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猪圆环病毒血清I型和II型的PCR鉴别 被引量:4
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作者 姜焱 张常印 +1 位作者 张敬友 陈国强 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期101-103,共3页
根据基因库中猪圆环病毒 (PCV)的基因序列 ,设计并合成了 3条引物 ,建立复合PCR,对 2株 PK-1 5细胞及一些疑似 PCV感染的病料进行了 PCV检测。结果 2株 PK-1 5细胞和所有病料都可扩增出 PCV-1的基因片段 ,其中 1株 PK-1 5细胞和一些病... 根据基因库中猪圆环病毒 (PCV)的基因序列 ,设计并合成了 3条引物 ,建立复合PCR,对 2株 PK-1 5细胞及一些疑似 PCV感染的病料进行了 PCV检测。结果 2株 PK-1 5细胞和所有病料都可扩增出 PCV-1的基因片段 ,其中 1株 PK-1 5细胞和一些病料还扩增得到了PCV-2的 DNA片段。证明应用设计的引物进行复合 PCR快速检测 PCV可行 ,为 PCV的检测分型及 展开更多
关键词 圆环病毒 血清 pcr鉴别 PCV 基因
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黑芥ANS基因的克隆和在芸薹属B基因组的PCR鉴别 被引量:1
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作者 严明理 刘丽莉 +3 位作者 向建华 丁素萍 舒佳宾 孙婵 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期484-490,共7页
利用同源克隆方法克隆黑芥ANS基因,获得2个ANS基因拷贝BnANS1和BnANS2,长度分别为1 366bp和1 367bp。这2个基因都有1个76bp的内含子。比较BnANS1和BnANS2基因序列,发现在编码区、5’与3’非编码区和内含子区域都有多态性,5’非编码区有... 利用同源克隆方法克隆黑芥ANS基因,获得2个ANS基因拷贝BnANS1和BnANS2,长度分别为1 366bp和1 367bp。这2个基因都有1个76bp的内含子。比较BnANS1和BnANS2基因序列,发现在编码区、5’与3’非编码区和内含子区域都有多态性,5’非编码区有3个碱基的多态性和4个碱基的缺失,编码区有26个碱基的多态性;内含子有2个碱基的多态性;3’非编码区有18个碱基的多态性和3个碱基的插入。这2个ANS拷贝都编码356个氨基酸的蛋白,具有其他物种同样的ANS蛋白保守结构域,属于2OG-Fe(II)加氧酶超家族。BnANS1编码的蛋白质理论分子量为40 448.58Da,等电点为5.05;BnANS2编码的蛋白质理论分子量为40 468.52Da,等电点为5.04。比较这2个ANS基因拷贝编码的蛋白质序列,发现有9个多态性位点。这2个ANS拷贝在黑芥的种皮和胚中均检测到表达。获得了1对ANS引物,能从白菜、黑芥、甘蓝、芥菜型油菜、甘蓝型油菜和埃塞俄比亚芥中,用等位特异PCR方法特异识别来自芸薹属B基因组的ANS基因。 展开更多
关键词 黑芥 ANS 克隆 B基因组 pcr鉴别
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中国林蛙真伪品的PCR鉴别 被引量:2
3
作者 郭立宏 杜智恒 +1 位作者 宁方勇 白秀娟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第5期96-98,共3页
本研究根据GenBank发表的哺乳类SRY核酸序列和禽类EcoRI家族序列设计1对引物,对中国林蛙真伪品进行了PCR扩增,并对特征条带进行了克隆测序。结果表明,PCR扩增产物有明显的区别,中国林蛙、黑龙江林蛙、黑斑蛙和中华大蟾蜍分别扩增出约100... 本研究根据GenBank发表的哺乳类SRY核酸序列和禽类EcoRI家族序列设计1对引物,对中国林蛙真伪品进行了PCR扩增,并对特征条带进行了克隆测序。结果表明,PCR扩增产物有明显的区别,中国林蛙、黑龙江林蛙、黑斑蛙和中华大蟾蜍分别扩增出约1000、250、450、750bp的特征条带,通过对中国林蛙1000bp条带的克隆序列进行BLAST比对分析,找到了一些禽类的WZ染色体上的相关基因片段。 展开更多
关键词 中国林蛙 伪品 pcr鉴别
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海狸鼠源性成分的PCR鉴别研究 被引量:1
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作者 段庆梓 张玉 +2 位作者 王巍 尚柯 梁恒兴 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2020年第12期181-184,共4页
以海狸鼠和其他物种的细胞色素b基因为目标基因,通过序列比对在碱基差异明显的区域设计海狸鼠的特异性引物,并通过退火温度、反应循环数、方法检出限和特异性等参数的考察建立海狸鼠源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction... 以海狸鼠和其他物种的细胞色素b基因为目标基因,通过序列比对在碱基差异明显的区域设计海狸鼠的特异性引物,并通过退火温度、反应循环数、方法检出限和特异性等参数的考察建立海狸鼠源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴别方法。结果显示:该PCR方法对海狸鼠能够扩增出约599 bp的条带,对其他物种无任何扩增现象,且在鸡肉和兔肉中对海狸鼠成分的检出限可达到0.1%。这表明该方法有较好的特异性和较高的灵敏度,能够满足海狸鼠源性成分的检测要求。 展开更多
关键词 海狸鼠 源性成分 聚合酶链式反应(pcr)鉴别 CYTB基因 检出限
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AS-PCR法鉴别炮制辅料鳖血和常见掺伪品的研究 被引量:1
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作者 苏雪蓉 谢颖 +4 位作者 娄悦 苏联麟 毛春芹 赵晓莉 陆兔林 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期953-960,共8页
目的建立一种炮制辅料鳖血等位基因特异性PCR(AS-PCR)鉴别方法,快速、准确地鉴别鳖血与其它常见动物血液。方法通过比较鳖血基原中华鳖和驴、牛、羊、鸡、猪、兔为代表的常见动物的COⅠ序列差异,根据SNP位点设计鳖血特异性鉴别引物,优化... 目的建立一种炮制辅料鳖血等位基因特异性PCR(AS-PCR)鉴别方法,快速、准确地鉴别鳖血与其它常见动物血液。方法通过比较鳖血基原中华鳖和驴、牛、羊、鸡、猪、兔为代表的常见动物的COⅠ序列差异,根据SNP位点设计鳖血特异性鉴别引物,优化PCR反应体系,并进行耐受性、适用性、掺伪灵敏度考察验证。结果实验条件为退火温度62℃、循环次数29次、引物用量0.2μL、DNA模板浓度100 ng时,鳖血使用设计的ZHB286引物经PCR扩增和凝胶电泳后出现约286 bp的明亮条带,其他动物血液样品均无条带出现。结论该AS-PCR鉴别方法具有高度特异性,能准确鉴别鳖血和其他常见动物血液,进而可用于鳖血与驴、牛、羊、鸡、猪、兔血掺伪鉴别,在血液类药材分子鉴定中具有广泛应用价值。 展开更多
关键词 鳖血 炮制辅料 等位基因特异性pcr鉴别
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