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腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究
1
作者
王震
陈运通
+5 位作者
魏天悦
陈洪岩
王旭光
高玉龙
夏长友
孟庆文
《中国家禽》
北大核心
2025年第2期27-33,共7页
鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价...
鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价。结果显示:使用CRISPR/Cas9腺病毒载体介导的ssODNs同源重组方案可以在chNHE1中引入突变,其中36%单克隆细胞株存在W38缺失;T37缺失的细胞对ALV-J感染具备极显著的抗性;W38缺失的细胞对ALV-J感染具有完全抗性,同时具有E35A替换、P36缺失、T37缺失的细胞对ALV-J感染也具有完全抗性。研究表明,CRISPR/Cas9腺病毒载体可以有效地编辑鸡DF-1细胞,W38缺失或E35A替换P36、T37缺失都可以使DF-1对ALV-J感染具有抗性,该方案为培育抗ALV-J感染的基因编辑鸡提供技术储备。
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关键词
J亚群禽白血病病毒
鸡Na^(+)/H^(+)交换蛋白
-
1
腺病毒载体
CRISPR/Cas9
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职称材料
人肺癌细胞转录因子——C/EBP和HMG样蛋白的EMSA检测
2
作者
吴国明
钱桂生
+3 位作者
周玉国
黄桂君
姚伟
陆俊羽
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第10期1173-1175,共3页
目的 检测人肺癌细胞中是否存在与Na+ H+ 交换蛋白 1(NHE 1)基因转录相关的重要转录因子———C EBP和HMG样蛋白。方法 采用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测人肺癌细胞株核蛋白中C EBP和HMG样蛋白的表达及其水平。结果 EMSA检测到...
目的 检测人肺癌细胞中是否存在与Na+ H+ 交换蛋白 1(NHE 1)基因转录相关的重要转录因子———C EBP和HMG样蛋白。方法 采用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测人肺癌细胞株核蛋白中C EBP和HMG样蛋白的表达及其水平。结果 EMSA检测到A5 49细胞和转染NHE 1反义载体的A5 49细胞均有转录因子C EBP和HMG样蛋白的表达 ,且后者表达水平高于前者 ;采用 5 0倍未标记的片段能完全抑制相应转录因子与32 P标记的相同片段的结合。结论 A5 49细胞核蛋白中存在能与C EBP结合序列和Poly(dA∶dT)区结合的转录因子 ,即C EBP和HMG样蛋白 ,后者的表达水平高于前者。特异性竞争抑制试验表明外源性特异DNA片段能抑制相同片段与转录因子的结合。
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关键词
肺癌
转录因子
HMG样蛋白
Na^+/H^+交换蛋白
-
1
转录调控
电泳迁移率改变分析
C/EBP样蛋白
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职称材料
题名
腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究
1
作者
王震
陈运通
魏天悦
陈洪岩
王旭光
高玉龙
夏长友
孟庆文
机构
新疆农业大学动物科学学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室
出处
《中国家禽》
北大核心
2025年第2期27-33,共7页
基金
国家重点研发计划项目(2022YFF0710501、2022YFF0711005)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302022018)。
文摘
鸡Na^(+)/H^(+)离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体,是ALV-J感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价。结果显示:使用CRISPR/Cas9腺病毒载体介导的ssODNs同源重组方案可以在chNHE1中引入突变,其中36%单克隆细胞株存在W38缺失;T37缺失的细胞对ALV-J感染具备极显著的抗性;W38缺失的细胞对ALV-J感染具有完全抗性,同时具有E35A替换、P36缺失、T37缺失的细胞对ALV-J感染也具有完全抗性。研究表明,CRISPR/Cas9腺病毒载体可以有效地编辑鸡DF-1细胞,W38缺失或E35A替换P36、T37缺失都可以使DF-1对ALV-J感染具有抗性,该方案为培育抗ALV-J感染的基因编辑鸡提供技术储备。
关键词
J亚群禽白血病病毒
鸡Na^(+)/H^(+)交换蛋白
-
1
腺病毒载体
CRISPR/Cas9
Keywords
avian leukosis virus subgroup J
chNHE
1
adenovirus vector
CRISPR/Cas9
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
人肺癌细胞转录因子——C/EBP和HMG样蛋白的EMSA检测
2
作者
吴国明
钱桂生
周玉国
黄桂君
姚伟
陆俊羽
机构
第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所
重庆市大足县人民医院内科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第10期1173-1175,共3页
基金
重庆市科委应用基础项目基金资助 ( 2 0 0 0 )
文摘
目的 检测人肺癌细胞中是否存在与Na+ H+ 交换蛋白 1(NHE 1)基因转录相关的重要转录因子———C EBP和HMG样蛋白。方法 采用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测人肺癌细胞株核蛋白中C EBP和HMG样蛋白的表达及其水平。结果 EMSA检测到A5 49细胞和转染NHE 1反义载体的A5 49细胞均有转录因子C EBP和HMG样蛋白的表达 ,且后者表达水平高于前者 ;采用 5 0倍未标记的片段能完全抑制相应转录因子与32 P标记的相同片段的结合。结论 A5 49细胞核蛋白中存在能与C EBP结合序列和Poly(dA∶dT)区结合的转录因子 ,即C EBP和HMG样蛋白 ,后者的表达水平高于前者。特异性竞争抑制试验表明外源性特异DNA片段能抑制相同片段与转录因子的结合。
关键词
肺癌
转录因子
HMG样蛋白
Na^+/H^+交换蛋白
-
1
转录调控
电泳迁移率改变分析
C/EBP样蛋白
Keywords
Na +/H +
exchanger
1
transcription regulation
electrophoretic mobility shift assay
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒载体介导编辑chNHE1基因对J亚群禽白血病病毒抗性研究
王震
陈运通
魏天悦
陈洪岩
王旭光
高玉龙
夏长友
孟庆文
《中国家禽》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
人肺癌细胞转录因子——C/EBP和HMG样蛋白的EMSA检测
吴国明
钱桂生
周玉国
黄桂君
姚伟
陆俊羽
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
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职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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