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雌激素对全脑缺血再灌小鼠海马CA_1区P-CREB和BDNF表达的影响 被引量:6
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作者 吕奔 唐怡庭 +4 位作者 谷蔚琼 陈富周 李有秋 罗学港 雷德亮 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期401-404,共4页
本文观察了雌激素对全脑缺血再灌的影响并探讨了其作用机制。切除小鼠双侧卵巢同时于颈部皮下植入雌激素(E2)缓释片(OVXE2组)或安慰剂缓释片(OVXPLC组)。术后18d,手术暴露双侧颈总动脉并夹闭25min后再通,制作全脑缺血再灌模型,分别于灌... 本文观察了雌激素对全脑缺血再灌的影响并探讨了其作用机制。切除小鼠双侧卵巢同时于颈部皮下植入雌激素(E2)缓释片(OVXE2组)或安慰剂缓释片(OVXPLC组)。术后18d,手术暴露双侧颈总动脉并夹闭25min后再通,制作全脑缺血再灌模型,分别于灌流后1h,12h,3d,7d取材进行PCREB和BDNF免疫组化染色和常规Nissl染色,研究E2对雌性小鼠全脑缺血/再灌流损伤后海马CA1区PCREB和BDNF表达的影响。结果表明:缺血再灌后7d,OVXPLC组海马CA1区神经元排列稀疏,细胞层次减少,细胞数低于OVXE2组(P<0.01);在缺血再灌后3d,OVXPLC组海马CA1区PCREB阳性细胞数低于OVXE2组(P<0.01),而BDNF的表达无统计学差异(P>0.05);在缺血再灌后7d,OVXPLC组PCREB和BDNF的表达均低于OVXE2组(P<0.01)。以上实验结果提示,E2在缺血再灌的中后期可能通过上调海马CA1区PCREB进而促进BDNF的表达,发挥神经元保护作用。 展开更多
关键词 雌激素 全脑缺血再灌小鼠 海马CA1区 p-creb BDNF 神经元保护机制
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基于NF-κB信号通路探讨麻黄细辛附子汤对变应性鼻炎大鼠NF-κBp65、p-CREB和AQP5表达的影响 被引量:10
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作者 杨阳 王树鹏 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第12期2662-2665,共4页
目的:基于NF-κB信号通路观察麻黄细辛附子汤对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜NF-κBp65、p-CREB和AQP5表达的影响,探讨麻黄细辛附子汤对AR的作用机理。方法:按体质量采用随机区组法将清洁级健康雄性Wistar大鼠48只分成6组,每组8只大鼠,即分... 目的:基于NF-κB信号通路观察麻黄细辛附子汤对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜NF-κBp65、p-CREB和AQP5表达的影响,探讨麻黄细辛附子汤对AR的作用机理。方法:按体质量采用随机区组法将清洁级健康雄性Wistar大鼠48只分成6组,每组8只大鼠,即分成空白对照组、模型对照组、Forskolin干预组、H89干预组、PDTC干预组、麻黄细辛附子汤组。AR大鼠模型的制作采用卵蛋白全身致敏和局部攻击方法,观察麻黄细辛附子汤组治疗后鼻黏膜AQP5、NF-κBp65和p-CREB表达,用统计学对实验结果进行分析。结果:模型组p-CREB、AQP5表达下调,Forskolin干预组、PDTC干预组、麻黄细辛附子汤组均能使p-CREB、AQP5表达上调,而H89能下调p-CREB、AQP5表达。模型组NF-κBp65表达上调,Forskolin干预组、PDTC干预组、麻黄细辛附子汤治疗组均能使NF-κBp65表达下调,而H89能上调NF-κBp65表达。结论:麻黄细辛附子汤治疗AR的作用机制可能通过调控NF-κB信号通路和cA MP-PKA信号通路使AQP5表达增加有关。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 麻黄细辛附子汤 AQP5 NF-ΚBP65 p-creb
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p-ERK p-CREB在姜黄素抗大鼠神经病理性痛中的作用 被引量:1
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作者 刘若海 李旭 +1 位作者 何伶俐 曹红 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第12期2673-2675,共3页
目的:观察姜黄素对神经病理性痛大鼠痛行为及脊髓背角的p-ERK、p-CREB表达的影响。方法:采用大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型。雄性SD大鼠108只,随机分为实验对照(Con)组、假手术(Sham组)、溶剂对照(SC)组、姜黄素(Cur30、Cur100、... 目的:观察姜黄素对神经病理性痛大鼠痛行为及脊髓背角的p-ERK、p-CREB表达的影响。方法:采用大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型。雄性SD大鼠108只,随机分为实验对照(Con)组、假手术(Sham组)、溶剂对照(SC)组、姜黄素(Cur30、Cur100、Cur300)组。姜黄素组行CCI术,每组每天分别腹腔注射姜黄素30、100、300mg/kg,持续14天。各组于术前2天和术后1、3、5、7、10、14天测定机械痛阈(MWT)和热痛阈(TWL)。在术后3、7、14天处死大鼠(n=6),分别制备大鼠L4-5脊髓的石蜡标本,用免疫组织化学方法测定p-ERK、p-CREB在脊髓背角神经元的动态变化。结果:Con组大鼠MWT和TWL呈进行性下降,在术后3天降至最低(MWT为15.3±3,TWL为4.6±1.0),术侧脊髓背角浅层p-ERK、p-CREB阳性神经元明显增多;Cur组大鼠在术后MWT和TWL亦进行性下降,在术后3天降至最低(Cur100组的MWT为22.6±4,TWL为5.6±1.1),与Con组相比,每组每个时间点的MWL、TWL均明显升高(P<0.01);术侧的脊髓背角浅层p-ERK、p-CREB阳性神经元的表达下降,每组每个时间点表达均低于Con组(P<0.01)。结论:在本实验中,姜黄素能减轻神经病理性痛,其机制可能与降低p-ERK、p-CREB阳性神经元的表达有关。 展开更多
关键词 姜黄素 P-ERK p-creb 神经病理性痛 脊髓 大鼠
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APP5肽类似物P165和罗格列酮对SH-SY5Y细胞IRS-1和p-CREB表达的影响 被引量:2
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作者 张景燕 王蓉 +3 位作者 赵静姝 姬志娟 赵志炜 盛树力 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期484-488,共5页
目的观察APP5肽类似物P165和罗格列酮(rosiglitazone)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)损伤人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞后,胰岛素信号通路相关因子IRS-1和p-CREB表达水平的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ损... 目的观察APP5肽类似物P165和罗格列酮(rosiglitazone)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)损伤人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞后,胰岛素信号通路相关因子IRS-1和p-CREB表达水平的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮保护组(STZ 0.8 mmol/L+罗格列酮20μmol/L),APP5肽类似物P165保护组(STZ 0.8 mmol/L+P165 30μmol/L),进行细胞形态观察,IRS-1和p-CREB免疫细胞荧光染色观察,采用image-pro plus图像分析软件测定平均吸光度值。结果与对照组相比,STZ损伤组细胞生长分裂减慢、突起缩短,细胞胞体皱缩,IRS-1和p-CREB免疫荧光染色强度减弱;与STZ损伤组相比,罗格列酮组和P165组突起伸展,细胞形态和细胞胞体皱缩现象明显改善,细胞出现强荧光染色。平均吸光度值测定结果显示:与对照组相比,STZ损伤组IRS-1和p-CREB平均吸光度值降低(P<0.008),与STZ损伤组相比,P165组和罗格列酮组平均吸光度值有所上升,差异均有统计学意义(P<0.008)。结论 APP5肽类似物P165和罗格列酮可能通过增加IRS-1、p-CREB的表达来改善STZ对于SH-SY5Y细胞的损伤,从而达到保护神经元的作用。 展开更多
关键词 APP5肽类似物P165 罗格列酮 链脲佐菌素 胰岛素受体底物-1 p-creb
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丙戊酸钠对大鼠海马神经元癫痫样放电后P-CREB1表达的影响 被引量:2
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作者 刘华 徐祖才 陈阳美 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1024-1027,共4页
目的:研究丙戊酸钠对大鼠海马神经元癫痫样放电后磷酸化腺感苷反应元件结合蛋白1(Phosphorylated cAMP responsive element binding protein 1,P-CREB1)表达的影响。方法:wistar新生鼠,迅速断头取脑,体外培养海马神经元,建立神经元癫痫... 目的:研究丙戊酸钠对大鼠海马神经元癫痫样放电后磷酸化腺感苷反应元件结合蛋白1(Phosphorylated cAMP responsive element binding protein 1,P-CREB1)表达的影响。方法:wistar新生鼠,迅速断头取脑,体外培养海马神经元,建立神经元癫痫样放电模型,将神经元分为空白组、模型组、丙戊酸钠低剂量(50mg/L)组、丙戊酸钠高剂量(100mg/L)组,运用免疫荧光技术观察P-CREB1在神经元癫痫样放电后在细胞内的表达部位,采用wester blot技术测定P-CREB1在不同分组中的表达强度。结果:通过免疫荧光技术,在各组中都可以看到P-CREB1在细胞核内表达,以模型组最明显;运用Western blot,发现表达趋势与免疫荧光一致,并且,给予丙戊酸钠后,P-CREB1表达减弱,且高剂量组与低剂量组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:海马神经元无镁处理后呈癫痫样放电,同时P-CREB1被过度激活,而有效浓度的丙戊酸钠可抑制此反应P-CREB1的磷酸化水平。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 p-creb1 神经元 癫痫样放电
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卒中后抑郁模型大鼠脑组织P-CREB的表达及中药的干预作用 被引量:1
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作者 侯秀娟 唐启盛 司银楚 《中医药学刊》 2005年第10期1794-1795,共2页
目的:观察卒中后抑郁模型大鼠脑内转录因子P-CREB表达及中药益肾化浊方的干预作用。方法:建立卒中后抑郁大鼠模型(PSD)基础上,采用免疫组化ABC法观察PSD大鼠脑内P-CREB的表达及益肾化浊方药的干预作用。结果:PSD模型大鼠脑前皮质、海马P... 目的:观察卒中后抑郁模型大鼠脑内转录因子P-CREB表达及中药益肾化浊方的干预作用。方法:建立卒中后抑郁大鼠模型(PSD)基础上,采用免疫组化ABC法观察PSD大鼠脑内P-CREB的表达及益肾化浊方药的干预作用。结果:PSD模型大鼠脑前皮质、海马P-CREB表达显著下调,益肾降浊方药能明显增加P-CREB表达。结论:卒中后抑郁模型大鼠脑内存在CREB功能下调,益肾降浊方药可能通过上调CREB磷酸化而达到治疗作用。 展开更多
关键词 脑血管意外 抑郁障碍 中药疗法 p-creb
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远志对锰中毒小鼠学习记忆能力及海马区p-CREB表达的影响 被引量:7
7
作者 黎文酉 覃丽 +1 位作者 郭忠信 杨伯宁 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期325-329,共5页
目的:探讨远志对锰中毒小鼠海马学习记忆的影响以及和p-CREB表达的关系。方法:将60只健康雌性成年昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组(CG),锰中毒组(MG),锰中毒加远志高剂量组(远志高剂量组,MHG)、锰中毒加远志中剂量组(远志中剂量组,MM... 目的:探讨远志对锰中毒小鼠海马学习记忆的影响以及和p-CREB表达的关系。方法:将60只健康雌性成年昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组(CG),锰中毒组(MG),锰中毒加远志高剂量组(远志高剂量组,MHG)、锰中毒加远志中剂量组(远志中剂量组,MMG),锰中毒加远志低剂量组(远志低剂量组,MLG)。采用腹腔注射氯化锰的方式制作小鼠锰中毒模型,采用灌胃的方式进行远志给药。用Morris水迷宫实验测试其空间学习和记忆能力,用免疫组织化学的方法检测海马内CA1,CA3区p-CREB的表达。结果:在定位航行实验中,远志高、中、低剂量组与锰中毒组相比,其平均逃避潜伏期下降,差异有统计学意义(P<0.01),而与对照组相比,平均逃避潜伏期变化不大,差异无统计学意义(P>0.05),锰中毒组与对照组比较,逃避潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P<0.01)。在空间探索实验中,远志高、中、低剂量组与锰中毒组相比,其穿越平台次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.01),而与对照组相比,穿越平台次数变化不大,差异无统计学意义(P>0.05),锰中毒组与对照组相比,穿越平台次数减少,差异有统计学意义(P<0.01)。与锰中毒组相比,远志高、中剂量组海马内pCREB蛋白的表达显著增多,差异有统计学意义(P<0.01),而与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),远志低剂量组与对照组相比,其蛋白的阳性表达减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:药物远志能够改善锰中毒小鼠学习记忆能力的机制可能与p-CREB的表达增加有关。 展开更多
关键词 远志 锰中毒 学习记忆 p-creb 小鼠
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七氟醚对福尔马林致炎性痛大鼠脊髓的p-CREB表达的作用 被引量:1
8
作者 周佩 罗伟 +4 位作者 罗聪 王雪琴 张建一 李昌琪 戴茹萍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期297-302,共6页
目的:初步探讨七氟醚对福尔马林诱发的急性炎性痛大鼠脊髓内p-CREB表达的作用。方法:通过足底皮下注射福尔马林建立大鼠急性炎性痛模型,采用免疫组化的方法,观察七氟醚吸入对福尔马林炎性痛引起的大鼠脊髓内环腺苷酸反应元件结合蛋白(cA... 目的:初步探讨七氟醚对福尔马林诱发的急性炎性痛大鼠脊髓内p-CREB表达的作用。方法:通过足底皮下注射福尔马林建立大鼠急性炎性痛模型,采用免疫组化的方法,观察七氟醚吸入对福尔马林炎性痛引起的大鼠脊髓内环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)磷酸化的影响。结果:大鼠足底皮下注射福尔马林后,10 min内脊髓内p-CREB(磷酸化CREB)表达相比对照组明显增加并达到峰值(P<0.001),1 h时下降,但仍高于正常水平(P<0.001);短时间吸入七氟醚不能抑制注射福尔马林后10 min的脊髓p-CREB表达(P>0.05),但长时间吸入能完全抑制注射后1 h的脊髓内p-CREB表达(P<0.001)。结论:长时间吸入七氟醚对福尔马林炎性痛引起的脊髓p-CREB的表达有抑制作用,提示长时间吸入七氟醚对福尔马林炎性痛可能具有镇痛作用,且可能机制是通过调节脊髓内p-CREB的表达。 展开更多
关键词 p-creb 七氟醚 吸入麻醉药 急性炎性痛 福尔马林 大鼠
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鞘内注射DNMT1-siRNA对CCI大鼠行为学和脊髓SOCS1、p-ERK、p-CREB表达的影响 被引量:2
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作者 张婷 尹伟 孙凯 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期919-922,共4页
目的:探讨 DNMT1在大鼠神经病理性痛中的作用及可能机制。方法清洁级健康雄性 SD 大鼠32只,体重200~250 g,随机分为四组:假手术组(S 组)、神经病理性痛组(CCI 组)、CCI+DNMT1-siRNA 组(CDS 组)和 CCI+control-siRNA 组(CCS ... 目的:探讨 DNMT1在大鼠神经病理性痛中的作用及可能机制。方法清洁级健康雄性 SD 大鼠32只,体重200~250 g,随机分为四组:假手术组(S 组)、神经病理性痛组(CCI 组)、CCI+DNMT1-siRNA 组(CDS 组)和 CCI+control-siRNA 组(CCS 组),每组8只。CDS 组在术后7、8、9 d 连续鞘内注射 DNMT1-siRNA(2μg/10μl),CCS 组注射等体积的对照序列 siRNA(control-siRNA)。分别在术前1 d,术后3、5、7、9、12和14 d 测定大鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL),术后14 d 测完行为学后处死大鼠,取 L4~L6脊髓腰膨大节段,采用 Western blot 技术检测脊髓 SOCS1、p-ERK、p-CREB 的表达水平。结果术后3、5、7、9、12和14 d CCI 组和 CCS 组大鼠的 MWT 明显低于,TWL 明显短于 S 组(P 〈0.05);术后9、12、14 d CDS 组大鼠 MWT 明显高于,TWL 明显长于 CCS 组(P 〈0.05);术后14 d CCI 组和 CCS 组 SOCS1表达明显低于 S 组和 CDS组,p-ERK、p-CREB 表达明显高于 S 组和 CDS 组(P 〈0.05)。结论鞘内注射 DNMT1-siRNA 明显抑制大鼠神经病理性痛,其机制可能与促进脊髓 SOCS1的表达,抑制 p-ERK、p-CREB 的表达有关。 展开更多
关键词 DNMT1 SOCS1 P-ERK p-creb 神经病理性痛 脊髓
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不同剂量拉莫三嗪对体外培养海马神经细胞存活及其BDNF和P-CREB表达的影响 被引量:1
10
作者 李佩瑾 蒋莉 刘官信 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1330-1333,共4页
目的:观察不同浓度拉莫三嗪(Lamotrigine,LTG)对体外培养海马神经细胞存活影响及脑源性神经生长因子(Brainderived neurotrophic factor,BDNF)和磷酸化cAMP反应元件结合(Phosphorylated cAMP response element binding protein,p-CREB)... 目的:观察不同浓度拉莫三嗪(Lamotrigine,LTG)对体外培养海马神经细胞存活影响及脑源性神经生长因子(Brainderived neurotrophic factor,BDNF)和磷酸化cAMP反应元件结合(Phosphorylated cAMP response element binding protein,p-CREB)的表达变化。从细胞水平角度探索拉莫三嗪对认知功能的可能影响。方法:取培养8 d的成熟海马神经细胞,随机分为拉莫三嗪低剂量组(4 mg/L)、拉莫三嗪中剂量组(8 mg/L)、拉莫三嗪高剂量处理组(12 mg/L)和空白对照组(0.1%DMSO)。维持浓度培养4 d后,MTT法检测细胞存活数量,免疫组化检测神经细胞BDNF和p-CREB。结果:(1)不同浓度拉莫三嗪处理组与空白对照组之间比较,细胞存活率有明显差异(P<0.05)。而3个不同剂量拉莫三嗪组之间的细胞存活率没有显著差异(P>0.05)。(2)与正常对照组比12 mg/L拉莫三嗪培养神经细胞,p-CREB和BDNF的表达显著降低(P<0.05),而4、8 mg/L拉莫三嗪剂量组无差异(P>0.05)。(3)加入拉莫三嗪12 mg/L培养神经细胞BDNF和p-CREB的表达明显低于4、8 mg/L拉莫三嗪剂量组(P<0.05)。结论:在4~12 mg/L的剂量范围内,拉莫三嗪均可造成体外培养神经细胞死亡,高浓度拉莫三嗪可通过神经细胞内BDNF和p-CREB的表达变化,影响神经细胞存活。 展开更多
关键词 拉莫三嗪 p-creb 认知
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CREB及p-CREB在前列腺癌细胞增殖中的作用 被引量:7
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作者 唐海斌 马越云 +6 位作者 苏明权 李蕊 常亮 高萌 付晓蕊 杨玉琪 郝晓柯 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期223-229,共7页
目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)及磷酸化CREB(p-CREB)在前列腺癌细胞增殖中的作用。方法:采用组织芯片技术检测人正常前列腺、前列腺增生、不同分级前列腺癌组织中CREB及p-CREB的表... 目的:探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)及磷酸化CREB(p-CREB)在前列腺癌细胞增殖中的作用。方法:采用组织芯片技术检测人正常前列腺、前列腺增生、不同分级前列腺癌组织中CREB及p-CREB的表达水平;免疫荧光及Western blotting检测人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1、前列腺癌细胞PC3及LNCap中CREB及p-CREB的表达水平;构建重组人源CREB质粒,并转染PC3及LNCap细胞,Western blotting及CCK-8试剂盒检测转染效率及细胞增殖水平的变化。结果:CREB及p-CREB在前列腺癌组织中表达率明显高于正常前列腺(96%vs 50%,88%vs 40%,P<0.05)和前列腺增生组织(96%vs 80%,88%vs 60%,P<0.05);CREB及p-CREB蛋白水平在前列腺癌PC3及LNCap细胞中表达量显著高于正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1[PC3细胞:(5.10±0.62)vs(2.31±0.40)、(4.31±0.54)vs(2.02±0.38);LNCap细胞:(7.5±0.83)vs(2.31±0.40)、(6.15±0.69)vs(2.02±0.38),均P<0.05)];转染重组质粒CREB可上调前列腺癌细胞PC3及LNCap中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达(均P<0.05),且转染后的PC3及LNCap细胞增殖水平明显增加(P<0.05)。结论:CREB及p-CREB在前列腺癌组织、体外培养前列腺癌细胞PC3及LNCap中高表达,并可上调PC3及LNCap中增殖相关基因PCNA的表达,提高细胞增殖水平。 展开更多
关键词 环磷腺苷效应元件结合蛋白 磷酸化CREB 前列腺癌 增殖
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人参皂苷Rg1促智信号转导途径研究 被引量:19
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作者 王玉珠 王永胜 +3 位作者 楚世峰 陈霁 陈乃宏 张均田 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期740-743,共4页
目的探究人参皂苷Rg1(G-Rg1)促智信号转导途径,观察G-Rg1对环腺苷酸(cAMP)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)和磷酸二酯酶(PDE)的影响。方法正常成年大鼠口服G-Rg120mg.kg-1,连续3d后,分别采用酶联免疫法和免疫组织化学法检测脑区c... 目的探究人参皂苷Rg1(G-Rg1)促智信号转导途径,观察G-Rg1对环腺苷酸(cAMP)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)和磷酸二酯酶(PDE)的影响。方法正常成年大鼠口服G-Rg120mg.kg-1,连续3d后,分别采用酶联免疫法和免疫组织化学法检测脑区cAMP和p-CREB水平的变化。体外给予G-Rg1后,检测海马匀浆液中PDE活性的变化。结果大鼠口服G-Rg1后,海马组织cAMP水平升高,海马和脑皮质p-CREB增强,G-Rg1降低海马PDE活性,抑制cAMP降解。结论G-Rg1能提高脑内cAMP、p-CREB水平,抑制PDE活性,表明G-Rg1可以通过激活cAMP-PKA-CREB信号通路发挥促智作用。 展开更多
关键词 人参皂苷RGL 认知功能 cAMP p-creb PDE 信号转导
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锁阳乙酸乙酯提取物的雌激素样作用研究 被引量:16
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作者 郑俊超 马素亚 +4 位作者 于雪 胡京红 刘永刚 田方泽 鲁艺 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1687-1690,共4页
雌激素提高学习记忆能力的功能已被广泛承认,前期实验证实锁阳乙酸乙酯提取物(ECS)可表现出雌激素样作用,提高去卵巢大鼠的学习记忆能力及血清E2水平,对Aβ损伤SK-N-SH细胞有一定的保护作用。为了进一步研究ECS的雌激素样作用机制,拟在... 雌激素提高学习记忆能力的功能已被广泛承认,前期实验证实锁阳乙酸乙酯提取物(ECS)可表现出雌激素样作用,提高去卵巢大鼠的学习记忆能力及血清E2水平,对Aβ损伤SK-N-SH细胞有一定的保护作用。为了进一步研究ECS的雌激素样作用机制,拟在小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2A)上探寻ECS对学习记忆相关蛋白突触素蛋白synaptophysin和环磷腺苷效应元件结合蛋白表达影响。采用CCK8法测定ECS对小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2A)细胞活力的影响。将小鼠神经母细胞瘤细胞分为正常组、DMSO组、ECS组、Tamoxifen组、Tamoxifen+ECS组;正常组、ECS组、ECS+G15组和正常组、DMSO组、ECS组、PD98059组、PD98059+ECS组。采用Western blot法测定synaptophysin,p-creb蛋白表达情况。实验表明锁阳乙酸乙酯提取物可促进synaptophysin,P-CREB表达,ER受体竞争性拮抗剂Tamoxifen可降低synaptophysin表达,对ECS促进synaptophysin表达无显著影响。GPR30受体特异性阻断剂G15可显著降低ECS促进synaptophysin表达。p-CREB上游Erk1/2-MAPK通路的阻断剂PD98059可显著抑制ECS上调p-CREB表达,结合前期实验结果,我们认为ECS可与GPR30结合通过MAPK通路促进学习记忆相关蛋白synaptophysin表达。 展开更多
关键词 锁阳 SYNAPTOPHYSIN p-creb GPR30
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精准针刺激痛点联合拉伸对大鼠前扣带皮层CREB表达及其磷酸化的影响 被引量:8
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作者 李丽辉 黄强民 +3 位作者 刘琳 阮氏深 徐安乐 嵇丽娟 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期87-93,共7页
目的:探讨针刺肌筋膜激痛点结合静态拉伸对大鼠前扣带回处CREB和p-CREB表达的变化。方法:将60只6周龄雄性SD大鼠随机平均分为对照组(C)、模型组(M)、激痛点组(D)、非激痛点组(ND)、拉伸组(S)和针刺拉伸结合组(SD),每组各10只。采用腓肠... 目的:探讨针刺肌筋膜激痛点结合静态拉伸对大鼠前扣带回处CREB和p-CREB表达的变化。方法:将60只6周龄雄性SD大鼠随机平均分为对照组(C)、模型组(M)、激痛点组(D)、非激痛点组(ND)、拉伸组(S)和针刺拉伸结合组(SD),每组各10只。采用腓肠肌定点钝性打击结合离心运动的模式建立慢性肌筋膜疼痛激痛点模型,之后分别进行激痛点处针刺、非激痛点处针刺、静态拉伸及针刺激痛点结合拉伸治疗,每周1次,共4周。采用蛋白免疫印记技术和PCR检测大鼠前扣带回处CREB和p-CREB蛋白和mRNA表达水平。结果:与C组相比,M组、S组和ND组的CREB和p-CREB蛋白及mRNA表达水平明显增高(P <0.01)。与M组相比,D组(P <0.01)、S组(P <0.05)及SD组(P <0.01)的CREB蛋白相对表达量显著降低,仅D组的m RNA表达显著降低。结论:本研究证实精准针刺激痛点联合或不联合拉伸均可抑制前扣带回CREB的蛋白和m RNA水平表达,提示二者水平可能与针刺肌筋膜激痛点的镇痛机制相关。 展开更多
关键词 肌筋膜激痛点(MTrPs) 针刺 静态拉伸 CREB p-creb
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促肾上腺皮质激素释放激素对下丘脑神经元CREB的调控 被引量:2
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作者 张云东 顾小红 +3 位作者 朱佩芳 王正国 周继红 许民辉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第9期1034-1037,共4页
目的:研究促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin-releasing hormone,CRH)对下丘脑神经元内CREB(CAMP-responsive element-binding protein)含量变化的调节作用。方法:取孕17d胎鼠下丘脑分散培养下丘脑神经元,采用PTI(Photon technolo... 目的:研究促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin-releasing hormone,CRH)对下丘脑神经元内CREB(CAMP-responsive element-binding protein)含量变化的调节作用。方法:取孕17d胎鼠下丘脑分散培养下丘脑神经元,采用PTI(Photon technology international,PTI)荧光成像系统测量下丘脑神经元胞浆内游离钙浓度([Ca2+]i)变化;测量和分析外源性CRH对培养下丘脑神经元内钙信号变化的影响,用Western blot方法测定神经元内P-CREB的含量变化,分别与用细胞膜L-型钙通道拮抗剂尼莫地平或CRH1受体(CRH1R)特异性拮抗剂CP-154526处理下丘脑神经元后[Ca2+]i和P-CREB的变化作比较。结果:正常对照组的下丘脑神经元[Ca2+]i含量较低,外源性CRH刺激后,[Ca2+]i立即升高;预先应用尼莫地平或CP-154526处理再用CRH刺激的神经元[Ca2+]i含量的增加明显被抑制,同时也可明显抑制神经元内P-CREB含量的增加。结论:在急性应激反应中,CRH可直接与下丘脑神经元CRH1R结合,开放膜L-型钙离子通道促使钙离子内流使[Ca2+]i明显增加,从而进一步激活神经元内P-CREB信号通路。说明在调节下丘脑神经元激活过程中CRH可能起了重要的作用。 展开更多
关键词 钙通道 下丘脑神经元 p-creb 促肾上腺皮质激素释放激素
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泻根醇酸对NMDA诱导的PC12细胞损伤的保护作用研究 被引量:2
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作者 张胜男 李煌 +5 位作者 张玉琴 徐伟 陈立典 黄枚 褚克丹 阙金花 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期139-142,162,共5页
钙离子内流、Ca2+/钙调蛋白(Ca M)依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和c AMP应答元件结合蛋白(CREB)的磷酸化是NMDA诱导细胞凋亡的重要过程。本实验探讨了泻根醇酸(BA)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及可能机制。MTT法... 钙离子内流、Ca2+/钙调蛋白(Ca M)依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和c AMP应答元件结合蛋白(CREB)的磷酸化是NMDA诱导细胞凋亡的重要过程。本实验探讨了泻根醇酸(BA)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及可能机制。MTT法测定细胞活力、测定LDH释放率、Fura-2/AM荧光标记法测定细胞内钙离子浓度,Western blot法测定CaMKⅡ、p-CaMKⅡ、CREB、p-CREB、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果显示,与模型组相比,BA给药组细胞活力显著升高,LDH释放减少,[Ca2+]i降低,p-CREB,Bcl-2表达上调,Bax表达下调。BA能够通过Ca2+-CaMKⅡ-CREB信号通路保护NMDA诱导的PC12细胞损伤,进而有望成为脑缺血疾病的神经保护药物。 展开更多
关键词 泻根醇酸 脑缺血 PC12细胞 CA2+ Bcl-2 Bax p-CaMKⅡ p-creb
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阿尔茨海默病与野生型小鼠海马中CREB1活性差异研究 被引量:1
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作者 王玲 李先发 +4 位作者 陈蒙 王谦 杨群 苏波 刘洋 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期956-959,990,共5页
目的:检测阿尔茨海默病(Alzhemer’s disease,AD)和野生型对照组小鼠海马CREB1蛋白的活性及意义。方法:D-半乳糖90 mg/(kg·d)联合三氯化铝(Al Cl3)40 mg/(kg·d)连续90 d腹腔注射制造AD小鼠模型;通过糖水偏好实验及Y-迷宫实验... 目的:检测阿尔茨海默病(Alzhemer’s disease,AD)和野生型对照组小鼠海马CREB1蛋白的活性及意义。方法:D-半乳糖90 mg/(kg·d)联合三氯化铝(Al Cl3)40 mg/(kg·d)连续90 d腹腔注射制造AD小鼠模型;通过糖水偏好实验及Y-迷宫实验初步鉴定模型复制成功;免疫组化检测、比较AD及野生型对照组小鼠海马CA1、CA3和DG区CREB1和p-CREB1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,AD模型组小鼠糖水偏好百分比明显下降(P<0.01)。AD组小鼠对新异臂的空间辨别能力明显低于野生型对照组(P﹤0.01)。与野生型对照组相比,AD小鼠海马CA1、CA3和DG区CREB1、p-CREB1蛋白阳性表达强度低,阳性颗粒数目少(P﹤0.01)。结论:D-半乳糖联合Al Cl3通过抑制海马组织关键核转录因子CREB1的活性,影响神经元的存活、损伤后的修复及神经细胞再生,导致小鼠学习记忆能力受损,进而引起AD的发生、发展。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 CREB1 p-creb1 海马
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牛蒡苷元干预CREB/BDNF信号通路保护Aβ_(25-35)损伤神经元的研究 被引量:4
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作者 孙东 杨静娴 +6 位作者 张囡 张晓丹 胡昱 赵丹 郝海光 李红艳 康廷国 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第2期288-290,I0005,I0006,共5页
目的:探讨牛蒡苷元对β淀粉样肽(β–amyloid,Aβ)所致小鼠神经元损伤的保护作用。方法:从乳鼠大脑皮层分离、纯化神经元,制备Aβ25-35损伤神经元模型,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测牛蒡苷元(0、0.1、1、10、25、50μmol·L-1)对... 目的:探讨牛蒡苷元对β淀粉样肽(β–amyloid,Aβ)所致小鼠神经元损伤的保护作用。方法:从乳鼠大脑皮层分离、纯化神经元,制备Aβ25-35损伤神经元模型,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测牛蒡苷元(0、0.1、1、10、25、50μmol·L-1)对受损神经元存活率的影响,用免疫荧光细胞化学法检测牛蒡苷元最佳浓度对受损神经元磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)水平和脑源性神经营养因子(BDNF)表达量的影响。结果:1μmol·L-1牛蒡苷元能显著提高Aβ25-35损伤神经元的存活率,并使神经元的p-CREB和BDNF表达水平显著提高。结论:牛蒡苷元能够有效对抗Aβ诱导的神经元损伤,此作用可能与牛蒡苷元激活p-CREB/BDNF信号通路有关。 展开更多
关键词 牛蒡苷元 Β淀粉样肽 磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白 脑源性神经营养因子
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独活香豆素对Aβ所致神经元损伤的神经保护作用研究 被引量:4
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作者 闫宇辉 李少恒 +5 位作者 孔亮 教亚男 姚璎珈 陶震宇 宋捷 杨静娴 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期1714-1717,I0003,共5页
目的:探究独活香豆素(TCA)对Aβ所致的小鼠海马神经元损伤的神经保护作用及其作用机理。方法:从胎鼠大脑海马中分离出神经元细胞,培养9 d待神经元成熟后将细胞分为正常组(control)、模型组(30 mmol/L Aβ孵育24 h)和给药组(经Aβ处理后... 目的:探究独活香豆素(TCA)对Aβ所致的小鼠海马神经元损伤的神经保护作用及其作用机理。方法:从胎鼠大脑海马中分离出神经元细胞,培养9 d待神经元成熟后将细胞分为正常组(control)、模型组(30 mmol/L Aβ孵育24 h)和给药组(经Aβ处理后给予不同浓度TCA处理的细胞)。MTT法和LDH法检测各组海马神经元的活性,RTPCR法检测环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的变化,免疫组织化学染色法检测突触素-1(synapsin^(-1))、磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和BDNF蛋白表达的变化。结果:孵育Aβ的海马神经元显现较强神经毒性。与模型组比较,TCA组明显增强神经细胞的存活能力,增加synapsin^(-1)的表达量,提高BDNF mRNA的表达,增强p-CREB和BDNF蛋白的表达。结论:TCA对Aβ所致的海马神经元损伤具有保护作用,此神经保护作用可能是与促进CREB的磷酸化使p-CREB表达增多,并刺激神经营养因子BDNF的生成增多有关。 展开更多
关键词 独活香豆素 阿尔茨海默病 海马神经元 磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白 脑源性神经营养因子
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吗啡对原代培养大鼠皮质神经元神经甾体水平的影响 被引量:5
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作者 江平 侯艳宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1489-1493,共5页
目的探讨吗啡慢性处理对大鼠大脑皮质神经元合成释放神经甾体水平的影响及其机制。方法建立原代培养大鼠大脑皮质神经元吗啡依赖样模型,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体水平;免疫印迹法检测神经元中p-CRE... 目的探讨吗啡慢性处理对大鼠大脑皮质神经元合成释放神经甾体水平的影响及其机制。方法建立原代培养大鼠大脑皮质神经元吗啡依赖样模型,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体水平;免疫印迹法检测神经元中p-CREB水平。结果与盐水对照组相比,吗啡(1μmol.L-1)处理使PREG和DS的水平降低(P<0.01);μ-受体激动剂DAMGO使PREG、DS和PS水平下降,AP水平增高;与吗啡单独处理组相比,μ-阿片受体拮抗剂CTAP与吗啡联合处理使PREG增加(P<0.01)。与盐水对照组相比,吗啡或DAMGO慢性处理均可增加神经元内p-CREB的水平(P<0.01);与吗啡处理组相比,CTAP抑制吗啡诱导的p-CREB的增加。结论μ-阿片受体参与了介导吗啡慢性处理对皮质神经元神经甾体合成释放的影响;神经元内p-CREB水平的变化反映了吗啡引起的神经元适应性改变,提示神经甾体水平的变化可能与吗啡依赖有关。 展开更多
关键词 阿片受体 吗啡 神经甾体 神经元 磷酸化cAMP反 应元件结合蛋白
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