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PCR探针熔解曲线法在对肺结核患者进行结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用效果 被引量:3
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作者 常凤霞 《当代医药论丛》 2018年第19期171-172,共2页
目的 :探讨PCR探针熔解曲线法在对肺结核患者进行结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用效果。方法 :将2018年1月至2018年3月期间在青海省第四人民医院门诊或住院部接受治疗的20例肺结核患者作为研究对象。使用PCR探针熔解曲线法对这20例患... 目的 :探讨PCR探针熔解曲线法在对肺结核患者进行结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用效果。方法 :将2018年1月至2018年3月期间在青海省第四人民医院门诊或住院部接受治疗的20例肺结核患者作为研究对象。使用PCR探针熔解曲线法对这20例患者体内结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、乙胺丁醇和链霉素的耐药性进行耐药基因检测。然后,以药敏试验的结果为金标准,观察这些患者体内结核分枝杆菌的耐药基因检测结果与利福平、异烟肼、乙胺丁醇和链霉素耐药表型的一致性。结果 :这20例患者体内结核分枝杆菌的耐药基因检测结果与利福平、异烟肼耐药表型的一致性较高,其体内结核分枝杆菌的耐药基因检测结果与乙胺丁醇、链霉素耐药表型的一致性较低。结论 :PCR探针熔解曲线法在对肺结核患者进行结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用效果显著,可迅速地筛查出患者体内结核分枝杆菌对利福平等常用一线抗结核药的耐药情况。 展开更多
关键词 pcr探针熔解曲线法 结核分枝杆菌 耐药基因检测 耐药表型 一致性
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PCR熔解曲线法检测乙型肝炎病毒变异株 被引量:11
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作者 刘新钰 曹利 张汉荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期445-446,共2页
目的 探讨PCR熔解曲线法检测HBVDNA聚合酶活性区YMDD变异的临床应用价值 ,并以DNA测序结果为标准 ,比较其敏感性和特异性。方法 采用DNA测序法和PCR熔解曲线法 ,对拉米夫定抗病毒治疗过程中出现HBVDNA由阴转阳的 6 8例慢性乙型肝炎患... 目的 探讨PCR熔解曲线法检测HBVDNA聚合酶活性区YMDD变异的临床应用价值 ,并以DNA测序结果为标准 ,比较其敏感性和特异性。方法 采用DNA测序法和PCR熔解曲线法 ,对拉米夫定抗病毒治疗过程中出现HBVDNA由阴转阳的 6 8例慢性乙型肝炎患者的血清 ,同步进行YMDD变异株的检测。结果  6 8例患者血清中 ,用DNA测序法检出YMDD变异株 5 5例 ,其中YIDD变异 2 5例 (其中 11例伴有L5 2 8M变异 )、YVDD变异 2 4例 (其中伴有L5 2 8M变异 19例 )、YMDD与YVDD共生伴有L5 2 8M变异 1例、YMDD与YIDD共生伴有L5 2 8M变异 5例 ,有 13例未发生YMDD变异 (野生型 )。用PCR熔解曲线法检出YMDD变异株 5 2例 ,其中YIDD变异 2 8例、YVDD变异 2 1例、YMDD与YVDD共生 1例、YMDD与YIDD共生 2例。有 10例未发生YMDD变异 (野生型 ) ,阴性结果 6例。两法变异符合率为 93.88% (46 / 4 9) ;检出符合率为 91.18% (6 2 / 6 8)。结论 采用PCR熔解曲线法进行YMDD变异株的检测 ,其操作方法简便 ,省时 ,不易交叉污染 ,很适用于临床快速诊断和人群筛查。但该法的敏感度和特异性均不如DNA测序法。 展开更多
关键词 pcr熔解曲线 含量检测 乙型肝炎病毒 病毒变异株
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实时荧光PCR熔解曲线法快速鉴定嗜肺军团菌 被引量:2
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作者 戈立秀 赵利伟 +2 位作者 陈文聪 朱庆义 吴尚为 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期187-189,共3页
目的建立特异、快速、敏感的实时荧光PCR熔解曲线基因分型方法,并探讨该法在鉴定嗜肺军团菌中的应用价值。方法根据嗜肺军团菌16S rRNA基因保守序列设计引物和猝灭FRET探针建立实时荧光PCR熔解曲线方法,优化引物与探针浓度,用15株嗜肺... 目的建立特异、快速、敏感的实时荧光PCR熔解曲线基因分型方法,并探讨该法在鉴定嗜肺军团菌中的应用价值。方法根据嗜肺军团菌16S rRNA基因保守序列设计引物和猝灭FRET探针建立实时荧光PCR熔解曲线方法,优化引物与探针浓度,用15株嗜肺军团菌、30株非嗜肺军团菌及7株其他病原菌标准菌株验证该方法的特异性、敏感性和重复性,用该法检测117例临床痰标本并进行基因测序。结果 15株不同血清型的嗜肺军团菌Tm值均为57℃;7株非嗜肺军团菌Tm值为43℃,1株Tm值为45℃;其余22株非嗜肺军团菌和7株其他病原菌均无明显Tm值。该方法最低检出限可达0.1 pg/μL。检测117例痰标本发现3株嗜肺军团菌,与PCR基因测序法检测结果一致。结论实时荧光PCR熔解曲线法可特异、快速和敏感地检测嗜肺军团菌,适用于临床痰标本的嗜肺军团菌检测。 展开更多
关键词 嗜肺军团菌 实时荧光pcr熔解曲线 猝灭FRET探针
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PCR熔解曲线法检测MTHFR 677T基因多态性在H型高血压诊治中的应用 被引量:1
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作者 李奕萍 李克强 +1 位作者 诸葛飞 郑文华 《浙江临床医学》 2014年第5期806-807,共2页
高同型半胱氨酸血症是指血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平的异常升高(Hcy≥10μmol/L)。亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)是同型半胱氨酸代谢过程中较为重要的关键酶,MTHFR677C/T多态... 高同型半胱氨酸血症是指血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平的异常升高(Hcy≥10μmol/L)。亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)是同型半胱氨酸代谢过程中较为重要的关键酶,MTHFR677C/T多态性可引起血浆Hcy水平的增高,研究发现MTHFR677C/T突变是中国人患有高同型半胱氨酸血症的重要原因之一。 展开更多
关键词 MTHFR 基因多态性 熔解曲线 HOMOCYSTEINE 血浆同型半胱氨酸 高同型半胱氨酸血症 亚甲基四氢叶酸还原酶 pcr
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荧光PCR熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用 被引量:4
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作者 李媛媛 苏东栋 《中国实用医药》 2021年第9期210-212,共3页
目的探讨气管镜刷检物实时荧光PCR熔解曲线耐药法检测对复治结核病耐药早期诊断的价值,同时根据支气管刷检深部痰液结核菌耐药检测结果,进一步分析指导可疑耐药结核病治疗,规范临床合理用药,为耐药结核病的诊断及治疗提供科学依据。方... 目的探讨气管镜刷检物实时荧光PCR熔解曲线耐药法检测对复治结核病耐药早期诊断的价值,同时根据支气管刷检深部痰液结核菌耐药检测结果,进一步分析指导可疑耐药结核病治疗,规范临床合理用药,为耐药结核病的诊断及治疗提供科学依据。方法纳入160例结核分枝杆菌(MTB)患者为本研究对象。每例患者采用同一标本进行绝对浓度法和熔解曲线法耐药基因检测,观察熔解曲线法对利福平、异烟肼的检测敏感度、特异度、准确度。结果同一标本应用两种方法检测时,绝对浓度法检出利福平21例耐药,139例敏感;检出异烟肼68例耐药,92例敏感。熔解曲线法检出利福平17例耐药,139例敏感,4例未检出结果;检出异烟肼61例耐药,99例敏感。熔解曲线法对利福平的检测准确度为96.15%、敏感度为87.50%、特异度为98.39%;对异烟腓的检测准确度为95.00%、敏感度为88.57%、特异度为96.80%。两种检验方法对利福平及异烟肼的耐药及敏感率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论荧光PCR熔解曲线法能够快速检测出MTB对药物的耐药基因检测,而且有良好的敏感度和特异度,有效节约时间、安全高效,是临床检验及诊治耐药结核的有效手段。 展开更多
关键词 荧光pcr熔解曲线 结核分枝杆菌 利福平 异烟肼 耐药情况 敏感度 特异性
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PCR熔解曲线法在原发性高血压患者中MTHFR677T基因多态性检测中的应用
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作者 陈玲 《中国社区医师》 2016年第20期120-121,共2页
目的:探讨PCR熔解曲线法检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态位点在原发性高血压(EH)诊治中的准确性,并分析血浆Hcy的水平、H型高血压发生率与MTHFR 677C/T基因型的相关性。方法:收治EH患者300例,均采用PCR熔解曲线法进行MTHF... 目的:探讨PCR熔解曲线法检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态位点在原发性高血压(EH)诊治中的准确性,并分析血浆Hcy的水平、H型高血压发生率与MTHFR 677C/T基因型的相关性。方法:收治EH患者300例,均采用PCR熔解曲线法进行MTHFR 677C/T基因型检测,并与DNA测序法对比。结果:①与DNA测序法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②MTHFR C677T基因的TT基因型的Hcy水平显著高于CC+CT基因型的Hcy水平,男女差异有统计学意义(P<0.05)。③MTHFR C677T基因的TT基因型较CC+CT基因型H型高血压发病风险显著增加,男女差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PCR溶解曲线法不但操作简单,而且准确率高,进行高血压患者的MTHFR C677T基因型检测有深远的临床意义,可早期预防H型高血压。 展开更多
关键词 pcr熔解曲线 亚甲基四氢叶酸还原酶 C677T HCY水平
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115462例新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查及基因突变分析 被引量:1
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作者 张禾璇 杨雪 +4 位作者 王侣金 李林洁 张晓怡 刘兴宇 余蕾 《罕少疾病杂志》 2024年第2期115-117,共3页
目的了解贵阳地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症发病情况和基因突变特点,为贵阳地区G6PD缺乏症的防治提供科学参考。方法募集该地区2020年8月至2023年1月出生的新生儿,应用荧光分析法对其血斑样... 目的了解贵阳地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症发病情况和基因突变特点,为贵阳地区G6PD缺乏症的防治提供科学参考。方法募集该地区2020年8月至2023年1月出生的新生儿,应用荧光分析法对其血斑样本进行G6PD酶活性筛查,召回初筛阳性儿,完成G6PD酶活性诊断及多色探针荧光PCR熔解曲线法(Multicolor probe melting curve analysis method,MMCA)基因突变分析。结果共募集115462例新生儿,G6PD酶活性筛查血斑样本共筛出阳性1606例,筛查阳性率为1.39%(1606/115462),其中男性为1.83%(1130/61801)、女性0.89%(476/53661),男女新生儿G6PD酶活性初筛阳性率差异有统计学意义(P<0.01);召回初筛阳性患儿,G6PD基因突变检出率87.07%(909/1044),其中男性为90.09%(764/848),女性为73.98%(145/196),男女间G6PD基因突变检出率差异有统计学意义(P<0.01)。本研究共检出13种类型G6PD基因单一突变型(c.1024 G>T、c.1388 G>A、c.95 A>G、c.1376 G>T、c.592C>T、c.871 G>A、c.519 C>T、c.392G>T、c.493 A>G、c.1004C>A、c.1360C>T、c.383T>C、c.517T>C)和6种复合突变型(c.1376 G>T杂合复合c.95A>G杂合突变、c.1024 G>T杂合复合c.95A>G杂合突变、c.1024 C>T杂合复合c.1388 G>A杂合突变、c.1024 C>T杂合复合c.519C>T杂合突变、c.1376 G>T杂合复合c.1024 C>T杂合突变、c.95A>G杂合复合c.1388 G>A杂合突变)。贵阳地区G6PD缺乏症基因突变类型复杂多样,G6PD突变常见类型为c.1024 C>T、c.1388G>A、c.95 A>G、c.1376G>T这四种类型。结论贵阳地区G6PD基因突变位点具有明显地域性特征,开展G6PD酶活性筛查及相关诊断检测,有利于本地区G6PD缺乏症的筛查、确诊、治疗和防控,有效提高出生人口素质。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 G6PD基因型 基因突变 多色探针熔解曲线分析
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