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右美托咪定对神经病理性疼痛大鼠脊髓P2X4R蛋白表达的影响
1
作者 武静茹 周田田 +3 位作者 陈自洋 刘珍秀 苗蓓 王杰 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期255-258,共4页
目的：观察右美托咪定对神经病理性痛大鼠脊髓P2X4R总蛋白及膜蛋白表达水平的影响。方法：雄性SD大鼠40只,180~220 g,随机分为4组（每组10只）：正常组（N组）、假手术组（S组）、神经病理性痛组（SNI组）、右美托咪定组（Dex组）。N组... 目的：观察右美托咪定对神经病理性痛大鼠脊髓P2X4R总蛋白及膜蛋白表达水平的影响。方法：雄性SD大鼠40只,180~220 g,随机分为4组（每组10只）：正常组（N组）、假手术组（S组）、神经病理性痛组（SNI组）、右美托咪定组（Dex组）。N组不作任何处理,Dex组于术后即刻腹腔注射右美托咪定40μg/kg,间隔24 h追加给药一次至术后14 d,S组和SNI组均腹腔注射等容量的生理盐水。术前1 d及术后1、3、5、7、14 d检测机械缩足反射阈值（MWT）。术后14 d用Western blot方法检测脊髓L4~6节段P2X4R总蛋白和膜蛋白表达量。结果：与N组和S组相比,SNI组大鼠术后MWT明显降低（P〈0.05）,脊髓水平P2X4R总蛋白和膜蛋白表达量均明显增加（P〈0.05）;与SNI组相比,Dex组MWT明显升高（P〈0.05）,脊髓水平P2X4R总蛋白和膜蛋白表达量均明显降低（P〈0.05）。结论：Dex能减轻大鼠神经病理性痛,其机制可能与抑制脊髓P2X4R总蛋白及膜蛋白水平有关。 展开更多
关键词 右美托咪定 神经病理性疼痛 脊髓 p2x4r 膜蛋白
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尼罗罗非鱼P2X4R基因克隆及原核表达分析 被引量：1
2
作者 余艳玲 张永德 +2 位作者 潘传燕 冯鹏霏 罗洪林 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2259-2265,共7页
【目的】克隆尼罗罗非鱼P2X4R基因,并构建原核表达载体进行诱导表达,为深入研究P2X4R在鱼类中的生物学功能打下基础。【方法】利用PCR克隆尼罗罗非鱼P2X4R基因的3个片段(G1、G2和G3),拼接获得目的基因后连接pCold Ⅱ载体构建pCold Ⅱ-P2... 【目的】克隆尼罗罗非鱼P2X4R基因,并构建原核表达载体进行诱导表达,为深入研究P2X4R在鱼类中的生物学功能打下基础。【方法】利用PCR克隆尼罗罗非鱼P2X4R基因的3个片段(G1、G2和G3),拼接获得目的基因后连接pCold Ⅱ载体构建pCold Ⅱ-P2X4R重组质粒,再转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG进行诱导表达。分别采用SDS-PAGE和Western blotting检测分析重组蛋白P2X4R的表达情况,并运用生物信息学在线分析软件对其理化性质、糖基化位点、跨膜区域、亚细胞定位及信号肽等进行预测分析。【结果】克隆获得的尼罗罗非鱼P2X4R基因大小为1108 bp,与pCold Ⅱ载体重组后转化BL21(DE3)感受态细胞获得的原核表达载体经IPTG诱导可表达获得目的蛋白,在IPTG 1.0 mmol/L、37℃诱导4 h的条件下重组蛋白表达量高于在IPTG 0.1 mmol/L、16℃过夜诱导的表达量。重组蛋白P2X4R的分子量约43.0 k D,其氨基酸数量为354个,理论等电点(pI)为6.78,不稳定指数为37.62,属于稳定蛋白,脂肪族指数为74.35;重组蛋白P2X4R具有3个N-糖基化位点和1个O-糖基位点;该蛋白未见跨膜区,其蛋白几乎100%位于细胞膜内,不含信号肽。【结论】诱导表达获得的尼罗罗非鱼P2X4R蛋白具有3个N-糖基化位点和1个O-糖基化位点,推测其存在糖基化现象,可制备相应抗体用于揭示罗非鱼巨噬细胞的抗原呈递作用机制。 展开更多
关键词 罗非鱼 p2x4r基因 克隆 原核表达 生物信息学分析
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P2X4受体在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达及意义 被引量：9
3
作者 刘超阳 刘清 +3 位作者 王莎 秦光成 陈力学 周冀英 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期169-175,共7页
目的:观察P2X4受体(P2X4 receptor,P2X4R)在慢性偏头痛(chronic migraine,CM)大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在CM中的作用。方法:SD雄性大鼠随机分为5组,对照组(n=12)、模型组(n=12)、模型+... 目的:观察P2X4受体(P2X4 receptor,P2X4R)在慢性偏头痛(chronic migraine,CM)大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在CM中的作用。方法:SD雄性大鼠随机分为5组,对照组(n=12)、模型组(n=12)、模型+溶剂组(n=6)、模型+TNP-ATP30 nmol组(n=6)、模型+TNP-ATP 60 nmol组(n=6)。硬脑膜反复滴注"炎性汤"(inflammatory soup,IS)建立CM模型。von Frey test检测眶周及后足机械痛阈值,Western blot检测P2X4R及神经元激活标志蛋白c-Fos的表达,免疫荧光检测P2X4R定位情况。结果:荧光染色显示P2X4R主要表达于TNC小胶质细胞。与对照组相比,模型组大鼠眶周及后足痛阈值显著降低(P<0.01),P2X4R及c-Fos表达量显著上调(P<0.05)。给予P2X4R抑制剂TNP-ATP后,大鼠眶周及后足痛阈值显著升高(P<0.05),c-Fos表达量显著降低(P<0.05)。结论:TNC小胶质细胞P2X4R表达上调,可能通过影响神经元的激活从而参与CM发病过程。 展开更多
关键词 小胶质细胞 P2X4受体 慢性偏头痛 三叉神经脊束尾核
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4
作者 《中国病理生理杂志》编辑部 《中国病理生理杂志》 2025年第11期2228-2228,共1页
发表于本刊2025年第41卷第10期第2023-2029页《P2X4R在周围神经损伤所致神经病理性疼痛中作用的研究进展》一文(作者:王艳,王雅慧,王艳,裴飞,吕丽洁,李天益,王淑瑾,秦欢;DOI:10.3969/j.issn.1000-4718.2025.10.018),因第一作者王艳更换... 发表于本刊2025年第41卷第10期第2023-2029页《P2X4R在周围神经损伤所致神经病理性疼痛中作用的研究进展》一文(作者:王艳,王雅慧,王艳,裴飞,吕丽洁,李天益,王淑瑾,秦欢;DOI:10.3969/j.issn.1000-4718.2025.10.018),因第一作者王艳更换工作单位。 展开更多
关键词 周围神经损伤 p2x4r 神经病理性疼痛
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