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NT4-p53(N15)-Ant融合基因重组腺病毒的构建与鉴定被引量：3: 1; 作者宋丽萍李跃萍 +2 位作者邱曙东杨广笑王全颖《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期214-218,共5页; 目的:构建编码融合基因NT4-p53(N15)-Ant的重组腺病毒表达载体,为进一步基因治疗的实验研究奠定基础。方法:利用PCR体系延伸互为模板的引物,通过T载体克隆法获得p53(N15)-Ant基因克隆,酶切后连入pBV220/NT4质粒,再将融合基因NT4-p53(N15... 展开更多; 关键词 nt4-p53(n15)-ant 重组腺病毒肿瘤基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

NT4-p53(N15)-Ant融合基因的克隆和鉴定被引量：4: 2; 作者宋丽萍李跃萍 +2 位作者邱曙东杨广笑王全颖《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期333-336,共4页; 目的构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒... 展开更多; 关键词 p53(n15)-ant nt4信号肽基因克隆肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

NT4p53(N15)Ant重组腺病毒对肝癌细胞腹腔种植瘤的治疗作用被引量：2: 3; 作者吴学元白斌 +1 位作者张党锋马巍《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期73-76,107,共5页; 目的研究NT4p53(N15)Ant融合基因重组腺病毒预先感染ICR小鼠腹腔后,对肝癌细胞株H22腹腔种植瘤的治疗作用。方法将16只ICR小鼠随机平均分成2组,分别于腹腔内预先感染Ad-NT4p53(N15)Ant(治疗组)及等量空病毒(对照组)。将H22细胞悬液接种... 展开更多; 关键词 nt4p53(n15)Ant 重组腺相关病毒肝癌凋亡癌转移腹水; 在线阅读下载PDF 职称材料

介导p73去阻抑肽表达的重组腺伴病毒的构建和鉴定被引量：1: 4; 作者白艳霞闫利英 +2 位作者马清涌杨广笑王全颖《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期180-184,189,共6页; 目的构建编码融合基因NT4-p53(N37)-HA2-TAT的重组腺伴病毒表达载体,为恶性肿瘤基因治疗的实验研究奠定基础。方法采用互补引物二次PCR法以及T载体克隆法获得p53(N37)基因克隆,酶切后将其连同穿膜肽HA2-TAT片段一起连入pUC19/NT4质粒,... 展开更多; 关键词 nt4-p53(n37)-ha2-tat p53(n37) P73 重组腺伴病毒恶性肿瘤基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NT4-p53(N15)-Ant融合基因重组腺病毒的构建与鉴定被引量：3: 1; 作者宋丽萍李跃萍邱曙东杨广笑王全颖; 机构西安交通大学第一附属医院放疗科西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系西安华广生物工程公司; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期214-218,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30471942) 陕西省科技攻关项目(2004k11-G3); 文摘目的:构建编码融合基因NT4-p53(N15)-Ant的重组腺病毒表达载体,为进一步基因治疗的实验研究奠定基础。方法:利用PCR体系延伸互为模板的引物,通过T载体克隆法获得p53(N15)-Ant基因克隆,酶切后连入pBV220/NT4质粒,再将融合基因NT4-p53(N15)-Ant亚克隆至腺病毒的穿梭质粒内,与辅助质粒PJM17共同转染HEK-293细胞,通过同源重组获得重组腺病毒Ad.NT4-p53(N15)-Ant,收集病毒上清,大量扩增并测定其滴度,用RT-PCR检测目的基因在293细胞的表达情况。MTT比色法观察重组病毒对HepG2细胞存活率的影响。结果:克隆出p53(N15)-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;得到高滴度的(1×1011pfu/ml)重组腺病毒表达载体;反转录聚合酶链反应证实感染Ad.NT4-p53(N15)-Ant的293细胞中有目的基因的表达。Ad.NT4-p53(N15)-Ant对HepG2细胞有强烈的杀伤作用,与Ad.GFP比较,NT4p53(N15)Ant重组腺病毒处理组HepG2细胞的存活率明显降低。结论:通过分子克隆体外重组技术成功制备了NT4-p53(N15)-Ant复制缺陷型重组腺病毒,为下一步的肿瘤基因治疗奠定了基础。; 关键词 nt4-p53(n15)-ant 重组腺病毒肿瘤基因治疗; Keywords nt4-p53 （ n15 ） -ant recombinant adenovirus carcinoma gene therapy; 分类号 R733 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NT4-p53(N15)-Ant融合基因的克隆和鉴定被引量：4: 2; 作者宋丽萍李跃萍邱曙东杨广笑王全颖; 机构西安交通大学医学院第一附属医院放疗科西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系西安华广生物工程公司; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期333-336,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30471942) 陕西省科技攻关项目(No.2004k11-G3); 文摘目的构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒。结果克隆了p53(N15)-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;重组质粒pBV220/NT4p53(N15)Ant经限制性内切酶及琼脂糖凝胶电泳,结果显示酶切片段大小和理论值一致。结论通过分子克隆体外重组技术成功制备了含有NT4-p53(N15)-Ant表达盒的pBV220质粒,为进一步开展肿瘤的基因治疗奠定了基础。; 关键词 p53(n15)-ant nt4信号肽基因克隆肿瘤; Keywords p53（n15）-ant nt4 signal peptide gene clon carcinoma; 分类号 R512.3 [医药卫生—内科学] R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NT4p53(N15)Ant重组腺病毒对肝癌细胞腹腔种植瘤的治疗作用被引量：2: 3; 作者吴学元白斌张党锋马巍; 机构西安交通大学医学院第一附属医院骨科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期73-76,107,共5页; 文摘目的研究NT4p53(N15)Ant融合基因重组腺病毒预先感染ICR小鼠腹腔后,对肝癌细胞株H22腹腔种植瘤的治疗作用。方法将16只ICR小鼠随机平均分成2组,分别于腹腔内预先感染Ad-NT4p53(N15)Ant(治疗组)及等量空病毒(对照组)。将H22细胞悬液接种于小鼠腹腔,建立小鼠腹腔泛发性种植瘤模型。根据小鼠生长情况、生存期以及腹水瘤细胞形态、细胞凋亡率和小鼠腹腔内瘤体重量等结果,评价Ad-NT4p53(N15)Ant对H22细胞种植瘤及癌性腹水的治疗效果。结果成功构建了小鼠腹腔泛发性种植瘤动物模型。与对照组相比,Ad-NT4p53(N15)Ant组小鼠生存期延长、腹水的产生时间延迟,腹水中多核巨细胞减少,细胞凋亡及坏死的比率升高,腹腔内瘤体的质量减少。结论 Ad-NT4p53(15)Ant可有效抑制H22肝癌细胞腹腔移植瘤生长,延迟腹水形成,诱导体内腹水瘤细胞凋亡及坏死,延长小鼠生存期。; 关键词 nt4p53(n15)Ant 重组腺相关病毒肝癌凋亡癌转移腹水; Keywords nt4p5 3 （n15） Ant recombinant adenovirus liver cancer apoptosis cancer raetastasis ascites; 分类号 R735 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名介导p73去阻抑肽表达的重组腺伴病毒的构建和鉴定被引量：1: 4; 作者白艳霞闫利英马清涌杨广笑王全颖; 机构西安交通大学医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科西安华广生物工程公司; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期180-184,189,共6页; 基金国家自然科学基金青年项目(No.81102056) 西安交通大学医学创新基金(No.GH0203115)~~; 文摘目的构建编码融合基因NT4-p53(N37)-HA2-TAT的重组腺伴病毒表达载体,为恶性肿瘤基因治疗的实验研究奠定基础。方法采用互补引物二次PCR法以及T载体克隆法获得p53(N37)基因克隆,酶切后将其连同穿膜肽HA2-TAT片段一起连入pUC19/NT4质粒,再将融合基因NT4-p53(N37)-HA2-TAT亚克隆至腺伴病毒的穿梭质粒pSSHG-CMV中,构建重组质粒pSSHG-CMV/NT4-p53(N37)-HA2-TAT并进行酶切鉴定;应用磷酸钙沉淀法,pSSHG-CMV/NT4-p53(N37)-HA2-TAT、辅助质粒pAAV-Ad,腺病毒全基因组质粒pFG140三种质粒共转染HEK293细胞,包装出重组腺伴病毒rAAV/NT4-p53(N37)-HA2-TAT并用斑点杂交法测定重组病毒的滴度;MTT比色法、流式细胞仪观察重组腺伴病毒rAAV/NT4-p53(N37)-HA2-TAT对HepG2细胞的抑制作用。结果克隆出p53(N37)基因,经酶切及测序证实结果正确;得到高滴度的(2×1013pfu/L)重组腺伴病毒表达载体并对HepG2细胞有明显的抑制作用,且这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的。结论通过分子克隆体外重组技术成功制备了rAAV/NT4-p53(N37)-HA2-TAT复制缺陷型重组腺伴病毒,为下一步开展在p53突变或缺失肿瘤中针对p73的靶向性肿瘤基因治疗研究奠定了基础。; 关键词 nt4-p53(n37)-ha2-tat p53(n37) P73 重组腺伴病毒恶性肿瘤基因治疗; Keywords nt4-p53(n37)-HA2-TAT p53(n37) p73 recombinant adeno-associated virus malignant tumor gene therapy; 分类号 R73.3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	NT4-p53(N15)-Ant融合基因重组腺病毒的构建与鉴定	宋丽萍李跃萍邱曙东杨广笑王全颖	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	NT4-p53(N15)-Ant融合基因的克隆和鉴定	宋丽萍李跃萍邱曙东杨广笑王全颖	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	NT4p53(N15)Ant重组腺病毒对肝癌细胞腹腔种植瘤的治疗作用	吴学元白斌张党锋马巍	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	介导p73去阻抑肽表达的重组腺伴病毒的构建和鉴定	白艳霞闫利英马清涌杨广笑王全颖	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料