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维甲酸诱导分化对SH-SY5Y细胞阿片受体表达的影响 被引量:1
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作者 边佳明 吴宁 李锦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期697-699,共3页
目的研究维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化后对阿片受体表达的影响。方法 1×10-5mol.L-1维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化6天,[3H-diprenorphine]放射性配体受体结合试验确定阿片受体表达量。结果维甲酸诱导分化6天后,与对照细胞比较,SH-SY5Y... 目的研究维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化后对阿片受体表达的影响。方法 1×10-5mol.L-1维甲酸诱导SH-SY5Y细胞分化6天,[3H-diprenorphine]放射性配体受体结合试验确定阿片受体表达量。结果维甲酸诱导分化6天后,与对照细胞比较,SH-SY5Y细胞突起增多增长类似轴突,且细胞间形成明显神经纤维网络,细胞生长明显减慢,阿片受体表达提高1.6倍以上。结论维甲酸明显诱导SH-SY5Y细胞向神经元分化,且分化后细胞阿片受体表达明显上调。 展开更多
关键词 阿片受体 维甲酸 表达 分化 sh-sy5y细胞 神经元
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p53基因在RA诱导SH-SY5Y细胞分化后低表达
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作者 张宝 马文丽 +2 位作者 冯春琼 宋艳斌 郑文岭 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期53-55,共3页
全反式维甲酸(RA)的抑制肿瘤细胞生长和调控细胞分化的作用是一项重要的研究课题。而p53基因是一个重要的肿瘤抑制基因,在RA的作用中是否涉及到p53的作用尚有待阐明。本文用低浓度的RA(10 μmol/L)作用于SH-SY5Y细胞,每2d换一次液,在作... 全反式维甲酸(RA)的抑制肿瘤细胞生长和调控细胞分化的作用是一项重要的研究课题。而p53基因是一个重要的肿瘤抑制基因,在RA的作用中是否涉及到p53的作用尚有待阐明。本文用低浓度的RA(10 μmol/L)作用于SH-SY5Y细胞,每2d换一次液,在作用9 d后,用光学显微镜观察SH-SY5Y细胞的形态学变化,并提取细胞质总RNA进行RT-PCR反应半定量检测p53基因表达。结果显示,SH-SY5Y细胞经RA诱导后,细胞生出较长的突起,具有神经元的形态;而对照组保持成纤维细胞的形态、无明显的形态学变化。RT-PCR半定量显示,在细胞诱导后,p53基因表达明显下调。本文结果提示,RA的作用可能独立于p53基因途径,p53基因的表达变化可能是继发于RA的作用。 展开更多
关键词 P53基因 sh-sy5y细胞 分化 表达 全反式维甲酸 RA 肿瘤细胞 人成神经瘤细胞
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稳定表达人MCHR2的SH-SY5Y细胞系的建立
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作者 张琴 卜友泉 +3 位作者 易发平 袁成福 秦琴 宋方洲 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期258-262,F0002,共6页
目的:构建黑色素浓集激素受体2(MCHR2)/增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白真核表达载体pEGFPN1-MCHR2,转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y,建立稳定表达人MCHR2的SH-SY5Y细胞系MCHR2-SH-SY5Y。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法从人胎脑cDNA... 目的:构建黑色素浓集激素受体2(MCHR2)/增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白真核表达载体pEGFPN1-MCHR2,转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y,建立稳定表达人MCHR2的SH-SY5Y细胞系MCHR2-SH-SY5Y。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法从人胎脑cDNA文库扩增MCHR2全长cDNA片段。用基因重组方法将其克隆到质粒pEGFPN1,构建真核表达载体pEGFPN1-MCHR2,并用LipofectamineTM转染到SH-SY5Y细胞,通过G418筛选,建立稳定表达MCHR2的MCHR2-SH-SY5Y细胞系,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blotting检测MCHR2的表达并用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白亚细胞定位。结果:扩增出人MCHR2全长cDNA;成功构建真核表达载体pEGFPN1-MCHR2;RT-PCR、Western blotting检测到MCHR2-SH-SY5Y细胞MCHR2的表达,激光共聚焦显微镜观察转染pEGFPN1-MCHR2的MCHR2-SH-SY5Y细胞融合蛋白定位于细胞膜,而转染空质粒pEGFPN1的SH-SY5Y细胞EGFP定位于细胞质。结论:成功建立稳定表达人MCHR2的MCHR2-SH-SY5Y细胞株。 展开更多
关键词 MCHR2 真核表达载体 稳定转染的sh-sy5y细胞 基因表达
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基于PCR的siRNA表达框的制备 被引量:1
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作者 郭秋野 马文丽 +3 位作者 张宝 吴清华 严律 郑文岭 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期483-485,489,共4页
目的改进目前基于PCR的方法制备siRNA表达框,转染细胞后产生高效的RNA干扰作用。方法从K562细胞中提取基因组DNA,以此为模板,PCR扩增U6启动子序列并克隆至pMD18-T载体中,用载体上的引物进行扩增,所得产物即制成作为扩增siRNA表达框的模... 目的改进目前基于PCR的方法制备siRNA表达框,转染细胞后产生高效的RNA干扰作用。方法从K562细胞中提取基因组DNA,以此为模板,PCR扩增U6启动子序列并克隆至pMD18-T载体中,用载体上的引物进行扩增,所得产物即制成作为扩增siRNA表达框的模板。选择p53为靶基因,扩增制备siRNA表达框,测序验证后,转染SH-SY5Y 细胞48h后提取RNA进行RT-PCR,检测RNA干扰的效应。结果测序结果表明所克隆的U6启动子序列正确。细胞转染表达框,在mRNA水平上,p53基因的表达明显受到了抑制。结论本实验所制作的基于PCR的方法制备siRNA表达框可以很好地应用于RNAi作用研究。 展开更多
关键词 RNAI SIRNA U6启动子 pcr表达框架:sh-sy5y细胞
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TAZ诱导性过表达慢病毒载体的构建、鉴定及诱导过表达TAZ神经母细胞瘤细胞株的建立 被引量:2
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作者 阮红峰 应忠明 罗环 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1035-1036,共2页
神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿... 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿瘤细胞的增殖、调控肿瘤转移,并能预测部分肿瘤患者的预后情况[4]。针对Oncomine肿瘤数据库NB肿瘤组织的生物信息学分析发现,TAZ基因在NB肿瘤组织中呈高表达,且随着NB的恶化,表达逐渐升高。而TAZ是否参与NB的形成及恶化尚未完全明确。 展开更多
关键词 TAZ基因 神经母细胞细胞sh-sy5y 诱导过表达慢病毒载体
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