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瘦蛋白对体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA表达的影响
1
作者 牛淑玲 张才 +3 位作者 夏成 王哲 梁冠生 徐闯 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1149-1153,共5页
取单层生长良好的脂肪细胞，采用单因素试验，分别添加浓度为5ng／mL外源牛重组瘦蛋白（每12h添加1次）不添加作为对照至4、12、24、36、48和72h后提取总RNA，每个处理3个重复（孔），应用竞争RT-PCR法检测外源瘦蛋白对初生犊牛脂肪细胞... 取单层生长良好的脂肪细胞，采用单因素试验，分别添加浓度为5ng／mL外源牛重组瘦蛋白（每12h添加1次）不添加作为对照至4、12、24、36、48和72h后提取总RNA，每个处理3个重复（孔），应用竞争RT-PCR法检测外源瘦蛋白对初生犊牛脂肪细胞Leptin长型受体（Ob—Rb）表达水平的影响，结果与对照组相比在12～24h内随着培养时间的增加，脂肪细胞Ob—Rb表达水平量亦显著增加（P〈0．01），之后其表达量逐渐回降，在48～72h趋于平稳（P〉0．05）。结果表明，在一定时间内瘦蛋白可提高体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 瘦蛋白 脂肪细胞 ob-rb MRNA 体外培养
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大熊猫卵巢OB-Rb、NPY的蛋白表达与分布研究
2
作者 罗启慧 王承东 +4 位作者 李德生 邓林华 李才武 陈正礼 黄超 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第12期2000-2006,共7页
为了探究瘦素长型受体(OB-Rb)与神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)在大熊猫生殖调控中的作用,运用HE法、免疫组化SABC法观察了5例大熊猫卵巢组织学结构及OB-Rb、NPY在卵巢的表达与分布。结果显示:大熊猫卵巢各级卵泡数量较少,尤以中晚期生长... 为了探究瘦素长型受体(OB-Rb)与神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)在大熊猫生殖调控中的作用,运用HE法、免疫组化SABC法观察了5例大熊猫卵巢组织学结构及OB-Rb、NPY在卵巢的表达与分布。结果显示:大熊猫卵巢各级卵泡数量较少,尤以中晚期生长卵泡更甚,原始卵泡和闭锁卵泡相对多见。OB-Rb和NPY在卵巢上均有表达,其中OB-Rb主要分布在颗粒细胞、卵泡膜细胞及黄体的粒黄体细胞;NPY阳性纤维和产物不均匀分布于卵巢各个部位,呈串珠状或点状。NPY阳性神经纤维主要位于血管周围、卵泡、黄体以及颗粒细胞中。大熊猫卵巢卵泡数量少的特征可能与其生殖能力低下有关;OB-Rb和NPY参与了卵巢卵泡发育的调控。 展开更多
关键词 NPY ob-rb 免疫组化 卵巢 大熊猫
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猪初情期前后瘦素长型受体Ob-Rb mRNA在垂体内表达变化的研究
3
作者 倪黎纲 周春宝 +1 位作者 韩大勇 唐现文 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第11期5672-5673,5727,共3页
[目的]观察猪初情期前后瘦素长型受体Ob-RbmRNA在垂体内的表达变化,探讨其与猪初情期发育的关系。[方法]随机选取苏姜猪120日龄、初情期、180日龄各3头,屠宰,采集垂体组织,提取垂体组织总RNA,设计引物,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测... [目的]观察猪初情期前后瘦素长型受体Ob-RbmRNA在垂体内的表达变化,探讨其与猪初情期发育的关系。[方法]随机选取苏姜猪120日龄、初情期、180日龄各3头,屠宰,采集垂体组织,提取垂体组织总RNA,设计引物,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测垂体内Ob-RbmRNA表达变化。[结果]在三个时期猪的垂体内都能检测到Ob-RbmRNA的表达,初情期表达量最低,与120日龄比较差异显著(P<0.05),与180日龄比较差异不显著(P>0.05)。[结论]低表达量的Ob-RbmRNA有利于初情期的发生。 展开更多
关键词 初情期 ob-rb基因 荧光定量RT-PCR
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猪Ob-Rb基因的克隆与分析 被引量：1
4
作者 朱达文 周春宝 +1 位作者 倪黎纲 韩大勇 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第35期17404-17405,共2页
[目的]采用RT-PCR法克隆与分析瘦素受体Ob-RbcDNA序列。[方法]从160日龄初情期的苏姜猪的下丘脑中提取组织总RNA,根据GenBank中猪Ob-RbmRNA全序列设计引物,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得1条343 bp的片段,将PCR产物... [目的]采用RT-PCR法克隆与分析瘦素受体Ob-RbcDNA序列。[方法]从160日龄初情期的苏姜猪的下丘脑中提取组织总RNA,根据GenBank中猪Ob-RbmRNA全序列设计引物,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得1条343 bp的片段,将PCR产物克隆于pGEM-Teasy载体后进行测序分析。[结果]用紫外分光光度计检测所提取的RNA质量,OD260/OD280=1.9,证明所提RNA的质量较好,无降解和蛋白质污染;用1%的琼脂糖检测所提RNA,有3条清晰的条带,分别是28S、18S、5S,28S与18S浓度比约为2∶1,说明所提的RNA的完整性较好。所获Ob-RbcDNA序列用Blast程序与在GenBank中发表的猪Ob-RbcDNA序列(AF092422)比较表明,其同源性为100%,说明所扩增的序列是正确的。[结论]该研究为进一步探索Ob-Rb基因组织表达和作用机理奠定了理论基础。 展开更多
关键词 猪 Ob—Rb基因 克隆 序列分析
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猪大脑皮质、海马结构、梨状叶和杏仁核内leptin长形受体mRNA的分布定位 被引量：4
5
作者 雷治海 王红星 +2 位作者 武枫林 丁菲 谭湘陵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期206-210,共5页
用分子生物学的方法合成了leptin长形受体 (Ob Rb)反意和正意核酸探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2～ 3月龄母猪端脑一些结构内Ob RbmRNA的分布定位。结果表明 ,猪Ob RbmRNA分布于大脑皮质、梨状叶、海马、齿状回和杏仁核。大脑皮质和梨... 用分子生物学的方法合成了leptin长形受体 (Ob Rb)反意和正意核酸探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2～ 3月龄母猪端脑一些结构内Ob RbmRNA的分布定位。结果表明 ,猪Ob RbmRNA分布于大脑皮质、梨状叶、海马、齿状回和杏仁核。大脑皮质和梨状叶内的Ob RbmRNA标记神经元主要位于第Ⅱ Ⅵ层 ,分子层偶见标记神经元。海马结构内的Ob RbmRNA标记神经元主要位于海马的锥体细胞层和齿状回的颗粒层 ,在海马的始层和齿状回的多形层偶见标记神经元 ,在海马的辐射层和腔隙层罕见标记细胞。实验结果弥补了猪端脑内Ob RbmRNA分布定位资料的空白 ,为理解leptin的生理功能提供了形态学基础。 展开更多
关键词 ob-rb 基因表达 大脑皮质 海马结构 梨状叶 杏仁核 猪 原位杂交
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SIF干预肥胖大鼠下丘脑瘦素介导JAK/STAT信号通路的研究 被引量：2
6
作者 陈晓林 罗启慧 +3 位作者 唐秀莹 刘芸 李立科 陈正礼 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期420-427,共8页
通过观察SIF对肥胖大鼠下丘脑中瘦素介导的信号通路蛋白表达的影响,探讨SIF对肥胖大鼠的干预机制。采用高脂饲料饲喂大鼠,建立肥胖动物模型,并将肥胖大鼠分为4组,分别灌胃SIF,剂量为:对照组(Ⅰ组)0 mg·kg^(–1)、低剂量组(Ⅱ组)50 ... 通过观察SIF对肥胖大鼠下丘脑中瘦素介导的信号通路蛋白表达的影响,探讨SIF对肥胖大鼠的干预机制。采用高脂饲料饲喂大鼠,建立肥胖动物模型,并将肥胖大鼠分为4组,分别灌胃SIF,剂量为:对照组(Ⅰ组)0 mg·kg^(–1)、低剂量组(Ⅱ组)50 mg·kg^(–1)、中剂量组(Ⅲ组)150 mg·kg^(–1)、高剂量组(Ⅳ组)450 mg·kg^(–1),并设置正常大鼠基础组(Ⅴ组),饲喂基础饲料,并灌胃给予SIF处理等体积的羧甲基纤维素钠,连续4周。采用HE染色法观察下丘脑组织学结构变化,免疫组织化学SABC法检测下丘脑中瘦素介导的JAK/STAT信号转导通路蛋白OB-Rb(瘦素受体长型),JAK2(内源性酪氨酸蛋白激酶2),p-STAT3(磷酸化的信号转导与转录激活子3),SOCS3(细胞因子信号3抑制因子),NPY(神经肽Y)的表达水平。结果显示:高剂量组和基础组OB-Rb,JAK2,p-STAT3的阳性表达水平显著高于其他组(P<0.05),且前述蛋白均有随SIF的剂量增加而表达增多趋势。高剂量组和基础组的SOCS3和NPY表达水平显著较其他组低(P<0.05),但NPY在背内侧核和室旁核的表达随SIF的剂量增加而增多。OB-Rb,JAK2,p-STAT3,SOCS3和NPY均在下丘脑广泛表达,并随SIF的剂量增加而变化,提示SIF对瘦素介导的信号通路有一定作用并与机体能量的调节密切相关;SIF通过干预大鼠下丘脑瘦素JAK/STAT信号通路具有减重作用,并呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 免疫组织化学SABC法 ob-rb JAK2 P-STAT3 SOCS3 NPY
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Leptin长形受体mRNA与LHRH在猪前脑内共存
7
作者 李庆梅 雷治海 +2 位作者 陈敏 苏娟 邓碧华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1079-1082,共4页
为了寻找Leptin在下丘脑水平调控生殖内分泌的形态学证据,用原位杂交和免疫组织化学相结合的方法,研究了5头三元杂交仔猪前脑内Leptin长形受体(OB-Rb)mRNA和黄体生成素释放激素(LHRH)免疫反应阳性物质的共存关系.结果表明,OB-Rb mRNA和L... 为了寻找Leptin在下丘脑水平调控生殖内分泌的形态学证据,用原位杂交和免疫组织化学相结合的方法,研究了5头三元杂交仔猪前脑内Leptin长形受体(OB-Rb)mRNA和黄体生成素释放激素(LHRH)免疫反应阳性物质的共存关系.结果表明,OB-Rb mRNA和LHRH免疫反应阳性神经元在下丘脑、海马结构、大脑皮层和杏仁核内共存,即上述结构内一些表达Leptin长形受体mRNA的神经元也含有LHRH免疫反应阳性物质.在下丘脑,双阳性神经元主要位于室旁核、室周核、腹内侧核、外侧区、弓状核;在大脑皮层(额叶和顶叶)内,双阳性神经元主要位于Ⅲ～V层;在海马结构内,双阳性神经元主要位于齿状回的多形层和颗粒层以及海马的锥体细胞层.结果提示,Leptin可能通过其受体直接作用于下丘脑的促性腺激素释放激素(GnRH)神经元调节动物的生殖和内分泌活动. 展开更多
关键词 猪 ob-rb LHRH 前脑 原位杂交 免疫组化
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大豆异黄酮对大鼠肠道上皮内淋巴细胞、杯状细胞及瘦素长型受体的影响 被引量：9
8
作者 唐秀莹 陈正礼 +1 位作者 罗启慧 张小龙 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期343-350,共8页
大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;... 大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;然后将筛选出的肥胖大鼠分别灌胃剂量为对照(I:0mg/kg)、低(Ⅱ:50mg/kg)、中(Ⅲ:150mg/kg)、高剂量(Ⅳ:450mg/kg)的大豆异黄酮,并设置基础对照组(Ⅴ:溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),连续4周用HE、PAS染色观察小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量和分布变化;用免疫组织化学SABC法测定瘦素受体(长型)水平。结果表明:大鼠上皮内淋巴细胞以小型淋巴细胞为主,主要分布于上皮的基底膜附近;大鼠杯状细胞分布在肠黏膜上皮层;瘦素受体(长型)阳性细胞分布于黏膜层。应用大豆异黄酮高剂量组较对照组大鼠的肠黏膜上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜瘦素受体(长型)水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明大豆异黄酮在一定程度上可促进大鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 大鼠 上皮内淋巴细胞 杯状细胞 瘦素受体(长型)
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奶牛乳腺中瘦素及其受体的表达与定位 被引量：6
9
作者 郭洪波 林叶 +2 位作者 李庆章 边艳杰 肖阳 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第6期8-11,共4页
为探讨瘦素在奶牛乳腺发育、泌乳及退化各时期的表达变化规律及在乳腺组织中的具体位置,采用免疫印迹(western blot-ting)技术及激光共聚焦技术检测奶牛乳腺组织中瘦素及瘦素受体(OB-Rb)的表达变化及其定位。结果表明,瘦素在青春期表达... 为探讨瘦素在奶牛乳腺发育、泌乳及退化各时期的表达变化规律及在乳腺组织中的具体位置,采用免疫印迹(western blot-ting)技术及激光共聚焦技术检测奶牛乳腺组织中瘦素及瘦素受体(OB-Rb)的表达变化及其定位。结果表明,瘦素在青春期表达量较高,在泌乳期表达量最低。瘦素受体在青春期和妊娠期表达量较高,泌乳期表达量相对较低,退化期逐渐恢复到妊娠期水平。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺组织 瘦素 长型瘦素受体
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水牛胚胎附植过程中瘦素及其受体在子宫内膜中的表达 被引量：1
10
作者 朱云干 夏剑 卞桂华 《安徽农业科学》 CAS 2013年第4期1553-1554,共2页
[目的]探讨瘦素及其受体ob-Rb在水牛子宫内膜中的表达规律及其对水牛胚胎附植的影响。[方法]母水牛经孕马血清促性腺激素(PMSG)超排后与公牛交配,分别在交配后第0、5、7、9和15天各屠宰10头水牛,分别取胚胎附植部位的子宫组织,提取瘦素... [目的]探讨瘦素及其受体ob-Rb在水牛子宫内膜中的表达规律及其对水牛胚胎附植的影响。[方法]母水牛经孕马血清促性腺激素(PMSG)超排后与公牛交配,分别在交配后第0、5、7、9和15天各屠宰10头水牛,分别取胚胎附植部位的子宫组织,提取瘦素及其受体总RNA。利用RT-PCR方法检测不同时期瘦素mRNA及其受体表达情况。[结果]瘦素在胚胎附植过程中在水牛子宫内膜都有表达,各时期的表达水平差异不明显(P>0.05),Ob-Rb在胚胎附植过程中亦有表达,但是交配后第7、9和15天的表达水平与0和5天差异显著(P<0.05),并且在妊娠期0～7天内表达水平上升,7天达到峰值,然后下降。[结论]瘦素及其受体Ob-Rb可能不仅参与胚胎的附植,而且也可能参与附植后胚胎的生长发育。 展开更多
关键词 水牛 瘦素 ob-rb 子宫内膜 附植
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