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EFHD2调节NOX4/ROS通路启动糖代谢重编程促进乳腺癌进展的机制研究 被引量：2
1
作者 徐明飞 张怡 +1 位作者 康如意 刘超越 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期66-75,共10页
目的基于NOX4/ROS信号通路探讨EFHD2影响乳腺癌发生进展的作用机制。方法将细胞分为NC-shRNA组和EFHD2-shRNA组,构建沉默EFHD2表达的慢病毒载体及其对照载体后转染乳腺癌细胞MDA-MB-23、MCF-7,qRT-PCR验证转染效率;CCK8检测细胞增殖活性... 目的基于NOX4/ROS信号通路探讨EFHD2影响乳腺癌发生进展的作用机制。方法将细胞分为NC-shRNA组和EFHD2-shRNA组,构建沉默EFHD2表达的慢病毒载体及其对照载体后转染乳腺癌细胞MDA-MB-23、MCF-7,qRT-PCR验证转染效率;CCK8检测细胞增殖活性;平板克隆实验检测细胞集落形成能力;划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡及ROS水平;qRT-PCR检测GLUT1、PDK1、PFK1、PKM2、PDH、LDH mRNA的表达;Western blot检测Cleaved caspase-3、MMP-2、NOX4蛋白的表达。结果与NC-shRNA组相比,EFHD2-shRNA组细胞中EFHD2的表达明显降低,细胞存活及其集落形成能力减弱;细胞凋亡率及促凋亡蛋白Cleaved caspase-3的表达升高;细胞迁移距离缩短,细胞侵袭数及促迁移、侵袭蛋白MMP-2的表达降低;乳酸及GLUT1、PDK1、PFK1、PKM2、LDH的水平降低,ATP及PDH的水平升高;流式结果表明沉默EFHD2后ROS水平降低,NOX4蛋白下调。结论EFHD2可通过调节NOX4/ROS信号通路,抑制ROS生成,引起乳酸及葡萄糖堆积从而促进乳腺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 代谢重编程 nox4/ros信号通路 EFHD2 免疫逃逸
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白花丹素通过调节TGF-β1/Smad2及Nrf2/NOX4通路改善博来霉素诱导的肺纤维化
2
作者 李慧 胡恒钊 +4 位作者 俞婷婷 胡慧娴 王佳乐 吴晶 郝伟 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第1期61-69,共9页
目的:探究白花丹素(plumbagi,PL)对博来霉素诱导的肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的保护作用及其可能性机制。方法:将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为:对照组(Control)、博来霉素组(bleomycin,BLM)、PL低剂量组(1 mg/kg)、PL高剂量组(2 m... 目的:探究白花丹素(plumbagi,PL)对博来霉素诱导的肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的保护作用及其可能性机制。方法:将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为:对照组(Control)、博来霉素组(bleomycin,BLM)、PL低剂量组(1 mg/kg)、PL高剂量组(2 mg/kg)。采用气管内注射BLM(3 mg/kg)复制小鼠PF模型,腹腔注射PL(1或2 mg/kg)3周,处死动物。HE与Masson染色观察肺组织形态学变化及胶原沉积情况。检测小鼠肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dis‐mutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和羟脯氨酸(hydroxy‐proline,HYP)活性或含量。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠肺组织中白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量。免疫组化检测小鼠肺组织中核因子相关因子2(nuclear factor related factor 2,Nrf2)和NADPH氧化酶4(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4)阳性细胞表达。Western blotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(collagen Ⅲ,Col Ⅲ)、IL-6、转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))、p-Smad2、Nrf2和NOX4的蛋白表达。结果:与BLM组相比,PL治疗可减轻小鼠肺间质损伤及细胞外基质沉积,降低HYP含量(P<0.01,P<0.05),降低α-SMA、Col Ⅰ和Col Ⅲ的蛋白表达(P<0.01,P<0.05),减少IL-6的分泌(P<0.01),提高机体抗氧化能力(增强SOD和GSH的活性,减少MDA含量,P<0.01,P<0.05),显著下调TGF-β_(1)、p-Smad2和NOX4阳性细胞及蛋白表达(P<0.01,P<0.05),上调Nrf2阳性细胞及蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:PL可能通过调节TGF-β_(1)/Smad2及Nrf2/NOX4信号通路减轻炎症反应与胶原沉积,提高机体抗氧化能力,从而延缓PF进程。 展开更多
关键词 白花丹素 肺纤维化 TGF-β1/Smad2信号通路 Nrf2/nox4信号通路
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姜黄素对内毒素诱导的血管平滑肌细胞Toll样受体4/NADPH氧化酶/活性氧信号通路及炎症因子释放的影响 被引量：6
3
作者 翟海杰 孟哲 +3 位作者 陶海龙 白中乐 闫超 李凌 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期543-548,共6页
目的：观察姜黄素（curcumin,Cur）对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）Toll 样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine... 目的：观察姜黄素（curcumin,Cur）对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）Toll 样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶/活性氧（reactive oxygen species,ROS）信号通路及炎症因子释放的影响。方法原代培养 VSMCs 分为5组：对照组、LPS 组、LPS＋姜黄素5μmol/L 组、LPS＋姜黄素10μmol/L 组、LPS＋姜黄素30μmol/L 组和姜黄素30μmol/L 组。MTT 法测定不同浓度姜黄素对 VSMCs 细胞活性的影响；酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）和白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）蛋白的表达；Real-time PCR 法及 Wester-blot 检测各组细胞 TLR4、p22phox 蛋白的表达；流式细胞仪测定细胞内 ROS 的表达。结果姜黄素在0~80μmol/L 浓度范围内对细胞活性无显著影响。姜黄素（5、10、30μmol/L）可以有效地抑制 LPS 诱导的 TNF-α和 IL-1过分泌和 TLR4、p22phox、ROS 的高表达并具有浓度依赖性。结论姜黄素能够有效地抑制 LPS 诱导的 VSMCs 炎症因子分泌、TLR4表达及其下游 NADPH 氧化酶、ROS 的生成,姜黄素对 LPS 诱导的 VSMCs 炎症反应的抑制作用可能部分依赖于 TLR4介导的 NADPH 氧化酶/ROS 信号通路。 展开更多
关键词 姜黄素 TOLL样受体-4 活性氧 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1 炎症因子 NADPH氧化酶/ros信号通路
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苏黄止咳胶囊中五味子醇甲对感冒后咳嗽的改善作用 被引量：1
4
作者 吴楠 白子玉 +5 位作者 欧永玉 邸同莲 赵子瑶 江宏 张之昊 谭宁华 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2562-2571,共10页
目的探讨苏黄止咳胶囊中五味子醇甲对感冒后咳嗽(PIC)的改善作用。方法气管滴注脂多糖(LPS)并联合香烟烟雾刺激建立体内PIC小鼠模型,小鼠随机分为对照组、模型组、苏黄止咳胶囊组(14 g/kg)、孟鲁司特钠组(阳性对照,3 mg/kg)和五味子醇... 目的探讨苏黄止咳胶囊中五味子醇甲对感冒后咳嗽(PIC)的改善作用。方法气管滴注脂多糖(LPS)并联合香烟烟雾刺激建立体内PIC小鼠模型,小鼠随机分为对照组、模型组、苏黄止咳胶囊组(14 g/kg)、孟鲁司特钠组(阳性对照,3 mg/kg)和五味子醇甲低、高剂量组(10、30 mg/kg);LPS刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B)建立体外PIC模型,细胞分为对照组、模型组、苏黄止咳胶囊组(10μg/mL)和五味子醇甲低、高浓度组(3、10μmol/L)。HE和Masson染色检测肺及支气管组织病理变化,ELISA法检测肺组织IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA、SOD、GSH水平,RT-qPCR法检测BEAS-2B细胞IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达,Western blot法检测小鼠肺组织和BEAS-2B细胞中p-PI3K、p-Akt、NOX4、SIRT1、p-ERK、Fibronectin、E-cadherin、Vimentin、α-SMA蛋白表达。结果与模型组比较,五味子醇甲和苏黄止咳胶囊均可延长PIC小鼠咳嗽潜伏期(P<0.01),减少咳嗽次数(P<0.01),减轻肺组织炎性细胞浸润和胶原沉积,降低肺组织IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA水平和Fibronectin、Vimentin、α-SMA、p-ERK、p-PI3K、p-Akt、NOX4蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高肺组织SOD、GSH水平和E-cadherin、SIRT1蛋白表达(P<0.05,P<0.01);降低BEAS-2B细胞ROS水平、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和p-ERK、p-PI3K、p-Akt、NOX4蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高BEAS-2B细胞SIRT1蛋白表达(P<0.01)。结论五味子醇甲可通过调节SIRT1/ERK信号通路抑制炎症,通过调节PI3K/Akt/NOX4信号通路抑制氧化应激,发挥对PIC的止咳作用,是苏黄止咳胶囊的主要止咳功效成分之一。 展开更多
关键词 五味子醇甲 苏黄止咳胶囊 感冒后咳嗽 炎症 氧化应激 SIRT1/ERK信号通路 PI3K/Akt/nox4信号通路
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达格列净调节糖尿病大鼠心肌SK2蛋白表达 被引量：1
5
作者 吴敏 赵江雁 +2 位作者 雷敏 陈清杰 郭西英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1478-1484,共7页
目的探讨达格列净(dapagliflozin,Dapa)对糖尿病大鼠心肌小电导钙激活钾通道2(small conductance calcium-activated potassium channel 2,SK2通道)蛋白的影响以及可能作用机制。方法体内:高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(35 ... 目的探讨达格列净(dapagliflozin,Dapa)对糖尿病大鼠心肌小电导钙激活钾通道2(small conductance calcium-activated potassium channel 2,SK2通道)蛋白的影响以及可能作用机制。方法体内:高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(35 mg·kg^(-1))构建2型糖尿病模型,并给予达格列净(1 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗干预;体外:Dapa(5μmol·L^(-1))处理原代心肌细胞并暴露于高糖(30 mmol·L^(-1));心脏超声检测各组大鼠的心功能情况;DCFH-DA荧光探针检测活性氧(reactive oxide specis,ROS)的水平;Western blot检测SK2、NOX4、p38MAPK、p-p38MAPK的蛋白表达水平。结果Dapa改善糖尿病大鼠心脏功能;Dapa降低ROS的产生;Dapa上调SK2的蛋白表达;Dapa抑制NOX4,p38MAPK及p-p38MAPK的蛋白表达;沉默NOX4基因后,Dapa降低了心肌细胞NOX4含量并促进了SK2的表达。结论Dapa可通过抑制NOX4/p38MAPK信号通路部分修复糖尿病大鼠心肌SK2的低表达。 展开更多
关键词 达格列净 糖尿病 心肌病 氧化应激 nox4/p38MAPK信号通路 小电导钙激活钾通道
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替格瑞洛改善心肌缺血再灌注损伤的机制 被引量：9
6
作者 陈佩儿 陈灿 +3 位作者 何原 莫少门 叶文桃 钟剑锋 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第16期2183-2188,共6页
目的观察替格瑞洛对心肌缺血再灌注损伤是否有抗氧化应激、抗炎的作用,以探讨替格瑞洛下调炎症因子及氧化应激水平的分子作用机制。方法建立SD大鼠缺血再灌注损伤模型,分为4组(n=15):正常组、缺血再灌注损伤+生理盐水组、缺血再灌注损伤... 目的观察替格瑞洛对心肌缺血再灌注损伤是否有抗氧化应激、抗炎的作用,以探讨替格瑞洛下调炎症因子及氧化应激水平的分子作用机制。方法建立SD大鼠缺血再灌注损伤模型,分为4组(n=15):正常组、缺血再灌注损伤+生理盐水组、缺血再灌注损伤+氯吡格雷组、缺血再灌注损伤+替格瑞洛组,术前7 d分别以生理盐水、替格瑞洛、氯吡格雷灌胃,术后7 d内眦取血检测炎症相关指标:IL-6、IL-1β、TNF-α;术后28 d取心脏组织,并检测相关指标:心肌纤维化Masson染色;Western blot:NOX4、Phospho-IKK、Phospho-p65和IκBα;FRAP法测定血浆中总抗氧化水平。结果SD大鼠在手术前连续7 d服用替格瑞洛后,IL-6、IL-1β、TNF-α、NOX4等表达均有不同程度下降,同时心肌纤维化程度也有不同程度的减轻;NF-κB信号通路相关激活因子Phospho-IKK、Phospho-p65等表达有不同程度的减少,NF-κB信号通路相关抑制因子IκBα的表达有不同程度的增加。结论替格瑞洛可能通过抑制NOX4/ROS/NF-κB信号通路轴下调炎症因子及氧化应激水平,从而改善心肌缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 替格瑞洛 缺血再灌注损伤 nox4/ros/NF-κB信号轴
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