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基于PI3K/Akt、NF-κB信号通路探究黄精多糖对前列腺癌PC-3细胞裸鼠模型作用的研究
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作者 杨帅博 唐玉红 +8 位作者 周艳 董少文 赵欣阳 刘鑫 李晨 王新梅 赵国斌 曾鑫 刘晨曦 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第11期824-832,839,共10页
目的:探讨黄精多糖(polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对裸鼠前列腺癌PC‑3细胞移植瘤生长及磷脂酰肌醇‑3‑羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和核因子κB(NF‑κB)信号通路中关键蛋白的影响。方法:选择雄激素非依赖型前列腺癌PC‑3细... 目的:探讨黄精多糖(polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对裸鼠前列腺癌PC‑3细胞移植瘤生长及磷脂酰肌醇‑3‑羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和核因子κB(NF‑κB)信号通路中关键蛋白的影响。方法:选择雄激素非依赖型前列腺癌PC‑3细胞株接种于BALB/c裸鼠皮下组织,构建模型,并分为5组,每组6只,然后根据人与裸鼠体表面积换算给药量。对照组予生理盐水,环磷酰胺组(CTX)予30 mg·kg^(-1)·d^(-1),PSP组分为低剂量组100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、中剂量组200 mg·kg^(-1)·d^(-1)、高剂量组400 mg·kg^(-1)·d^(-1),0.2 mL灌胃/次/只,隔天1次,持续30 d。每3 d测量记录一次裸鼠体重和瘤体积,分析PSP对移植瘤的生长情况、大小及裸鼠生长状态的影响。以末次给药4 h后的瘤体积计算抑瘤率,使用原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术观测瘤细胞凋亡情况,细胞增殖试剂盒‑8(CCK8)检测脾细胞增殖活力,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测自然杀伤(NK)细胞活性,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素‑2、‑6(TNF‑α、IL‑2、IL‑6)的水平,免疫组织化学(IHC)法分析裸鼠移植瘤组织中PI3K、Akt、NF‑κB P65蛋白及磷酸化(p‑PI3K、p‑Akt、NF‑κB p‑P65)蛋白和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶‑3(Caspase‑3)的表达。结果:模型建立初期,各组裸鼠精神状态良好,活动自如且频繁,进食稳定,对外界刺激反应灵敏,但随着瘤体生长均出现活动度、进食、反应减少等改变。与对照组相比,CTX组和PSP组裸鼠抑瘤率,流式细胞术中瘤细胞凋亡率,IHC中Caspase‑3水平均升高(P<0.05或P<0.001);CTX组和中、高剂量组Tunel中瘤细胞凋亡率,中、高剂量组LDH中NK细胞活力、ELISA中IL‑6水平,高剂量组CCK8中脾细胞活力,PSP组TNF‑α、IL‑2水平均升高(P<0.05);CTX组和PSP组瘤体积和IHC中p‑P65水平,CTX组ELISA中TNF‑α、IL‑2水平和IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平,中、高剂量组IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平均降低(P<0.05)。与CTX组相比,PSP组裸鼠瘤体积,LDH法中NK细胞活力,ELISA中TNF‑α、IL‑2水平和IHC中p‑P65水平均升高(P<0.05);中、高剂量组CCK8中脾细胞活力、ELISA中IL‑6水平,低剂量组IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平均升高(P<0.05);PSP组抑瘤率和Tunel中瘤细胞凋亡率,低、中剂量组IHC中Caspase‑3表达均降低(P<0.01或P<0.001)。与低剂量组相比,中、高剂量组裸鼠抑瘤率,Tunel和流式细胞术中瘤细胞凋亡率,ELISA中TNF‑α、IL‑2、IL‑6水平,IHC中Caspase‑3表达均升高(P<0.05);中、高剂量组瘤体积和IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平,高剂量组p‑P65水平均降低(P<0.05或P<0.001)。与中剂量组比较,高剂量组裸鼠抑瘤率,Tunel和流式细胞术中瘤细胞凋亡率,ELISA中TNF‑α、IL‑2、IL‑6水平,IHC中Caspase‑3水平均升高(P<0.05);高剂量组瘤体积,IHC中p‑PI3K、p‑Akt、p‑P65水平均降低(P<0.05)。结论:PSP可抑制荷瘤裸鼠PC‑3细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过降低PI3K、Akt、P65蛋白的活化水平抑制PI3K/Akt、NF‑κB信号通路的激活以及促进凋亡因子Caspase‑3的表达实现的,同时可能与其调节免疫细胞的活性和血清细胞因子TNF‑α、IL‑2、IL‑6的水平有关。 展开更多
关键词 黄精多糖 PC‑3细胞 裸鼠 PI3K/AKT NF‑κB P65
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20(S)-人参皂苷Rg3对前列腺癌PC-3M细胞的诱导凋亡作用 被引量:17
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作者 赵文杰 陈迪 +3 位作者 倪劲松 王心蕊 高静 李平亚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期235-238,共4页
目的研究20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人前列腺癌PC-3M细胞诱导凋亡的作用,并探讨其可能机制。方法采用MTT法观察SPG-Rg3对PC-3M细胞生长的抑制作用,计算IC50;用流式细胞术测定PC-3M细胞周期的变化;AO/EB双染观察SPG-Rg3对PC-3M细胞凋... 目的研究20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人前列腺癌PC-3M细胞诱导凋亡的作用,并探讨其可能机制。方法采用MTT法观察SPG-Rg3对PC-3M细胞生长的抑制作用,计算IC50;用流式细胞术测定PC-3M细胞周期的变化;AO/EB双染观察SPG-Rg3对PC-3M细胞凋亡的形态学变化;利用免疫细胞化学染色和RT-PCR技术探讨SPG-Rg3对PC-3M细胞的诱导凋亡作用及与其相关基因caspase-8的关系。结果SPG-Rg3可明显抑制PC-3M细胞的生长,IC50为(248.5±0.58)mg.L-1;PC-3M细胞的生长周期中S期细胞数增加,G2/M期细胞数则明显减少,且在G1峰前出现明显的凋亡峰;SPG-Rg3作用后PC-3M细胞呈现明显的凋亡改变,且细胞caspase-8mRNA含量增加、表达明显增强。结论SPG-Rg3能诱导前列腺癌PC-3M细胞发生凋亡,其机制可能与其活化caspase-8作用有关。 展开更多
关键词 人参皂苷 前列腺癌 pc-3M 凋亡 CASPASE-8
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沙棘黄酮制备及体外抑制人前列腺癌PC-3细胞作用研究 被引量:19
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作者 赵波 向晓玲 +3 位作者 王微 李春松 吴晓琴 沈建福 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期27-32,160,共7页
采用AB-8大孔树脂纯化沙棘黄酮初提物,用10%、30%、50%乙醇溶液梯度洗脱,以总黄酮含量和黄酮苷元含量为指标,筛选纯化样品;采用MTT法、实时无标记细胞分析技术检测沙棘黄酮样品体外对人前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术检... 采用AB-8大孔树脂纯化沙棘黄酮初提物,用10%、30%、50%乙醇溶液梯度洗脱,以总黄酮含量和黄酮苷元含量为指标,筛选纯化样品;采用MTT法、实时无标记细胞分析技术检测沙棘黄酮样品体外对人前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用,流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期情况,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达情况。实验结果表明50%乙醇梯度洗脱样品(S50)中,总黄酮含量达到25.42%;水解后得到SH50样品,其槲皮素、异鼠李素含量分别达到5.03%、18.64%;25μg/m L的SH50样品对PC-3细胞即有增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;同时25μg/m L的SH50样品作用48 h即可显著诱导细胞凋亡(P<0.01),并将细胞周期阻滞在G2/M期,此外,样品可提高Bax蛋白和降低Bcl-2蛋白的表达。说明沙棘黄酮SH50样品对体外人前列腺癌PC-3细胞具有抑制增殖并诱导细胞凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞周期,调节Bax和Bcl-2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 沙棘黄酮 人前列腺癌 pc-3细胞 抑制增殖
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人参单体皂甙Rh_2对体外培养的前列腺癌细胞株PC-3M抑制效应的研究 被引量:17
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作者 周桂华 孟艳 +3 位作者 李扬 赵雪俭 陈燕萍 马兴元 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期595-598,共4页
目的 :探讨人参单体皂甙 Rh2 对体外培养的 PC- 3M细胞株的抗肿瘤效应。方法 :采用 MTT实验及 3 H- Td R掺入实验观察 Rh2 对 PC- 3M细胞生长状态及细胞 DNA合成的影响。结果 :高剂量 Rh2可明显抑制 PC- 3M细胞的生长 ,细胞 DNA合成减... 目的 :探讨人参单体皂甙 Rh2 对体外培养的 PC- 3M细胞株的抗肿瘤效应。方法 :采用 MTT实验及 3 H- Td R掺入实验观察 Rh2 对 PC- 3M细胞生长状态及细胞 DNA合成的影响。结果 :高剂量 Rh2可明显抑制 PC- 3M细胞的生长 ,细胞 DNA合成减慢 ,并呈剂量依赖性。结论 :Rh2 对 PC- 展开更多
关键词 前列腺癌 人参皂甙RH2 pc-3M 抑制
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康莱特联合5-Fu治疗人胰腺癌PC-3裸鼠皮下移植瘤的实验研究 被引量:12
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作者 王伟 金建光 秦兆寅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期473-476,共4页
目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表... 目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡比率,测量肿瘤体积。结果康莱特和5-Fu都可明显提高胰腺癌细胞凋亡率,降低细胞Bcl-2在蛋白水平上的表达,两者对Bax在蛋白水平上的表达无影响;康莱特明显降低移植瘤VEGF蛋白的表达;康莱特和5-Fu联合组,胰腺癌细胞凋亡比率显著高于单药组,而Bcl-2蛋白表达率显著低于单药组;康莱特和联合用药组VEGF蛋白表达率低于5-Fu组;联合用药组肿瘤体积小于单药组。结论康莱特联合5-Fu治疗胰腺癌的效果明显优于两药单独使用的效果。 展开更多
关键词 人胰腺癌 pc-3细胞 裸鼠 皮下移植瘤 细胞凋亡 免疫组织化学 Bcl-2 Bax VEGF
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虾青素保护PC-3细胞免受H_2O_2氧化应激的作用机制 被引量:8
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作者 倪晓锋 于海宁 +2 位作者 王姗姗 张程程 沈生荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第9期154-162,共9页
目的:研究虾青素对过氧化氢诱导PC-3细胞氧化应激的保护作用,探索其信号通路机制。方法:建立H2O2氧化应激模型,采用不同浓度虾青素预处理PC-3细胞,检测细胞存活率、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、B淋巴细胞瘤-2(B... 目的:研究虾青素对过氧化氢诱导PC-3细胞氧化应激的保护作用,探索其信号通路机制。方法:建立H2O2氧化应激模型,采用不同浓度虾青素预处理PC-3细胞,检测细胞存活率、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、活化半胱天冬酶-3表达及丝裂原活化蛋白激酶-核因子E2相关基因2-血红素氧合酶1(mitogen-activated protein kinases nuclear factor erythroid-2-related factor 2-heme oxygenase 1,MAPK-Nrf2-HO-1)通路的变化。结果:20μmol/L虾青素预处理显著提高H2O2所降低的细胞存活率、降低ROS水平(P<0.05),同时通过抑制Bcl-2/Bax比率下降及半胱天冬酶-3的激活,从而使细胞凋亡率从51.4%降低至14.8%,进一步研究发现虾青素能够促进Nrf2磷酸化,并促进HO-1的表达,呈现浓度依赖性。通过细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)抑制剂(U0126)和Akt抑制剂(LY294002)预处理,发现当ERK和磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)通路被抑制后,Nrf2表达降低,表明HO-1上调受上游ERK和胞内PI3K/Akt通路的调控。在对MAPK途径对细胞毒性影响的研究中,ERK通路被抑制后细胞存活率显著下降,而c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和p38 MAPK通路被抑制后并不影响其保护作用,表明虾青素抑制细胞存活率下降是通过MAPK途径中的ERK通路,而不是JNK和p38通路。结论:虾青素预处理PC-3细胞可以减轻H2O2诱导的氧化应激,维持细胞生理活性。 展开更多
关键词 虾青素 氧化应激 pc-3细胞 丝裂原活化蛋白激酶途径 核因子E2相关基因2 血红素氧合酶1
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乌贼墨肽聚糖对前列腺癌PC-3、DU-145细胞作用机制研究 被引量:7
7
作者 郑玉寅 杨最素 +3 位作者 闫海强 黄芳芳 李荣 丁国芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第13期251-256,共6页
目的:研究乌贼墨肽聚糖对前列腺癌PC-3和DU-145细胞凋亡的影响,以及细胞凋亡的机制。方法:用HE染色观察肽聚糖作用后细胞形态变化,流式细胞术检测细胞早期凋亡率,免疫组化检测肽聚糖作用前后细胞中COX-2和VEGF蛋白阳性表达情况,原位杂... 目的:研究乌贼墨肽聚糖对前列腺癌PC-3和DU-145细胞凋亡的影响,以及细胞凋亡的机制。方法:用HE染色观察肽聚糖作用后细胞形态变化,流式细胞术检测细胞早期凋亡率,免疫组化检测肽聚糖作用前后细胞中COX-2和VEGF蛋白阳性表达情况,原位杂交检测肽聚糖作用前后细胞中Bcl-2 mRNA和Caspase-3 mRNA表达的变化。免疫印迹检测肽聚糖作用前后细胞中COX-2、VEGF、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达情况。结果:肽聚糖作用后的细胞出现凋亡的形态学改变,流式细胞术检测后发现,早期凋亡细胞随着作用时间和药物质量浓度的增加而增加,两种细胞中的COX-2和VEGF蛋白表达量下降,Bcl-2 mRNA的表达量减少,而Caspase-3 mRNA表达量增加。免疫印迹结果显示,COX-2、VEGF和Bcl-2蛋白表达量下降,Caspase-3蛋白表达量增加。结论:乌贼墨肽聚糖可以诱导前列腺癌PC-3和DU-145细胞的凋亡,机制可能是下调COX-2、VEGF蛋白和Bcl-2 mRNA的表达;上调Caspase-3 mRNA的表达。 展开更多
关键词 乌贼墨肽聚糖 pc-3细胞株 DU-145细胞株 细胞凋亡
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扶正抑瘤方含药血清对PC-3细胞作用的实验研究 被引量:9
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作者 古炽明 陈艳芬 +5 位作者 陈志强 王树声 向松涛 潘明沃 孙静 黄羽 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第9期1027-1031,共5页
目的:通过体外细胞实验,探讨扶正抑瘤方有效治疗前列腺癌的作用机理。方法:以人前列腺癌PC-3细胞为模型,观察扶正抑瘤方高、中、低剂量(9.58、19.17、38.33 g/kg)及不同浓度含药血清对PC-3细胞形态、细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影... 目的:通过体外细胞实验,探讨扶正抑瘤方有效治疗前列腺癌的作用机理。方法:以人前列腺癌PC-3细胞为模型,观察扶正抑瘤方高、中、低剂量(9.58、19.17、38.33 g/kg)及不同浓度含药血清对PC-3细胞形态、细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:扶正抑瘤方含药血清处理后,PC-3细胞可发现不同程度的细胞皱缩,染色质凝集,或细胞核固缩碎裂;MTT实验表明含药血清能明显抑制PC-3细胞增殖,且剂量越高细胞增殖抑制率越高,20%高剂量含药血清组抑制率约50%;流式细胞仪检测发现,含药血清组处理后48 h,各组在非凋亡细胞二倍体峰(G1)之前均出现大小不等的凋亡细胞峰,凋亡率均显著高于空白血清组,而且G0/G1期细胞比例增加,S期及G2/M期细胞比例下降。结论:扶正抑瘤方含药血清能抑制PC-3细胞增殖,且呈剂量、浓度依赖性,其抗肿瘤活性可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 扶正抑瘤方 血清药理学 pc-3细胞
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Survivin-siRNA对前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制作用 被引量:11
9
作者 刘艳波 赵丽娟 +4 位作者 赵丽晶 赵丹 刘喜春 高丽芳 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1873-1876,共4页
目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRN... 目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平,MTT法测定细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果:转染72h后,两个实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的48%±6%(n=3)和30%±5%(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的38%±4%(n=3)和36%±4%(n=3)。MTT检测实验组细胞的生长速度分别是脂质体组的44.20%±2.08%(n=3)和39.20%±1.93%(n=3),流式细胞术发现实验组G1期细胞比例明显高于两个对照组,而G2期和S期细胞比例减少,细胞出现凋亡。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌PC-3M细胞的增殖,细胞受阻于G1期,诱导细胞凋亡,为进一步进行动物体内研究奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 前列腺肿瘤 pc-3M细胞 细胞凋亡 SURVIVIN
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人前列腺癌PC-3细胞的荧光标记及其脊椎转移动物模型的建立 被引量:4
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作者 崔明星 詹新立 +3 位作者 刘会江 贺聚良 顾容赫 黄圣升 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期243-248,共6页
目的对人前列腺癌PC-3细胞进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,并建立其在动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移的前列腺癌脊柱转移模型。方法常规肿瘤细胞培养、传代,在细胞状态最佳时以不同病毒感染复数实行GFP慢病毒对PC-3的感染,7 ... 目的对人前列腺癌PC-3细胞进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,并建立其在动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移的前列腺癌脊柱转移模型。方法常规肿瘤细胞培养、传代,在细胞状态最佳时以不同病毒感染复数实行GFP慢病毒对PC-3的感染,7 d后在荧光显微镜下观察GFP在PC-3的表达情况。选取感染GFP阳性表达率最高的孔继续扩大培养,然后采用悬液注射于小鼠的下腔静脉,动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移,3个月后处死荷瘤鼠,常规石蜡切片苏木素-伊红(HE)染色观察。结果经绿色荧光蛋白标记后人前列腺癌PC-3细胞在荧光显微镜下发出绿光,并可在体内、外持续稳定表达;下腔静脉注射1.5×l06转染后的前列腺癌细胞后1周即可在活体荧光成像系统下观察到腰背部有绿色荧光显像,4周时可见表达绿色荧光的肿瘤增大,肿瘤骨转移率为19%(3/16);3个月后解剖裸鼠可见有3只裸鼠腰椎有肿瘤浸润,与动物活体荧光成像系统结果一致,转移率约为19%(3/16)。结论 GFP慢病毒能够高效标记人前列腺癌PC-3细胞且不影响其生物学特性,并能够持久稳定表达;用绿色荧光蛋白标记的人前列腺癌PC-3细胞成功地建立了裸鼠脊柱骨转移模型,为进一步研究前列腺癌骨转移提供了一种简便、可行的新方法。 展开更多
关键词 前列腺癌 pc-3细胞 慢病毒属 绿色荧光蛋白 动物模型 活体荧光成像系统
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维生素K_3对雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞的凋亡诱导作用 被引量:11
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作者 周磊 李扬 +6 位作者 苏静 康劲松 穆桂芳 王志 许莉 赵雪俭 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1339-1342,共4页
目的:观察维生素K3对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M的凋亡诱导作用。方法:MTT增殖抑制实验;吖啶橙染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化;NAC抗氧化试验;DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;RT-PCR检测G... 目的:观察维生素K3对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M的凋亡诱导作用。方法:MTT增殖抑制实验;吖啶橙染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化;NAC抗氧化试验;DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;RT-PCR检测GSH-Px和CAT基因表达的改变。结果:60μmol/L剂量以上的VK3均可以有效抑制PC-3M细胞的增殖,并且呈时间剂量依赖性;联合应用不同剂量NAC(5、10、20、40、80μmol/L)与VK3(60μmol/L)共同作用于PC-3M细胞后,结果显示与单独应用VK3相比各浓度的NAC能不同程度增加细胞存活率;吖啶橙染色证明在VK3(60μmol/L)作用12h后,PC-3M细胞出现凋亡的形态学改变;流式细胞计数结果显示VK3(60μmol/L)作用12h后细胞出现凋亡峰,细胞周期被阻滞于G0/G1期;DCFH-DA荧光染色,在VK3作用后1-2h,细胞内即出现了较强的荧光表达;RT-PCR结果显示,在VK3作用后细胞内的CAT和GSH-Px两种主要的抗氧化酶类表达降低。结论:VK3可能主要通过引起PC-3M细胞内氧化应激诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 维生素K3 前列腺肿瘤 细胞凋亡 pc-3M细胞
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EGCG与锌离子互作对PC-3细胞能量代谢的影响 被引量:3
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作者 孙世利 凌彩金 +6 位作者 于海宁 沈生荣 苗爱清 潘顺顺 庞式 卓敏 赵超艺 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期251-256,共6页
采用Hoechst33258荧光染色法观察EGCG、Zn2+和EGCG+Zn2+对前列腺癌PC-3细胞凋亡的诱导作用;采用HPLC法检测了EGCG、Zn2+和EGCG+Zn2+对PC-3细胞内腺苷酸(ATP、ADP、AMP)含量的影响,并分析了能量负荷(EC)和ATP/ADP比值。结果表明,Hoechst3... 采用Hoechst33258荧光染色法观察EGCG、Zn2+和EGCG+Zn2+对前列腺癌PC-3细胞凋亡的诱导作用;采用HPLC法检测了EGCG、Zn2+和EGCG+Zn2+对PC-3细胞内腺苷酸(ATP、ADP、AMP)含量的影响,并分析了能量负荷(EC)和ATP/ADP比值。结果表明,Hoechst33258染色后正常细胞发出均匀微弱的蓝色荧光,细胞核未见异常,EGCG、Zn2+和EGCG+Zn2+处理后凋亡的PC-3细胞都发出较强的蓝色荧光,细胞核DNA断裂及染色体高度浓缩;EGCG、Zn2+及二者混合物处理后细胞内总腺苷酸含量、EC及ATP/ADP比值都下降,表明EGCG与Zn2+对PC-3细胞能量代谢都存在明显的抑制作用。 展开更多
关键词 EGCG 锌离子 pc-3细胞 细胞凋亡 腺苷酸 能量代谢
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人PC-3细胞系中前列腺癌干细胞的富集与鉴定 被引量:3
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作者 张波 范新兰 +2 位作者 林天歆 许可慰 黄健 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期878-883,共6页
【目的】从人前列腺癌PC-3细胞系中分离、富集并鉴定前列腺癌干细胞。【方法】采用无血清培养液(SFM)悬浮细胞聚球法体外培养PC-3细胞系,通过传代更新、诱导分化、交替在含血清/无血清培养液中培养等方法鉴定PC-3悬浮成球细胞具有强增... 【目的】从人前列腺癌PC-3细胞系中分离、富集并鉴定前列腺癌干细胞。【方法】采用无血清培养液(SFM)悬浮细胞聚球法体外培养PC-3细胞系,通过传代更新、诱导分化、交替在含血清/无血清培养液中培养等方法鉴定PC-3悬浮成球细胞具有强增殖性、自我更新和分化潜能等肿瘤干细胞特性。以PC-3悬浮成球细胞为实验组,常规在含血清培养液(SSM)中单层贴壁培养的PC-3细胞为对照组,采用流式细胞术检测两种细胞中CD44+CD133+细胞及侧群(SP)细胞比例。【结果】PC-3成球细胞可以在SFM中生存并形成悬浮细胞球,悬浮培养第5天时开始可以观察到典型的悬浮细胞球形成,第10天时细胞球形成效率约为(2.6±1.0)%,较第5天时明显增多(P<0.05)。PC-3悬浮成球细胞具有自我更新和分化能力,在体外可以连续、稳定传代,在SFM中滴加血清后可以分化,交替培养于SSM和SFM中可以实现与贴壁细胞之间的相互转化。PC-3悬浮成球细胞中CD44+CD133+细胞比率为13.94%,SP细胞含量为3.1%,均显著高于常规培养的PC-3贴壁细胞(分别为0.77%和0.0%,P<0.05)。【结论】PC-3悬浮成球细胞具有肿瘤干细胞特性,采用无血清悬浮细胞聚球培养法可以从PC-3细胞系中简便、高效地富集前列腺癌干细胞。 展开更多
关键词 pc-3 前列腺癌 悬浮培养 聚球法 肿瘤干细胞 富集 鉴定
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番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 罗琼 庞雅琴 +4 位作者 崔晓燕 王丽红 闫俊 杨明亮 曾秀林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期215-219,共5页
目的:探讨番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用及其机理研究。方法:番茄红素及不同浓度番茄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测番茄汁、番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末... 目的:探讨番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用及其机理研究。方法:番茄红素及不同浓度番茄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测番茄汁、番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末端标记法(TUNEL)法观察凋亡细胞的形态结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰。结果:番茄汁、番茄红素能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞生长;TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰。以上各指标中,番茄汁随着浓度增大其作用加强;低剂量组的作用虽比番茄红素组差,中剂量组的作用与番茄红素组相比无差别,高剂量组的作用比番茄红素组强。结论:番茄汁对抗人前列腺癌PC-3细胞的作用,除番茄红素外,可能还存在其他抗癌成分的交互作用。番茄汁、番茄红素对PC-3细胞生长抑制作用的机理可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 番茄汁 番茄红素 人前列腺癌pc-3细胞 生长抑制作用 细胞凋亡
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地衣酸抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖效应的初步探讨 被引量:5
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作者 孙艳 王洪军 +5 位作者 张薇 吴扬 张志强 冯立 王立强 吴益民 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第4期289-291,共3页
目的:从真菌松萝中提取地衣酸并研究地衣酸对体外培养前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制效应.方法:用细胞培养、细胞生长抑制实验(MTT法)观察PC-3M细胞形态、细胞生长密度和检测细胞生长抑制率,用3H-TdR掺入法测定细胞增殖过程中DNA的含量.结... 目的:从真菌松萝中提取地衣酸并研究地衣酸对体外培养前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制效应.方法:用细胞培养、细胞生长抑制实验(MTT法)观察PC-3M细胞形态、细胞生长密度和检测细胞生长抑制率,用3H-TdR掺入法测定细胞增殖过程中DNA的含量.结果:与对照组相比,实验组PC-3M细胞形态异常、细胞生长密度降低,细胞生长抑制率增强,3H-TdR掺人量明显减少,并呈剂量依赖关系,与地衣酸浓度的相关系数分别为0.9799与-0.9525.结论:地衣酸对体外培养PC-3M细胞具有抑制效应. 展开更多
关键词 前列腺癌 地衣酸 pc-3M
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IL-24基因联合电离辐射对前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 刘永哲 吴丛梅 +1 位作者 倪冠英 金顺子 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期171-174,共4页
目的:探讨人白细胞介素24(IL-24)基因联合X射线对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响,为IL-24基因联合电离辐射治疗肿瘤奠定实验基础。方法:检测电离辐射对PC-3细胞凋亡的影响分为假照射组及2、4、6、8、12和18GyX射线照射组;检测IL-24目的... 目的:探讨人白细胞介素24(IL-24)基因联合X射线对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响,为IL-24基因联合电离辐射治疗肿瘤奠定实验基础。方法:检测电离辐射对PC-3细胞凋亡的影响分为假照射组及2、4、6、8、12和18GyX射线照射组;检测IL-24目的基因的表达分为对照组(0.01mol.L-1PBS)、空载体组[pcDNA3.1(+)载体]和IL-24基因组;检测IL-24基因联合电离辐射对PC-3细胞凋亡的影响分为对照组、空载体组、IL-24基因组、单纯照射组(6Gy)、空载体联合照射组以及IL-24基因联合照射组。碱裂解法提取纯化质粒DNA,用PEI转染质粒DNA至PC-3细胞中,目的基因表达的检测采用RT-PCR法。AnnexinV-FITC和PI双染后,采用流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡的变化。结果:与假照组比较,2和4GyX射线照射48h后PC-3细胞凋亡百分率无明显变化,6GyX射线照射后细胞凋亡百分率开始明显升高(P<0.01),且细胞凋亡百分率随剂量增大而增加,约是假照组的1.6~3.0倍。PC-3细胞中对照组和空载体组均未观察到IL-24基因的表达,而IL-24基因组则可见IL-24基因的表达;以上3组均有GAPDH基因的表达。IL-24基因联合照射组与对照组、空载体组、IL-24基因组、单纯照射组和空载体联合照射组比较,早期凋亡细胞数均有上升趋势,除单纯照射组外,与其他组比较差异均有显著性(P<0.05);晚期凋亡和坏死细胞数也均有上升趋势,其中与对照组、单纯照射组和空载体联合照射组比较显著升高(P<0.05或P<0.001);凋亡和坏死的总细胞数均有上升趋势,除IL-24基因组外,与其他组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:IL-24基因联合电离辐射能够有效诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡。 展开更多
关键词 白细胞介素24 辐射 电离 前列腺肿瘤 pc-3细胞
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EGCG与锌离子互作对前列腺癌细胞PC-3生长的影响 被引量:5
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作者 陈勋 于海宁 沈生荣 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期219-224,共6页
本文采用MTT法研究了EGCG以及EGCG与锌离子相互作用对前列腺癌细胞PC-3生长的影响;采用原子吸收光谱法(AAS)研究了锌离子及EGCG共存对PC-3细胞锌、镉离子吸收的影响;利用HPLC测定了锌离子对EGCG在PBS缓冲液与正辛醇,水与正辛醇体系中分... 本文采用MTT法研究了EGCG以及EGCG与锌离子相互作用对前列腺癌细胞PC-3生长的影响;采用原子吸收光谱法(AAS)研究了锌离子及EGCG共存对PC-3细胞锌、镉离子吸收的影响;利用HPLC测定了锌离子对EGCG在PBS缓冲液与正辛醇,水与正辛醇体系中分配系数的影响。结果表明,EGCG能抑制前列腺癌细胞生长,细胞存活率呈时间和剂量依赖性;锌离子能抑制PC-3细胞的生长,促进EGCG对PC-3细胞生长的抑制作用,呈时间和剂量依赖性;同时,锌离子能抑制PC-3细胞对镉离子的吸收,而EGCG有增强效应。 展开更多
关键词 儿茶素 ZN^2+ CD^2+ pc-3细胞
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Zeylenone抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及诱导凋亡作用研究 被引量:2
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作者 张蕾蕾 李如意 +4 位作者 张丽静 陈丹 霍小位 李立勇 曹丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期808-813,共6页
目的研究(4R,5S,6S)-4-苯甲酰氧基-6-[(苯甲酰氧基)甲基]-5,6-二羟基-2-环己烯-1-酮Zeylenone(Zey)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察Zey对PC-3细胞和正常前列腺基质细胞WPMY-1的增殖抑制作用,应用平板... 目的研究(4R,5S,6S)-4-苯甲酰氧基-6-[(苯甲酰氧基)甲基]-5,6-二羟基-2-环己烯-1-酮Zeylenone(Zey)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察Zey对PC-3细胞和正常前列腺基质细胞WPMY-1的增殖抑制作用,应用平板克隆形成实验观察Zey对PC-3细胞克隆形成的作用,AO/EB荧光染色观察细胞形态、JC-1染色观察Zey对细胞内线粒体膜电位的影响,An-nexin V-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-7和PARP的激活及Bcl-2、Bax、Bid、Bcl-xL蛋白的表达。结果Zey可以明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常前列腺基质细胞WPMY-1的抑制作用显著低于PC-3细胞。Zey抑制PC-3细胞克隆形成并明显诱导其凋亡。线粒体膜电位检测结果显示Zey导致细胞内线粒体膜电位的明显降低,Western blot检测结果表明Caspase-8、Caspase-9、Caspase-7、Caspase-3被激活,PARP和Bid被剪切活化,Bcl-2、Bcl-xL表达下降,而Bax表达上调。结论 Zey可选择性抑制人非激素依赖性前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,作用机制与其对Bcl-2和Caspase家族蛋白的影响,从而诱导PC-3细胞发生内源性和外源性凋亡相关。Zey有望成为治疗前列腺癌的候选药物。 展开更多
关键词 Zeylenone Uvaria grandiflora Roxb 人前列腺癌 pc-3细胞 细胞凋亡 Caspase活化 Bcl-2蛋白家族
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前列腺癌PC-3M细胞hmSD活性与细胞凋亡相关性的实验研究 被引量:4
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作者 李扬 狄茜 +4 位作者 许莉 刘喜春 赵丹 赵雪俭 宫城妙子 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期748-751,共4页
目的:研究前列腺癌PC - 3M细胞株hmSD的活性与细胞凋亡的相关性。方法:应用丁酸钠诱导前列腺癌PC - 3M细胞发生凋亡,吖啶橙/溴化乙锭染色检测细胞凋亡率;收集丁酸钠作用后的PC - 3M细胞,匀浆后离心取上清,与底物共同孵育,以硫代巴比妥酸... 目的:研究前列腺癌PC - 3M细胞株hmSD的活性与细胞凋亡的相关性。方法:应用丁酸钠诱导前列腺癌PC - 3M细胞发生凋亡,吖啶橙/溴化乙锭染色检测细胞凋亡率;收集丁酸钠作用后的PC - 3M细胞,匀浆后离心取上清,与底物共同孵育,以硫代巴比妥酸(TBA)显色反应检测所生成的唾液酸,计算唾液酸酶活性;将细胞凋亡率与hmSD活性进行相关性分析。结果:丁酸钠诱导PC - 3M细胞凋亡的同时显著下调hmSD的活性,凋亡率与hmSD活性呈负相关。结论:hmSD活性变化与前列腺癌细胞凋亡呈相关性。 展开更多
关键词 神经氨酸酶 前列腺肿瘤 pc-3M细胞 细胞凋亡 丁酸盐类
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藤茶抑制N-亚硝胺的生成及诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡作用 被引量:6
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作者 龚金炎 薛薇 +3 位作者 李言郡 欧凯 曹少谦 陈秋平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期2160-2163,共4页
目的研究藤茶提取物及其主要活性物质二氢杨梅素的抗肿瘤作用。方法采用体外体系,研究藤茶对致癌物亚硝酸盐的清除作用和对N-亚硝胺的生成抑制作用,并结合细胞实验评价藤茶对PC-3前列腺癌细胞增殖的抑制用。结果藤茶提取物和二氢杨梅素... 目的研究藤茶提取物及其主要活性物质二氢杨梅素的抗肿瘤作用。方法采用体外体系,研究藤茶对致癌物亚硝酸盐的清除作用和对N-亚硝胺的生成抑制作用,并结合细胞实验评价藤茶对PC-3前列腺癌细胞增殖的抑制用。结果藤茶提取物和二氢杨梅素在能够有效清除亚硝酸盐,半抑制浓度分别为12.2、11.1μg/m L,同时也能抑制亚硝胺的生成,半抑制浓度分别为48.6、15.1μg/m L。细胞实验中,藤茶提取物及其主要活性物质二氢杨梅素可以抑制PC-3前列腺癌细胞的增殖,呈剂量依赖关系。细胞周期实验结果表明,藤茶提取物及二氢杨梅素能够将细胞周期阻滞于S期和G2/M。结论藤茶提取物和二氢杨梅素可以清除亚硝酸盐,抑制N-亚硝胺的生成,诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡。 展开更多
关键词 藤茶 二氢杨梅素 pc-3 增殖抑制 亚硝胺 细胞周期
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