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布尼亚病毒非结构蛋白NSs与RNA沉默被引量：2: 1; 作者陶宏征杨宝菊刘雅婷《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期656-661,共6页; 布尼亚病毒科含5个属,350多种病毒,寄主范围包括植物、动物和人类,主要通过节肢动物传播(仅有汉坦病毒属通过啮齿动物传播),其中大部分病毒危害严重,影响农业生产,威胁人类和动物健康,造成重大经济损失。NSs蛋白是布尼亚病毒S RNA编码... 展开更多; 关键词布尼亚病毒科 RNA沉默 nss蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

番茄斑萎病毒属病毒非结构蛋白NSs的生物信息学分析被引量：1: 2; 作者郑宽瑜董家红 +3 位作者苏晓霞方琦郑雪张仲凯《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期646-651,共6页; 番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒编码的非结构蛋白NSs,可能在病毒复制、转录、抑制RNA沉默中起重要作用,本文利用生物信息方法对21个Tospovirus病毒成员的NSs序列进行分析,为进一步研究NSs的功能提供参考信息。从GenBank数据库中下载NS... 展开更多; 关键词番茄斑萎病毒属非结构蛋白 nss 生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白被引量：3: 3; 作者赵星月陈建斌 +9 位作者王曙光张晓林穆野魏辉赵立华陈永对郑雪陈勇郑立敏张洁《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期735-743,共9页; 【目的】筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus,TZSV)NSs蛋白互作的介体因子。【方法】利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白... 展开更多; 关键词西花蓟马酵母双杂交番茄环纹斑点病毒 nss蛋白 VDAC; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型阿卡斑病毒NSs蛋白生物信息学分析及多克隆抗体制备被引量：4: 4; 作者蔡畅陈赫威 +9 位作者宋瑞鹏覃绍敏刘金凤秦树英孙倩陈童锦悦欧长波刘兴友马玲吴健敏《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2015-2026,共12页; 【目的】对新型阿卡斑病毒(Akabane virus,AKAV)非结构蛋白(non-structura,NSs)进行生物信息学分析,进而制备抗多克隆抗体,为新型AKAV检测及功能研究提供必要材料。【方法】使用蛋白生物信息学在线分析网站,对新型AKAV NSs蛋白进行系统... 展开更多; 关键词新型阿卡斑病毒(AKAV) nss蛋白生物信息学原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名布尼亚病毒非结构蛋白NSs与RNA沉默被引量：2: 1; 作者陶宏征杨宝菊刘雅婷; 机构云南农业大学植物保护学院云南红河学院生命科学与技术学院生物系云南农业大学农学与生物技术学院生物技术与生理生化系; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期656-661,共6页; 基金国家自然科学基金项目(No.31471828 31260451 +2 种基金 30960224) 云南省重点新产品开发计划项目(No.2014BB005)~~; 文摘布尼亚病毒科含5个属,350多种病毒,寄主范围包括植物、动物和人类,主要通过节肢动物传播(仅有汉坦病毒属通过啮齿动物传播),其中大部分病毒危害严重,影响农业生产,威胁人类和动物健康,造成重大经济损失。NSs蛋白是布尼亚病毒S RNA编码的非结构蛋白质,可以抑制RNA沉默,在侵染介体和寄主的过程中起时发挥重要作用。在植物寄主中,NSs蛋白通过与病毒dsRNA结合、抑制dsRNA次生扩增、长距离传播等机制抑制RNA沉默;在动物、人类寄主以及传播介体中,多种证据表明,NSs蛋白也能抑制RNA沉默。RNA沉默是植物和节肢动物中主要的抗病毒机制之一,NSs蛋白抑制RNA沉默对于病毒成功侵染寄主或传播介体非常重要。本文就近年来NSs蛋白在抑制RNA沉默方面的研究做一综述。; 关键词布尼亚病毒科 RNA沉默 nss蛋白; Keywords bunyavirus RNA silencing the nss protein; 分类号 S4 [农业科学—植物保护]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番茄斑萎病毒属病毒非结构蛋白NSs的生物信息学分析被引量：1: 2; 作者郑宽瑜董家红苏晓霞方琦郑雪张仲凯; 机构云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所; 出处《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期646-651,共6页; 基金 “973”计划前期研究专项(2010CB134501) 国家自然科学基金(31060237); 文摘番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒编码的非结构蛋白NSs,可能在病毒复制、转录、抑制RNA沉默中起重要作用,本文利用生物信息方法对21个Tospovirus病毒成员的NSs序列进行分析,为进一步研究NSs的功能提供参考信息。从GenBank数据库中下载NSs基因序列,用DNAMAN5.0做NSs相似性矩阵分析,发现一些Tospovirus病毒成员之间的NSs氨基酸序列相似性很低,最低仅为7.1%;用ClustalX2.1进行NSs的氨基酸多序列比对分析,发现Tospovirus病毒成员的NSs相对保守区主要位于NSs的C端的位置,高度保守的氨基酸位点共有9个;PROSITE对NSs进行模体预测分析,结果显示Tospovirus病毒NSs共有的蛋白修饰:C蛋白激酶磷酸化、酪蛋白激酶II磷酸化和N-酰基化。此外,不同种的Tospovirus病毒NSs模体也表现出了多样性的特点。预测结果为下一步研究NSs功能奠定了基础。; 关键词番茄斑萎病毒属非结构蛋白 nss 生物信息学; Keywords Tospovirus Non-structural protein nss Bioinformatic; 分类号 S436.412 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白被引量：3: 3; 作者赵星月陈建斌王曙光张晓林穆野魏辉赵立华陈永对郑雪陈勇郑立敏张洁; 机构西南林业大学生命科学学院云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所湖南省农业科学院植物保护研究所福建省农业科学院植物保护研究所; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期735-743,共9页; 基金国家自然科学基金项目(31560499,31871936,31860498,31960531,31871935) 云南省应用基础研究计划重点项目(2018FA020) 国家重点研发计划政府间/港澳台重点专项项目(2018YFE0112600)。; 文摘【目的】筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus,TZSV)NSs蛋白互作的介体因子。【方法】利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况。再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系。【结果】构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性。序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like,VDAC)。酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作。GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用。【结论】通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作。这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制,为虫传病毒病的防治提供理论基础。; 关键词西花蓟马酵母双杂交番茄环纹斑点病毒 nss蛋白 VDAC; Keywords Franiklinella ocicdentalis yeast two-hybrid tomato zonate spot virus nss protein VDAC; 分类号 S436 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型阿卡斑病毒NSs蛋白生物信息学分析及多克隆抗体制备被引量：4: 4; 作者蔡畅陈赫威宋瑞鹏覃绍敏刘金凤秦树英孙倩陈童锦悦欧长波刘兴友马玲吴健敏; 机构广西壮族自治区兽医研究所河南科技学院动物科技学院农业农村部(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西大学动物科学技术学院新乡学院生命科学与基础医学学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2015-2026,共12页; 基金国家自然科学基金(32160830) 广西兽医生物技术重点实验室开放基金项目(20-065-23-B-2) 广西兽医研究所基本科研业务费专项(桂科专项20-4、桂科专项21-7)。; 文摘【目的】对新型阿卡斑病毒(Akabane virus,AKAV)非结构蛋白(non-structura,NSs)进行生物信息学分析,进而制备抗多克隆抗体,为新型AKAV检测及功能研究提供必要材料。【方法】使用蛋白生物信息学在线分析网站,对新型AKAV NSs蛋白进行系统分析。克隆NSs全长基因,利用大肠杆菌表达系统表达NSs重组蛋白,优化蛋白诱导条件并分析重组蛋白的可溶性;收获破碎菌体,经8 mol/L尿素变性、Ni 2+-NTA亲和层析纯化、透析及浓缩后进行SDS-PAGE、Western blotting鉴定;将纯化的重组NSs蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;应用间接ELISA、Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)测定多克隆抗体效价及特异反应性。【结果】生物信息学分析表明,NSs蛋白由91个氨基酸残基构成,等电点为12.10,属于碱性蛋白,不稳定指数约为79.04,平均亲水性为指数为―0.059,为不稳定的亲水蛋白;无跨膜区和信号肽,属于非分泌蛋白。试验成功构建了NSs蛋白原核表达载体pET-32a-NSs,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定显示,成功表达重组NSs蛋白,分子质量为29.3 ku,主要以包涵体形式存在,与生物信息学分析结果一致;制备的多克隆抗体效价可达1∶16384000,Western blotting和IFA结果表明所制备抗体能够与NSs蛋白发生特异性反应,具有较好的特异性。【结论】试验成功获得纯化的新型AKAV NSs蛋白,该蛋白具有较好的免疫原性;制备获得效价高、特异性好的多克隆抗体,为后续新型AKAV疫苗开发、检测及NSs蛋白功能研究提供了基础。; 关键词新型阿卡斑病毒(AKAV) nss蛋白生物信息学原核表达多克隆抗体; Keywords novel Akabane virus(AKAV) nss protein bioinformatics prokaryotic expression polyclonal antibody; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	布尼亚病毒非结构蛋白NSs与RNA沉默	陶宏征杨宝菊刘雅婷	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	番茄斑萎病毒属病毒非结构蛋白NSs的生物信息学分析	郑宽瑜董家红苏晓霞方琦郑雪张仲凯	《西南农业学报》 CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白	赵星月陈建斌王曙光张晓林穆野魏辉赵立华陈永对郑雪陈勇郑立敏张洁	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	新型阿卡斑病毒NSs蛋白生物信息学分析及多克隆抗体制备	蔡畅陈赫威宋瑞鹏覃绍敏刘金凤秦树英孙倩陈童锦悦欧长波刘兴友马玲吴健敏	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2024	4	在线阅读下载PDF 职称材料