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基于PiggyBac转座系统的CD19-CAR载体的构建及功能鉴定
被引量：
3
1
作者
姜淇耀
史甲儒
+4 位作者
罗志强
周雅婷
和似琦
于国华
王建勋
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期156-160,共5页
目的:开发基于PiggyBac(PB)转座系统的电转染CAR-T细胞制备方法并鉴定其体外抗肿瘤功能。方法:采用健康人外周血单个核细胞(PBMC)制备T细胞,通过分子克隆技术将CD19基因克隆到PB质粒(转座子)中后经电转染法将转座子和转座酶质粒导入激活...
目的:开发基于PiggyBac(PB)转座系统的电转染CAR-T细胞制备方法并鉴定其体外抗肿瘤功能。方法:采用健康人外周血单个核细胞(PBMC)制备T细胞,通过分子克隆技术将CD19基因克隆到PB质粒(转座子)中后经电转染法将转座子和转座酶质粒导入激活的T细胞中,并测定其转染效率,最后运用流式细胞术及荧光素酶发光实验评估其对人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞的杀伤能力。结果:电转染制备的CD19 CAR-T细胞转染效率较高(>60%),呈剂量依赖性,且CAR-T细胞相对于Pan-T细胞对Raji细胞杀伤能力显著(P<0.05)。结论:开发的PB转座系统的电转染方法可行,在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤能力,具备临床运用于CD19 CAR-T细胞制备的潜力。
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关键词
CAR-T细胞
CD19
pb转座系统
电转染
淋巴瘤
RAJI细胞
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职称材料
题名
基于PiggyBac转座系统的CD19-CAR载体的构建及功能鉴定
被引量：
3
1
作者
姜淇耀
史甲儒
罗志强
周雅婷
和似琦
于国华
王建勋
机构
北京中医药大学生命科学学院
中国中医科学院中药资源中心
深圳北京中医药大学研究院
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期156-160,共5页
基金
北京市双一流高层次人才科研启动经费资助项目(No.9011451310032)
北京中医药大学新教师启动基金资助项目(No.1000061223998)。
文摘
目的:开发基于PiggyBac(PB)转座系统的电转染CAR-T细胞制备方法并鉴定其体外抗肿瘤功能。方法:采用健康人外周血单个核细胞(PBMC)制备T细胞,通过分子克隆技术将CD19基因克隆到PB质粒(转座子)中后经电转染法将转座子和转座酶质粒导入激活的T细胞中,并测定其转染效率,最后运用流式细胞术及荧光素酶发光实验评估其对人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞的杀伤能力。结果:电转染制备的CD19 CAR-T细胞转染效率较高(>60%),呈剂量依赖性,且CAR-T细胞相对于Pan-T细胞对Raji细胞杀伤能力显著(P<0.05)。结论:开发的PB转座系统的电转染方法可行,在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤能力,具备临床运用于CD19 CAR-T细胞制备的潜力。
关键词
CAR-T细胞
CD19
pb转座系统
电转染
淋巴瘤
RAJI细胞
Keywords
CAR-T cell
CD19
PiggyBac(
pb
)transposable system
electrotransfection
lymphoma
Raji cell
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于PiggyBac转座系统的CD19-CAR载体的构建及功能鉴定
姜淇耀
史甲儒
罗志强
周雅婷
和似琦
于国华
王建勋
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
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