目的:构建TPX2的真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并观察其在食管癌EC9706细胞中的表达。方法:在pQE-70-TPX2原核表达载体基础上,根据GenBank上提供的TPX2基因序列及测序结果,采用Primer Premier 5.0软件设计扩增TPX2基因编码区的引物序列,经...目的:构建TPX2的真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并观察其在食管癌EC9706细胞中的表达。方法:在pQE-70-TPX2原核表达载体基础上,根据GenBank上提供的TPX2基因序列及测序结果,采用Primer Premier 5.0软件设计扩增TPX2基因编码区的引物序列,经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,与真核表达载体pcDNA3.1连接后转化感受态大肠杆菌JM109,并进行酶切分析和序列测定。将构建的质粒pcDNA3.1-TPX2体外转染EC9706细胞,进行稳定筛选。用Western blot鉴定基因的表达。结果:DNA测序和BLAST比对表明克隆的人TPX2基因序列正确,进一步酶切分析显示,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并在EC9706细胞中获得稳定表达。结论:TPX2基因真核表达载体的成功构建为后续研究TPX2基因在肿瘤细胞中的功能奠定了基础。展开更多
试验旨在研究TLR4(Toll like receptor4)蛋白在子宫内膜组织中具体的分布与表达,从而构建TLR4真核表达载体,为TLR4在细胞水平上的功能研究提供一种技术手段.选择早期妊娠绵羊(9d、13d、17d、21d、25d)子宫组织,采用免疫组织化学和细胞...试验旨在研究TLR4(Toll like receptor4)蛋白在子宫内膜组织中具体的分布与表达,从而构建TLR4真核表达载体,为TLR4在细胞水平上的功能研究提供一种技术手段.选择早期妊娠绵羊(9d、13d、17d、21d、25d)子宫组织,采用免疫组织化学和细胞免疫学抗体着色法检测各阶段子宫组织中TLR4蛋白的分布与表达,确定受体蛋白的表达部位.同时将构建的pcDNA3.1-TLR4质粒转染到确定的受体细胞,检测TLR4蛋白的表达水平.结果表明:TLR4蛋白在子宫内膜各部位均有表达,呈一定的动态时空模式,且第17d胚胎附植后主要表达于内膜基质细胞;重组质粒转染到基质细胞后,TLR4蛋白的表达水平明显增强.此研究成功构建pcDNA3.1-TLR4表达载体,为TLR4在生殖细胞免疫学功能的研究奠定了一定的理论基础.展开更多
冰裂隙是冰川动态变化的重要特征,通过研究冰裂隙,可以有效监测冰川的变化情况。然而,传统的冰裂隙遥感监测方法往往存在人工干预多、效率低下或对复杂冰川环境适应性不足等问题。为解决以上问题,以GeoScene Pro 3.1软件为平台,利用高...冰裂隙是冰川动态变化的重要特征,通过研究冰裂隙,可以有效监测冰川的变化情况。然而,传统的冰裂隙遥感监测方法往往存在人工干预多、效率低下或对复杂冰川环境适应性不足等问题。为解决以上问题,以GeoScene Pro 3.1软件为平台,利用高分辨率遥感影像,选择长江源各拉丹冬冰川区为试验区,结合深度学习技术,探讨了U-Net像素分类模型、HED边缘检测器和BDCN边缘检测器在冰裂隙检测与提取中的应用。首先,通过调整不同的训练样本集组合与训练参数,对以上3种模型分别进行了5次模型训练和冰裂隙检测分析。检测结果表明,U-Net像素分类模型和HED边缘检测器都存在检测效果不佳的问题,而BDCN边缘检测器能够有效抑制检测噪声干扰,并能准确地检测并识别出冰裂隙的分布位置和宽度。其次,利用BDCN边缘检测器对各拉丹冬4条冰川进行冰裂隙检测,冰裂隙检测率分别达到90%、92%、89%、93%,模型检测宽度与人工采样宽度的最小差值仅为0.3 m,充分证明了该模型在不同冰川区域应用时具备良好的鲁棒性和泛化能力。研究表明BDCN边缘检测器更适合冰裂隙的检测识别,可为各拉丹冬冰川及类似区域的冰裂隙周期性监测提供快速有效的技术支持。展开更多
文摘目的:构建TPX2的真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并观察其在食管癌EC9706细胞中的表达。方法:在pQE-70-TPX2原核表达载体基础上,根据GenBank上提供的TPX2基因序列及测序结果,采用Primer Premier 5.0软件设计扩增TPX2基因编码区的引物序列,经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,与真核表达载体pcDNA3.1连接后转化感受态大肠杆菌JM109,并进行酶切分析和序列测定。将构建的质粒pcDNA3.1-TPX2体外转染EC9706细胞,进行稳定筛选。用Western blot鉴定基因的表达。结果:DNA测序和BLAST比对表明克隆的人TPX2基因序列正确,进一步酶切分析显示,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并在EC9706细胞中获得稳定表达。结论:TPX2基因真核表达载体的成功构建为后续研究TPX2基因在肿瘤细胞中的功能奠定了基础。
文摘试验旨在研究TLR4(Toll like receptor4)蛋白在子宫内膜组织中具体的分布与表达,从而构建TLR4真核表达载体,为TLR4在细胞水平上的功能研究提供一种技术手段.选择早期妊娠绵羊(9d、13d、17d、21d、25d)子宫组织,采用免疫组织化学和细胞免疫学抗体着色法检测各阶段子宫组织中TLR4蛋白的分布与表达,确定受体蛋白的表达部位.同时将构建的pcDNA3.1-TLR4质粒转染到确定的受体细胞,检测TLR4蛋白的表达水平.结果表明:TLR4蛋白在子宫内膜各部位均有表达,呈一定的动态时空模式,且第17d胚胎附植后主要表达于内膜基质细胞;重组质粒转染到基质细胞后,TLR4蛋白的表达水平明显增强.此研究成功构建pcDNA3.1-TLR4表达载体,为TLR4在生殖细胞免疫学功能的研究奠定了一定的理论基础.
文摘冰裂隙是冰川动态变化的重要特征,通过研究冰裂隙,可以有效监测冰川的变化情况。然而,传统的冰裂隙遥感监测方法往往存在人工干预多、效率低下或对复杂冰川环境适应性不足等问题。为解决以上问题,以GeoScene Pro 3.1软件为平台,利用高分辨率遥感影像,选择长江源各拉丹冬冰川区为试验区,结合深度学习技术,探讨了U-Net像素分类模型、HED边缘检测器和BDCN边缘检测器在冰裂隙检测与提取中的应用。首先,通过调整不同的训练样本集组合与训练参数,对以上3种模型分别进行了5次模型训练和冰裂隙检测分析。检测结果表明,U-Net像素分类模型和HED边缘检测器都存在检测效果不佳的问题,而BDCN边缘检测器能够有效抑制检测噪声干扰,并能准确地检测并识别出冰裂隙的分布位置和宽度。其次,利用BDCN边缘检测器对各拉丹冬4条冰川进行冰裂隙检测,冰裂隙检测率分别达到90%、92%、89%、93%,模型检测宽度与人工采样宽度的最小差值仅为0.3 m,充分证明了该模型在不同冰川区域应用时具备良好的鲁棒性和泛化能力。研究表明BDCN边缘检测器更适合冰裂隙的检测识别,可为各拉丹冬冰川及类似区域的冰裂隙周期性监测提供快速有效的技术支持。
