神经调节蛋白1/转化生长因子β1对血管平滑肌细胞骨架的作用 被引量：4

1

作者 李海涛 林劲 +2 位作者 韩丽珍 王裕岱 滕丽峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第7期863-868,共6页

目的探讨神经调节蛋白1/转化生长因子β1(NRG-1/TGF-β1)对血管平滑肌细胞骨架的作用。方法取小鼠血管组织,采用免疫荧光法对NRG-1干预后细胞收缩功能变化进行分析,采用鬼笔环肽、免疫荧光共定位分析NRG-1/TGF-β1表达,采用GST融合蛋白... 目的探讨神经调节蛋白1/转化生长因子β1(NRG-1/TGF-β1)对血管平滑肌细胞骨架的作用。方法取小鼠血管组织,采用免疫荧光法对NRG-1干预后细胞收缩功能变化进行分析,采用鬼笔环肽、免疫荧光共定位分析NRG-1/TGF-β1表达,采用GST融合蛋白沉降技术检测分析NRG-1-ICD与α-肌动蛋白(α-SMA)的共位性。结果 TGF-β1在人主动脉血管平滑肌细胞中可上调NRG-1表达,经免疫荧光染色可发现平滑肌细胞标志蛋白α-SMA与NRG-1存在共位性;经RT-PCR及Western blot检测分析发现,在大鼠平滑肌细胞、人平滑肌细胞以及人内皮细胞中均存在NRG-1的mRNA表达。结论在转录和翻译水平上TGF-β1可上调NRG-1的表达;在细胞收缩中,TGF-β1对于α-SMA与NRG-1-ICD之间的表达可以起到促进作用。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 α-肌动蛋白 神经调节蛋白1 转化生长因子β1 血小板衍生生长因子 胞内结构域

在线阅读 下载PDF 职称材料

转化生长因子-β1对人Tenon囊成纤维细胞表型转化的作用 被引量：5

2

作者 谢冰 叶纹 沈玺 《眼科新进展》 CAS 2006年第5期344-347,共4页

目的探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）对人Tenon囊成纤维细胞（human subconjunctival Tenon’s capsule fibroblast，HTCF）表型转化的作用。方法人白内障手术中取结膜下Tenon囊组织块培养成纤维细胞... 目的探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）对人Tenon囊成纤维细胞（human subconjunctival Tenon’s capsule fibroblast，HTCF）表型转化的作用。方法人白内障手术中取结膜下Tenon囊组织块培养成纤维细胞。用第5～9代细胞，以不同浓度TGF-β1（0μg·L^-1，2μg·L^-1，5μg·L^-1。，10μg·L^-1，20μg·L^-1）、不同时间（24h、48h、72h）诱导成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞。用蛋白质印迹免疫检测技术和免疫细胞化学技术鉴定细胞表型。结果体外用TGF-β1诱导HTCF，在0～10μg·L^-1，TGF-β1呈剂量依赖性增加平滑肌肌动蛋白在蛋白水平的表达，至20μg·L^-1时表达迅速下降；10μg·L^-1 TGF-β1诱导48h后其平滑肌肌动蛋白的表达与24h、72h相比，差异有显著性（P〈0．01，n=6）。结论一定浓度和剂量的TGF-β1能显著诱导HTCF表型转化为肌成纤维细胞，在人Tenon囊组织局部组织损伤修复及瘢痕形成中具有重要作用。 展开更多

关键词 人Tenon囊成纤维细胞 肌成纤维细胞 转化生长因子-β1 表型转化 平滑肌肌动蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

大黄䗪虫丸对转化生长因子-β_(1)诱导A549细胞上皮-间充质转化的影响 被引量：5

3

作者 蒋锋利 黄茂 +5 位作者 蔡松 任士杰 孙文丽 张晶 赵明镜 张立山 《世界中医药》 CAS 2021年第24期3606-3610,共5页

目的:基于“IPF患者存在肺络干血”假说,观察大黄䗪虫丸含药血清对TGF-β_(1)诱导后A549细胞上皮-间充质转化(EMT)及Smad3,CollagenⅢ表达的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法:正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β_... 目的:基于“IPF患者存在肺络干血”假说,观察大黄䗪虫丸含药血清对TGF-β_(1)诱导后A549细胞上皮-间充质转化(EMT)及Smad3,CollagenⅢ表达的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法:正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β_(1)对其诱导48 h,电子显微镜下观察A549细胞的形态学变化;选择吡非尼酮(PFD)为阳性对照药,RT-PCR法检测EMT相关基因及Smad3 mRNA的表达;Western Blottingting法检测Smad3,p-Smad3,CollagenⅢ蛋白表达。结果:成功获取发生EMT的A549细胞;以α-SMA mRNA表达情况判断EMT程度由高到低依次为:模型组(M),大黄䗪虫丸含药血清大剂量组(D),西药组(P),大黄䗪虫丸含药血清中剂量组(Z),大黄䗪虫丸含药血清小剂量组(X),空白对照组(K);与M组比较,Z组,X组,P组中CollagenⅢ表达不同程度降低(P<0.05),且其在Z组与K组中表达差异无统计学意义(P>0.05);与M组及K组比较,各观察组Smad3表达差异无统计学意义(P>0.05),但对其基因及磷酸化,即Smad3 mRNA及p-Smad3的表达有影响,且与M组比较,Z组,X组,P组中均不同程度降低(P<0.05),D组中表达虽低于M组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大黄䗪虫丸对TGF-β_(1)诱导后A549细胞发生EMT程度与Smad3 mRNA及CollagenⅢ的表达有影响,推测大黄䗪虫丸对IPF的保护机制可能与不同程度阻断或逆转了TGF-β_(1)/Smad3介导的EMT有关。 展开更多

关键词 大黄䗪虫丸 肺络干血 特发性肺纤维化 含药血清 上皮细胞-间充质转化 转化生长因子-β_(1) α-平滑肌肌动蛋白 Ⅲ型胶原蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

TGF-β_1对人输尿管平滑肌细胞增殖和迁移及α-SMA表达的影响 被引量：3

4

作者 徐桂彬 余涵 +7 位作者 陈丽 罗亚楠 马猛 王林杰 何永忠 彭晔 李逊 朱晓琴 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期656-660,共5页

目的探讨外源性转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)对人输尿管平滑肌细胞(USMCs)生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组:1对照组;2TGF-β_1组(10μg/L TGF-β_1处理);3TGF-β_1拮抗剂组(30... 目的探讨外源性转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)对人输尿管平滑肌细胞(USMCs)生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组:1对照组;2TGF-β_1组(10μg/L TGF-β_1处理);3TGF-β_1拮抗剂组(30μmol/L SB-431542处理);4TGF-β_1+TGF-β_1拮抗剂组(10μg/L TGF-β_1+30μmol/L SB-431542处理)。MTT法检测各组输尿管平滑肌细胞在处理0、24、48、72h的增殖情况;细胞划痕实验检测各组输尿管平滑肌细胞处理24h、48h时的迁移能力;各组细胞处理48h后分别应用RT-qPCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果MTT实验显示与对照组相比,TGF-β_1处理24h后USMCs增殖率增加(P<0.05),处理48h、72h后增殖最明显(P<0.01),拮抗剂组细胞生长明显受抑制(P<0.05或P<0.01),TGF-β_1联合SB-431542共同处理细胞后其增殖活性与对照组相比无明显差异;细胞划痕实验显示TGF-β_1组与对照组相比,各时间点细胞迁移距离明显增加(P<0.01),拮抗剂组24h和48h细胞迁移距离与对照组相比明显减小(P<0.01),TGF-β_1联合拮抗剂处理组迁移距离与对照组相比差异无统计学意义;RT-qPCR和Western blot结果显示:与对照组相比,经TGF-β_1处理组α-SMA mRNA和蛋白的表达明显增加(均P<0.01),TGF-β_1拮抗剂则明显下调α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 TGF-β_1能够明显上调输尿管平滑肌细胞中α-SMA mRNA和蛋白的表达,并能增强细胞增殖和迁移的生物活性,拮抗TGF-β_1信号路径可明显对α-SMA的表达及细胞增殖和迁移产生抑制效应。 展开更多

关键词 输尿管平滑肌细胞 转化生长因子β_1 α-平滑肌肌动蛋白 增殖 迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

转化生长因子β_1及其信号转导阻滞对系统性硬化症皮损中成纤维细胞转分化的影响 被引量：5

5

作者 刘彤 胡晓丁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1840-1845,共6页

目的探讨成纤维细胞(FB)向肌成纤维细胞(MFB)转分化在系统性硬化症(SSc)发病机制中的作用,研究施加转化生长因子β(1TGF-β1)及其信号转导阻滞对FB转分化为MFB的影响。方法体外培养并鉴定SSc患者皮损和正常皮肤组织中FB;经免疫细胞化学... 目的探讨成纤维细胞(FB)向肌成纤维细胞(MFB)转分化在系统性硬化症(SSc)发病机制中的作用,研究施加转化生长因子β(1TGF-β1)及其信号转导阻滞对FB转分化为MFB的影响。方法体外培养并鉴定SSc患者皮损和正常皮肤组织中FB;经免疫细胞化学法定性、ELISA法定量检测培养FB中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)而了解MFB密度;观察施加TGF-β1及其信号转导阻滞对FB转分化为MFB的影响。结果两组FB的细胞形态类似,SSc组α-SMA阳性率均值高于对照组(P<0.01),随培养时间的延长,两组α-SMA量均逐渐增多(P均<0.01),但在培养的24、48、72 h,SSc组α-SMA量分别高于对照组(P均<0.05)。随培养时间的延长,两组TGF-β1施加前、后α-SMA量均逐渐增多(P均<0.01),但在培养的三个时间点,TGF-β1施加后α-SMA量分别高于施加前(P均<0.05),且TGF-β1施加后SSc组α-SMA量分别高于对照组(P均<0.01)。两组FB在TGF-β1参与下,除JNK/MAPK通路外,Smads、ERK/MAPK及p38MAPK通路阻滞可显著降低α-SMA量(P均<0.05)。结论 SSc患者皮损来源的FB存在强烈地向MFB转分化的特性,TGF-β1可促进FB转分化,Smads、ERK/MAPK及p38MAPK信号转导通路可能介导了TGF-β1诱导的该转分化过程。 展开更多

关键词 系统性硬化症 α-平滑肌肌动蛋白 肌成纤维细胞 转化生长因子-β1 信号转导

在线阅读 下载PDF 职称材料

全反式维甲酸对HFL-Ⅰ细胞α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、热休克蛋白47表达的影响 被引量：1

6

作者 刘巨源 李佳鑫 +3 位作者 海广范 陈永凤 夏武 贾岩龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期700-704,共5页

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF-β1和ATRA分别作用3 d对HFL-Ⅰ细胞增殖能力的影响。随后分为6组:对照组、5μg·L-1 TGF-β1组、10μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1TGF-β1+0.1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+10μmol·L-1 AT-RA组,RT-PCR和Western blot方法分别检测各实验组细胞中α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 mRNA和蛋白的表达。结果①MTT法检测结果显示不同浓度的TGF-β1可刺激HFL-Ⅰ细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.05);不同浓度的ATRA对HFL-Ⅰ细胞增殖能力均有明显抑制作用,并随药物浓度的增加而增强(P<0.05)。②5μg.L-1 TGF-β1诱导后,HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05)。③ATRA以浓度依赖性方式下调经TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mR-NA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 ATRA能够抑制TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞的分化,其作用机制可能与降低Col-lagen-I、HSP47表达有关。 展开更多

关键词 肌成纤维细胞 转化生长因子-β1 全反式维甲酸 α-平滑肌肌动蛋白 I型胶原 热休克蛋白47

在线阅读 下载PDF 职称材料

肝细胞生长因子对转化生长因子-β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生及转分化的抑制作用

7

作者 陈静 王泳 李东豪 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期925-930,共6页

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子.β1(TGF.β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法 人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF.β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF.β1组.TGF.β1处理组在细胞培... 目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子.β1(TGF.β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法 人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF.β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF.β1组.TGF.β1处理组在细胞培养液中添加10μg/L TGF.β1,不同质量浓度HGF+TGF.β1组在细胞培养液中分别添加10μg/L TGF.β1,然后分别添加不同质量浓度的HGF(25、50、100、200μg/L),采用甲基偶氮四唑(MTT)法检测波长560 nm处各组细胞的吸光度(A560);然后选用100μg/L的HGF进行干预,采用细胞免疫荧光染色技术检测人Tenon囊成纤维细胞中α.平滑肌肌动蛋白(α.SMA)的表达分布;采用Western blot法检测细胞中α.SMA蛋白的相对表达量.结果 体外培养的人Tenon囊成纤维细胞呈长梭形,边界清楚,细胞中波形蛋白表达阳性并定位于细胞质.MTT检测显示空白对照组、TGF.β1处理组及HGF25μg/L+TGF.β1组、HGF50μg/L+TGF.β1组、HGF100μg/L+TGF.β1组、HGF200μg/L+TGF.β1组细胞的增生值分别为0.203±0.025、0.497±0.101、0.426±0.062、0.354±0.040、0.272±0.084和0.241±0.011,组间比较差异有统计学意义(F=9.210,P=0.003),TGF.β1处理组细胞增生值明显高于空白对照组,不同质量浓度HGF+TGF.β1组细胞增生值均明显低于TGF.β1处理组,差异均有统计学意义(均P<0.05).免疫荧光染色结果显示空白对照组细胞中未见α.SMA的表达,TGF.β1处理组及HGF100μg/L+TGF.β1组细胞的胞质中均可见α.SMA的表达,呈红色荧光,HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA表达荧光减弱,α.SMA表达细胞明显减少.TGF.β1处理组和HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA染色阳性细胞百分比分别为(60.0±4.7)%和(14.3±3.1)%,差异有统计学意义(t=19.856,P<0.001).Western blot检测显示空白对照组、TGF.β1处理组和HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA蛋白相对表达量分别为0.642±0.032、1.330±0.069和0.884±0.040,总体比较差异有统计学意义(F=13.370,P<0.001),其中TGF.β1处理组细胞中 α.SMA蛋白相对表达量明显高于空白对照组,HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA蛋白相对表达量明显低于TGF.β1处理组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 HGF抑制TGF.β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞的过度增生,下调细胞中α.SMA蛋白的表达,阻止成纤维细胞的表型转化. 展开更多

关键词 Tenon囊/细胞学 成纤维细胞/代谢 肝细胞生长因子/应用及剂量 转化生长因子β1 纤维化/预防和控制 α-平滑肌肌动蛋白 人 培养细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

地塞米松对兔胆道成纤维细胞P311/TGF-β1/α-SMA通路表达的影响 被引量：4

8

作者 李克跃 石承先 +5 位作者 汤可立 魏国微 刘振华 黎涛 张帅民 徐贤刚 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期26-31,共6页

目的:研究地塞米松(dexamethasone,DEX)对兔良性胆道狭窄(benign biliary stricture,BBS)模型胆管成纤维细胞(model fibroblast,MF)中P311/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle... 目的:研究地塞米松(dexamethasone,DEX)对兔良性胆道狭窄(benign biliary stricture,BBS)模型胆管成纤维细胞(model fibroblast,MF)中P311/转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)通路表达的影响。方法:取2只家兔正常胆管培养正常胆管成纤维细胞(normal bile duct fibroblasts,NF),对2只家兔采用切开再吻合方法建立BBS模型并获取MF,进行细胞鉴定后分组为:NF、MF、MF+不同浓度的DEX(0.02,0.1及0.5 mg/m L)组,各组给予对应浓度的DEX干预48 h,CCK-8细胞计数法测定各组细胞增殖水平;q RT-PCR检测各组细胞P311、TGF-β1及α-SMA基因m RNA表达水平;Western blot检测各组细胞TGF-β1及α-SMA蛋白表达水平。结果:(1)各组细胞A值:NF为0.331±0.002,MF组为0.533±0.005,MF+DEX 0.02组为0.487±0.003,MF+DEX 0.1组为0.434±0.004,MF+DEX 0.5组为0.381±0.004。(2)各组细胞P311 m RNA值:NF组为1.000 0±0.024 8,MF组为4.146 3±0.037 1,MF+DEX 0.02组为3.789 9±0.056 8,MF+DEX 0.1组为3.566 1±0.148 1,MF+DEX 0.5组为2.945 8±0.165 4。(3)各组细胞TGF-β1 m RNA值NF组为1.000 0±0.034 6,MF组为2.647 9±0.048 5,MF+DEX 0.02组为1.929 7±0.054 8,MF+DEX 0.1组为1.678 2±0.080 2,MF+DEX 0.5组为1.676 2±0.036 9。(4)各组细胞α-SMA m RNA值:NF组为1.000 0±0.056 0,MF组为4.025 7±0.065 9,MF+DEX0.02组为3.644 9±0.196 4,MF+DEX 0.1组为2.712 9±0.102 4,MF+DEX 0.5组为2.320 7±0.031 2。(5)各组细胞TGF-β1蛋白值:NF组为0.999 6±0.046 3,MF组为2.096 3±0.029 3,MF+DEX 0.02组为1.781 8±0.040 4,MF+DEX 0.1组为1.531 4±0.032 5,MF+DEX 0.5组为1.384 0±0.035 7。(6)各组细胞α-SMA蛋白值:NF组为1.000 8±0.051 4,MF组为3.231 4±0.116 0,MF+DEX 0.02组为2.875 3±0.078 0,MF+DEX 0.1组为2.262 8±0.059 8,MF+DEX 0.5组为1.940 8±0.093 7。在DEX干预48 h后,MF增殖明显受到抑制,细胞P311、TGF-β1及α-SMA基因m RNA及蛋白表达明显下调(均P<0.05,0.1~0.5 mg/m L),呈现浓度依耐性。结论:DEX抑制BBS形成的作用机制之一可能与它对MF中P311/TGF-β1/α-SMA通路的调控有关。 展开更多

关键词 良性胆道狭窄 成纤维细胞 p311/转化生长因子-β1/α-平滑肌动蛋白 地塞米松 兔

在线阅读 下载PDF 职称材料

CTRP3对TGF-β_1诱导的血管外膜成纤维细胞增殖及α-SMA表达的影响 被引量：7

9

作者 林绍慧 盛净 +3 位作者 马绍骏 陆平 蔡文玮 胡萍 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期274-278,共5页

目的探讨C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AFs)增殖以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调节作用。方法采用细胞贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AFs;CCK-8检测不同浓度CTRP3(0.1、1、10... 目的探讨C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞(AFs)增殖以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调节作用。方法采用细胞贴壁法培养SD大鼠胸主动脉AFs;CCK-8检测不同浓度CTRP3(0.1、1、10和50μg/mL)对AFs增殖的影响;免疫荧光、Real-Time PCR和Western blotting检测CTRP3对AFsα-SMA表达的影响。结果 CTRP3可呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导的AFs增殖,随着浓度升高,其抑制能力增强,浓度为10μg/mL时,其对AFs增殖的抑制作用最强(P<0.01);免疫荧光、Real-Time PCR和Western blotting结果显示,CTRP3可明显抑制TGF-β1诱导的α-SMA mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论 CTRP3可在体外抑制TGF-β1诱导AFs的增殖和α-SMA表达,提示其潜在的改善病理性血管重构作用。 展开更多

关键词 血管外膜成纤维细胞 C1 q肿瘤坏死因子相关蛋白 3 转化生长因子β1 α-平滑肌肌动蛋白 增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

反义α肌动蛋白基因腺病毒载体对TGF-β1刺激的肾小管上皮细胞转分化的影响 被引量：2

10

作者 干磊 吴雄飞 吴亿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1301-1304,共4页

目的观察大鼠血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体(pAdanti-α-SMA)转染对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)的影响。方法pAdanti-α-SMA载体构建并鉴定,转染肾小管上皮细胞(TEC)后免疫荧... 目的观察大鼠血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体(pAdanti-α-SMA)转染对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)的影响。方法pAdanti-α-SMA载体构建并鉴定,转染肾小管上皮细胞(TEC)后免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA水平。实验分为5组,A组:正常肾小管上皮细胞(TEC,对照组);B组:TEC+2μlpAdanti-α-SMA;C组:TEC+1μg天然TGF-β1;D组:TEC+1μg天然TGF-β1+2μlpA-danti-α-SMA;E组:TEC+1μg天然TGF-β1+10μlpAdanti-α-SMA。结果成功构建pAdanti-α-SMA,pAdanti-α-SMA转染TEC后抑制了TGF-β1诱导的TEC的α-SMA水平并呈剂量依赖性。结论pAdanti-α-SMA可有效地抑制肾小管上皮细胞的肌成纤维细胞转分化。 展开更多

关键词 血管平滑肌α肌动蛋白基因反义腺病毒载体 转化生长因子β1 肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

粉防己碱对VSMC表型转化和p38及MKP-1表达的影响 被引量：2

11

作者 张新明 张新平 《实验室研究与探索》 CAS 2008年第6期41-44,57,共5页

研究粉防己碱(tetrandrine,Tet)抑制内膜损伤后血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化和对p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)及丝裂原激活蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。采用HE染色检测28 d假损伤组(S组)、损伤组(I组)和损伤+Tet治疗组(Tet... 研究粉防己碱(tetrandrine,Tet)抑制内膜损伤后血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化和对p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)及丝裂原激活蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。采用HE染色检测28 d假损伤组(S组)、损伤组(I组)和损伤+Tet治疗组(Tet组)血管形态学改变;分别使用免疫组化、Western blot和RT-PCR技术检测I组和Tet组7、14、28 d增殖细胞核抗原(PCNA)、平滑肌α-肌动蛋白(SMα-actin)、p38 MAPK和MKP-1表达的变化。结果为:①28天S组血管壁各层结构完整;I组新生内膜(NI)面积显著增加,管腔面积(LA)显著缩小;Tet组NI增殖较I组明显减轻,LA增加。②损伤后7 d,Tet组与I组之间血管壁SMα-actin、PCNA、p38 MAPK和MKP-1表达基本一致,NI增殖程度亦基本相同。Tet组14和28 d,血管壁中PCNA和p38 MAPK表达均低于I组;而MKP-1表达均高于I组;14、28 d SMα-actin表达均略高于I组。因此Tet可不同程度地拮抗内膜损伤后P38MAPK信号转导途径及其调节,抑制VSMC表型转化,继而减缓NI增殖。 展开更多

关键词 粉防己碱 增殖细胞核抗原 平滑肌α-肌动蛋白 p38丝裂原激活蛋白激酶 丝裂原激活蛋白激酶磷酸酶-1 表型转化

在线阅读 下载PDF 职称材料

螺内酯对实验大鼠肝组织TGFβ1、PDGF-BB及α-SMA表达的影响 被引量：11

12

作者 贾皑 苌新明 +2 位作者 张盈涛 厉英超 常英 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期64-66,75,共4页

目的　探讨螺内酯预防肝纤维化的作用机制。方法　SD大鼠 90只 ,随机分为 3组。正常对照组 (8只 ) :正常饮食 ,皮下注射花生油 ;模型组 (42只 ) :复合因素制成肝纤维化模型 ;螺内酯预防组 (40只 ) :造模方法同模型组 ,螺内酯 10 0mg... 目的　探讨螺内酯预防肝纤维化的作用机制。方法　SD大鼠 90只 ,随机分为 3组。正常对照组 (8只 ) :正常饮食 ,皮下注射花生油 ;模型组 (42只 ) :复合因素制成肝纤维化模型 ;螺内酯预防组 (40只 ) :造模方法同模型组 ,螺内酯 10 0mg·kg- 1·d- 1灌胃。分别于第 2周、4周、6周、8周末随机处死 8只大鼠 ,取肝组织用免疫组化法检测各组肝组织内转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子 (PDGF BB)及α 平滑肌动蛋白 (α SMA)含量。结果　螺内酯预防组TGFβ1、PDGF BB及α SMA在肝组织中的表达均较模型组明显减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。 结论　螺内酯可通过降低TGFβ1、PDGF 展开更多

关键词 螺内酯 实验 大鼠 肝组织 TGFβ1 pDGF-BB α-SMA 肝纤维化 转化生长因子β1 血小板衍生生长因子 α-平滑肌动蛋白 肝星状细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

丹参素干预对肺纤维化大鼠TGF-β_1/Smads信号通路的影响 被引量：44

13

作者 秦静 赵铭山 李君 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期937-940,946,共5页

目的:探讨丹参素对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的防治作用及其可能机制。方法:SD大鼠经气管内滴注博莱霉素诱导肺间质纤维化,随后分别腹腔内注射丹参素15 mg.kg-1.d-1(DA组)、地塞米松1 mg.kg-1.d-1(DXM组)和生理盐水2 mL.d-1(BLM组)进行... 目的:探讨丹参素对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的防治作用及其可能机制。方法:SD大鼠经气管内滴注博莱霉素诱导肺间质纤维化,随后分别腹腔内注射丹参素15 mg.kg-1.d-1(DA组)、地塞米松1 mg.kg-1.d-1(DXM组)和生理盐水2 mL.d-1(BLM组)进行干预,正常对照组(NC组)气管内滴注和腹腔内注射均用生理盐水。于造模后第28天处死所有大鼠,通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色来评价治疗效果;免疫组化技术检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量PCR测定转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及Smad7 mRNA的表达。结果:DA组与BLM组相比,肺泡炎症及肺纤维化程度均明显减轻,肺组织α-SMA表达明显减少,肺组织TGF-β1和Smad3 mRNA表达明显减少,Smad7 mRNA明显增多。结论:丹参素早期应用可减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能通过抑制TGF-β1、Smad3 mRNA和促进Smad7 mRNA的表达而实现。 展开更多

关键词 肺纤维化 丹参素 α-平滑肌肌动蛋白 转化生长因子β1 SMAD3蛋白 SMAD7蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

PDGF和TGF-β1对兔RPE细胞α-SMA表达及收缩功能的影响 被引量：4

14

作者 权彦龙 王峰 +1 位作者 郑玉萍 孙乃学 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期370-372,共3页

目的　研究血小板源性生长因子 (PDGF AB)和转化生长因子 (TGF β1)对兔视网膜色素上皮 (RPE)细胞α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达和RPE细胞诱导的胶原收缩的影响。方法　免疫荧光染色法分析PDGF AB和TGF β1对α SMA表达的影响。体... 目的　研究血小板源性生长因子 (PDGF AB)和转化生长因子 (TGF β1)对兔视网膜色素上皮 (RPE)细胞α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达和RPE细胞诱导的胶原收缩的影响。方法　免疫荧光染色法分析PDGF AB和TGF β1对α SMA表达的影响。体外胶原凝胶收缩实验用于证实两种生长因子对兔RP细胞收缩的刺激作用。结果　PDGF AB和TGF β1均可显著诱导兔RPE细胞α SMA的表达 ,TGF β1的作用显著强于PDGF AB ;两种生长因子对RPE细胞诱导的胶原收缩有着相同显著的刺激作用。结论　PDGF AB和TGF β1均可增强RPE细胞的收缩力量 ,但二者可能是通过不同的途径达到这一效果 ,还需要更多的研究来分析α SMA在纤维增殖疾病中的作用。 展开更多

关键词 血小板源性生长因子 转化生长因子-β1 α-平滑肌肌动蛋白 收缩

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛磺酸对博莱霉素肺纤维化大鼠的干预作用及对TGF-β_1、α-SMA表达的影响 被引量：3

15

作者 王利平 符鹏程 +1 位作者 肖振军 张华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第13期2044-2046,共3页

目的:研究牛磺酸对博莱霉素肺纤维化大鼠的干预作用及其可能的机制。方法:54只清洁SD大鼠随机分为牛磺酸组(T组)、模型组(B组)、正常组(CN组)。T组和B组实验当天气管内滴入博莱霉素5mg/kg,CN组气管内滴入等量生理盐水。在气管内滴药后第... 目的:研究牛磺酸对博莱霉素肺纤维化大鼠的干预作用及其可能的机制。方法:54只清洁SD大鼠随机分为牛磺酸组(T组)、模型组(B组)、正常组(CN组)。T组和B组实验当天气管内滴入博莱霉素5mg/kg,CN组气管内滴入等量生理盐水。在气管内滴药后第7、14、28天每组各处死6只动物,行HE、Masson染色并做肺泡炎、肺纤维化评分,测羟脯氨酸含量、免疫组化法测转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平表达。结果:B组TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显高于CN组和T组。B组各时间点肺泡炎评分均高于同一时间点CN组和T组,实验第14、28天肺纤维化程度及羟脯氨酸含量也高于同期CN组及T组。结论:牛磺酸可减轻博莱霉素肺纤维化大鼠的肺纤维化程度,其机制可能与抑制肺组织TGF-β1表达及成纤维细胞转化为肌成纤维细胞有关。 展开更多

关键词 肺纤维化 牛磺酸 博莱霉素 转化生长因子-β1 α-平滑肌肌动蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

IL-18对肾小管上皮细胞表型转化的影响 被引量：1

16

作者 姚翠微 梁东 +2 位作者 刘华锋 唐德燊 陈孝文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期364-367,共4页

目的:研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响,以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法:应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK2)。应用RTPCR技术检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)m... 目的:研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响,以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法:应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK2)。应用RTPCR技术检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平,用免疫细胞化学方法(ICC)及Westernblot技术分别检测IL18对HK2细胞表达αSMA蛋白的影响。结果:(1)IL-18可促进HK2细胞表达αSMA、TGFβ1mRNA,且两者之间呈正相关(P<0.05)。(2)IL18增加αSMA阳性HK2细胞百分数(P<0.05)。(3)IL18使HK2细胞αSMA蛋白表达水平增加。结论:IL-18可剂量和时间依赖性地促进肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞,促进肾间质纤维化。 展开更多

关键词 白细胞介素18 肾小管上皮细胞 转分化 α-平滑肌肌动蛋白 转化生长因子-β1

在线阅读 下载PDF 职称材料

软肾散对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1及α-SMA的影响 被引量：1

17

作者 何敏 徐再春 +3 位作者 潘庆 韩文轮 胡岗 李娜 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第6期1475-1477,I0015,共4页

目的:观察软肾散对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化(RIF)的影响及可能的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利治疗组和软肾散治疗组,后3组建立UUO大鼠模型。治疗结束后测定大鼠肾功能、行HE染色观... 目的:观察软肾散对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化(RIF)的影响及可能的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利治疗组和软肾散治疗组,后3组建立UUO大鼠模型。治疗结束后测定大鼠肾功能、行HE染色观察肾组织病理变化,计算肾小管间质病理积分,用免疫组化方法测定肾TGF-β1、α-SMA的表达情况。结果:两治疗组大鼠BUN、SCr低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);肾间质病理积分显示两治疗组显著低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,两治疗组TGF-β1和α-SMA的表达均低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:软肾散能一定程度上减轻UUO大鼠RIF程度,其作用机制可能与下调TGF-β1和α-SMA表达有关。 展开更多

关键词 软肾散 肾间质纤维化 转化生长因子β1 α-平滑肌肌动蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

TGF-β_1和α-SMA在大鼠皮层注射FeCl_3所致痫性发作中的表达

18

作者 陶武 谢延风 +3 位作者 石全红 詹彦 张光伟 王佳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1066-1069,共4页

目的:研究转化生长因子β1(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(Alpha-smooth muscleaction,α-SMA)的表达差异与幼年和成年大鼠皮层注射FeCl3所致痫性发作的相关性,探讨其在大鼠痫性发作中的可能机制。方... 目的:研究转化生长因子β1(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(Alpha-smooth muscleaction,α-SMA)的表达差异与幼年和成年大鼠皮层注射FeCl3所致痫性发作的相关性,探讨其在大鼠痫性发作中的可能机制。方法:分别用FeCl3和生理盐水(Normal saline,N.S)注射幼年与成年大鼠皮层,观察大鼠痫性发作情况。ELISA法检测脑脊液(Cerebral spinal fluid,CSF)中TGF-β1变化,RT-PCR和Western免疫印迹法检测注射区域α-SMA表达。结果:只有幼鼠FeCl3组出现癫痫样发作;TGF-β1和α-SMA在幼鼠FeCl3组表达最高。结论:幼年比成年鼠更易并发癫痫发作,且TGF-β1和α-SMA表达更高,推断TGF-β1和α-SMA表达增加是幼鼠更易并发痫性发作的重要机制之一。 展开更多

关键词 癫痫发作 转化生长因子β1 α-平滑肌肌动蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

苓桂术甘汤含药血清对TGF-β_(1)诱导的心肌成纤维细胞α-SMA和胶原蛋白合成的影响 被引量：5

19

作者 葛瑞瑞 王翔 +6 位作者 汤同娟 王靓 翟梦婷 左梦雨 陈建 周鹏 黄金玲 《海南医学院学报》 CAS 2021年第10期741-746,751,共7页

目的:探讨苓桂术甘汤(LGZGD)含药血清对转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))诱导心肌纤维化的保护作用。方法:利用酶消化,结合差速贴壁的方法体外分离及培养乳鼠的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasys,C... 目的:探讨苓桂术甘汤(LGZGD)含药血清对转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))诱导心肌纤维化的保护作用。方法:利用酶消化,结合差速贴壁的方法体外分离及培养乳鼠的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasys,CFB)。分为:空白组、20%空白大鼠血清组、模型组、5%LGZGD含药血清组、10%LGZGD含药血清组和20%LGZGD含药血清组,除空白组和空白大鼠血清组外分别予5 ng/mL TGF-β_(1)刺激12 h,再用LGZGD含药血清(5%、10%、20%)进行干预后继续培养24 h。采用免疫荧光法及蛋白质印迹法(western blot,WB)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)及WB检测I型胶原蛋白(Collagen I)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达。结果:与空白组比较,模型组Collagen I、CollagenⅢ、α-SMA和FN的表达均显著升高(P<0.01),与模型组比较,实验各浓度组Collagen I及CollagenⅢ的表达均显著降低(P<0.01);α-SMA和FN的表达显著降低(P<0.01)。结论:LGZGD对胶原蛋白合成以及α-SMA和FN的表达有抑制作用,表明LGZGD的抗纤维化作用与其有关。 展开更多

关键词 苓桂术甘汤 转化生长因子-β_(1) 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 α-平滑肌肌动蛋白 胶原蛋白 纤维连接蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

N-乙酰半胱氨酸对TGF-β1诱导的ARPE-19细胞向肌成纤维细胞转分化的影响 被引量：2

20

作者 刘帅 金海鹰 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期894-901,共8页

背景视网膜色素上皮（RPE）细胞转分化为肌成纤维细胞是增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的一个核心事件。N-乙酰半胱氨酸（NAC）能够通过抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的细胞内活性氧（ROS）的产生和MAPK蛋白的磷酸化来抑制... 背景视网膜色素上皮（RPE）细胞转分化为肌成纤维细胞是增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的一个核心事件。N-乙酰半胱氨酸（NAC）能够通过抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的细胞内活性氧（ROS）的产生和MAPK蛋白的磷酸化来抑制多种细胞向肌成纤维细胞的转分化，但是NAC对TGF-β1诱导的人RPE细胞系ARPE-19细胞向肌成纤维细胞转分化的影响及其潜在的分子机制尚不清楚。目的研究NAC对TGF-β1诱导的ARPE-19细胞向肌成纤维细胞转分化的影响及其潜在的分子机制。方法体外培养人ARPE-19细胞并分为对照组、TGF-β1处理组、NAC干预组和NAC单独处理组，对照组不做处理，其他3个组分别使用10 ng/ml TGF-β1、10 ng/ml TGF-β1＋5 mmol/L NAC和5 mmol/L NAC处理细胞48 h，相差显微镜下观察细胞的形态学改变。采用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光及ELISA法检测转分化标志基因α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤维结合蛋白及Ⅰ型胶原的表达情况。使用非荧光探针DCFH-DA通过流式细胞仪检测在TGF-β1处理后1 h，细胞内ROS的产生情况及NAC对细胞内ROS产生的影响。采用Western blot法检测各组细胞内p38MAPK、ERK1/2及SAPK/JNK蛋白磷酸化的影响。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测不同浓度NAC对ARPE-19细胞生存的影响。结果实时荧光定量PCR、Western blot及ELISA实验结果表明，与对照组相比，TGF-β1处理组α-SMA、纤维结合蛋白和Ⅰ型胶原mRNA表达水平均上调，分别是对照组的（2.15±0.29）、（9.54±1.08）和（25.78±0.66）倍，蛋白表达水平分别是对照组的（8.49±0.32）、（2.53±0.69）和（4.45±1.05）倍，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。NAC干预组α-SMA、纤维结合蛋白和Ⅰ型胶原mRNA的表达水平分别是TGF-β1处理组的（66.70±12.57）%、（66.11±8.35）%和（33.19±6.90）%，蛋白表达水平分别是TGF-β1处理组的（52.30±4.83）%、（55.03±2.58）%和（56.08±3.65）%，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。流式细胞仪分析结果显示，TGF-β1处理组细胞内ROS的产生水平较对照组增加，是对照组的（2.12±0.20）倍，NAC干预组细胞内ROS水平是TGF-β1处理组的（57.41±9.45）%，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。Western blot结果显示，与对照组相比，TGF-β1处理组p38MAPK、SAPK/JNK及ERK1/2蛋白磷酸化水平均上调，分别是对照组的（9.18±1.00）、（4.87±0.81）和（4.20±0.69）倍，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。使用NAC干预处理后，p38MAPK、SAPK/JNK及ERK1/2蛋白磷酸化水平分别是TGF-β1处理组的（48.16±14.82）%、（67.90±2.90）%和（74.52±4.00）%，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论NAC可能通过抑制TGF-β1诱导的ROS的产生及p38MAPK、SAPK/JNK及ERK1/2蛋白的磷酸化进而抑制ARPE-19细胞向肌成纤维细胞转分化。 展开更多

关键词 N-乙酰半胱氨酸 视网膜色素上皮细胞 转化生长因子-β1 肌成纤维细胞 转分化 α-平滑肌肌动蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料