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弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定
被引量:
14
1
作者
高世同
吴少廷
+2 位作者
林敏
梁驹卿
占国清
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000年第2期62-64,共3页
目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物,采用PCR法扩增出P22目的基因片段,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后,插入质粒载体p5.6的多克隆位点,构建重组体p5.6/P2...
目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物,采用PCR法扩增出P22目的基因片段,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后,插入质粒载体p5.6的多克隆位点,构建重组体p5.6/P22,并转化大肠杆菌DH5α,快速酸法初筛阳性重组子,并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。被鉴定的重组子以双脱氧链终止法进行序列测定。结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约593bpDNA条带,与预期扩增片段大小相符,空白对照无特异性扩增条带;所构建p5.6/P22重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果一致;序列测定的结果确证了插入片段的正确性。结论体外成功扩增、克隆了弓形虫表面抗原P22编码基因片段,并经序列分析所验证,为弓形虫P22表面抗原的表达以及弓形虫疫苗的制备作好铺垫。
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关键词
p22表面抗原
克隆
序列分析
弓形体病
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职称材料
题名
弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定
被引量:
14
1
作者
高世同
吴少廷
林敏
梁驹卿
占国清
机构
深圳市卫生防疫站
广东省妇幼保健医院
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000年第2期62-64,共3页
文摘
目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物,采用PCR法扩增出P22目的基因片段,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后,插入质粒载体p5.6的多克隆位点,构建重组体p5.6/P22,并转化大肠杆菌DH5α,快速酸法初筛阳性重组子,并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。被鉴定的重组子以双脱氧链终止法进行序列测定。结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约593bpDNA条带,与预期扩增片段大小相符,空白对照无特异性扩增条带;所构建p5.6/P22重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果一致;序列测定的结果确证了插入片段的正确性。结论体外成功扩增、克隆了弓形虫表面抗原P22编码基因片段,并经序列分析所验证,为弓形虫P22表面抗原的表达以及弓形虫疫苗的制备作好铺垫。
关键词
p22表面抗原
克隆
序列分析
弓形体病
Keywords
Toxo
p
lasma gomdii
p
22
surface antigen
DNA clone
Sequence determination
分类号
R531.8 [医药卫生—内科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定
高世同
吴少廷
林敏
梁驹卿
占国清
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000
14
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