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猪瘟病毒NS3丝氨酸蛋白酶功能区基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量：
1
1
作者
周鹏程
陈建国
丁明孝
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期330-337,共8页
用RT PCR方法扩增分别获得了中国猪瘟病毒强毒石门株和兔化弱毒株非结构蛋白NS3丝氨酸蛋白酶功能区 [即NS3 (ΔC) ]基因cDNA ,将之克隆到 pGEMT载体测定其核苷酸序列 ,并推导出其对应氨基酸序列 ,结果表明这两个毒株间的NS3 (ΔC)区基...
用RT PCR方法扩增分别获得了中国猪瘟病毒强毒石门株和兔化弱毒株非结构蛋白NS3丝氨酸蛋白酶功能区 [即NS3 (ΔC) ]基因cDNA ,将之克隆到 pGEMT载体测定其核苷酸序列 ,并推导出其对应氨基酸序列 ,结果表明这两个毒株间的NS3 (ΔC)区基因核苷酸序列同源性为95 8% ,氨基酸序列同源性为 99% ,有 2个残基的差异 ;两毒株与一些猪瘟病毒以及同属的牛病毒性腹泻病病毒代表毒株的对应序列进行比较 ,所测核苷酸序列及推导的氨基酸序列均极为保守 ,而且氨基酸序列分析结果还表明 ,瘟病毒NS3 (ΔC)序列也含有与其它黄病毒同样保守的由His,Asp和Ser残基构成的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶催化三分体 ,三分体中Ser为丝氨酸蛋白酶催化活性关键氨基酸残基 ;将上述NS3 (ΔC)基因亚克隆至原核表达载体pET 2 8a中 ,并在E .coli中获得高效表达 ,将表达产物纯化并免疫小鼠 ,间接免疫荧光和Westernblot结果表明制备了针对NS3(ΔC)蛋白的多克隆抗体。上述实验结果为继续深入研究非结构蛋白NS3在猪瘟病毒的复制及病毒与宿主细胞相互关系中的作用 。
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关键词
猪瘟病毒
非结构
蛋白
ns
3
ns3丝氨酸蛋白酶
功能区
基因克隆
基因表达
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职称材料
鞣花酸衍生物的合成及抑制HCV NS3蛋白酶活性
被引量：
3
2
作者
王悦
李正全
徐筱杰
《佳木斯大学学报（自然科学版）》
CAS
2011年第6期884-886,895,共4页
从中草药叶下珠中活性追踪、提取出具有体外抑制HCV NS3丝氨酸蛋白酶活性的先导化合物——鞣花酸,进而化学合成鞣花酸的衍生物并用NMR和MS确定结构;采用ELISA法测定了所合成鞣花酸衍生物体外抑制HCV-NS3丝氨酸蛋白酶的活性.
关键词
鞣花
酸
衍生物
合成
ELISA
HCV
ns3丝氨酸蛋白酶
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职称材料
从分子生物学机制来设计抗HCV的基因治疗方案
3
作者
成军
《抗感染药学》
1999年第1期27-28,共2页
干扰素α(IFNα)的应用是目前国际上公认的丙型肝炎治疗药物,但其疗效仍不十分令人满意。随着丙肝病毒(HCV)以及HCV与肝细胞之间相互作用的分子生物学机制的阐明,将有助于抗HCV基因治疗新方案的设计,标志着抗病毒治疗的一个重要研究方向。
关键词
分子生物学机制
治疗方案
抗HCV
基因治疗
自身抗原
ns3丝氨酸蛋白酶
抑制作用
肝细胞
生物学功能
噬菌体展示
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职称材料
题名
猪瘟病毒NS3丝氨酸蛋白酶功能区基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量：
1
1
作者
周鹏程
陈建国
丁明孝
机构
北京大学生命科学学院细胞及遗传学系
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期330-337,共8页
基金
国家攀登计划B类项目资助 (85 44 0 2 0 5 )
文摘
用RT PCR方法扩增分别获得了中国猪瘟病毒强毒石门株和兔化弱毒株非结构蛋白NS3丝氨酸蛋白酶功能区 [即NS3 (ΔC) ]基因cDNA ,将之克隆到 pGEMT载体测定其核苷酸序列 ,并推导出其对应氨基酸序列 ,结果表明这两个毒株间的NS3 (ΔC)区基因核苷酸序列同源性为95 8% ,氨基酸序列同源性为 99% ,有 2个残基的差异 ;两毒株与一些猪瘟病毒以及同属的牛病毒性腹泻病病毒代表毒株的对应序列进行比较 ,所测核苷酸序列及推导的氨基酸序列均极为保守 ,而且氨基酸序列分析结果还表明 ,瘟病毒NS3 (ΔC)序列也含有与其它黄病毒同样保守的由His,Asp和Ser残基构成的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶催化三分体 ,三分体中Ser为丝氨酸蛋白酶催化活性关键氨基酸残基 ;将上述NS3 (ΔC)基因亚克隆至原核表达载体pET 2 8a中 ,并在E .coli中获得高效表达 ,将表达产物纯化并免疫小鼠 ,间接免疫荧光和Westernblot结果表明制备了针对NS3(ΔC)蛋白的多克隆抗体。上述实验结果为继续深入研究非结构蛋白NS3在猪瘟病毒的复制及病毒与宿主细胞相互关系中的作用 。
关键词
猪瘟病毒
非结构
蛋白
ns
3
ns3丝氨酸蛋白酶
功能区
基因克隆
基因表达
Keywords
Classical swine fever virus
No
ns
tructural protein
ns
3
Clone and expression
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
鞣花酸衍生物的合成及抑制HCV NS3蛋白酶活性
被引量：
3
2
作者
王悦
李正全
徐筱杰
机构
中国人民解放军防化学院化生防护系
中国广州分析测试中心
北京大学化学与分子工程学院
出处
《佳木斯大学学报（自然科学版）》
CAS
2011年第6期884-886,895,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(71041024)
文摘
从中草药叶下珠中活性追踪、提取出具有体外抑制HCV NS3丝氨酸蛋白酶活性的先导化合物——鞣花酸,进而化学合成鞣花酸的衍生物并用NMR和MS确定结构;采用ELISA法测定了所合成鞣花酸衍生物体外抑制HCV-NS3丝氨酸蛋白酶的活性.
关键词
鞣花
酸
衍生物
合成
ELISA
HCV
ns3丝氨酸蛋白酶
Keywords
Derivative of ellagic acid
synthesis
ELISA
HCV
ns
3
serine protease
分类号
O625.4 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
从分子生物学机制来设计抗HCV的基因治疗方案
3
作者
成军
机构
解放军
出处
《抗感染药学》
1999年第1期27-28,共2页
文摘
干扰素α(IFNα)的应用是目前国际上公认的丙型肝炎治疗药物,但其疗效仍不十分令人满意。随着丙肝病毒(HCV)以及HCV与肝细胞之间相互作用的分子生物学机制的阐明,将有助于抗HCV基因治疗新方案的设计,标志着抗病毒治疗的一个重要研究方向。
关键词
分子生物学机制
治疗方案
抗HCV
基因治疗
自身抗原
ns3丝氨酸蛋白酶
抑制作用
肝细胞
生物学功能
噬菌体展示
分类号
R9 [医药卫生—药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒NS3丝氨酸蛋白酶功能区基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
周鹏程
陈建国
丁明孝
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鞣花酸衍生物的合成及抑制HCV NS3蛋白酶活性
王悦
李正全
徐筱杰
《佳木斯大学学报（自然科学版）》
CAS
2011
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
从分子生物学机制来设计抗HCV的基因治疗方案
成军
《抗感染药学》
1999
0
在线阅读
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职称材料
已选择
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