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题名基于酵母双杂交的微囊藻毒素检测系统初探
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作者
潘晓
沈萍萍
华子春
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机构
南京大学医药生物技术国家重点实验室
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出处
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期201-206,共6页
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基金
国家自然科学基金(30425009)资助
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文摘
微囊藻毒素是由淡水微囊藻产生的次生代谢物,结构为环状七肽,分子量约1000Da,对生物机体具有多种毒理作用,是一类较强的肿瘤促进剂,目前没有比较简单便宜的藻毒素检测方法,本文探索建立利用酵母双杂交系统进行藻毒素检测的方法。前期实验已用噬菌体表面展示肽库技术从随机12和7肽库中筛选获得若干与藻毒素有相互作用的多肽。本文分别挑选其中亲和力较高的3个多肽,构建到酵母双杂交系统中,将不同的肽段分别融合在含有Ac-tive Domain和Binding Domain的表达载体中,共转化酵母菌株AH109,然后测定β-半乳糖苷酶活性来反映下游报告基因半乳糖苷酶的表达情况,从而通过反映培养基里面是否含有藻毒素,进而利用此方法来比较方便地检测藻毒素。
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关键词
微囊藻毒素
酵母双杂交
onpg(邻硝基苯-β-d-半乳吡喃糖苷)
β-Gal(β-半乳糖苷酶)
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Keywords
Microcystins
Yeast two-hybrid
onpg
β-Gal
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分类号
Q5-33
[生物学—生物化学]
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