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基于电喷雾电离质谱的人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02的N-糖链的定性定量比较 被引量:8
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作者 潘丽英 王承健 +3 位作者 袁江北 张英 黄琳娟 王仲孚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期237-243,共7页
以培养的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,采用细胞裂解液提取总蛋白,用PNGase F酶解释放N-糖链,以微晶纤维素柱结合石墨碳柱纯化分离N-糖链,通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对N-糖链进行序列鉴定,以β-环... 以培养的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,采用细胞裂解液提取总蛋白,用PNGase F酶解释放N-糖链,以微晶纤维素柱结合石墨碳柱纯化分离N-糖链,通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对N-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精为内标对2种细胞系的N-糖链进行了定量比较分析.结果表明,在肝癌细胞系HepG2和正常细胞系L02中共检测到26种N-糖链,与L02相比,HepG2的大多数高甘露糖型糖链、唾液酸化糖链和岩藻糖基化糖链的数量都明显升高,其中有15种糖链在数量上具有极显著性差异(p<0.01),1种糖链具有显著性差异(p<0.05).本研究为进一步探索肝癌中各类N-糖链的表达特点及发现早期肝癌糖链标志物提供了参考. 展开更多
关键词 原发性肝癌细胞(HepG2) 正常肝细胞(l02) N-糖链 电喷雾电离质谱
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去甲肾上腺素对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响 被引量:1
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作者 施媛萍 罗光华 +2 位作者 郑璐 魏江 于洋 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第47期5-8,共4页
目的观察去甲肾上腺素(NE)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响。方法体外培养HepG2细胞和L-02细胞,分别加入不同浓度NE处理,继续培养,采用MTT法观察细胞增殖情况,HE染色和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞形态学变化... 目的观察去甲肾上腺素(NE)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响。方法体外培养HepG2细胞和L-02细胞,分别加入不同浓度NE处理,继续培养,采用MTT法观察细胞增殖情况,HE染色和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术观察细胞凋亡情况。结果经0.1、1、10、50μmol/L NE处理24、48 h,HepG2细胞OD值显著下降(P均<0.05),L-02细胞OD值无明显变化。10μmol/L NE作用于HepG2细胞可见典型的凋亡形态学改变,胞质收缩、深染,核染色质浓缩;L-02细胞在NE作用前后形态学均无明显改变。HepG2细胞加入10μmol/L NE后部分细胞呈绿色(为早期凋亡表现),加入50μmol/L NE后部分细胞膜呈绿色,细胞核呈红色(为晚期凋亡表现);L-02细胞均未显示有荧光。0.1、1、10μmol/L NE作用于HepG2细胞24 h后,其凋亡率均显著高于对照组(0μmol/L NE),且呈剂量依赖关系(P均<0.05);而上述浓度NE作用于L-02细胞24 h后,其凋亡率较对照组先增高后降低(P均<0.05)。结论 NE可以抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,而对L-02细胞增殖和凋亡没有影响,提示其在特定类型肝癌临床治疗中具有潜在价值。 展开更多
关键词 去甲肾上腺素 人肝癌细胞HEPG2 人正常肝细胞l-02 细胞增殖 细胞凋亡
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梓白皮、桑白皮和楸树皮对H_2O_2致损的L-O2肝细胞的保护作用 被引量:4
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作者 吴军 王明艳 周春祥 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期254-258,共5页
目的研究梓白皮、楸树皮和桑白皮对体外H2O2致损肝细胞的保护作用及其机制。方法采用H2O2(100μmol/L)体外诱导L-O2肝细胞损伤,CCK-8法检测细胞活性,检测细胞上清中天门冬氨酸转换酶(AST)、丙氨酸氨基转换酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)... 目的研究梓白皮、楸树皮和桑白皮对体外H2O2致损肝细胞的保护作用及其机制。方法采用H2O2(100μmol/L)体外诱导L-O2肝细胞损伤,CCK-8法检测细胞活性,检测细胞上清中天门冬氨酸转换酶(AST)、丙氨酸氨基转换酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,ELISA法检测细胞中TNF-α和IL-1水平,流式细胞术检测细胞周期。结果 H2O2可以改变L-O2细胞的形态结构,抑制其活性;促进细胞代偿性增殖;提高细胞AST、ALT和TNF-α、IL-1的水平;降低细胞SOD活性。而梓白皮、楸树皮和桑白皮可拮抗H2O2对细胞的损伤。结论梓白皮、楸树皮和桑白皮对H2O2致损的LO2肝细胞有保护作用。 展开更多
关键词 梓白皮 楸树皮 桑白皮 l-O2细胞 过氧化氢 保护作用
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二苯乙烯苷对正常人肝细胞增殖的抑制率及影响因素研究 被引量:9
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作者 李娜 马致洁 +10 位作者 孟雅坤 王亚 李晓菲 涂灿 张雅铭 牛明 赵艳玲 肖小河 康廷国 游云 王伽伯 《中国药物警戒》 2015年第7期385-388,共4页
目的以L-02细胞为载体,考察不同因素(谷胱甘肽、过氧化氢、温度等)对不同质量浓度的二苯乙烯苷(300μg·m L-1、600μg·m L-1、1 200μg·m L-1,分别相当于740μmol·L-1、1 480μmol·L-1、2 960μmol·L-1)... 目的以L-02细胞为载体,考察不同因素(谷胱甘肽、过氧化氢、温度等)对不同质量浓度的二苯乙烯苷(300μg·m L-1、600μg·m L-1、1 200μg·m L-1,分别相当于740μmol·L-1、1 480μmol·L-1、2 960μmol·L-1)肝细胞增殖抑制率的影响。方法培养的人肝L-02细胞分别给以经不同组合方式(与谷胱甘肽或H2O2组合给药)或不同处理方式(与H2O2组合于不同温度蒸干重溶)处理的二苯乙烯苷,采用MTS法检测二苯乙烯苷对人肝L-02细胞的吸光度,并通过公式计算抑制率,比较各组抑制率差异值。结果低浓度二苯乙烯苷(300μg·m L-1)对肝细胞增殖几乎无抑制作用;中浓度(600μg·m L-1)呈现一定抑制作用,加入谷胱甘肽(GSH)后抑制作用消失;高浓度二苯乙烯苷(1 200μg·m L-1)随着GSH加入量的增加,抑制率显著下降,与阳性对照药野百合碱(MCT)(1600μg·m L-1,相当于4.92×103μmol·L-1)表现一致。二苯乙烯苷3个浓度对肝细胞增殖的抑制率(6%、25%和82%)有显著性差异,而加入不同体积分数的H2O2(0.5%和1%)对抑制率的影响变化不大。二苯乙烯苷经水溶解并于不同温度(常温、50℃和90℃)及p H 3条件下蒸干,所得样品对L-02细胞增殖的抑制率与未经处理的二苯乙烯苷组比较,没有明显变化。结论二苯乙烯苷在一定浓度范围内对肝细胞增殖有不同程度的抑制作用,且该作用与氧化或水解关系不大,具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 何首乌 谷胱甘肽 肝损伤 l-02细胞
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黄曲霉毒素的细胞毒性及机制 被引量:5
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作者 徐明芳 耿梦梦 《乳业科学与技术》 2018年第3期1-9,共9页
以正常人肝细胞(L-02细胞)为研究对象,根据细胞增殖率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量等指标的变化研究黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)的毒性作用及氧化应激损伤,选用VC作为AFB_1损... 以正常人肝细胞(L-02细胞)为研究对象,根据细胞增殖率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量等指标的变化研究黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)的毒性作用及氧化应激损伤,选用VC作为AFB_1损伤肝细胞的保护剂,通过比色法测定细胞的相对存活率,从细胞周期的变化和细胞凋亡率研究AFB_1引起L-02细胞凋亡的程度及机制。结果表明:根据AFB_1的半数细胞抑制率(inhibition of cell,IC)(IC_(50))值,选择AFB_1组的暴露质量浓度为40?μg/m L,VC的质量浓度选择在细胞活性最高区域的0.025~0.250 mg/m L;当VC质量浓度≥0.5 mg/m L时,细胞活性与AFB_1损伤组相近;对于L-02细胞,VC处理组及VC+AFB_1处理组细胞的ROS水平较空白对照组高,但较AFB_1处理组低,表明添加VC能够帮助L-02细胞降低胞内MDA水平、减小拮抗氧化损伤;通过细胞凋亡及细胞周期检测,发现AFB_1造成L-02细胞中晚期凋亡的细胞所占比例较大,添加VC能有效抑制细胞凋亡的发生;在细胞周期的检测中发现,AFB_1能够造成L-02细胞发生G_0/G1期阻滞;添加VC后,各细胞周期指标与空白对照组接近。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 液态乳 风险评估 人胚胎肝细胞(l-02细胞) 氧化应激
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