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GFP基因在软枣猕猴桃愈伤组织原生质体中瞬间表达的初步研究
被引量：
16
1
作者
朱道圩
米银法
+2 位作者
陈延惠
王静毅
刘中杰
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
2003年第2期145-148,共4页
用PEG介导法对游离出来的软枣猕猴桃原生质体进行遗传转化,成功地将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入了原生质体,并获得了瞬间表达.结果表明,影响GFP基因转化的因素主要是材料的生理状态,PEG的种类和浓度;适宜的转化条件和方法为,将从白色、...
用PEG介导法对游离出来的软枣猕猴桃原生质体进行遗传转化,成功地将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入了原生质体,并获得了瞬间表达.结果表明,影响GFP基因转化的因素主要是材料的生理状态,PEG的种类和浓度;适宜的转化条件和方法为,将从白色、较为疏松愈伤组织中游离的原生质体,悬浮到质量分数为13%甘露醇的洗液(CPW13)中,置于45℃水浴中热激5min,再放在冰浴中迅速冷却;加入质粒,轻轻混匀后静止10min;逐滴加入质量分数40%PEG6000介导转化,终浓度为100g·L-1,在室温下放置20min;逐滴加入CPW13稀释转化后的原生质体,以避免PEG浓度剧烈变化造成细胞膜破裂.
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关键词
软枣猕猴桃
愈伤组织
原生质体
瞬间表达
GFP基因
peg介导法
遗传转化
绿色荧光蛋白
报告基因
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职称材料
题名
GFP基因在软枣猕猴桃愈伤组织原生质体中瞬间表达的初步研究
被引量：
16
1
作者
朱道圩
米银法
陈延惠
王静毅
刘中杰
机构
河南农业大学林学园艺学院
出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
2003年第2期145-148,共4页
基金
河南省自然科学基金项目(0111011700)
文摘
用PEG介导法对游离出来的软枣猕猴桃原生质体进行遗传转化,成功地将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入了原生质体,并获得了瞬间表达.结果表明,影响GFP基因转化的因素主要是材料的生理状态,PEG的种类和浓度;适宜的转化条件和方法为,将从白色、较为疏松愈伤组织中游离的原生质体,悬浮到质量分数为13%甘露醇的洗液(CPW13)中,置于45℃水浴中热激5min,再放在冰浴中迅速冷却;加入质粒,轻轻混匀后静止10min;逐滴加入质量分数40%PEG6000介导转化,终浓度为100g·L-1,在室温下放置20min;逐滴加入CPW13稀释转化后的原生质体,以避免PEG浓度剧烈变化造成细胞膜破裂.
关键词
软枣猕猴桃
愈伤组织
原生质体
瞬间表达
GFP基因
peg介导法
遗传转化
绿色荧光蛋白
报告基因
Keywords
Actinidia arguta
protoplast
GFP
marker genes
分类号
S663.4 [农业科学—果树学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
GFP基因在软枣猕猴桃愈伤组织原生质体中瞬间表达的初步研究
朱道圩
米银法
陈延惠
王静毅
刘中杰
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
2003
16
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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