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水稻OsAFB4蛋白原核表达体系创建
1
作者
冉乐
郭小浩
+2 位作者
黄冉涛
舒庆尧
郭芾
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期827-837,共11页
OsAFB4基因编码一类水稻生长素受体蛋白,其缺失可使水稻对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)和毒莠定产生抗性。为研究Os AFB4蛋白的功能、特性以及与生长素类除草剂的互作关系,需建立起Os AFB4蛋白的原核表达体...
OsAFB4基因编码一类水稻生长素受体蛋白,其缺失可使水稻对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)和毒莠定产生抗性。为研究Os AFB4蛋白的功能、特性以及与生长素类除草剂的互作关系,需建立起Os AFB4蛋白的原核表达体系。本研究将Os AFB4基因分别克隆到原核表达载体p ET-32a、p GEX-4T和pMAL-C6T中,随后将pET-32a-OsAFB4转化至大肠埃希菌OverExpress C43(DE3)、Rosseta2(DE3)和ER2566感受态细胞,将pGEX-4T-OsAFB4转化至大肠埃希菌OverExpress C43(DE3)和Rosseta2(DE3)感受态细胞,将pMAL-C6T-OsAFB4转化至OverExpress C43(DE3)、Rosseta2(DE3)和TB1感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白,在不同诱导时间、诱导温度和IPTG浓度下对诱导条件进行优化。蛋白质凝胶电泳结果表明,OsAFB4蛋白原核表达的最佳诱导条件为利用200μmol/L IPTG,于23℃下诱导12 h。该体系的建立为后续生长素受体的功能研究及抗生长素类除草剂位点的开发奠定了基础。
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关键词
生长素受体
原核表达
osafb4基因
水稻
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职称材料
题名
水稻OsAFB4蛋白原核表达体系创建
1
作者
冉乐
郭小浩
黄冉涛
舒庆尧
郭芾
机构
浙江大学农业与生物技术学院
浙江大学海南研究院
南阳市科学院
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期827-837,共11页
基金
国家自然科学基金项目(32201834)。
文摘
OsAFB4基因编码一类水稻生长素受体蛋白,其缺失可使水稻对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)和毒莠定产生抗性。为研究Os AFB4蛋白的功能、特性以及与生长素类除草剂的互作关系,需建立起Os AFB4蛋白的原核表达体系。本研究将Os AFB4基因分别克隆到原核表达载体p ET-32a、p GEX-4T和pMAL-C6T中,随后将pET-32a-OsAFB4转化至大肠埃希菌OverExpress C43(DE3)、Rosseta2(DE3)和ER2566感受态细胞,将pGEX-4T-OsAFB4转化至大肠埃希菌OverExpress C43(DE3)和Rosseta2(DE3)感受态细胞,将pMAL-C6T-OsAFB4转化至OverExpress C43(DE3)、Rosseta2(DE3)和TB1感受态细胞,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白,在不同诱导时间、诱导温度和IPTG浓度下对诱导条件进行优化。蛋白质凝胶电泳结果表明,OsAFB4蛋白原核表达的最佳诱导条件为利用200μmol/L IPTG,于23℃下诱导12 h。该体系的建立为后续生长素受体的功能研究及抗生长素类除草剂位点的开发奠定了基础。
关键词
生长素受体
原核表达
osafb4基因
水稻
Keywords
auxin receptor
prokaryotic expression
osafb
4
gene
rice
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S511.22 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
水稻OsAFB4蛋白原核表达体系创建
冉乐
郭小浩
黄冉涛
舒庆尧
郭芾
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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