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富硒秦巴硒菇多糖改善H_(2)O_(2)致PC12细胞损伤的作用及机制
1
作者 雷文娟 程小益 +4 位作者 滕月鹏 苏晓洁 余利军 杨俊卿 孟敏 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第5期7-13,23,共8页
【目的】探讨秦巴硒菇多糖(Agaricus blazei Murrill polysaccharides extracts,ABM)对H_(2)O_(2)诱导PC12细胞氧化应激损伤的作用及其机制。【方法】建立H_(2)O_(2)诱导PC12细胞氧化损伤模型,分为空白对照组、H_(2)O_(2)组、ABM低、中... 【目的】探讨秦巴硒菇多糖(Agaricus blazei Murrill polysaccharides extracts,ABM)对H_(2)O_(2)诱导PC12细胞氧化应激损伤的作用及其机制。【方法】建立H_(2)O_(2)诱导PC12细胞氧化损伤模型,分为空白对照组、H_(2)O_(2)组、ABM低、中、高剂量组(0.2、0.6、1.2 mg/mL)。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,生化酶学方法检测SOD和CAT活性、MDA含量;采用Western-blot检测PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。【结果】与对照组相比,H_(2)O_(2)组显著降低了细胞活力,凋亡细胞增多,MDA含量升高,SOD和CAT活性降低,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白比值降低。与H_(2)O_(2)组相比,ABM低、中、高剂量组细胞活力增加,细胞凋亡减少,MDA含量降低,SOD和CAT的活性增加,显著上调p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白比值,且呈剂量依赖性。【结论】秦巴硒菇多糖对H_(2)O_(2)致PC12细胞氧化应激损伤有明显保护作用,其机制可能涉及PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活。 展开更多
关键词 秦巴硒菇多糖 pc12细胞 氧化应激损伤 PI3K/Akt/mTOR通路
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锦葵素-3-O-葡萄糖苷改善毒死蜱诱导PC12细胞损伤机制
2
作者 朱容晨 荆世纪 +3 位作者 李琦 付成国 贺阳 文连奎 《食品科学》 北大核心 2025年第13期196-204,共9页
探讨锦葵素-3-O-葡萄糖苷(malvidin-3-O-glucoside,Mv3G)对毒死蜱损伤PC12细胞的保护作用及机制。建立毒死蜱损伤PC12细胞模型,筛选毒死蜱最佳损伤剂量以及Mv3G最佳保护剂量;采用蛋白免疫印迹分析观察Mv3G处理后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激... 探讨锦葵素-3-O-葡萄糖苷(malvidin-3-O-glucoside,Mv3G)对毒死蜱损伤PC12细胞的保护作用及机制。建立毒死蜱损伤PC12细胞模型,筛选毒死蜱最佳损伤剂量以及Mv3G最佳保护剂量;采用蛋白免疫印迹分析观察Mv3G处理后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路蛋白、自噬蛋白苄氯素1(recombinant beclin 1,Beclin1)以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达变化;酶联免疫吸附试剂盒法测定氧化应激指标谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AChE)活性以及凋亡蛋白半胱天冬蛋白酶-3(cysteinasparatic protease-3,Caspase-3)表达变化。通过细胞存活率以及形态变化,选择30μmol/L为毒死蜱最适作用浓度,200μmol/L为Mv3G最佳作用浓度。实验结果表明Mv3G对毒死蜱损伤的PC12细胞存活率具有显著提高作用;Mv3G通过改善毒死蜱引起的PI3K/AKT信号通路抑制,提高了毒死蜱损伤PC12细胞GSH含量、AChE活性,降低了TNF-α含量、Beclin1和Caspase-3蛋白表达。证明Mv3G通过PI3K/AKT通路改善毒死蜱引起的氧化应激、神经炎症、胆碱能系统紊乱、细胞凋亡和自噬异常等。 展开更多
关键词 锦葵素-3-O-葡萄糖苷 毒死蜱 pc12细胞 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路
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燕窝O-链寡糖组结构解析及对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞抗氧化保护作用
3
作者 刘娅 Josef VOGLMEIR 刘丽 《食品工业科技》 北大核心 2025年第16期439-448,共10页
目的:探究燕窝O-链寡糖组的具体结构及其对神经细胞的抗氧化保护作用。方法:采用化学法释放燕窝黏蛋白上的O-链寡糖组,通过超高效液相色谱、基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱、酶切消化等方法解析推测出燕窝O-链寡糖组的可能物质构成... 目的:探究燕窝O-链寡糖组的具体结构及其对神经细胞的抗氧化保护作用。方法:采用化学法释放燕窝黏蛋白上的O-链寡糖组,通过超高效液相色谱、基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱、酶切消化等方法解析推测出燕窝O-链寡糖组的可能物质构成,并利用酸解法分析燕窝糖链的单糖成分。开展细胞实验研究燕窝O-链寡糖组对H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞的抗氧化保护作用。结果:分析推测出燕窝O-链寡糖组可能的20种结构,其中Neu5Acα2-3Gal为主要结构,丰度(40%)远高于其他结构。燕窝糖链单糖组分包括Gal、Fuc、GalNAc、GlcNAc、Man,其中Gal、GlcNAc和GalNAc的含量较高。燕窝中测得总唾液酸和结合态唾液酸含量为150.99±3.04 mg/g和139.06±3.96 mg/g,燕窝中大部分唾液酸以末端糖苷的形式存在。燕窝O-链寡糖组能够有效降低氧化应激水平并上调细胞抗氧化机制,从而对神经细胞发挥抗氧化保护作用。此外,燕窝O-链寡糖组在提高GSH-Px酶活性,降低活性氧水平和上调HO-1基因水平方面展现出比阳性对照唾液酸更强的作用(P<0.05)。结论:燕窝O-链寡糖组可能具有20种不同的结构,其中检测到一种主要的特殊糖结构Neu5Acα2-3Gal,燕窝O-链寡糖组对H_(2)O_(2)诱导氧化损伤的PC12细胞具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 燕窝 O-链寡糖组 结构 抗氧化 pc12 细胞
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栀子类外泌体样纳米颗粒对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的保护作用
4
作者 王豪波 王艳 +4 位作者 兰周哲 沈伟康 秦春莲 陈文 徐李舟 《食品工业科技》 北大核心 2025年第15期367-374,共8页
本文研究了栀子果来源的类外泌体样纳米颗粒(Gardenia fruit-derived exosome-like nanoparticles,GDENs)对鱼藤酮诱导的PC12细胞的保护作用。通过超速离心法制备GDENs,利用蔗糖密度梯度超离进一步纯化。使用透射电子显微镜观察其形态,... 本文研究了栀子果来源的类外泌体样纳米颗粒(Gardenia fruit-derived exosome-like nanoparticles,GDENs)对鱼藤酮诱导的PC12细胞的保护作用。通过超速离心法制备GDENs,利用蔗糖密度梯度超离进一步纯化。使用透射电子显微镜观察其形态,纳米颗粒跟踪分析仪测定其浓度、粒径,BCA法检测蛋白浓度。最后,采用2’,7’-二氯荧光素(DCF)和二氢乙锭(DHE)等染料,评估GDENs对鱼藤酮损伤的PC12细胞的保护效果。结果显示,制备的GDENs在电镜下呈现清晰的膜结构,形态为杯盘状,粒径分布在50~150 nm之间,RNA含量为9.30±1.06 ng/μL,蛋白浓度为6.53±0.52μg/μL。UPLC-MS/MS共检测出12大类771种化合物,其中以脂质、酚酸类和生物碱等为主。细胞实验表明,GDENs对PC12细胞有良好的生物相容性和无毒性,GDENs不仅能够被PC12细胞有效摄取,还可以降低经鱼藤酮损伤的细胞内活性氧(ROS)和超氧阴离子(O_(2)^(−))水平,在减少氧化应激方面具有显著作用。此外,GDENs还能提升PC12细胞中的线粒体数量,这可能与其促进线粒体的生物合成及其功能改善有关,从而有助于细胞的能量代谢和功能维持。这些发现为GDENs在神经保护和抗氧化领域的潜在应用奠定了基础。 展开更多
关键词 栀子 类外泌体样纳米颗粒 制备方法 鱼藤酮 pc12 细胞保护
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基于NGF/TrkA通路探究大黄素对缺氧/复氧诱导的PC12细胞凋亡及氧化损伤的影响
5
作者 吕昌迎 边俊莉 李伟 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期566-570,共5页
目的:分析大黄素对缺氧/复氧诱导的PC12细胞凋亡及氧化损伤的影响及其相应作用机制。方法:体外培养PC12细胞并诱导其神经分化,将细胞分为对照组、模型组、大黄素低浓度组(30 mmol/L)、大黄素高浓度组(90 mmol/L)、大黄素高浓度+GW441756... 目的:分析大黄素对缺氧/复氧诱导的PC12细胞凋亡及氧化损伤的影响及其相应作用机制。方法:体外培养PC12细胞并诱导其神经分化,将细胞分为对照组、模型组、大黄素低浓度组(30 mmol/L)、大黄素高浓度组(90 mmol/L)、大黄素高浓度+GW441756组(90 mmol/L+6.3μmol/L),除对照组外,对其余各组细胞进行缺氧/复氧处理,CCK-8法测定PC12细胞活力;试剂盒测定LDH释放、SOD、MDA、IL-1β、TNF-α水平;流式细胞术测定PC12细胞凋亡,Western blot测定PC12细胞神经生长因子(NGF)/原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)通路蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组PC12细胞活性、SOD水平、NGF、p-TrkA/TrkA降低(P<0.05),LDH释放、凋亡率、MDA、IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.05);与模型组相比,大黄素低浓度组、大黄素高浓度组PC12细胞活性、SOD水平、NGF、p-TrkA/TrkA升高(P<0.05),LDH释放、凋亡率、MDA、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05);与大黄素高浓度组相比,大黄素高浓度+GW441756组PC12细胞活性、SOD水平、NGF、p-TrkA/TrkA降低(P<0.05),LDH释放、凋亡率、MDA、IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.05)。结论:大黄素可通过激活NGF/TrkA通路抑制缺氧/复氧诱导的PC12细胞氧化应激与炎症损伤,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 缺氧/复氧 pc12 凋亡 氧化损伤 神经生长因子/原肌球蛋白受体激酶A
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去氢骆驼蓬碱诱发PC12细胞凋亡时对线粒体融合分裂的影响 被引量：1
6
作者 巩月红 赵美玲 +3 位作者 马瑞佳 林玉霞 赵军 王建华 《医药导报》 北大核心 2024年第2期174-183,共10页
目的探讨去氢骆驼蓬碱(HM)对PC12细胞线粒体功能损伤和线粒体融合分裂相关蛋白表达水平的影响。方法PC12细胞分为细胞对照组、HM组、线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、线粒体裂变激动剂WY14643组、HM+WY14643组,药物浓度均为1... 目的探讨去氢骆驼蓬碱(HM)对PC12细胞线粒体功能损伤和线粒体融合分裂相关蛋白表达水平的影响。方法PC12细胞分为细胞对照组、HM组、线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、线粒体裂变激动剂WY14643组、HM+WY14643组,药物浓度均为1、10、25、50、100μmol·L^(-1),处理24 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,显微镜观察细胞形态;MitoTracker Red探针染色观察线粒体形态和纵横轴长度比值,JC-1染色检测线粒体膜电位,试剂盒检测ROS、ATP水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,免疫荧光染色法和Western blotting检测胱天蛋白酶3(caspase-3)、促凋亡蛋白(Bax)、细胞色素C(cyt-c)和线粒体融合蛋白(Mfn2)、线粒体分裂蛋白(Drp-1)的表达水平;电穿孔法转染Drp1的干扰序列,筛选转染效果好的siRNA序列,协同药物干预,通过荧光法、MTT法、免疫印迹法检测相关指标。结果MTT结果显示,与细胞对照组比较,HM组、Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、WY14643组和HM+WY14643组存活率显著下降(P<0.01),EC 50分别为(11.48±2.32)、(12.35±1.67)、(14.88±2.07)、(39.14±3.25)、(20.09±1.97)μmol·L^(-1),依此后续实验选择20μmol·L^(-1)浓度的HM、Mdivi-1和HM+Mdivi-1作为构建PC12细胞模型的工作浓度;显微镜和MitoTracker Red探针染色观察发现,药物组细胞密度呈不同程度减少,树枝状突起减少变圆;线粒体形态趋向圆形,纵横轴长度比值分别为细胞对照组(3.33±0.72)、HM组(2.19±0.58)、Mdivi-1组(2.45±0.44)、HM+Mdivi-1组(1.43±0.62)。JC-1染色检测结果显示,与细胞对照组相比,HM组线粒体模电位显著下降(P<0.01);ROS显著升高(P<0.01)、ATP水平下降(P<0.01),LDH酶活性上升(P<0.01);免疫荧光染色法和Western blotting结果显示,与细胞对照组比较,HM组促凋亡蛋白Bax、细胞色素C、胱天蛋白酶3表达水平均显著上升(均P<0.01);与细胞对照组比较,HM组细胞线粒体分裂相关蛋白Drp1表达水平显著上升(P<0.01),而线粒体融合相关蛋白Mfn2的表达水平显著下降(P<0.01);特异性干扰Drp1并协同HM干预后,各干扰组较各单独药物干预组PC12细胞存活率下降,Drp1和Mfn2表达下调,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论HM可通过ROS累积降低PC12细胞膜电位及ATP,进而激活caspase-3凋亡途径促使细胞凋亡,线粒体融合分裂可能参与HM造成PC12细胞的损伤,启动细胞线粒体途径凋亡。 展开更多
关键词 去氢骆驼蓬碱 pc12细胞 线粒体融合分裂 线粒体功能损伤 神经毒性损伤
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基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究 被引量：3
7
作者 李萌 施浩 +4 位作者 陈佳俊 吕家乐 秦雪梅 杜冠华 周玉枝 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期11-21,共11页
目的研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法①将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100~800μmol·L^(-1)孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·... 目的研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法①将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100~800μmol·L^(-1)孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·L^(-1)孵育24 h)组,MTT法检测细胞存活率。②将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),模型组(CORT 400μmol·L^(-1)孵育24 h)和模型+SSb2组(SSb21.5625,3.125,6.25,12.5和25μmol·L^(-1)预处理3 h,去上清,然后加入CORT 400μmol·L^(-1)及对应浓度SSb2共孵育24 h)。MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。③将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb212.5μmol·L^(-1)组,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的代谢组学技术检测PC12细胞代谢轮廓变化;比色法检测谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性。结果①与细胞对照组相比,当CORT浓度为400μmol·L^(-1)时,细胞存活率降低至(55±6)%(P<0.01);SSb2浓度>50μmol·L^(-1)时,对PC12细胞有显著的细胞毒性(P<0.01)。②与细胞对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01),LDH释放率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2各浓度组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),LDH释放率显著降低(P<0.01)。③与细胞对照组相比,模型组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。代谢组学结果表明,SSb2能显著回调谷氨酸、肌酸、N-乙酰天冬氨酸、L-酪氨酸、柠檬酸、L-异亮氨酸、乳酸、谷氨酰胺和胆碱9个差异代谢物。对SSb2调控的关键代谢物进一步富集分析表明,SSb2主要影响5条代谢通路,即D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,酪氨酸代谢和精氨酸生物合成。与细胞对照组相比,模型组谷氨酸含量和谷氨酰胺酶活性显著降低(P<0.01);与模型组相比,模型+SSb2组细胞谷氨酸含量(P<0.01)和谷氨酰胺酶活性显著升高(P<0.05)。结论SSb2对CORT诱导的PC12细胞损伤具有神经保护作用,其机制与抑制细胞凋亡和调节代谢紊乱有关。 展开更多
关键词 柴胡皂苷b2 皮质酮 pc12细胞 代谢组学
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桑葚花色苷对PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量：4
8
作者 朱晓晗 铁芳芳 +2 位作者 欧阳健 王洪伦 殷军港 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期105-113,共9页
通过建立大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤模型,探讨桑葚花青素中2个矢车菊素类化合物即矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-O-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)对过氧化氢(H_(2)O_(... 通过建立大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤模型,探讨桑葚花青素中2个矢车菊素类化合物即矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-O-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的细胞氧化损伤的保护作用及相关作用机制。采用噻唑蓝法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,试剂盒测定细胞中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)以及过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平。Western Blot检测抗氧化以及细胞凋亡蛋白的表达水平。结果表明,650μmol/L H_(2)O_(2)处理PC12细胞12 h后,细胞存活率显著降低(P<0.01),50、100μmol/L的C3G、C3R能显著升高细胞活力(P<0.05)及GSH、SOD和CAT等抗氧化酶的活性(P<0.05),降低细胞内ROS以及MDA的含量。此外50、100μmol/L的C3G、C3R处理后显著抑制PC12细胞内c-Jun氨基末端激酶和细胞外调节蛋白激酶蛋白磷酸化水平,抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3以及Bcl-2相关X蛋白等凋亡蛋白的表达(P<0.05),促进核因子E-2-相关因子和血红素加氧酶1抗氧化蛋白的表达水平。综上,C3G、C3R对H_(2)O_(2)所致的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,可能与抑制细胞凋亡通路相关蛋白的表达,提高胞内抗氧化酶活性,清除胞内过量ROS,降低细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 桑葚花色苷 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷 矢车菊素-3-O-芸香糖苷 pc12细胞 氧化应激 细胞凋亡
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线粒体裂变因子对OGD/R诱导的PC12细胞线粒体凋亡通路的影响 被引量：1
9
作者 钱旭东 李国芸 +3 位作者 卜一 王红梅 张硕 窦志杰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期168-174,189,共8页
目的探究线粒体裂变因子(mitochondrial fission factor,MFF)在氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)处理的PC12细胞中的表达及其对线粒体凋亡通路的影响。方法选用PC12细胞系构建体外缺血性神经元损伤模型... 目的探究线粒体裂变因子(mitochondrial fission factor,MFF)在氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)处理的PC12细胞中的表达及其对线粒体凋亡通路的影响。方法选用PC12细胞系构建体外缺血性神经元损伤模型。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验明确MFF mRNA和蛋白在不同处理时间点的表达情况。通过RNA干扰技术沉默MFF基因表达,利用qRT-PCR、Western blot检测MFF mRNA和蛋白的表达情况;CCK-8检测沉默MFF对OGD/R处理的PC12细胞活力的影响;JC-1和试剂盒检测线粒体膜电位、腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化;Western blot检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)、Bax和Bcl2的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Caspase-3和Caspase-9的活性变化。结果MFF在体外OGD/R诱导的PC12细胞中的mRNA和蛋白含量明显升高。MFF沉默增强了OGD/R损伤后PC12细胞的活力,降低了细胞凋亡率,并促进Bcl2和抑制Bax蛋白的表达。敲低MFF明显提高了OGD/R处理后PC12细胞的线粒体膜电位,促进ATP合成,降低ROS含量,抑制线粒体细胞色素C释放和Caspase-3和Caspase-9的活性。结论沉默MFF基因显著提高了OGD/R处理后PC12细胞的存活率,改善了线粒体功能。 展开更多
关键词 线粒体凋亡 氧糖剥夺/复氧模型 pc12细胞 线粒体裂变因子
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陈年六堡茶对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤的神经保护研究 被引量：1
10
作者 聂晴 庞月兰 +4 位作者 吴焕 丁树洽 钟可渝 刘仲华 蔡淑娴 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1005-1013,共9页
通过建立β-淀粉样蛋白_(25-35)(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤模型,以绿茶(GT)为对照,探讨了陈年六堡茶(ALPT)对神经细胞的保护作用及机制。研究结果表明,Aβ_(25-35)会导致PC12细胞的活性下降,诱发线粒体功能障碍、诱导有毒集聚物... 通过建立β-淀粉样蛋白_(25-35)(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤模型,以绿茶(GT)为对照,探讨了陈年六堡茶(ALPT)对神经细胞的保护作用及机制。研究结果表明,Aβ_(25-35)会导致PC12细胞的活性下降,诱发线粒体功能障碍、诱导有毒集聚物及其通路的形成。ALPT干预显著提高了PC12细胞的存活率及其线粒体膜电位,并显著抑制了有毒集聚物积累及其通路的形成。转录组分析显示,ALPT处理组的基因表达整体趋势与Aβ_(25-35)组相反,上调基因与线粒体自噬、糖酵解、甘油磷脂代谢相关;下调基因主要参与细胞周期调控、核糖体功能、泛素介导的蛋白质水解及细胞衰老过程。总体而言,GT与ALPT均具有显著抑制Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤作用,在转录组水平上影响作用差别较大,这可能与ALPT活性成分具有更好的生物利用度有关。研究结果可为陈年六堡茶在神经退行性疾病预防和治疗中的应用提供试验依据。 展开更多
关键词 陈年六堡茶 β-淀粉样蛋白_(25-35) pc12细胞 神经保护 线粒体功能
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神经酸对H_(2)O_(2)诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1
11
作者 玛依乐·艾海提 刘垚杰 李建科 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期116-123,共8页
以PC12细胞作为研究对象、H_(2)O_(2)为诱导剂,用200μmol/L H_(2)O_(2)处理PC12细胞24 h,建立细胞氧化损伤模型。通过检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性以及乳酸... 以PC12细胞作为研究对象、H_(2)O_(2)为诱导剂,用200μmol/L H_(2)O_(2)处理PC12细胞24 h,建立细胞氧化损伤模型。通过检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平确定氧化应激程度,并对细胞凋亡和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平进行评估。采用蛋白免疫印迹和实时聚合酶链式反应检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bcl-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、kelch样ECH关联蛋白1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)及其基因的表达水平。结果表明,使用200μmol/L H_(2)O_(2)处理PC12细胞24 h后,其存活率为60.12%;细胞毒性实验表明,神经酸能够显著降低H_(2)O_(2)诱导损伤细胞中LDH和MDA的含量,抑制ROS的过度产生,并增强SOD和GSH-Px活性,显著上调Bcl-2、Nrf2和HO-1的表达水平,下调Caspase-3、Bax和Keap1的表达水平。综上所述,神经酸对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,且与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。 展开更多
关键词 神经酸 氧化损伤 pc12细胞 信号通路
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基于非靶向代谢组学研究毛蕊异黄酮对氯化血红素诱导的PC12细胞损伤的保护机制 被引量：1
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作者 张雪阳 吕全军 +2 位作者 熊玉清 黄佳敏 李鹏飞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2073-2079,共7页
目的基于非靶向代谢组学研究毛蕊异黄酮对氯化血红素诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制。方法采用氯化血红素构建PC12细胞损伤模型。CCK-8法检测细胞增殖及凋亡情况,LC-MS法检测细胞非靶代谢组学。通过单变量统计分析、多维统计分析... 目的基于非靶向代谢组学研究毛蕊异黄酮对氯化血红素诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制。方法采用氯化血红素构建PC12细胞损伤模型。CCK-8法检测细胞增殖及凋亡情况,LC-MS法检测细胞非靶代谢组学。通过单变量统计分析、多维统计分析进行差异代谢物的筛选,通过KEGG通路富集分析找出差异代谢物可能参与的代谢通路。结果与对照组比较,毛蕊异黄酮组PC12细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达升高(P<0.05),Bax mRNA表达降低(P<0.05)。通过非靶代谢组学研究发现了10个特异性代谢物,通路富集分析发现嘌呤代谢可能是毛蕊异黄酮保护氯化血红素所致细胞凋亡的主要通路。结论毛蕊异黄酮可能通过调控嘌呤代谢抑制氯化血红素所致PC12细胞的凋亡从而发挥保护作用。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 脑出血 pc12细胞 嘌呤代谢
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基于GC-MS研究OPFRs对PC12细胞代谢的影响
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作者 孙梦瑶 赵亚菲 +1 位作者 王少敏 刘宏民 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期96-103,I0005,共9页
基于气相色谱质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)研究了4种有机磷阻燃剂(organophosphate flame retardants,OPFRs)对神经细胞PC12代谢的影响.首先将PC12细胞分别暴露于4种不同浓度的阻燃剂中,利用噻唑蓝(methyl thiazol... 基于气相色谱质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)研究了4种有机磷阻燃剂(organophosphate flame retardants,OPFRs)对神经细胞PC12代谢的影响.首先将PC12细胞分别暴露于4种不同浓度的阻燃剂中,利用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法选出对细胞存活率影响较小的浓度.然后在该浓度下培养细胞并提取代谢物,利用GC-MS对细胞内的代谢物进行非靶向代谢组学分析.接着采用SIMCA软件对定量后的代谢数据进行OPLS-DA分析,找出细胞中受到OPFRs影响的关键代谢物,并利用生物信息学方法分析这些关键代谢物所涉及的重要代谢通路.该研究共鉴定出PC12细胞中的38种小分子代谢物.经过多元统计分析发现4种OPFRs均影响PC12细胞的代谢表型.OPFRs在100μmol/L和1000μmol/L浓度下,对PC12细胞表现出显著的细胞毒性.其中糖代谢和氨基酸代谢是受影响的主要代谢通路. 展开更多
关键词 有机磷阻燃剂 代谢组学 气相色谱质谱 pc12细胞
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NSUN2基因敲除对PC12细胞分化和凋亡的影响研究
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作者 张利利 贺九芳 +1 位作者 陈林 汪希珂 《中国神经精神疾病杂志》 CSCD 北大核心 2024年第12期735-741,共7页
目的研究NOP2/Sun RNA甲基转移酶2(NOP2/Sun RNA methyltransferase 2,NSUN2)基因在PC12细胞分化和凋亡等功能中的作用,以探索NSUN2基因在神经系统发育过程中的功能。方法将神经生长因子诱导分化的PC12细胞分为敲除NSUN2 PC12细胞诱导... 目的研究NOP2/Sun RNA甲基转移酶2(NOP2/Sun RNA methyltransferase 2,NSUN2)基因在PC12细胞分化和凋亡等功能中的作用,以探索NSUN2基因在神经系统发育过程中的功能。方法将神经生长因子诱导分化的PC12细胞分为敲除NSUN2 PC12细胞诱导分化组(NSUN2-KO组)和PC12细胞正常细胞诱导分化组(NSUN2组)。采用免疫荧光法检测各组PC12细胞的神经元特征;酶联免疫吸附试验检测细胞神经递质含量;激光共聚焦及流式细胞学检测细胞内钙离子内流;氮蓝四唑法检测超氧化物歧化酶活性;硫代巴比妥酸法检测丙二醛含量;细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。结果NSUN2-KO组PC12细胞诱导分化后细胞突触减少、变短(神经元特异性烯醇化酶灰度值44.26 vs.63.21,P=0.002;神经丝蛋白10.12 vs.33.63,P<0.001)。NSUN2-KO组释放的天冬氨酸(618.83 nmol/L vs.372.38 nmol/L,P<0.001)、谷氨酸(880.45 nmol/L vs.525.17 nmol/L,P<0.001)等兴奋性神经递质较NSUN2组增加,而甘氨酸(197.40 nmol/L vs.286.15 nmol/L,P<0.001)、γ-氨基丁酸(134.91 nmol/L vs.208.25 nmol/L,P<0.001)等抑制性神经递质较NSUN2组减少。NSUN2-KO组细胞内的钙离子荧光强度值较NSUN2组增加(51319.70 vs.24546.06,P<0.001)。NSUN2-KO组细胞较NSUN2组G1期延长(73.38%vs.68.48%,P<0.001),G2期缩短(14.69%vs.16.99%,P=0.008),S期缩短(11.92%vs.14.52%,P=0.002)。NSUN2-KO组细胞较NSUN2组细胞氧化应激水平升高(超氧化物歧化酶活性11.05 U/mgprot vs.21.59 U/mgprot,P=0.002;丙二醛含量1.42 nmol/mgprot vs.0.80 nmol/mgprot,P=0.008)。NSUN2-KO组细胞较NSUN2组细胞凋亡增多(21.55%vs.10.53%,P<0.001)。结论敲除NSUN2基因使神经生长因子诱导的PC12细胞突触减少、变短,释放兴奋性神经递质的能力增强,细胞毒性增强,细胞活力减低,并促进细胞凋亡,表明NSUN2基因可能是神经元增殖分化并维持其形态与功能的重要神经保护因子。 展开更多
关键词 NSUN2 基因编辑 基因敲除 智力障碍 pc12细胞 细胞分化 细胞凋亡 神经系统发育
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玉米肽对酒精损伤PC12细胞的保护作用及机制 被引量：1
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作者 林巍 韩思琪 +1 位作者 刘晓兰 许英一 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第21期194-202,共9页
在细胞水平上探讨玉米肽对酒精损伤PC12细胞的保护作用及可能机制。首先建立酒精损伤细胞模型,对玉米肽的作用剂量进行筛选;采用酶联免疫吸附试剂盒法测定玉米肽预处理后PC12细胞中氧化应激指标(谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧... 在细胞水平上探讨玉米肽对酒精损伤PC12细胞的保护作用及可能机制。首先建立酒精损伤细胞模型,对玉米肽的作用剂量进行筛选;采用酶联免疫吸附试剂盒法测定玉米肽预处理后PC12细胞中氧化应激指标(谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA))、炎症相关因子(肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB))、神经营养因子(神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF))、突触可塑性相关蛋白(突触后致密物质-95(postsynaptic density-95,PSD-95)、生长相关蛋白-43(growth-associated protein-43,GAP-43)、突触素(synaptophysin,SYN))等指标。通过细胞存活率和形态变化,选择400 mmol/L为酒精损伤的最适浓度,确定玉米肽剂量低、中、高质量浓度为25、100、400μg/mL;实验结果表明3个剂量组的玉米肽对酒精损伤的PC12细胞存活率都具有显著的提高作用;氧化应激指标发现玉米肽可提高酒精损伤PC12细胞中GSH和SOD含量、抑制MDA的生成;炎症相关指标测定结果表明玉米肽可降低酒精损伤PC12细胞中炎症因子TNF-α和IL-6的水平,抑制乙醇导致的NF-κB含量升高;对神经营养因子含量的测定表明玉米肽还可提高酒精损伤细胞中NGF和BDNF的含量;此外玉米肽还可以增加突触可塑性相关蛋白PSD-95和GAP-43的含量,但对SYN无改善作用。总体来看,玉米肽对酒精损伤PC12细胞具有保护作用,其保护作用机制为多种途径共同作用的结果。 展开更多
关键词 玉米肽 酒精损伤 pc12细胞 保护作用
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氧糖剥离预处理通过保护线粒体减轻PC12细胞氧糖剥离/再灌注损伤
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作者 黄丽 许娜 杨朝鲜 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期1763-1771,共9页
目的研究氧糖剥离预处理(oxygen-glucose deprivation preconditioning,OGDPC)对氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤PC12细胞的保护作用及机制。方法简单随机抽样将PC12细胞分为Control、OGDPC、OGD/R... 目的研究氧糖剥离预处理(oxygen-glucose deprivation preconditioning,OGDPC)对氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤PC12细胞的保护作用及机制。方法简单随机抽样将PC12细胞分为Control、OGDPC、OGD/R和OGDPC+OGD/R共4组。透射电镜观察线粒体的超微结构,Mito-tracker染色观察线粒体数量,Western blot检测OGDH、PDHA1、COX4、HSP60的表达,JC-1和ATP试剂盒评估线粒体膜电位及ATP水平,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,并与AIF、EndoG的免疫荧光染色进行共定位。结果与OGD/R组相比,OGDPC+OGD/R组PC12细胞线粒体超微结构损伤较轻;OGDH、PDHA1和COX4的表达增多(P<0.05),HSP60的表达减少(P<0.05);线粒体膜电位及ATP水平提高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),且AIF、EndoG向TUNEL染色阳性的细胞核聚集减少(P<0.05)。结论OGDPC减轻OGD/R引起的PC12细胞损伤,其机制可能与改善线粒体结构和功能、减少线粒体途径引起的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氧糖剥离预处理 氧糖剥离/再灌注 线粒体 pc12细胞
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苦参碱对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤的影响及作用机制
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作者 袁琳 李洁 +1 位作者 王芳 李可 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2024年第11期1128-1133,共6页
目的分析苦参碱(MT)对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供依据。方法取对数生长期的PC12细胞,分为对照组、Aβ_(25-35)组(40μmol/L Aβ_(25-35))、MT低浓度(MT-L)组(40μmol/L Aβ_(25-35)+2 mmol/L ... 目的分析苦参碱(MT)对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供依据。方法取对数生长期的PC12细胞,分为对照组、Aβ_(25-35)组(40μmol/L Aβ_(25-35))、MT低浓度(MT-L)组(40μmol/L Aβ_(25-35)+2 mmol/L MT)、MT中浓度(MT-M)组(40μmol/L Aβ_(25-35)+4 mmol/L MT)、MT高浓度(MT-H)组(40μmol/L Aβ_(25-35)+8 mmol/L MT)、MT-H+Compound C组(40μmol/L Aβ_(25-35)+2 mmol/L MT+10μmol/L Compound C);MTT法检测细胞活力;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测凋亡因子(Bax、Bcl-2 mRNA)的表达水平;Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)通路相关蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果与对照组相比,Aβ_(25-35)组细胞活力、Bcl-2 mRNA及蛋白、SOD、GSH-Px水平、p-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著降低,凋亡率、Bax mRNA及蛋白、LDH、MDA水平显著增加(P<0.05);与Aβ_(25-35)组相比,MT-L组、MT-M组、MT-H组细胞活力、Bcl-2 mRNA及蛋白、SOD、GSH-Px水平、p-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著增加,凋亡率、Bax mRNA及蛋白、LDH、MDA水平显著降低,呈现剂量依赖性(P<0.05);与MT-H组相比,MT-H+Compound C组细胞活力、Bcl-2mRNA及蛋白、SOD、GSH-Px水平、p-AMPK/AMPK、SIRT1表达显著降低,凋亡率、Bax mRNA及蛋白、LDH、MDA水平显著增加(P<0.05)。结论MT抑制Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤,可能与激活AMPK/SIRT1通路有关。 展开更多
关键词 苦参碱 阿尔茨海默病 AMPK/SIRT1通路 Aβ_(25-35) pc12细胞
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黄芪甲苷对H_2O_2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：29
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作者 王世博 邱景富 +4 位作者 白群华 李佳佳 和晋渝 高艳军 于超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1603-1609,共7页
目的探讨黄芪甲苷对H2O2引起PC12细胞氧化应激损伤的保护作用与分子机制。方法用H2O2作用PC12细胞建立氧化应激损伤模型,通过MTT法检测细胞活力;Hoechst 33258染色观察细胞内核酸形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡、胞内活性氧的产生及... 目的探讨黄芪甲苷对H2O2引起PC12细胞氧化应激损伤的保护作用与分子机制。方法用H2O2作用PC12细胞建立氧化应激损伤模型,通过MTT法检测细胞活力;Hoechst 33258染色观察细胞内核酸形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡、胞内活性氧的产生及细胞周期变化情况;Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin A、磷酸化p38及T-p38的表达。结果成功建立了H2O2致PC12细胞氧化应激损伤模型;黄芪甲苷能够提高H2O2损伤的PC12细胞的活力,提升因H2O2导致的细胞凋亡率的下降,降低H2O2所致的胞内ROS升高的状况。机制研究表明:黄芪甲苷通过恢复H2O2诱导细胞周期蛋白Cyclin D1表达下调的情况,调控各细胞周期的百分比,恢复细胞的正常增殖;进一步研究发现黄芪甲苷是通过抑制H2O2对p38的激活发挥作用的。结论黄芪甲苷对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过调控细胞周期蛋白Cyclin D1的表达来实现的,调控过程与p38/MAPK通路密切相关。该发现为临床上抗氧化治疗策略提供有益的实验依据。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 过氧化氢 氧化应激 CYCLIN D1 CYCLIN A pc12细胞
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槲皮素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护效果与机制 被引量：31
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作者 刘红亮 胡磊 +3 位作者 王靖凯 刘彬 李金菊 邓锦波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期77-81,共5页
目的研究槲皮素(quercetin)对PC12细胞增殖的影响以及降低H2O2损伤PC12的效果并初步探讨其机制。方法通过MTT比色法检测槲皮素对PC12细胞增殖的影响,并用H2O2诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,通过MTT和LDH比色法以及TUNEL法检测分析槲皮... 目的研究槲皮素(quercetin)对PC12细胞增殖的影响以及降低H2O2损伤PC12的效果并初步探讨其机制。方法通过MTT比色法检测槲皮素对PC12细胞增殖的影响,并用H2O2诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,通过MTT和LDH比色法以及TUNEL法检测分析槲皮素保护PC12细胞免受H2O2损伤的效果;对比分析槲皮素保护组和对照组PC12细胞内ROS水平和MDA的含量检测抗氧化的效果;比较分析SOD、CAT、GSH-PX活性初步探讨槲皮素的抗氧化机制。结果检测浓度范围内槲皮素对PC12细胞没有毒性;通过提高细胞内SOD、CAT和GSH-PX活性,槲皮素能够降低细胞内活性氧水平,减少MDA的产生,保护H2O2对PC12细胞的氧化损伤。结论槲皮素对PC12细胞没有毒性,能够通过减弱H2O2产生的活性氧保护PC12细胞。 展开更多
关键词 槲皮素 H2O2 pc12细胞 抗氧化功能 活性氧 抗氧化酶
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瓜子金皂苷己对连二亚硫酸钠致氧糖剥夺/复供诱导PC12细胞凋亡的抑制作用 被引量：20
20
作者 石瑞丽 胡金凤 +5 位作者 孔令雷 牛非 吴苗苗 何鑫 李培锋 陈乃宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期333-336,共4页
目的观察瓜子金皂苷己(polygalasaponin F,PGSF)对氧糖剥夺/复供(oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R)所诱导的PC12细胞凋亡的作用及其机制。方法以连二亚硫酸钠合并无糖Earle’s液造成氧糖剥夺,继而恢复为完全培养基以... 目的观察瓜子金皂苷己(polygalasaponin F,PGSF)对氧糖剥夺/复供(oxygen-glucose deprivation and reperfusion,OGD/R)所诱导的PC12细胞凋亡的作用及其机制。方法以连二亚硫酸钠合并无糖Earle’s液造成氧糖剥夺,继而恢复为完全培养基以建立体外OGD/R模型,以Hoechst33342/PI双染及流式细胞术观察细胞受损和凋亡情况;以JC-1荧光染色法测定细胞线粒体膜电位(mitochondrial membranepotential,MMP);以Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果 PGSF可明显改善细胞形态并降低细胞受损和凋亡百分率,抑制MMP水平的降低,增加Bcl-2/Bax表达比值。结论 PGSF对OGD/R诱导的PC12细胞凋亡具有明显抑制作用,机制与其调节Bcl-2和Bax的表达及稳定MMP有关。 展开更多
关键词 瓜子金皂苷己 连二亚硫酸钠 氧糖剥夺 复供 pc12细胞 凋亡 线粒体膜电位 Bcl-2 BAX
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