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丽水市十三项呼吸道病原体感染情况及特点分析被引量：8: 1; 作者黄振强马亚萍 +2 位作者曲春生张旭颖杨景森《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期869-873,共5页; 目的了解丽水市呼吸道病原体感染情况及流行病学特征,为呼吸道传染病诊疗与防控提供科学依据。方法回顾性分析2020年3月至2021年12月丽水市人民医院收治的4035例呼吸道感染患者13项呼吸道病原体PCR毛细电泳核酸检测结果,并分析病原体感... 展开更多; 关键词呼吸道病原体 pcr毛细电泳片段分析法感染情况丽水市; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲醛溶液保存的中华哲水蚤基因组DNA提取和PCR扩增被引量：3: 2; 作者周美玉林元烧 +3 位作者方旅平郑连明刘迟迟曹文清《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期403-406,共4页; 提取了保存于5%甲醛溶液中的单只中华哲水蚤基因组DNA.经凝胶电泳后虽无清晰条带,但PCR扩增后可得线粒体DNA细胞色素氧化酶I亚基基因(mtCOI)片段.测序分析,该片段长度为710bp,与GenBank中的序列(索引号AF332769)比对后确定为中华哲水蚤m... 展开更多; 关键词中华哲水蚤 pcr扩增基因组DNA提取甲醛溶液保存细胞色素氧化酶 GENBANK 线粒体DNA 海洋浮游动物种群遗传结构测序分析凝胶电泳片段长度系统发生实验方法实用技术信息利用分子水平序列; 在线阅读下载PDF 职称材料

BRCA1基因全长mRNA序列分析技术: 3; 作者徐红先周冬仙 +1 位作者熊文邵超鹏《实用医学杂志》 CAS 2005年第12期1340-1341,共2页; 目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健... 展开更多; 关键词 BRCA1基因 RNA序列全长分析技术 pcr技术检测 MRNA RT-pcr 分析结果特异性引物 DNA测序毛细管电泳 pcr反应特异性结合测定方法序列设计 pcr) 健康女性方法建立扩增片段序列分析逆转录样本; 在线阅读下载PDF 职称材料

土壤微生物分子生态学研究中总DNA的提取被引量：72: 4; 作者赵勇周志华 +3 位作者李武刘彬彬潘迎捷赵立平《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期854-860,共7页; 建立了一种土壤DNA提取方法。根据DNA产量和纯度2个评价指标,从3种手提土壤DNA方法中优选出方法B为手提DNA方法(Labmethod),它包括样品预处理,细胞裂解,粗DNA纯化,其中细胞裂解组合了玻璃珠击打,SDS裂解,溶菌酶裂解。进一步应用PCR-限... 展开更多; 关键词土壤DNA提取 DNA质量 pcr扩增限制性片段长度多态性分析温度梯度凝胶电泳分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

镉致鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的研究被引量：3: 5; 作者李金龙熊永忠 +2 位作者徐世文王秀荣李术《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期362-364,共3页; 应用片段化DNA定量分析法和碱性单细胞凝胶电泳法,检测了10μmol/L镉对体外不同时间培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的情况,结果表明:10μmol/L的镉能够明显损伤鸡脾脏淋巴细胞DNA,并且呈现时间效应。提示镉致淋巴细胞DNA损伤是镉对禽类免... 展开更多; 关键词脾脏淋巴细胞 DNA损伤镉鸡凝胶电泳法定量分析法时间效应免疫毒性 MOL 单细胞片段化禽类; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗菌肽基因在E.ColiJM109中的克隆表达被引量：2: 6; 作者李启辉乐国伟 +1 位作者施用晖王树英《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2004年第6期47-50,80,共5页; 合成5条50-70 bp的DNA片段,用"片段拼凑"的方法通过三步PCR扩增得到目的基因,天蚕素基因被克隆到PUC19载体上,再转化大肠杆菌JM109.电泳分析重组质粒,确定天蚕素基因已转化到JM109上.摇床发酵转化子,IPTG诱导表达目的肽,最后... 展开更多; 关键词 pcr扩增片段拼凑诱导SDS-PAGE电泳色谱分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名丽水市十三项呼吸道病原体感染情况及特点分析被引量：8: 1; 作者黄振强马亚萍曲春生张旭颖杨景森; 机构丽水市人民医院检验科丽水市疾病控制预防中心健康教育科; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期869-873,共5页; 基金浙江省教育厅一般科研项目(No.Y202043158)。; 文摘目的了解丽水市呼吸道病原体感染情况及流行病学特征,为呼吸道传染病诊疗与防控提供科学依据。方法回顾性分析2020年3月至2021年12月丽水市人民医院收治的4035例呼吸道感染患者13项呼吸道病原体PCR毛细电泳核酸检测结果,并分析病原体感染分布特征。结果呼吸道病原体感染患者阳性检出率为32.24%(1301/4035),检出率前5位分别是HRV(16.60%)、HRSV(7.09%)、HPIV(2.87%)、HMPV(2.21%)、HADV(1.96%)。混合感染阳性占比为7.61%(99/1301),Boca病毒(76.0%)与Ch(46.15%)易与其它病原体形成混合感染。不同性别呼吸道病原体感染率差异无统计学意义(P>0.05)。虽然不同季节呼吸道病原体整体感染率差异无统计学意义(P>0.05),但HRV好发于春秋两季,而HPIV在春秋两季感染率较低,春季HRSV感染率较低,HADV在夏秋两季感染率较低,HMPV在冬季较为流行。未成年人呼吸道病原体感染率较高,HRSV、HRV、HPIV、HADV和Boca主要发生于未成年人组,InfB和HMPV在未成年和青年人群感染率都较高。结论未成年人群是呼吸道病原体易感人群,应加强未成年人呼吸道传染病防控。; 关键词呼吸道病原体 pcr毛细电泳片段分析法感染情况丽水市; Keywords respiratory pathogens pcr capillary electro-phoresis infectious situations Lishui City; 分类号 R183.3 [医药卫生—流行病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲醛溶液保存的中华哲水蚤基因组DNA提取和PCR扩增被引量：3: 2; 作者周美玉林元烧方旅平郑连明刘迟迟曹文清; 机构厦门大学海洋与环境学院; 出处《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期403-406,共4页; 基金国家重点基础研究发展规划 ( 973 )项目资助(G1999043708); 文摘提取了保存于5%甲醛溶液中的单只中华哲水蚤基因组DNA.经凝胶电泳后虽无清晰条带,但PCR扩增后可得线粒体DNA细胞色素氧化酶I亚基基因(mtCOI)片段.测序分析,该片段长度为710bp,与GenBank中的序列(索引号AF332769)比对后确定为中华哲水蚤mtCOI序列的一部分.利用本实验方法所提取的基因组DNA可适用于系统发生、种群遗传结构等领域的分子水平研究,为保存在甲醛溶液中的小型海洋浮游动物的基因信息利用提供实用技术.; 关键词中华哲水蚤 pcr扩增基因组DNA提取甲醛溶液保存细胞色素氧化酶 GENBANK 线粒体DNA 海洋浮游动物种群遗传结构测序分析凝胶电泳片段长度系统发生实验方法实用技术信息利用分子水平序列; Keywords Calanus sinicus formaldehyde solution DNA genome extraction pcr amplification; 分类号 Q959.223.3 [生物学—动物学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名BRCA1基因全长mRNA序列分析技术: 3; 作者徐红先周冬仙熊文邵超鹏; 机构广东省深圳市人民医院检验科暨南大学医学院第二附属医院甲状腺乳腺外科广东省深圳市血液中心; 出处《实用医学杂志》 CAS 2005年第12期1340-1341,共2页; 文摘目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健康女性样本。结果:6个特异性RT-PCR反应扩增片段相互覆盖,使序列分析结果包括全长BRCA1mRNA,共5000多bp。3名经PCR技术检测确定携带正常BRCA1基因的样本的mRNA分析结果显示,其BRCA1mRNA序列均与过往报道的正常mRNA序列完全一致。结论:所建立的RT-PCR特异性结合BRCA1基因,能用于其mRNA全长序列分析。; 关键词 BRCA1基因 RNA序列全长分析技术 pcr技术检测 MRNA RT-pcr 分析结果特异性引物 DNA测序毛细管电泳 pcr反应特异性结合测定方法序列设计 pcr) 健康女性方法建立扩增片段序列分析逆转录样本; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤] R977.3 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名土壤微生物分子生态学研究中总DNA的提取被引量：72: 4; 作者赵勇周志华李武刘彬彬潘迎捷赵立平; 机构南京农业大学微生物学系上海交通大学生命科学技术学院微生物分子生态学与基因组学实验室上海水产大学食品科学学院; 出处《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期854-860,共7页; 基金国家863计划(2001AA214131) 上海市农委资助项目(2002-4-4-2 2003-15-2); 文摘建立了一种土壤DNA提取方法。根据DNA产量和纯度2个评价指标,从3种手提土壤DNA方法中优选出方法B为手提DNA方法(Labmethod),它包括样品预处理,细胞裂解,粗DNA纯化,其中细胞裂解组合了玻璃珠击打,SDS裂解,溶菌酶裂解。进一步应用PCR-限制性片段长度多态性(Restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)技术及PCR-温度梯度凝胶电泳(Temperaturegradientgelelectrophoresis,TGGE)技术,结合DNA产量、纯度、片段大小以及所反映的微生物群落结构特性等指标评价了手提方法(Labmethod)得到的总DNA质量,并将这些结果与2种应用较广的商业试剂盒(MoBioUltraCleanSoilDNAKit和Bio101FastDNASPINKit(ForSoil))所得DNA的各种指标进行了比较。结果表明,手提方法(Labmethod)的粗DNA产量低于Bio101Kit的,但高于MoBioKit的。这些方法所得DNA的长度都在21kb左右,Labmethod提取的DNA没有严重被剪切现象,而2种试剂盒提取的DNA都有不同程度的剪切。手提方法得到的DNA经纯化后,应用细菌及真菌特异引物进行PCR扩增,均能获得目的片段,表明该方法能从土壤中同时有效提取细菌和真菌总基因组DNA。并且,手提方法所得DNA的细菌16SrDNA和真菌18SrDNA的PCR-RFLP图谱与两种商业试剂盒的图谱基本相似,但3种方法提取的DNA在细菌16SrDNAV3区和真菌28SrDNA片段的PCR-TGGE图谱上都存在一定差异,主要表现在一些弱势条带的有无或强弱上。这说明手提方法提取的总DNA与2种商业试剂盒一样,在一定程度上能反映微生物群落的多样性和组成。总之,手提DNA方法(Labmethod)所用试剂普通,价格便宜,能在4h以内获得够质够量的土壤DNA用于微生物分子生态学研究,较适合于广大普通实验室进行土壤DNA提取工作。; 关键词土壤DNA提取 DNA质量 pcr扩增限制性片段长度多态性分析温度梯度凝胶电泳分析; Keywords soil DNA extraction DNA quality pcr amplification restriction fragment length polymorphism （RFLP） analysis temperature gradient gel electrophoresis （TGGE） analysis; 分类号 S151.9 [农业科学—土壤学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名镉致鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的研究被引量：3: 5; 作者李金龙熊永忠徐世文王秀荣李术; 机构东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期362-364,共3页; 基金黑龙江省教育厅科研基金项目(10551038); 文摘应用片段化DNA定量分析法和碱性单细胞凝胶电泳法,检测了10μmol/L镉对体外不同时间培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的情况,结果表明:10μmol/L的镉能够明显损伤鸡脾脏淋巴细胞DNA,并且呈现时间效应。提示镉致淋巴细胞DNA损伤是镉对禽类免疫毒性的重要机制之一。; 关键词脾脏淋巴细胞 DNA损伤镉鸡凝胶电泳法定量分析法时间效应免疫毒性 MOL 单细胞片段化禽类; Keywords cadmium chicken splenic lymphocytes DNA damage; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学] Q523 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗菌肽基因在E.ColiJM109中的克隆表达被引量：2: 6; 作者李启辉乐国伟施用晖王树英; 机构江南大学食品学院江南大学测试中心; 出处《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2004年第6期47-50,80,共5页; 文摘合成5条50-70 bp的DNA片段,用"片段拼凑"的方法通过三步PCR扩增得到目的基因,天蚕素基因被克隆到PUC19载体上,再转化大肠杆菌JM109.电泳分析重组质粒,确定天蚕素基因已转化到JM109上.摇床发酵转化子,IPTG诱导表达目的肽,最后提纯表达产物.SDS-PAGE电泳分析表明有特异性带出现,荧光色谱分析表明表达肽与目的肽组成一致,最后确定天蚕素在JM109中得到表达.抑菌圈活性实验表明,表达肽具有一定抗菌活性.; 关键词 pcr扩增片段拼凑诱导SDS-PAGE电泳色谱分析; Keywords pcr amplification fragment piecing-together induction SDS-PAGE electroph-oresis chromatography analysis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	丽水市十三项呼吸道病原体感染情况及特点分析	黄振强马亚萍曲春生张旭颖杨景森	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	甲醛溶液保存的中华哲水蚤基因组DNA提取和PCR扩增	周美玉林元烧方旅平郑连明刘迟迟曹文清	《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	BRCA1基因全长mRNA序列分析技术	徐红先周冬仙熊文邵超鹏	《实用医学杂志》 CAS	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	土壤微生物分子生态学研究中总DNA的提取	赵勇周志华李武刘彬彬潘迎捷赵立平	《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	72	在线阅读下载PDF 职称材料
5	镉致鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤的研究	李金龙熊永忠徐世文王秀荣李术	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗菌肽基因在E.ColiJM109中的克隆表达	李启辉乐国伟施用晖王树英	《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料