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O型口蹄疫病毒磁微粒化学发光抗体检测方法的建立
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作者 耿玉静 白晶晶 +5 位作者 刘慧芳 李长印 张鹏翼 原小燕 吴彬 李玉婉 《中国动物检疫》 2025年第6期87-91,共5页
为建立一种高通量全自动磁微粒化学发光O型口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)免疫抗体检测方法,利用O型FMDV-VP1结构蛋白和酶标单抗,通过各反应条件优化,建立O型FMDV免疫抗体磁微粒化学发光检测方法。结果显示:当所建方法... 为建立一种高通量全自动磁微粒化学发光O型口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)免疫抗体检测方法,利用O型FMDV-VP1结构蛋白和酶标单抗,通过各反应条件优化,建立O型FMDV免疫抗体磁微粒化学发光检测方法。结果显示:当所建方法检测临界值(S/N)≤0.8时,O型FMDV抗体阳性;当S/N>0.8时,O型FMDV抗体阴性。与5种常见病原的免疫血清不存在交叉反应,特异性良好;对敏感性质控血清的最低检出量为1:1 024,批间批内变异系数均在10%以内,与标准方法的符合率达到95.9%。结果表明该方法具有较高的敏感性和特异性、重复性。本研究为O型FMDV免疫抗体检测提供一种高效的检测方法。 展开更多
关键词 o型fmdv 磁微粒化学发光 酶标抗体 敏感性 特异性
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O型口蹄疫病毒VP1基因及其多表位基因的原核表达与纯化鉴定 被引量:1
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作者 何奇松 陈磊 +7 位作者 颜健华 许瑞胜 易春华 韦达有 冯淑萍 黄胜斌 梁晟 熊毅 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期472-477,共6页
【目的】通过原核表达并纯化获得O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因及其多表位基因的重组蛋白,为建立O型FMDV抗体ELISA检测试剂盒及制备动物高免血清提供技术支持。【方法】以O型FMDV VP1全基因重组质粒p MD18-T-T-VP1及串联的VP1多表位基因... 【目的】通过原核表达并纯化获得O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因及其多表位基因的重组蛋白,为建立O型FMDV抗体ELISA检测试剂盒及制备动物高免血清提供技术支持。【方法】以O型FMDV VP1全基因重组质粒p MD18-T-T-VP1及串联的VP1多表位基因重组质粒p MD18-T-O-VP1为模板,通过特异性引物扩增并回收目的基因,构建重组质粒p ET-32a-VP1和p GEX-6p-1-VP1,然后转入大肠杆菌BL211(DE3)中诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting对融合蛋白进行分析鉴定。【结果】O型FMDV的VP1基因及其多表位基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到正确表达,表达的两种融合蛋白主要以包涵体形式存在,纯度较高,且均能与猪抗O型FMDV阳性血清发生特异性结合,具有良好的反应原性。【结论】表达获得的融合蛋白具有良好的反应原性,可作为包被抗原应用于O型FMDV抗体检测试剂盒研发。 展开更多
关键词 o型fmdv VP1基因 多表位基因 原核表达 纯化 鉴定
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ECMS对O-Asia Ⅰ型FMD疫苗免疫功能增强的初探
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作者 刘迪文 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第1期5-7,共3页
目的证实ECMS增强O-Asia I型FMDV疫苗免疫功能的有效性,选择ECMS使用的有效浓度及诱导抗体的维持时间。方法本文用ELISA法测定了免疫后3、6、14周O型FMDV VP1及AsiaI型FMDV抗体的滴度。结果与结论与疫苗组和阳性组对照,100μgECMS诱导O-... 目的证实ECMS增强O-Asia I型FMDV疫苗免疫功能的有效性,选择ECMS使用的有效浓度及诱导抗体的维持时间。方法本文用ELISA法测定了免疫后3、6、14周O型FMDV VP1及AsiaI型FMDV抗体的滴度。结果与结论与疫苗组和阳性组对照,100μgECMS诱导O-Asia I型FMDV疫苗产生两种抗体的效价较高,维持时间较长。相对来讲,ECMS诱导O型FMDV疫苗的抗体含量较高,但下降较快;诱导Asia I型FMDV疫苗的抗体较低,但下降非常缓慢。100μgECMS的效果优于公认的皂树皂甙(QA)佐剂。 展开更多
关键词 木鳖子提取物 o型fmdv VP1抗体效价 ASIA Ifmdv抗体效价 免疫反应
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