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基于CRISPR/Cas9技术研究金针菇冷诱导结实基因HK1和HK2的编辑转化系统
被引量：
7
1
作者
欧阳萍兰
李琼洁
+6 位作者
郭丽琼
林俊芳
叶志伟
魏韬
郑倩望
伍土恒
罗润
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2018年第3期1-7,107,共8页
对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度,利用PEG介导的方法将表达...
对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度,利用PEG介导的方法将表达载体pgfvs-Cas9-HK1/HK2-gRNA转化金针菇原生质体,经潮霉素筛选后的拟转化子再进行PCR鉴定。结果显示:金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度均为50μg/mL;经潮霉素筛选后的部分拟转化子成功扩增出Cas9的部分片段,携带有HK1、HK2基因载体的Cas9蛋白基因成功整合到了金针菇的基因组中,两个表达载体转化率分别为24.1%和12.5%。
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关键词
金针菇
CRISPR/Cas9
peg介导的转化
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职称材料
题名
基于CRISPR/Cas9技术研究金针菇冷诱导结实基因HK1和HK2的编辑转化系统
被引量：
7
1
作者
欧阳萍兰
李琼洁
郭丽琼
林俊芳
叶志伟
魏韬
郑倩望
伍土恒
罗润
机构
华南农业大学食品学院&食品生物技术研究所
广东省微生态制剂工程技术研究中心
出处
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2018年第3期1-7,107,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31372116
31572178)
+1 种基金
广东省现代农业食用菌体系项目(2016LM1125
2016LM1126)
文摘
对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度,利用PEG介导的方法将表达载体pgfvs-Cas9-HK1/HK2-gRNA转化金针菇原生质体,经潮霉素筛选后的拟转化子再进行PCR鉴定。结果显示:金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度均为50μg/mL;经潮霉素筛选后的部分拟转化子成功扩增出Cas9的部分片段,携带有HK1、HK2基因载体的Cas9蛋白基因成功整合到了金针菇的基因组中,两个表达载体转化率分别为24.1%和12.5%。
关键词
金针菇
CRISPR/Cas9
peg介导的转化
Keywords
Flammulina velutipes
CRISPR/Cas9
peg
mediated transformation
分类号
S646.15 [农业科学—蔬菜学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于CRISPR/Cas9技术研究金针菇冷诱导结实基因HK1和HK2的编辑转化系统
欧阳萍兰
李琼洁
郭丽琼
林俊芳
叶志伟
魏韬
郑倩望
伍土恒
罗润
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2018
7
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