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CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)协同促进脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞增殖与迁移 被引量:2
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作者 杨春秀 屈已白 闫征征 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期198-204,共7页
目的探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法使用1 mg/L LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞建立体外炎症细胞模型,采用CCK-8法检测CpG ODN(500 nmol/L)对LPS诱导的巨噬细胞增殖的影响,... 目的探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞增殖与迁移能力的影响及机制。方法使用1 mg/L LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞建立体外炎症细胞模型,采用CCK-8法检测CpG ODN(500 nmol/L)对LPS诱导的巨噬细胞增殖的影响,采用TranswellTM实验检测CpG ODN对细胞迁移能力的影响;采用Western blot法检测p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶(ERK)、核因子κBp65(NF-κB p65)的蛋白磷酸化水平,同时使用以上通路的抑制剂SB203580、SP600125、PD98059、BAY11-7082,探讨CpG ODN发挥效应的机制;采用实时定量PCR检测CpG ODN对LPS诱导产生的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、环加氧酶2(COX2)mRNA水平的影响。结果CpG ODN协同促进LPS诱导的巨噬细胞增殖与迁移,并促进COX2、MCP-1的转录,增强JNK、ERK信号通路蛋白的磷酸化水平,并且JNK与ERK信号通路激酶抑制剂可有效降低CpG ODN的协同效应。结论CpG ODN可通过JNK与ERK途径协同促进LPS诱导的巨噬细胞增殖与迁移并促进COX2、MCP-1的转录。 展开更多
关键词 CpG寡脱氧核苷(CpG odn) 脂多糖(LPS) 细胞增殖 细胞迁移 RAW264.7巨噬细胞
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C型CpG单链寡核苷酸对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用 被引量:4
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作者 王学菊 王智博 +4 位作者 卫红飞 吴秀丽 王莉 于永利 王丽颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期338-340,342,共4页
目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用... 目的研究C型CpG单链寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对肿瘤疫苗抑瘤效果的增强作用。方法利用体外淋巴细胞增生实验和病毒保护实验确定新C型CpG ODN,采用小鼠体内抑瘤实验观察CpG ODN对肿瘤疫苗HSP65-MUC1重组蛋白抑制MUC1阳性肿瘤生长的增强作用,并对小鼠血清中抗HSP65-MUC1抗体的类型进行了初步鉴定。结果自行设计的CpG ODN BW005能刺激人PBMC和小鼠脾细胞增生,其刺激后的培养上清具有保护Vero E6细胞免受VSV感染的作用,属于新型C型CpG ODN。将BW005与HSP65-MUC1联合应用于C57BL/6小鼠后,MUC1阳性肿瘤的发生明显延缓(平均44.8d),其终末肿瘤发生率最低(33.33%);荷瘤小鼠的生存期明显延长(平均49.5d),其终末生存率最高(66.67%)。小鼠血清中抗HSP65和抗MUC1的IgG2a抗体水平增加。结论C型CpG ODN可以增强肿瘤疫苗HSP65-MUC1的抑瘤效果,考虑与小鼠体内Th1环境的形成有关。 展开更多
关键词 CPG odn(单链寡脱氧核苷) HSP-MUC1融合蛋白 肿瘤免疫治疗
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乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人肝癌细胞株乙酰肝素酶表达的影响 被引量:2
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作者 王顺祥 吴晓慧 +1 位作者 周少英 彭利 《实用医学杂志》 CAS 2005年第14期1494-1496,共3页
目的:探讨乙酰肝素酶(Hpa)反义寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞株Hpa mRNA和蛋白表达的影响。方法:设计合成互补于Hpa mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体Oligofectamine^(TM) Rea... 目的:探讨乙酰肝素酶(Hpa)反义寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞株Hpa mRNA和蛋白表达的影响。方法:设计合成互补于Hpa mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体Oligofectamine^(TM) Reagent包埋后转染SMMC-7721、BEL-7402细胞,以RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞Hpa mRNA以及蛋白表达的变化。结果:与正常对照组和NS-ODN相应浓度组相比,转染AS-ODN组肝癌细胞Hp amRNA和蛋白的表达均下降。结论:Hpa反义寡脱氧核苷酸下调Hpa mRNA和蛋白的表达,可能抑制肝癌的侵袭转移。 展开更多
关键词 人肝癌细胞株 乙酰肝素酶 反义寡核苷 反义寡脱氧核苷 BEL-7402细胞 酶表达 Reagent Western mRNA 阳离子脂质体 BLOT检测 RT-PCR 蛋白表达 Hpa 正常对照组 设计合成 起始密码 SMMC 侵袭转移 odn 转染 包埋后 AS
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MT01对牙龈卟啉单胞菌感染成骨细胞MG63中Ⅰ型胶原mRNA表达的促进作用及其意义 被引量:3
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作者 刘引 申玉芹 +5 位作者 高涵 费鸿博 胡天琦 李洋洋 顾中一 林崇韬 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期681-684,I0002,共5页
目的:检测单链寡脱氧核苷酸MT01作用下牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染成骨细胞MG63中Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA表达水平,探讨MT01对感染状态下成骨细胞成骨向分化的影响。方法:体外培养的MG63细胞分为空白对照组、MT01组、Pg组和MT01+Pg组。按分组... 目的:检测单链寡脱氧核苷酸MT01作用下牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染成骨细胞MG63中Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA表达水平,探讨MT01对感染状态下成骨细胞成骨向分化的影响。方法:体外培养的MG63细胞分为空白对照组、MT01组、Pg组和MT01+Pg组。按分组情况进行相应处理,加入MT01(质量浓度1mg·L-1),以1mg·L-1PBS作对照共孵育3h后,以100∶1的感染复数(MOI)加入Pg悬液共培养。4组细胞分别孵育2、4、6、8、12和24h后采用RT-PCR法检测MG63细胞中ColⅠmRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,MT01和MT01+Pg组MG63细胞中ColⅠmRNA表达水平在2和4h时无明显变化(P>0.05),8、12和24h时MT01组细胞中ColⅠmRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与Pg组比较,2和4h时MT01+Pg组细胞中ColⅠmRNA呈低表达,6、8、12和24h时ColⅠmRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论:MT01上调感染状态下MG63细胞中ColⅠmRNA的表达水平,MT01可促进感染状态下成骨细胞成骨向分化。 展开更多
关键词 单链寡脱氧核苷MT01 牙龈卟啉单胞菌 人成骨细胞 Ⅰ型胶原
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