、caspase-1和NLRP3表达水平下调(P<0.05或P<0.01);经XZF含药血清干预后,HacaT细胞焦亡显著受到抑制(P<0.01),电镜下观察细胞表面相对完整,没有明显的孔洞或损伤,且细胞中53BP1蛋白免疫荧光强度显著下调(P<0.01)。结论:消疹方对EGFR抑制剂诱导的小鼠皮肤毒性具有逆转作用,其可能通过NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路调控细胞焦亡从而发挥细胞保护效应,从而减轻其引起的皮肤毒性。 展开更多

关键词 消疹方 厄洛替尼 皮肤毒性 细胞焦亡 nlrp3/caspase-1/GSDMD信号通路

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基于NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路探讨益气蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠软骨细胞焦亡的影响

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作者 崔馨予 李浩林 +6 位作者 李伟青 康惠琴 程伟刚 贺佩鑫 杨彩红 陈平 王海东 《中成药》 北大核心 2025年第9期2880-2887,共8页

目的探讨益气蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠软骨细胞焦亡的影响。方法50只大鼠于尾根部皮下注射牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂等体积的混合乳液,以诱导建立CIA模型,并将其随机分为模型组、甲氨蝶呤组(0.35 mg/kg)和益气蠲痹方低、中... 目的探讨益气蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠软骨细胞焦亡的影响。方法50只大鼠于尾根部皮下注射牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂等体积的混合乳液,以诱导建立CIA模型,并将其随机分为模型组、甲氨蝶呤组(0.35 mg/kg)和益气蠲痹方低、中、高剂量组(9.4、18.7、37.4 g/kg);另取10只正常大鼠作为空白组。灌胃给药4周后,观察大鼠一般情况,检测关节肿胀程度及关节炎指数;HE染色观察踝关节病理变化;ELISA法检测血清IL-1β、IL-18和TNF-α水平;RT-qPCR法检测踝关节软骨组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、TNF-αmRNA表达;Western blot法检测踝关节软骨组织NF-κB、NLRP3和Caspase-1蛋白表达;免疫组化法检测踝关节软骨组织NLRP3、GSDMD阳性表达。结果与空白组比较,模型组大鼠关节肿胀程度、关节炎指数升高(P<0.01);血清IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高(P<0.01);踝关节出现软骨表面缺损破坏,细胞数量减少、形态改变、排列不规则,滑膜组织有大量的炎性细胞浸润;踝关节软骨组织NF-κB、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、TNF-αmRNA表达和NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白表达均升高(P<0.01);踝关节软骨组织NLRP3、GSDMD阳性表达升高(P<0.01);与模型组比较,益气蠲痹方中、高剂量组和甲氨蝶呤组大鼠关节肿胀程度、关节炎指数降低(P<0.01);踝关节病理损伤程度减轻;血清IL-1β、IL-18和TNF-α水平降低(P<0.01);踝关节软骨组织NF-κB、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、TNF-αmRNA表达和NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01);踝关节软骨组织NLRP3、GSDMD阳性表达降低(P<0.01)。结论益气蠲痹方可减轻CIA大鼠炎症反应,其作用可能与抑制NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路活化,从而抑制软骨细胞焦亡有关。 展开更多

关键词 益气蠲痹方 类风湿关节炎 软骨细胞焦亡 炎症反应 NF-κB/nlrp3/Caspase-1信号通路

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基于miRNA-155探讨盆炎清胶囊对盆腔炎性疾病后遗症大鼠TLR4/NF-κB、NLRP3/Caspase-1信号通路的影响

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作者 张嘉晔 陈敏红 +1 位作者 陈颐 王军飞 《中成药》 北大核心 2025年第4期1336-1340,共5页

目的研究盆炎清胶囊对盆腔炎性疾病后遗症(CPID)大鼠的影响。方法大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和盆炎清组,采用苯酚胶浆诱导建立CPID模型,造模14 d后,盆炎清组大鼠灌胃给予625 mg/kg药液,其余各组大鼠灌胃给予生理盐水,连续14 ... 目的研究盆炎清胶囊对盆腔炎性疾病后遗症(CPID)大鼠的影响。方法大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和盆炎清组,采用苯酚胶浆诱导建立CPID模型,造模14 d后,盆炎清组大鼠灌胃给予625 mg/kg药液,其余各组大鼠灌胃给予生理盐水,连续14 d。给药结束后,肉眼、HE染色观察大鼠盆腔粘连及子宫组织病理学改变情况,RT-qPCR法检测子宫组织miRNA-155 mRNA表达,Western blot法检测子宫组织TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白表达,ELISA法检测血清IL-1β、IL-18水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠盆腔粘连评分、子宫组织病理学评分、miRNA-155 mRNA表达、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白表达、IL-1β、L-18水平均升高(P<0.05);与模型组比较,盆炎清组大鼠盆腔粘连及子宫组织病理学有所改善,评分均降低(P<0.05),子宫组织miRNA-155 mRNA表达、TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白表达、IL-1β、IL-18水平均降低(P<0.05)。结论盆炎清胶囊可改善CPID大鼠的炎症情况,其作用与下调miRNA-155表达,抑制TLR4/NF-κB、NLRP3/Caspase-1信号通路活化有关。 展开更多

关键词 盆炎清胶囊 盆腔炎性疾病后遗症 miRNA-155 TLR4/NF-κB信号通路 nlrp3/Caspase-1信号通路

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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨温肾方对甲状腺功能减退小鼠神经细胞焦亡的影响

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作者 曾明星 陈继东 +5 位作者 向楠 邹小娟 吴永贵 卞庆来 吴祖茜 张海洋 《中成药》 北大核心 2025年第8期2742-2747,共6页

目的探讨温肾方对甲状腺功能减退(简称甲减)小鼠认知障碍及神经细胞焦亡的影响。方法60只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组,模型组,优甲乐组(15μg/kg),温肾方低、高剂量组(12.87、25.74 g/kg),联合用药组(15μg/kg+12.87 g/kg),每组10... 目的探讨温肾方对甲状腺功能减退(简称甲减)小鼠认知障碍及神经细胞焦亡的影响。方法60只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组,模型组,优甲乐组(15μg/kg),温肾方低、高剂量组(12.87、25.74 g/kg),联合用药组(15μg/kg+12.87 g/kg),每组10只。模型小鼠自由饮用丙硫氧嘧啶(PTU)溶液建立甲减模型,给药12周后,ELISA法检测血清TT_(3)、TT_(4)、TSH水平;生化法检测皮质和海马TC、GSH水平;流式细胞仪检测皮质和海马ROS水平;RT-qPCR法检测皮质和海马UCP4 mRNA表达;Western blot法检测皮质和海马UCP4、ApoE4、NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD-FL、GSDMD-N蛋白表达。结果与模型组比较,优甲乐组、温肾方高剂量组和联合用药组小鼠血清TSH水平,皮质和海马TC、ROS水平,皮质和海马ApoE4、NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1、GSDMD-FL、GSDMD-N蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);血清TT_(3)、TT_(4)水平,皮质和海马GSH水平,皮质和海马UCP4 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);联合用药效果优于优甲乐单独用药(P<0.05,P<0.01)。结论温肾方可改善甲减小鼠甲状腺功能和认知障碍,其可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路,抑制神经细胞焦亡发挥作用。 展开更多

关键词 温肾方 甲状腺功能减退 认知障碍 甲状腺功能 焦亡 nlrp3/Caspase-1/GSDMD信号通路

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芪蛭降糖胶囊调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制足细胞焦亡改善糖尿病肾损伤的机制研究 被引量：4

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作者 苏珊珊 郭兆安 +3 位作者 杨欢 刘慧 唐静楠 姜晓宇 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期204-210,共7页

目的 探究芪蛭降糖胶囊(QZJT)通过含pyrin结构域NOD样受体家族3/半胱天冬酶1/消皮素D(NLRP3/caspase-1/GSDMD)信号通路对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的影响。方法 小鼠随机分为6组,分别为正常组(NC)、模型组(DN)、 QZJT低剂量组(L-QZJT)、... 目的 探究芪蛭降糖胶囊(QZJT)通过含pyrin结构域NOD样受体家族3/半胱天冬酶1/消皮素D(NLRP3/caspase-1/GSDMD)信号通路对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的影响。方法 小鼠随机分为6组,分别为正常组(NC)、模型组(DN)、 QZJT低剂量组(L-QZJT)、 QZJT高剂量组(H-QZJT)、阳性对照组(参芪降糖颗粒给药,SQJT)、 ML385组[核呼吸因子2(Nrf2)抑制剂],模型构建成功后给药处理,通过测定空腹血糖(FBG)、 24 h尿白蛋白(UAlb)、血清肌酐(SCr)、血尿素(BUN)及肾脏/体质量比值(K/B)评估小鼠肾功能损伤程度;HE及PAS染色评估肾组织的病理变化;ELISA检测血清中炎性细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-18含量;Western blot法检测足细胞标志物及相关通路蛋白水平。结果 与NC组相比,DN组的FBG、 24 h UAlb、 SCr和BUN升高,K/B质量比值升高。与DN组相比,QZJT低剂量及高剂量给药组的FBG、 24 h UAlb、 SCr及BUN均降低,同时K/B质量比降低,高剂量QZJT的治疗效果与参芪降糖颗粒相当。QZJT改善DN小鼠肾组织病理学损伤,提高了足细胞标志物肾病蛋白(Nephrin)的蛋白水平,降低了NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、 pro-caspase-1和GSDMD-N的蛋白水平。ML385处理后,小鼠的肾组织细胞肿胀和形态改变,炎性浸润面积增加,NLRP3、 ASC、 pro-caspase-1和GSDMD-N的蛋白水平上调,IL-1β和IL-18水平升高。结论 QZJT可能通过作用Nrf2调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制足细胞焦亡,改善DN小鼠肾损伤。 展开更多

关键词 芪蛭降糖胶囊(QZJT) 糖尿病肾病 nlrp3/caspase-1/GSDMD信号通路 NRF2 细胞焦亡

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神经节苷脂调控PIM-1/PI3K/Akt信号通路介导的细胞焦亡改善新生大鼠缺血缺氧脑损伤的机制

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作者 徐琳琳 王艺 +1 位作者 李峰 赵曼 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第8期1517-1523,共7页

目的探讨神经节苷脂(ganglioside,GM1)对新生大鼠缺血缺氧脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)的保护作用及机制。方法将80只7 d龄SD新生大鼠随机分为4组:假手术组(Sham)、HIBI组、GM1组及GM1+PIM-1抑制剂组(GM1+PIM-1 inhibito... 目的探讨神经节苷脂(ganglioside,GM1)对新生大鼠缺血缺氧脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)的保护作用及机制。方法将80只7 d龄SD新生大鼠随机分为4组:假手术组(Sham)、HIBI组、GM1组及GM1+PIM-1抑制剂组(GM1+PIM-1 inhibitor),每组各20只。除Sham组外,其余3组新生大鼠均采用左侧颈部总动脉结扎及缺氧处理构建新生大鼠HIBI模型。Sham组新生大鼠仅做颈部切口,不做缺血缺氧处理。HIBI模型构建成功后,GM1组新生大鼠腹腔注射GM1(20 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药3 d,GM1+PIM-1 inhibitor组新生大鼠侧脑室一次性注射PIM-1 inhibitor(5 mg·kg^(-1))后腹腔注射GM1(20 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药3 d,Sham和HIBI组新生大鼠腹腔注射等量生理盐水。采用Longa法评估神经功能损伤情况;TTC染色检测脑梗死体积比率;HE染色观察海马组织病理学情况;TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况;ELISA检测海马组织IL-1β和IL-18水平;Western blot检测海马组织PIM-1/PI3K/Akt信号通路蛋白及焦亡相关蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1 p20、GSDMD-N)表达。结果与Sham组相比,HIBI组新生大鼠Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、IL-1β,IL-18水平、焦亡相关蛋白表达均明显升高(P<0.05)PIM-1蛋白表达、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均明显降低(P<0.05)。与HIBI组相比,GM1组新生大鼠Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、IL-1β,IL-18水平、焦亡相关蛋白表达均明显降低(P<0.05),PIM-1蛋白表达、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均明显升高(P<0.05)。与GM1组相比,GM1+PIM-1 inhibitor组新生大鼠Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、IL-1β,IL-18水平、焦亡相关蛋白表达均明显升高(P<0.05),PIM-1蛋白表达、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均明显降低(P<0.05)。结论GM1能够改善新生大鼠HIBI,机制与激活PIM-1/PI3K/Akt信号通路,抑制海马神经元焦亡相关。 展开更多

关键词 神经节苷脂 缺血缺氧脑损伤 PIM-1/PI3K/Akt信号通路 细胞焦亡 nlrp3/ASC/caspase-1

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消定膏干预NLRP3/NF-κB/Caspase-1通路治疗急性闭合性软组织损伤的作用机制

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作者 王玉娟 贾永龙 +5 位作者 刘婧 许宏斌 强胜林 黄凯 陈环环 赵玲 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期328-334,共7页

目的探讨消定膏通过核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/核因子κB(NF-κB)/半胱天冬酶1(Caspase-1)通路抑制细胞焦亡,对急性闭合性软组织损伤的治疗效果。方法选取60只SPF级SD大鼠,随机分为4组:空白组、模型组、阳性对照组(使... 目的探讨消定膏通过核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/核因子κB(NF-κB)/半胱天冬酶1(Caspase-1)通路抑制细胞焦亡,对急性闭合性软组织损伤的治疗效果。方法选取60只SPF级SD大鼠,随机分为4组:空白组、模型组、阳性对照组(使用奇正消痛贴膏)和消定膏组(外用敷贴)。空白组不做任何处理,其余组在制备急性闭合性软组织损伤模型后,进行相应干预,治疗周期为7 d。通过损伤症状评分评估肿胀、疼痛、活动受限等情况。苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠腿部肌肉组织组织病理学变化。ELISA检测血清炎症因子IL-1β、TNF-α水平。TUNEL染色观察细胞焦亡情况。Western blot和免疫组化分析NLRP3、NF-κB、p65、Caspase-1蛋白表达水平,评估消定膏的疗效及作用机制。结果与模型组相比,消定膏组大鼠的肿胀程度、外观变化、活动情况及疼痛行为明显改善(均P<0.05),组织病理学结果显示炎症细胞浸润减少,肌纤维排列趋于正常;血清炎症因子IL-1β、TNF-α水平显著降低(均P<0.05);焦亡阳性细胞数及焦亡阳性率明显下降(均P<0.05);NLRP3、NF-κB、p65及Caspase-1蛋白表达明显降低(均P<0.05)。结论消定膏通过抑制NLRP3炎症小体活化及NF-κB信号通路,阻断Caspase-1依赖性细胞焦亡进程,减少IL-1β、TNF-α炎症因子释放,从而减轻急性软组织损伤后的炎症反应,促进组织修复。 展开更多

关键词 消定膏 急性闭合性软组织损伤 细胞焦亡 nlrp3炎症小体 NF-ΚB信号通路 CASPASE-1 炎症因子

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基于NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路探讨双硫仑改善HFpEF大鼠心功能的机制 被引量：1

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作者 沈玄洋 李卫东 +4 位作者 蒋晓路 张美琪 谭文涛 沈媛 文红福 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1891-1897,共7页

目的:探讨双硫仑(DSF)在高脂饮食(HFD)和一氧化氮阻滞剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME诱导的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)大鼠模型中的作用及可能的机制。方法:通过HFD+L-NAME构建HFpEF大鼠模型;将SD大鼠随机分为三组:control组(给予... 目的:探讨双硫仑(DSF)在高脂饮食(HFD)和一氧化氮阻滞剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME诱导的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)大鼠模型中的作用及可能的机制。方法:通过HFD+L-NAME构建HFpEF大鼠模型;将SD大鼠随机分为三组:control组(给予正常饮食和水喂养)、HFpEF组(给予HFD和含0.5 g/L L-NAME的饮用水喂养)和DSF+HFpEF组(在HFD+L-NAME的基础上给予DSF治疗)。5周后,使用超声心动图和运动力竭实验检测心功能;苏木素-伊红和麦胚凝集素染色检测心肌病理改变;Masson染色检测心肌纤维化程度;TUNEL染色观察细胞凋亡水平;Western blot检测心肌中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、cleaved caspase-1和消皮素D的N端片段(GSDMD-N)蛋白水平;ELISA检测血清N末端脑利尿钠肽前体(NT-proBNP)水平及心肌中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18含量。结果:与control组相比,HFpEF组大鼠体重、收缩压、舒张压、E/E'比值、舒张期左心室前壁厚度(LVAWd)和血清NT-proBNP水平均显著升高(P<0.05),E/A比值和整体纵向应变(GLS)绝对值均显著降低(P<0.05);与HFpEF组相比,DSF+HFpEF组大鼠体重、E/E'比值、舒张压和血清NTproBNP水平均显著降低(P<0.05),E/A比值和GLS绝对值显著升高(P<0.05),收缩压、舒张期左心室后壁厚度(LVPWd)和左心室射血分数(LVEF)无显著改变(P>0.05)。与control组相比,HFpEF组大鼠心肌纤维化面积、心肌细胞横截面积和凋亡率均显著升高(P<0.05),DSF+HFpEF组大鼠上述指标均显著下降(P<0.05)。Western blot和ELISA结果显示,与control组相比,HFpEF组大鼠心肌中NLRP3、cleaved caspase-1和GSDMD-N蛋白水平及炎症因子IL-1β和IL-18含量均显著升高(P<0.05);与HFpEF组相比,DSF+HFpEF组大鼠上述指标均显著下降(P<0.05)。结论:DSF可改善HFpEF大鼠心功能,抑制心肌重构,其机制可能与抑制NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路、减轻心肌炎症反应有关。 展开更多

关键词 双硫仑 射血分数保留的心力衰竭 nlrp3/caspase-1/GSDMD信号通路

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桑色素抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡上皮细胞焦亡的影响 被引量：5

11

作者 邹曲 欧阳瑶 +1 位作者 邹林林 符丹丹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2052-2057,共6页

目的:探讨桑色素(MH)抑制核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)/IL-1β信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺泡上皮细胞焦亡的作用机制。方法:采用烟熏法建立COPD模型大鼠,将其随机分模型组(C... 目的:探讨桑色素(MH)抑制核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)/IL-1β信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺泡上皮细胞焦亡的作用机制。方法:采用烟熏法建立COPD模型大鼠,将其随机分模型组(COPD组)、MH低、中、高剂量组(MH-L、MH-M、MH-H组)(50、100、200 mg/kg)、阳性对照组(地塞米松组,DXMS,0.09 mg/kg),另取10只健康大鼠作为正常对照组(NC组)。检测大鼠肺功能指标[潮气量(TV)、肺活量(FVC)和呼气峰流速(PEF)];HE染色观察肺组织病理学变化;免疫荧光双染观察肺泡上皮细胞焦亡情况;ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子水平;RT-qPCR检测NLRP3、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1βmRNA水平;Western blot检测肺组织SP-C、NLRP3、C-Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β蛋白表达。结果:与COPD组比较,DXMS组、MH各组肺组织管腔狭窄、黏液分泌和支气管黏膜上皮细胞坏死等病理学变化明显改善,肺功能指标(TV、FVC、PEF)显著上升(P<0.05),且MH-L、MH-M、MH-H组依次上升(P<0.05);TNF-α、IL-6、IL-8水平、NLRP3及C-Caspase-1免疫荧光表达、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1βmRNA水平、NLRP3、C-Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β蛋白水平显著下降,SP-C蛋白表达逐渐上升(P<0.05)。结论:MH可抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路及其介导的炎症因子释放和细胞焦亡,减轻COPD大鼠的肺组织病变。 展开更多

关键词 桑色素 慢性阻塞性肺疾病 细胞焦亡 nlrp3/Caspase-1/IL-1β信号通路

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E.coli HPI通过NLRP3/caspase-1信号通路诱导细胞焦亡而促进肠道炎症 被引量：1

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作者 张靖松 单春兰 +6 位作者 王浩 潘天灵 沈珏 肖金龙 赵汝 肖鹏 高洪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1777-1787,共11页

目的:探究大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)强毒力岛(high-pathogenicity island,HPI)对细胞焦亡及肠道炎症的影响。方法:用含HPI的E.coli株(HPI+)、HPI缺失的E.coli株(△HPI)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分别处理昆明小鼠和IP... 目的:探究大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)强毒力岛(high-pathogenicity island,HPI)对细胞焦亡及肠道炎症的影响。方法:用含HPI的E.coli株(HPI+)、HPI缺失的E.coli株(△HPI)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分别处理昆明小鼠和IPEC-J2细胞(猪小肠上皮细胞)。测定小鼠肠道乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、IgA表达和分泌性IgA(secretory IgA,SIgA)含量;HE和TUNEL染色观察肠道损伤;RT-qPCR、免疫组织化学染色和Western blot检测小鼠肠组织和IPEC-J2细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)/caspase-1信号通路关键调控点的表达;ELISA检测小鼠血清和IPEC-J2细胞培养上清液中白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18含量;共聚焦显微镜观察NLRP3与caspase-1的共定位。siRNA沉默IPEC-J2细胞的NLRP3,验证NLRP3在E.coli HPI感染中的关键调控功能。结果:相对于△HPI感染,E.coli HPI显著降低小鼠肠道SOD活性,增加IgA+B细胞,并促进LDH的释放和SIgA的分泌;ELISA、HE染色和TUNEL染色结果显示,E.coli HPI促进了小鼠肠道上皮细胞DNA断裂、组织损伤和炎症;Western blot结果显示,相对于△HPI,E.coli HPI感染使得小鼠肠道消皮素D的N端片段(gasdermin D N-terminal fragment,GSDMD-N)蛋白水平显著升高;RT-qPCR和免疫组织化学染色结果显示,E.coli HPI显著促进了小鼠肠道和IPEC-J2细胞中NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)、caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白表达,IL-1β和IL-18分泌增加;共聚焦显微镜观察发现,相对于△HPI感染,E.coli HPI显著促进了NLRP3炎症小体的组装,使得NLRP3与caspase-1发生共定位;此外,在NLRP3沉默的IPEC-J2细胞中观察到E.coli HPI诱导的细胞炎症、细胞损伤及NLRP3/caspase-1信号通路的激活被缓解。结论:HPI的存在增强了E.coli的毒力水平,促进肠道炎症;NLRP3/caspase-1信号通路调控的细胞焦亡参与了E.coli HPI诱导的肠道损伤。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 强毒力岛 细胞焦亡 nlrp3/caspase-1信号通路

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基于PINK1/Parkin信号通路探讨黄芪散改善阿尔茨海默病大鼠海马突触可塑性的机制

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作者 张运辉 袁云川 +4 位作者 杨梦琳 伍大华 刘霞 杨昆 程妍 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第4期612-623,共12页

本研究旨在探究黄芪散对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠模型中突触可塑性的影响,并分析其潜在机制。SPF级雄性SD大鼠50只,随机分为正常组(normal group,Norm)、模型组(model group,Mod)、黄芪散低剂量组(Huangqisan low dos... 本研究旨在探究黄芪散对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠模型中突触可塑性的影响,并分析其潜在机制。SPF级雄性SD大鼠50只,随机分为正常组(normal group,Norm)、模型组(model group,Mod)、黄芪散低剂量组(Huangqisan low dose group,HQS-L;1.2 g/kg)、黄芪散高剂量组(Huangqisan high dose group,HQS-H;4.8 g/kg)及阳性对照组(positive group,Pos),每组10只。除正常组外,其余组双侧海马注射β淀粉样蛋白25-35造模。采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆功能;Nissl染色检测大鼠海马组织神经元损伤情况;JC-1探针流式细胞术检测海马组织线粒体膜电位水平;透射电镜观察大鼠海马区神经元和突触超微结构;ELISA法检测大鼠海马组织炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;流式细胞术检测海马活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测大鼠海马中PTEN诱导激酶1(PTEN-induced kinase 1,PINK1)、帕金蛋白(Parkin E3 ubiquitin protein ligase,Parkin)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtuble-associated protein light chain 3,LC3B)、泛素结合蛋白p62(ubiquitin-binding protein p62,p62)、动力相关蛋白1(dynmin-related protein 1,Drp1)、线粒体融合素1(mitofusion 1,Mfn1)、线粒体融合素2(mitofusion 1,Mfn2)、Nod样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP43)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(N-methyl-D-aspartate receptor(NMDAR)subunit 2B,NR2B)、突触后致密蛋白95(postsynaptic dense protein95,PSD95)、突触素(synaptosin,SYP)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白表达。与Norm组比较,Mod组大鼠学习记忆功能显著降低(P<0.01),海马组织神经元胞内尼氏体减少或消失,海马区的神经元和突触超微结构出现明显的病理改变,线粒体膜电位明显降低,线粒体结构受损,自噬溶酶体形成,海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),ROS水平明显升高(P<0.01),PINK1、Parkin、LC3B、Mfn1、Mfn2、GAP43、NR2B、PSD95、SYP、BDNF蛋白表达降低(P<0.05),而p62、Drp1、NLRP3蛋白表达显著升高(P<0.01);与Mod组比较,HQS-L组、HQS-H组和Pos组能显著改善AD大鼠的学习记忆功能,主要表现为逃避潜伏期缩短、穿过平台的次数增加(P<0.05,P<0.01);海马组织神经元胞内尼氏体增多,海马区的神经元和突触超微结构受损减轻,线粒体膜电位明显升高,线粒体自噬显著增多;海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低(P<0.05,P<0.01),ROS水平明显降低(P<0.01),PINK1、Parkin、LC3B、Mfn1、Mfn2、GAP43、NR2B、PSD95、SYP、BDNF的蛋白表达显著升高,而p62、Drp1、NLRP3的蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。黄芪散改善AD大鼠突触可塑性的机制可能与其激活海马中PINK1-Parkin通路促进线粒体自噬,改善线粒体功能,降低ROS水平,抑制NLRP3炎症小体的活化有关。 展开更多

关键词 黄芪散 阿尔茨海默病 线粒体自噬 PTEN诱导激酶1/帕金蛋白信号通路 nlrp3炎症小体

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丹参酮ⅡA通过NLRP3/Caspase-1信号通路对心肌成纤维细胞的保护作用 被引量：15

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作者 郑鹏 王俊帅 +6 位作者 占大钱 王敏 夏海发 刘旭东 明晓青 周代星 冯俊 《世界中医药》 CAS 2021年第6期916-919,共4页

目的:探讨丹参酮ⅡA对心肌成纤维细胞损伤的保护作用及可能机制。方法:分离和培养大鼠心肌成纤维细胞(Cardiac Fibroblast,CFs)。以脂多糖(LPS)刺激CFs建立脓毒症心肌损伤体外模型,以不同浓度丹参酮ⅡA预处理CFs 30 min后,给予LPS刺激,... 目的:探讨丹参酮ⅡA对心肌成纤维细胞损伤的保护作用及可能机制。方法:分离和培养大鼠心肌成纤维细胞(Cardiac Fibroblast,CFs)。以脂多糖(LPS)刺激CFs建立脓毒症心肌损伤体外模型,以不同浓度丹参酮ⅡA预处理CFs 30 min后,给予LPS刺激,设对照组,LPS模型组,LPS+不同浓度TSA(2μmol/L、10μmol/L、50μmol/L)组;采用蛋白质免疫印迹试验法(Western blotting)检测CFs的NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中IL-1β和IL-18的含量。结果:LPS刺激24 h后,CFs的NLRP3蛋白的表达水平最高。LPS模型组NLRP3和Caspase-1蛋白的表达较对照组明显升高(P<0.01)。与LPS模型组比较,丹参酮ⅡA(10μmol/L、50μmol/L)处理组NLRP3和Caspase-1蛋白的表达均明显降低(P<0.05);丹参酮ⅡA处理组的IL-1β和IL-18水平均明显低于LPS模型组(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA能抑制LPS诱导的心肌成纤维细胞内NLRP3/Caspase-1炎症反应信号通路分子的表达,这可能是其保护心肌细胞的分子机制之一。 展开更多

关键词 丹参酮ⅡA 脓毒症 心肌成纤维细胞 nlrp3/Caspase-1信号通路

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藤黄健骨胶囊通过SIRT1/NF-κB/NLRP3信号通路调节绝经后骨质疏松大鼠破骨细胞分化 被引量：8

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作者 安方玉 颜春鲁 +6 位作者 孙柏 汪春梅 柳颖 王霞霞 马海珍 张蕊 陈振东 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2044-2052,共9页

目的:探讨藤黄健骨胶囊(TJC)对绝经后骨质疏松大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路关键蛋白表达的影响及分子机制。方法:采用随机数字表法将SD雌性大鼠分为假手术组,模型... 目的:探讨藤黄健骨胶囊(TJC)对绝经后骨质疏松大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路关键蛋白表达的影响及分子机制。方法:采用随机数字表法将SD雌性大鼠分为假手术组,模型组[卵巢切除术(OVX)组],SIRT1抑制剂组(EX-527+OVX组),阳性药物戊酸雌二醇(ESV)对照组(ESV+OVX组),以及高、中、低剂量TJC处理组(TJC-H+OVX、TJC-M+OVX和TJCL+OVX组),每组10只。OVX建模,建模成功后给予TJC或ESV干预,并根据实验设计给予EX-527干预,8周后取材。ELISA法检测相关炎症因子水平;双重免疫荧光染色分别检测SIRT1、NF-κB p65和NLRP3蛋白;RT-qPCR和Western blot分别检测SIRT1/NF-κB/NLRP3信号通路相关分子和破骨分化标志分子的mRNA和蛋白水平。结果:与假手术组相比,OVX组和EX-527+OVX组大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量显著升高(P<0.01),破骨细胞NF-κB p65及NLRP3表达荧光面积显著增大(P<0.01),股骨组织NF-κB p65、NLRP3和活化T细胞核因子胞浆1型(NFATc1)mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.01),而破骨细胞SIRT1表达荧光面积显著减小(P<0.01);与OVX组相比,高剂量TJC处理组大鼠血清IL-1β含量和股骨组织NLRP3蛋白表达水平均显著降低,中、高剂量TJC处理组大鼠血清IL-18含量及股骨组织NF-κB p65和NFATc1蛋白表达水平均显著降低,低、中、高剂量TJC处理组大鼠血清TNF-α含量、破骨细胞NF-κB p65和NLRP3表达荧光面积、股骨组织NF-κB p65、NLRP3及NFATc1 mRNA水平均显著降低,而破骨细胞SIRT1表达荧光面积显著增大(P<0.05);与EX-527+OVX组相比,高剂量TJC处理组大鼠股骨组织NLRP3蛋白表达水平显著降低,中、高剂量TJC处理组大鼠血清IL-1β及IL-18含量、股骨组织NF-κB p65和NFATc1蛋白表达水平均显著降低,低、中、高剂量TJC处理组血清TNF-α含量、破骨细胞NF-κB p65和NLRP3表达荧光面积、股骨组织NF-κB p65、NLRP3及NFATc1 mRNA水平均显著降低,而破骨细胞SIRT1表达荧光面积显著增大(P<0.05)。结论:TJC能够抑制绝经后骨质疏松模型大鼠破骨细胞分化,其作用机制可能与抑制SIRT1/NF-κB/NLRP3信号通路激活、减轻炎症反应有关。 展开更多

关键词 绝经后骨质疏松症 藤黄健骨胶囊 破骨细胞分化 SIRT1/NF-κB/nlrp3信号通路

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丹皮酚对β-1,3-葡聚糖诱导的小鼠巨噬细胞Dectin-1/NLRP3信号通路抑制作用研究 被引量：8

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作者 吴嘉迪 段强军 +5 位作者 肖楠 汪天明 邵菁 吴大强 颜贵明 汪长中 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期415-421,共7页

目的:研究丹皮酚对β-1,3-葡聚糖诱导的巨噬细胞上Dectin-1/NLRP3信号通路的影响。 方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,并分成空白对照组、β-1,3-葡聚糖诱导模型组、昆布多糖组和丹皮酚组,β-1,3-葡聚糖诱导巨噬细胞24 h建立ALD炎症模型... 目的:研究丹皮酚对β-1,3-葡聚糖诱导的巨噬细胞上Dectin-1/NLRP3信号通路的影响。 方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,并分成空白对照组、β-1,3-葡聚糖诱导模型组、昆布多糖组和丹皮酚组,β-1,3-葡聚糖诱导巨噬细胞24 h建立ALD炎症模型。通过MTT法检测细胞活性,通过倒置显微镜观察各组形态学变化,通过Western blot检测小鼠RAW264.7巨噬细胞Dectin-1、Syk、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1蛋白的表达,通过RT-qPCR检测小鼠RAW264.7巨噬细胞Dectin-1、NLRP3、caspase-1 mRNA的表达,通过ELISA检测各组培养液中IL-1β、IL-18的分泌水平。结果:MTT结果表明,与空白对照组相比,β-1,3-葡聚糖诱导模型组抑制细胞增殖活性减弱。与β-1,3-葡聚糖诱导模型组相比,丹皮酚干预后细胞增殖活性增强。形态学观察发现,空白对照组细胞体积小,形态圆润。β-1,3-葡聚糖诱导后细胞体积变大,分化严重,形态狭长。丹皮酚干预后细胞分化减轻,细胞形态近似圆形。Western blot、RT-qPCR和ELISA结果表明,与空白对照组相比,β-1,3-葡聚糖能显著升高巨噬细胞中Dectin-1、Syk、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1的蛋白表达水平和Dectin-1、NLRP3、caspase-1 mRNA表达水平以及细胞上清液IL-1β、IL-18的分泌水平。而与β-1,3-葡聚糖诱导模型组相比,经丹皮酚干预后可明显降低巨噬细胞中 Dectin-1、Syk、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1的蛋白表达水平和Dectin-1、NLRP3、caspase-1 mRNA表达水平以及细胞上清液IL-1β、IL-18的分泌水平。结论:本研究结果表明丹皮酚可能通过抑制β-1,3-葡聚糖诱导的Dectin-1/NLRP3信号通路上Dectin-1、Syk、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1的过表达从而有效降低终末炎症因子IL-1β及IL-18的释放,进而有效抑制β-1,3-葡聚糖诱导的ALD炎症反应。 展开更多

关键词 丹皮酚 Β-1 3-葡聚糖 巨噬细胞 Dectin-1/nlrp3信号通路

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硫化氢通过下调NLRP3/caspase-1信号通路抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞焦亡 被引量：11

17

作者 何婷婷 张旭琳 +4 位作者 贾珍丽 王昀 马克涛 李玲 张亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1738-1746,共9页

目的:探讨缓释型硫化氢(H2S)供体GYY4137对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞焦亡的抑制作用及其分子机制。方法:以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,将其分为空白对照组、GYY4137干预组、oxLDL刺激组和oxLDL+GYY4137干... 目的:探讨缓释型硫化氢(H2S)供体GYY4137对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞焦亡的抑制作用及其分子机制。方法:以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,将其分为空白对照组、GYY4137干预组、oxLDL刺激组和oxLDL+GYY4137干预组。各组HUVECs经不同药物干预指定时间后,采用CCK-8法检测各组细胞活力;使用乳酸脱氢酶(LDH)释放测定和Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)双荧光标记检测各组细胞死亡情况;采用亚甲基蓝比色法检测各组细胞中的H2S含量;采用Western blot实验观察各组细胞中细胞焦亡信号通路标志蛋白的表达。结果:oxLDL(50和100 mg/L)可使HUVECs活力显著降低(P<0.05或P<0.01),LDH释放及PI阳性细胞比例显著增加(P<0.05或P<0.01),且细胞中NLRP3、caspase-1(p20亚单位)、gasdermin D(GSDMD)、GSDMD-N及白细胞介素18(IL-18)蛋白水平显著升高(P<0.05或P<0.01),即HUVECs发生焦亡。而GYY4137干预则可降低HUVECs中NLRP3、caspase-1(p20)、GSDMD、GSDMD-N及IL-18蛋白水平(P<0.05),抑制oxLDL诱导的细胞焦亡(P<0.05),并使细胞活力增强(P<0.05)。结论:H2S供体GYY4137可通过下调NLRP3/caspase-1细胞焦亡信号通路而抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞焦亡。 展开更多

关键词 硫化氢 动脉粥样硬化 血管内皮细胞 细胞焦亡 nlrp3/caspase-1信号通路

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S1P/S1PR1信号通路通过调控ROS/NLRP3对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化的影响 被引量：1

18

作者 黄太平 王菁 +4 位作者 徐焕雨 杨佳 薛媛 张婷婷 田继华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1143-1148,共6页

目的探究S1P/S1PR1信号通路对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度葡萄糖处理细胞,ELISA法检测细胞内S1P表达,Western blot检测S1PR1蛋白表... 目的探究S1P/S1PR1信号通路对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度葡萄糖处理细胞,ELISA法检测细胞内S1P表达,Western blot检测S1PR1蛋白表达;将细胞分为正常对照组、HG组及HG+siS1PR1组,RT-PCR检测细胞E-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Twist mRNA的表达,Western blot检测E-cadherin、α-SMA、Vimentin、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白表达,流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;将细胞分为正常对照组、S1P组及S1P+siS1PR1组,Western blot检测Vimentin、Snail、α-SMA、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白表达,荧光显微镜测定ROS水平。结果ELISA结果显示,高糖刺激下细胞内S1P含量明显升高。Western blot结果显示,30 mmol·L^(-1)浓度时S1PR1蛋白表达量与对照组相比明显升高;阻断S1PR1后可以抑制高糖诱导的Fibronectin、Vimentin及Twist mRNA表达,上调E-cadherin mRNA的表达,Western blot结果显示,E-cadherin蛋白表达升高,Vimentin,α-SMA蛋白表达下降,同时可抑制细胞内ROS的产生和NLRP3,ASC,NF-κB蛋白水平;加入S1P激活剂后细胞内ROS水平,Vimentin、α-SMA、Snail、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白水平表达均升高,阻断S1PR1后表达均降低。结论高糖能诱导肾小管上皮细胞EMT,其机制可能与S1P/S1PR1信号通路作用于ROS/NLRP3轴有关。 展开更多

关键词 S1P/S1PR1信号通路 ROS NF-κB nlrp3 上皮间充质转化 肾小管上皮细胞

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PERK/ATF4/CHOP通路对BCG诱导THP-1细胞NLRP3炎性小体活化的调控作用 被引量：4

19

作者 马伯利 聂雪伊 +4 位作者 刘悦阳 苗申奥 陈通 杨易 徐金瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2268-2281,共14页

旨在探讨牛分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体的调控作用。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞后,采用qRT-PCR和Western blot方法... 旨在探讨牛分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体的调控作用。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞后,采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达;在BCG单独感染或与PERK抑制剂GSK2656157共处理THP-1细胞后,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达,采用ELISA方法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的释放量,采用CCK-8方法检测THP-1细胞活率,采用免疫荧光检测NLRP3与ASC的共定位。结果表明:在BCG单独感染THP-1细胞不同时间后,PERK、NLRP3、ASC和Caspase-1在蛋白水平的表达均随感染时间延长而升高,且在24 h达到最高(P<0.001),IL-1β和IL-18的释放随时间递增,24 h达到最高(P<0.001)。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,siNC+BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.001)上调,而siPERK+BCG感染组与siNC+BCG感染组相比,NLRP3等关键分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01,P<0.001);在BCG单独感染或与GSK2656157共同作用THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,IL-1β和IL-18的释放极显著增加(P<0.001),细胞活率极显著下调(P<0.001),而BCG+GSK2656157感染组与BCG单独感染组相比,上述分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01),IL-1β和IL-18的释放显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)减少,细胞活率显著上调(P<0.05),免疫荧光的结果显示NLRP3与ASC存在共定位,且GSK2656157可以极显著抑制BCG感染引起的NLRP3和ASC的表达上调(P<0.001)。以上研究结果表明,PERK/ATF4/CHOP通路对BCG感染巨噬细胞后NLRP3炎性小体的活化具有调控作用。 展开更多

关键词 卡介苗 perk/ATF4/CHOP通路 nlrp3炎性小体 THP-1细胞

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基于NLRP3/Caspase-1信号通路研究三叶香茶菜抗小鼠CCL4急性肝损伤机制 被引量：2

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作者 周至品 农汝楠 +5 位作者 覃乐 王竟静 李秋甫 吴妍 刘代华 周蓓 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第12期4678-4685,共8页

目的研究三叶香茶菜对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)急性肝损伤小鼠NLRP3/casepase-1信号通路的影响。方法采用CCL_(4)小鼠急性肝损伤动物模型,随机分为模型组,正常组,联苯双脂组,三叶香茶菜组分别为高(150 g·kg^(-1))、中(... 目的研究三叶香茶菜对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)急性肝损伤小鼠NLRP3/casepase-1信号通路的影响。方法采用CCL_(4)小鼠急性肝损伤动物模型,随机分为模型组,正常组,联苯双脂组,三叶香茶菜组分别为高(150 g·kg^(-1))、中(75 g·kg^(-1))、低(37.5 g·kg^(-1))剂量组(按生药量计)。各组干预7天后,于第7天晚上注射CCL4油溶液诱导急性肝损小鼠动物模型(除正常组外)。12 h后,称量各组肝、脾重量,并计算肝、脾指数,生化法检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)活力、谷草转氨酶(AST)活力,ELISA法检测小鼠血清半胱肽氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平及肝组织NLR家族含有Pyrin结构域的蛋白质3(NLR Family,Pyrin Domain Containing Protein 3,NLRP3)含量。同时,采用免疫组化检测肝组织中NLRP3含量。取肝组织制成病理切片,苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色后观察肝组织细胞形态学变化,并评分。结果(1)各组肝指数与模型组比较无明显变化(P<0.05);与模型组比较,正常组、联苯双脂组、三叶香茶菜低剂量组脾指数均显著下降(P<0.05)。(2)与正常组对比,模型组小鼠血清ALT、AST、Caspase-1、IL-1β以及小鼠肝组织NLRP3显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,各组小鼠血清ALT、AST、Caspase-1、IL-1β以及小鼠肝组织NLRP3显著下降(P<0.05或P<0.01);但模型组与三叶香茶菜低剂量组对比,小鼠血清ALT、Caspase-1、IL-1β无显著性差异(P<0.05)。(3)光镜下观察发现,与模型组相比,三叶香茶菜高、中、低剂量组小鼠肝组织损伤明显减少,肝组织细胞坏死细胞减轻,有少量炎性浸润,各组病理评分差异具显著性差异(P<0.05)。结论三叶香茶菜对CCL_(4)诱导急性肝损伤小鼠具有保护作用,其护肝作用机制可能是是通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路的活化,减少炎症介质释放,从而抑制肝组织炎症损害。 展开更多

关键词 三叶香茶菜 nlrp3/Caspase-1信号通路 急性肝损伤

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