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植物半胱氨酸合成酶复合体(SAT/OAS-TL)研究进展
被引量:
6
1
作者
刘明坤
刘关君
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第24期10344-10347,共4页
综述了植物半胱氨酸的合成调节和半胱氨酸合成酶复合体的结构、调节机理及其植物转基因的研究进展。
关键词
乙
酰
丝
氨
酸
转移
酶
o-
乙
酰
丝
氨
酸
硫
解
酶
半胱
氨
酸
合成
酶
复合体
转
基因
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职称材料
大肠杆菌cysE和cysM基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
被引量:
2
2
作者
方堃
白丁平
陈玉林
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011年第11期35-40,共6页
【目的】克隆大肠杆菌半胱氨酸合成酶(包括丝氨酸乙酰转移酶(cysE)和O-乙酰丝氨酸硫化氢解酶(cysM))的基因,对其进行原核表达,并制备相应蛋白的抗体。【方法】用PCR方法从大肠杆菌BL21(DE3)中扩增cysE和cysM基因,构建其原核表达载体pET3...
【目的】克隆大肠杆菌半胱氨酸合成酶(包括丝氨酸乙酰转移酶(cysE)和O-乙酰丝氨酸硫化氢解酶(cysM))的基因,对其进行原核表达,并制备相应蛋白的抗体。【方法】用PCR方法从大肠杆菌BL21(DE3)中扩增cysE和cysM基因,构建其原核表达载体pET32a(+)-cysE和pET32a(+)-cysM,对其进行BamHⅠ和SacⅠ双酶切鉴定和测序验证后转入大肠杆菌中进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot(以His抗体作为一抗)检测。用纯化的cysE和cysM蛋白作为抗原免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价。【结果】PCR获得了822bp的cysE基因和912bp的cysM基因。原核表达质粒pET32a(+)-cysE和pET32a(+)-cysM构建成功,并可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达的cysE和cysM重组蛋白分子质量分别为56和58ku。制备的多克隆抗体具有较强的免疫结合活性,抗体滴度均达到1∶102 400。【结论】成功克隆了大肠杆菌cysE和cysM基因,并实现了原核表达,同时制备出了相应的多克隆抗体。
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关键词
大肠杆菌
丝
氨
酸
乙
酰
转移
酶
基因
o-乙酰丝氨酸硫化氢解酶基因
基因
克隆
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职称材料
鱼腥草对金黄色葡萄球菌生物被膜干预作用研究
被引量:
5
3
作者
廖芯
李晨曦
+4 位作者
何佳
罗煜
屈谦伟
王爽
周永辉
《中兽医医药杂志》
CAS
2022年第2期26-29,F0002,共5页
研究鱼腥草水提物对金黄色葡萄球菌生物被膜的干预作用。采用微量肉汤稀释法测定鱼腥草水提物对金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003的最低抑菌浓度;采用结晶紫染色法、扫描电镜及激光共聚焦显微镜评估鱼腥草水提物对CMCC(B)26003生物被膜形成...
研究鱼腥草水提物对金黄色葡萄球菌生物被膜的干预作用。采用微量肉汤稀释法测定鱼腥草水提物对金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003的最低抑菌浓度;采用结晶紫染色法、扫描电镜及激光共聚焦显微镜评估鱼腥草水提物对CMCC(B)26003生物被膜形成的影响;最后采用实时荧光定量PCR方法测定鱼腥草水提物对O-乙酰丝氨酸硫化氢裂解酶B(O-acetylserine sulfhydrylase-B)cysM基因转录的影响。结果显示,鱼腥草水提物在12.500 mg/mL、6.250 mg/mL、3.125 mg/mL质量浓度下均可以有效抑制金黄色葡萄球菌生物被膜的形成,在12.500 mg/mL质量浓度下可下调cysM基因的表达。鱼腥草可能通过下调cysM基因的表达而抑制金黄色葡萄球菌生物被膜的形成。
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关键词
鱼腥草
金黄色葡萄球菌
生物被膜
干预
o-
乙
酰
丝
氨
酸
硫化氢
裂
解
酶
B
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职称材料
题名
植物半胱氨酸合成酶复合体(SAT/OAS-TL)研究进展
被引量:
6
1
作者
刘明坤
刘关君
机构
东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第24期10344-10347,共4页
基金
黑龙江省重点攻关项目(GB06B303)资助
文摘
综述了植物半胱氨酸的合成调节和半胱氨酸合成酶复合体的结构、调节机理及其植物转基因的研究进展。
关键词
乙
酰
丝
氨
酸
转移
酶
o-
乙
酰
丝
氨
酸
硫
解
酶
半胱
氨
酸
合成
酶
复合体
转
基因
Keywords
Serine acetyltransferase
o-
acetylserine (thiol) lyase
Cysteine synthase complex
Transgene
分类号
Q946.5 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
大肠杆菌cysE和cysM基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
被引量:
2
2
作者
方堃
白丁平
陈玉林
机构
西北农林科技大学动物科技学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011年第11期35-40,共6页
基金
农业部转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08008-002)
文摘
【目的】克隆大肠杆菌半胱氨酸合成酶(包括丝氨酸乙酰转移酶(cysE)和O-乙酰丝氨酸硫化氢解酶(cysM))的基因,对其进行原核表达,并制备相应蛋白的抗体。【方法】用PCR方法从大肠杆菌BL21(DE3)中扩增cysE和cysM基因,构建其原核表达载体pET32a(+)-cysE和pET32a(+)-cysM,对其进行BamHⅠ和SacⅠ双酶切鉴定和测序验证后转入大肠杆菌中进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot(以His抗体作为一抗)检测。用纯化的cysE和cysM蛋白作为抗原免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价。【结果】PCR获得了822bp的cysE基因和912bp的cysM基因。原核表达质粒pET32a(+)-cysE和pET32a(+)-cysM构建成功,并可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达的cysE和cysM重组蛋白分子质量分别为56和58ku。制备的多克隆抗体具有较强的免疫结合活性,抗体滴度均达到1∶102 400。【结论】成功克隆了大肠杆菌cysE和cysM基因,并实现了原核表达,同时制备出了相应的多克隆抗体。
关键词
大肠杆菌
丝
氨
酸
乙
酰
转移
酶
基因
o-乙酰丝氨酸硫化氢解酶基因
基因
克隆
Keywords
Escherichia coli
cysE gene
cysM gene
gene cloning
分类号
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
鱼腥草对金黄色葡萄球菌生物被膜干预作用研究
被引量:
5
3
作者
廖芯
李晨曦
何佳
罗煜
屈谦伟
王爽
周永辉
机构
贵州中医药大学第二临床医学院
东北农业大学动物医学学院
贵州中医药大学基础医学院
出处
《中兽医医药杂志》
CAS
2022年第2期26-29,F0002,共5页
基金
大学生创新创业训练项目[贵中医大创合字(2020)10号]
贵州中医药大学博士启动基金项目[贵中医博士启动金(2020)60号]
国家自然科学基金青年科学基金项目(31902327)。
文摘
研究鱼腥草水提物对金黄色葡萄球菌生物被膜的干预作用。采用微量肉汤稀释法测定鱼腥草水提物对金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003的最低抑菌浓度;采用结晶紫染色法、扫描电镜及激光共聚焦显微镜评估鱼腥草水提物对CMCC(B)26003生物被膜形成的影响;最后采用实时荧光定量PCR方法测定鱼腥草水提物对O-乙酰丝氨酸硫化氢裂解酶B(O-acetylserine sulfhydrylase-B)cysM基因转录的影响。结果显示,鱼腥草水提物在12.500 mg/mL、6.250 mg/mL、3.125 mg/mL质量浓度下均可以有效抑制金黄色葡萄球菌生物被膜的形成,在12.500 mg/mL质量浓度下可下调cysM基因的表达。鱼腥草可能通过下调cysM基因的表达而抑制金黄色葡萄球菌生物被膜的形成。
关键词
鱼腥草
金黄色葡萄球菌
生物被膜
干预
o-
乙
酰
丝
氨
酸
硫化氢
裂
解
酶
B
Keywords
Herba Houttuyniae
Staphylococcus aureus
biofilm
inhibition
o-
acetylserine sulfhydrylase-B
分类号
S859.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
植物半胱氨酸合成酶复合体(SAT/OAS-TL)研究进展
刘明坤
刘关君
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大肠杆菌cysE和cysM基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
方堃
白丁平
陈玉林
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
鱼腥草对金黄色葡萄球菌生物被膜干预作用研究
廖芯
李晨曦
何佳
罗煜
屈谦伟
王爽
周永辉
《中兽医医药杂志》
CAS
2022
5
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职称材料
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