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PCR-SSP对潜在输血需要住院患者ABO基因分型的检测效果与意义 被引量:8
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作者 李俊勋 詹洁瑜 +5 位作者 张帆 叶壮健 王亦斌 罗敏 肖露露 姜傥 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期786-792,共7页
【目的】调查潜在输血需要住院患者的ABO血型基因,分析ABO表型相同输血中ABO基因型的错配输血几率。【方法】对502例潜在输血需要的住院患者,采用血清学方法和聚合酶链反应-序列特异性扩增技术(PCR-SSP)检测ABO血型的表型及基因型。比... 【目的】调查潜在输血需要住院患者的ABO血型基因,分析ABO表型相同输血中ABO基因型的错配输血几率。【方法】对502例潜在输血需要的住院患者,采用血清学方法和聚合酶链反应-序列特异性扩增技术(PCR-SSP)检测ABO血型的表型及基因型。比较两种方法学对ABO血型表型的一致率;统计各ABO等位基因及各ABO基因型的频率;并分析潜在输血需要的住院患者在接受ABO血型表型相同的输血时,ABO基因错配输血几率。【结果】血清学与PCR-SSP对502例潜在输血需要的住院患者的ABO表型识别的一致率为100%。PCR-SSP技术检测出患者中常见ABO基因5个(O1、O2、A1、B1及A2)以及ABO基因型16个(O1O2、O1O1、B1O1、A1O1、A1O2、B1O2、O2O2、A1B1、A1A1、B1B1、A2O1、A2O2、A2B1和A1A2),而血清学仅能识别ABO表型。潜在输血需要住院的患者在接受ABO血型表型相同的随机输血中,与供者之间ABO基因型的错配率分别为:A型65.98%,B型57.39%,O型56.95%,AB型22.55%。【结论】PCR-SSP能识别ABO基因型,不仅可以作为血清学的有力补充,而且可能揭示输血治疗中不明原因的输血不良反应的临床原因,具有重要临床意义。 展开更多
关键词 ABO血型 表型 基因型 血型血清学 聚合酶链反应-序列特异性扩增
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PCR-SSP法检测胎儿、新生儿ABO血型 被引量:6
2
作者 岳亚飞 邱洪涛 +1 位作者 赵亚娟 归巧娣 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期403-405,共3页
目的 研究用PCR SSP法鉴定胎儿、新生儿血型及基因型。方法 用PCR SSP法检测 5 6例 16周以上孕妇的胎儿、新生儿脐血红细胞基因型 ;用常规法检测双亲及胎儿、新生儿血红细胞ABO血型。结果 用PCR SSP法检测出全部 5 6例脐血ABO血型及... 目的 研究用PCR SSP法鉴定胎儿、新生儿血型及基因型。方法 用PCR SSP法检测 5 6例 16周以上孕妇的胎儿、新生儿脐血红细胞基因型 ;用常规法检测双亲及胎儿、新生儿血红细胞ABO血型。结果 用PCR SSP法检测出全部 5 6例脐血ABO血型及基因型 ;PCR SSP法检测出的子代血型与由父母血型按孟德尔遗传规律推测的子代血型符合率达 10 0 % ;用常规法检测脐血ABO血型 ,检出率为 87.5 %。结论 PCR SSP法检测子代ABO血型方法可靠 。 展开更多
关键词 pcr-ssp 检测 胎儿 新生儿 ABO血型基因型 ABO血型 黄疸
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人类血小板抗原HPA-15系统PCR-SSP基因分型技术的建立 被引量:5
3
作者 陈悦康 李大成 +2 位作者 王大明 李茜 邓志辉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期185-188,共4页
本研究目的是采用PCR-SSP技术建立人类血小板抗原HPA-15系统的基因分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型。采用第11届国际输血协会(ISBT)血小板血清学与基因分型协作组推荐的序列特异性引物,调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索最... 本研究目的是采用PCR-SSP技术建立人类血小板抗原HPA-15系统的基因分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型。采用第11届国际输血协会(ISBT)血小板血清学与基因分型协作组推荐的序列特异性引物,调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索最佳PCR扩增条件,建立HPA-15系统基因分型技术。该分型技术的准确性和可靠性,采用第11届ISBT血小板协作组提供的质控样本进行验证,同时采用本研究合成的引物及商品化试剂盒,对50名随机的汉族血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型,作为平行对照。应用本研究的方法,对第11届ISBT送检的10份考核样本进行基因分型。结果表明:基因分型结果与ISBT公布的结果完全一致。50名随机的血小板志愿捐献者,经本研究的方法及美国G&T公司的试剂检测,基因分型的结果相符合;观察到的基因频率:HPA-15a和-15b分别为0.5100和0.4900。结论:本研究建立的HPA基因分型技术具有简便、快速、准确的特点,适合于常规HPA基因分型,具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 人类血小板抗原 HPA-15系统 序列特异性引物-pcr 基因分型
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PCR-SSP快速检测胰腺癌石蜡切片中K-ras基因点突变 被引量:4
4
作者 戴存才 刘训良 +4 位作者 苗毅 杜竞辉 王祥 张兆松 陈淑贞 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第4期330-333,共4页
胰腺癌第12位点K-ras基因点突变检出率达72%~100%,检测其点突变方法有数种。我们采用针对K-ras基因点突变方式设计的引物,对胰腺癌石蜡包埋组织进行多聚酶链反应(PCR),产物借助常规电泳即可判定有无K-r... 胰腺癌第12位点K-ras基因点突变检出率达72%~100%,检测其点突变方法有数种。我们采用针对K-ras基因点突变方式设计的引物,对胰腺癌石蜡包埋组织进行多聚酶链反应(PCR),产物借助常规电泳即可判定有无K-ras基因突变及突变方式,无需酶切、杂交、放射性及非放射性显影等技术。研究发现:31例胰腺癌标本有23例存在K-ras基因点突变,方式分别为CGT、GAT、GTT,而9例正常胰腺组织、19例胰腺良性疾病、7例胆管癌及4例十二指肠乳头癌均未见K-ras基因突变。该法简便、快速、特异、灵敏,易临床推广应用,可以作为胰腺病变良恶性鉴别的一种新方法。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 聚合酶链反应 K-RAS基因 点突变
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应用SSP-PCR/SSO方法进行中国辽宁汉族人HLA-DRB1基因的遗传多态性研究 被引量:8
5
作者 刘利民 梁健 +1 位作者 宋芳吉 贾静涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期20-24,共5页
对159名中国辽宁汉族个体的基因组DNA进行分析,共检出42种等位基因,其中以DRB109012(12.8%)、0701(10.7%)、1501(10.4%)最为常见,其次为DRB11201(79%)、1... 对159名中国辽宁汉族个体的基因组DNA进行分析,共检出42种等位基因,其中以DRB109012(12.8%)、0701(10.7%)、1501(10.4%)最为常见,其次为DRB11201(79%)、1202(75%)、1101(66%)、0301(5.0%)。并发现辽宁汉族人DRB1等位基因频率与白种人间存在明显差异,揭示不同人种有其自己的主要等位基因。 展开更多
关键词 HLA-DRB1 基因分型 ssp-pcr 遗传多态性
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用PCR-SSP分析HLA-B位点血清学分型困难标本 被引量:2
6
作者 杨颖 冯哲 +2 位作者 张雁征 张工梁 冯明亮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期300-302,共3页
目的 :对血清学HLA B位点分型困难标本用PCR SSP方法分析 ,并寻找血清分型效果不佳原因。方法 :用本室建立的PCR SSP方法对 10 0株标准细胞及 91份血清学分型困难标本分别作HLA B位点分析 ,前者作为PCR SSP方法的参考对照品。结果 :10 ... 目的 :对血清学HLA B位点分型困难标本用PCR SSP方法分析 ,并寻找血清分型效果不佳原因。方法 :用本室建立的PCR SSP方法对 10 0株标准细胞及 91份血清学分型困难标本分别作HLA B位点分析 ,前者作为PCR SSP方法的参考对照品。结果 :10 0株标准细胞分析结果与已知结果一致 ;91份疑问标本均顺利地用PCR SSP分型 ,结果共有 70种等位基因格局 ,其中 36种与血清学完全不同 ,占 5 2 %。PCR SSP还检出了一些原先认为上海人中空白的基因 ,如B49。结论 :从PCR SSP分型结果推断血清学部分标本分型结果不佳的原因是缺少单价抗血清 ;同一交叉反应组内错检 ;反应强度不当 ,导致结果难辨 ;操作中跨孔污染。而PCR SSP就没有这方面的问题。证实了本室建立的PCR SSP法可作为准确可靠的HLA 展开更多
关键词 HLA-B位点 pcr-ssp 基因分型 白血病
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人类血小板抗原1~6和Gov系统的PCR-SSP同步基因分型 被引量:3
7
作者 朱培元 洪萍 +3 位作者 栾建凤 叶东 雷千红 严京梅 《医学研究生学报》 CAS 2007年第1期39-42,共4页
目的:采用序列特异性引物PCR(PCR—SSP)对人类血小板抗原(HPA)1-6、Gov系统进行同步基因分型,以确定中国大陆汉族人群中的HPA等位基因频率。方法:随机采集100名中国大陆汉族无偿献血者外周血标本,采用酚/氯仿方法提取基因组DN... 目的:采用序列特异性引物PCR(PCR—SSP)对人类血小板抗原(HPA)1-6、Gov系统进行同步基因分型,以确定中国大陆汉族人群中的HPA等位基因频率。方法:随机采集100名中国大陆汉族无偿献血者外周血标本,采用酚/氯仿方法提取基因组DNA。设计合成21条序列特异性引物,在相同的PCR循环条件下对HPA-1-6和Gov进行PCR-SSP同步基因分型。结果:100名随机供血者中观察到的基因频率分别是HPA-1a和1b为1.000和0.000,HPA-2a和26为0.995和0.005,HPA-3a和36为0.655和0.345,HPA-4a和46为1.000和0.000,HPA-5a和56为0.990和0.010,HPA-6a和66为0.980和0.020,Gov^a和Gov^b为0.515和0.485。中国人HPA—1.6、Gov的基因频率与亚洲其他人群相一致,HPA-3a/3b和Gov^a/Gov^b基因频率在包括高加索人在内的不同人群中基本相等。结论:中国大陆汉族人群中Gov和HPA-3等位基因分布有其自身特点。 展开更多
关键词 人类血小板抗原 pcrssp 同步基因分型 基因频率
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利用PCR-SSP法研究肺腺癌细胞系A549、Calu-6的HLA-ABDR等位基因 被引量:2
8
作者 邓波 林一丹 +1 位作者 王如文 蒋耀光 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期113-116,共4页
背景和目的已有的研究表明人类白细胞抗原(HLA)在抗原呈递及T细胞识别抗原的过程中起关键作用,此外还与肿瘤细胞的免疫杀伤及免疫逃避有着密切的关系。本研究探讨了人肺腺癌细胞系A549、Calu6中HLA-A、HLA-B、HLA-DR等位基因的存在状况... 背景和目的已有的研究表明人类白细胞抗原(HLA)在抗原呈递及T细胞识别抗原的过程中起关键作用,此外还与肿瘤细胞的免疫杀伤及免疫逃避有着密切的关系。本研究探讨了人肺腺癌细胞系A549、Calu6中HLA-A、HLA-B、HLA-DR等位基因的存在状况。方法分离A549、Calu6细胞DNA,分别行PCRSSP法扩增、电泳后紫外透射扫描,根据反应格局表对HLA-A、HLA-B、HLA-DR进行判定。结果A549与Calu6细胞中HLAA、HLAB基因较杂合子均有缺失,而HLA-DR基因无缺失。A549细胞HLAABDR的基因分型为HLA-A30、HLA-B44、HLA-DR7/HLADR53。Calu6细胞HLAAB-DR的基因分型为HLAA01、HLAB08、HLADR17/HLADR52。结论肺腺癌中存在HLAⅠ和HLAⅡ基因。HLAⅠ基因可能在肿瘤细胞传代过程中发生选择性丢失,而HLA-DR基因完整保留。检测肿瘤HL-A对了解其免疫学行为及建立肿瘤特异性杀伤淋巴细胞(CTL)模型具有重要意义。 展开更多
关键词 肺腺癌细胞 人类白细胞抗原 pcr-ssp
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用PCR-SSP作HLA-B位点分型及B22亚型分析 被引量:1
9
作者 杨颖 冯喆 +4 位作者 张雁征 冯明亮 嵇月华 陆琼 许一多 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期91-94,共4页
目的:用DNA分型弥补血清学HLAB位点分型的欠缺并了解南方汉族B22亚型分布情况。方法:采用标准细胞作参照,建立B位点的PCRSSP分型方法;并对血清学B22阳性标本进行B22亚型分析。结果:104株标准细胞PCRSSP分型结果与已知结果完全一致,17例... 目的:用DNA分型弥补血清学HLAB位点分型的欠缺并了解南方汉族B22亚型分布情况。方法:采用标准细胞作参照,建立B位点的PCRSSP分型方法;并对血清学B22阳性标本进行B22亚型分析。结果:104株标准细胞PCRSSP分型结果与已知结果完全一致,17例白血病人及同胞分型与血清学一致,1例不符;B22亚型以B5401最多,B5601较少,1例分型格局异常,可能为新B22等位基因或错配的DNA双链。结论:PCRSSP可用于B位点的DNA分型,比血清学更直观精确,操作简便,不受疾病状态影响。 展开更多
关键词 HLA-B pcr-ssp 分型 B22亚型 白血病
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小鼠H2Eb位点的PCR-SSP检测与多态性 被引量:3
10
作者 王准 刘辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期669-671,共3页
为探讨小鼠遗传背景的多态性,我们采用PCR SSP技术对60只昆明种(KM)小鼠的H2Eb位点第二个外显子的等位基因进行鉴定,得到78个PCR阳性结果,共检出65%的等位基因且43.3%小鼠此位点的基因型相同。KM小鼠具有一定程度的遗传多态性。
关键词 H2复合体 pcr-ssp 等位基因 小鼠 遗传多态性
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HLA-DRB1位点的PCR-SSP分型在亲子鉴定中的应用研究 被引量:1
11
作者 刘利民 梁健 +5 位作者 王保捷 丁梅 李建平 李春梅 肖仰哲 贾静涛 《法医学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期201-203,共3页
应用PCR-SSP(PCRamplificationwithsequencespecificprimer)方法将HLAⅡ类DRB1位点基因分型应用于亲权鉴定。对42例亲子鉴定案例进行分析研究的结果表明,本方法简单、快速、结果可靠,且具有较高的非父排除概率(66.3%),不仅适... 应用PCR-SSP(PCRamplificationwithsequencespecificprimer)方法将HLAⅡ类DRB1位点基因分型应用于亲权鉴定。对42例亲子鉴定案例进行分析研究的结果表明,本方法简单、快速、结果可靠,且具有较高的非父排除概率(66.3%),不仅适用于法医学亲手鉴定和个人识别,亦可应用于移植配型、HLA相关疾病及人类遗传学研究。 展开更多
关键词 亲子鉴定 pcr DRB1基因 白细胞抗原
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应用PCR-SSP方法研究越南中部京族HLA-DQA1等位基因的多态性 被引量:1
12
作者 陈亭平 王琳琳 +2 位作者 林伟雄 陈剑峰 谢湘芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期198-200,204,共4页
目的检测越南中部京族HLADQA1等位基因的多态性。方法应用PCRSSP方法对105名健康,无血缘关系的越南中部京族儿童、青年进行HLADQA1分型。结果检出10个HLADQA1等位基因,频率最高为DQA10104(213%)和最低为DQA10601(15%)。结论结果表明越... 目的检测越南中部京族HLADQA1等位基因的多态性。方法应用PCRSSP方法对105名健康,无血缘关系的越南中部京族儿童、青年进行HLADQA1分型。结果检出10个HLADQA1等位基因,频率最高为DQA10104(213%)和最低为DQA10601(15%)。结论结果表明越南中部京族人的HLADQA1等位基因分布与中国各民族的HLADQA1等位基因分布有差异。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 HLA-DQA1 pcr-ssp 越南京族
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PCR-SSP技术对广东汉族人HLA-DR基因分型 被引量:13
13
作者 罗超权 陈汉奎 +1 位作者 杨英浩 伍新尧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期87-91,共5页
探索具有高分辨率、高特异性和简捷快速的方法对HLA-DR基因分型,为临床器官移植配型和疾病相关性分析提供实用的方法和基础资料.利用DR1~DRw18序列特异性的19组引物及1对内参照引物进行PCR扩增即PCR-SSP... 探索具有高分辨率、高特异性和简捷快速的方法对HLA-DR基因分型,为临床器官移植配型和疾病相关性分析提供实用的方法和基础资料.利用DR1~DRw18序列特异性的19组引物及1对内参照引物进行PCR扩增即PCR-SSP对HLA-DR进行基因分型,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,溴乙锭染色,在紫外光下观察分型结果.每个被检个体的DR型别可由特异引物扩增出现的电泳谱带直接判断.双盲检测22例的结果100%正确.在102例中国广东地区汉族人中,DR9和DR2的基因频率最高,分别为0.2205和0.1912,DR10为最低(0.0098).与用PCR-SSO方法分型获得的结果比较,基因型别分布基本一致,但一些等位基因的频率有差异,表明HLA-DR基因频率的分布在不同地区、不同种族的人群间存在着差异.PCR-SSP法分辨率和特异性虽不及PCR-SSO法但比血清学方法精细,分型的全过程只需2~4h能满足临床器官移植配型的要求.基因频率调查结果为器官移植配型和疾病相关性分析提供了基础资料. 展开更多
关键词 HLA pcr 基因分型 基因频率 器官移植
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异基因骨髓移植中PCR-SSP和RFLP对HLA-DRB、DPB1分型的应用
14
作者 林祥华 陈志哲 +1 位作者 林敏辉 吕联煌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期558-561,共4页
目的:探讨序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)和聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)对HLA-DRB、DPB1分型在异基因骨髓移植中应用的可行性。方法:应用19对不同的DRB抗原所对应等位基因序列特异性的引物,PCR扩增供受者... 目的:探讨序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)和聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)对HLA-DRB、DPB1分型在异基因骨髓移植中应用的可行性。方法:应用19对不同的DRB抗原所对应等位基因序列特异性的引物,PCR扩增供受者各20个样本DRB,产物直接琼脂糖凝胶电泳分析;同时用另一对引物PCR扩增DPB1第二外显子,产物10种限制性内切酶酶切分析。结果:各DRB带清晰可辨,直接确定为该型;DPB1的多态性片段编码转换后确定其基因型;4例找到供者。结论:它们是异基因骨髓植前快速、精确和可靠的基因分型手段。 展开更多
关键词 异基因骨髓移植 pcr-ssp RFLP HLA-DRB DPB1 分型
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HLA-DQB1-PCR-SSP方法的建立及其在骨髓移植中的应用研究 被引量:2
15
作者 孙玉英 孔繁华 +4 位作者 奚永志 刘广贤 陈兴国 金荔 孙成文 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期39-44,共6页
为了改进骨髓移植中供、受体配型技术,在已有技术的基础上改进、建立了新的HLA-DQB1-PCR-SSP方法。利用澳大利亚皇家医院赠送的HLA标准分型细胞对自行设计引物的特异性进行鉴定,发现该引物设计合理、扩增特异。通过内部阳性对照引物的设... 为了改进骨髓移植中供、受体配型技术,在已有技术的基础上改进、建立了新的HLA-DQB1-PCR-SSP方法。利用澳大利亚皇家医院赠送的HLA标准分型细胞对自行设计引物的特异性进行鉴定,发现该引物设计合理、扩增特异。通过内部阳性对照引物的设立,可较容易地将纯合子及杂合子分型细胞分开,并对个体DNA进行了尝试。结论表明,HLA-DQB1-PCR-SSP快速、简便、灵敏、重复性好,结果易于判断,适于小样本及急症病人的器官及骨髓移植配型,是比较理想的HLA-Ⅱ类基因分型方法。 展开更多
关键词 HLA-DQB1-pcr-ssp方法 HLA-DQB1基因 骨髓移植 纯合子细胞 杂合子细胞
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HLA-A位点PCR-SSP基因分型和血清学分型的比较
16
作者 嵇月华 冯哲 +5 位作者 杨颖 冯明亮 陆琼 倪建华 张雁征 陈仁彪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期80-81,共2页
目的:建立优化HLAA位点PCRSSP分型方法。方法:采用普通扩增仪和Eppendorf管对细胞系DNA和37个健康正常人进行基因分型,血清学检测采用标准淋巴细胞毒试验方法。结果:发现引物浓度和浓度比、DNA的纯... 目的:建立优化HLAA位点PCRSSP分型方法。方法:采用普通扩增仪和Eppendorf管对细胞系DNA和37个健康正常人进行基因分型,血清学检测采用标准淋巴细胞毒试验方法。结果:发现引物浓度和浓度比、DNA的纯度及酶的选用,是影响HLAA位点PCRSSP分型准确性的重要因素。该方法对37个标本的基因分型结果与血清学结果相符合。结论:PCRSSP方法具有简便准确的优点。 展开更多
关键词 HLA-A pcr-ssp 基因分型 血清学
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玉米S组CMS胞质与正常胞质育性相关基因基于SSP-PCR的遗传多型性研究
17
作者 李镭 郑用琏 张方东 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期681-686,共6页
利用 SSP- PCR技术对 S组 CMS与正常胞质线粒体胞质育性相关基因 cox ,cox 的 5′上游、 3′下游以及基因编码区与正常 N胞质进行了遗传多型性的比较研究。结果表明在所选用的 (特异引物 +随机引物 )的引物组合中 ,未能在 cox 基因的 ... 利用 SSP- PCR技术对 S组 CMS与正常胞质线粒体胞质育性相关基因 cox ,cox 的 5′上游、 3′下游以及基因编码区与正常 N胞质进行了遗传多型性的比较研究。结果表明在所选用的 (特异引物 +随机引物 )的引物组合中 ,未能在 cox 基因的 5′上游和 3′下游区发现变异 ,但其基因内含子中存在基于 SSP- PCR的遗传多型性。在 S组不育系的 cox 基因 5′上游调控区内 ,由于复杂的重组事件而导致翻译起始密码 ATG和富含 AT的核糖体结合区域的缺失。讨论了 SSP- PCR技术作为揭示和分析某一目的基因的遗传变异的有效性与准确性 ,以及 cox 基因在表达水平上的变异可能与玉米 展开更多
关键词 玉米 CMS COX ssp-pcr 遗传多型性
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序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP)结合血清学在疑难血型鉴定中的应用 被引量:3
18
作者 宋艳艳 张羽茜 +2 位作者 曹昕瑞 于笑难 郑伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期824-827,共4页
目的 探讨血型血清学与序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP)基因分型在ABO疑难血型鉴定中的作用。方法 用血清学分析鉴定的ABO疑难血型标本80例,同时采用PCR-SSP法进行基因分型,结合两种方法学结果,确定血型及制定输血策略。结果... 目的 探讨血型血清学与序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP)基因分型在ABO疑难血型鉴定中的作用。方法 用血清学分析鉴定的ABO疑难血型标本80例,同时采用PCR-SSP法进行基因分型,结合两种方法学结果,确定血型及制定输血策略。结果 血清学鉴定亚型40例,其他原因引起的抗原抗体缺失或减弱正常血型40例;PCR-SSP法基因分型亚型41例(3例二者结果不一致:血清学Ael型1例,基因分型O2O2;血清学O型1例,基因分型BO1;血清学A型1例,基因分型AB),正常血型39例。结论 使用血清学结合基因分型鉴定ABO疑难血型具有重要意义。 展开更多
关键词 ABO血型 血型血清学 序列特异引物引导的聚合酶链式反应(pcr-ssp) 疑难血型
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应用PCR-SSP法分析中国人血小板抗原基因型频率(英文) 被引量:1
19
作者 张克强 王波 +1 位作者 王字玲 李娅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期256-259,共4页
本研究建立了在同一PCR反应条件下同时检测人血小板抗原 (humanplateletantigen ,HPA)系统HPA 1到HPA 5的PCR SSP检测法。应用该方法分析了 110例健康献血员的HPA 1到HPA 5的基因型 ,并以此为依据推算了中国人HPA 1到HPA 5各亚型的基因... 本研究建立了在同一PCR反应条件下同时检测人血小板抗原 (humanplateletantigen ,HPA)系统HPA 1到HPA 5的PCR SSP检测法。应用该方法分析了 110例健康献血员的HPA 1到HPA 5的基因型 ,并以此为依据推算了中国人HPA 1到HPA 5各亚型的基因频率。结果表明HPA 1a和HPA 1b的基因频率分别为 0 .91和 0 .0 9,HPA 2a和HPA 2的基因频率分别为 0 .86和 0 .14,HPA 3a和HPA 3b的基因频率分别为 0 .60和 0 .4 0 ,HPA 4a和HPA 4b的基因频率分别为 0 .92和 0 .0 8,HPA 5a和HPA 5b的基因频率分别为 0 .85和 0 .15。结论 :基因组DNA的血小板抗原PCR SSP分型法切实可行 。 展开更多
关键词 人血小板抗原 基因分型 基因型频率 pcr-ssp
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应用PCR-RFLP技术检测短喙矮小综合征鹅细小病毒 被引量:3
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作者 王劭 肖世峰 +7 位作者 林甦 程晓霞 俞博 江丹丹 林锋强 朱小丽 陈仕龙 陈少莺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1026-1030,共5页
为准确诊断鸭短喙矮小综合征(SBDS)以及鉴别鹅细小病毒感染鸭群中新发短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV),本研究通过对GenBank登录的水禽细小病毒基因组核苷酸序列的比对分析,根据该病毒5'非编码区基因序列特征设计一对特异性引物... 为准确诊断鸭短喙矮小综合征(SBDS)以及鉴别鹅细小病毒感染鸭群中新发短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV),本研究通过对GenBank登录的水禽细小病毒基因组核苷酸序列的比对分析,根据该病毒5'非编码区基因序列特征设计一对特异性引物,建立了SBDS-GPV聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测方法。特异性试验和敏感性试验显示,水禽细小病毒特异性引物可以扩增得到约200 bp的目的片段,SBDS-GPV PCR产物能够被SspⅠ酶切为140 bp和60 bp两个片段,番鸭细小病毒与德兹西氏病小鹅瘟病毒则不能被酶切,检出SBDS-GPV DNA的最低浓度为2.28×10~7拷贝/μL。利用该方法对14份疑似SBDS临床样品检测,阳性样本采用SPF鸭胚进行病毒分离,结果显示SBDS-GPV PCR-RFLP检测的阳性样本经病毒分离均为SBDS-GPV。上述研究表明,该SBDS-GPV PCR-RFLP检测方法特异性强、敏感性高,为SBDS的防控提供了有效手段。 展开更多
关键词 短喙矮小综合征 鹅细小病毒 聚合酶链式反应-限制性片段多态性 sspⅠ限制性内切酶
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